羊附紅細(xì)胞體病的診斷與治療

1 病原

附紅細(xì)胞體以往多被當(dāng)成寄生蟲或立克次氏體，近年來明確其屬于嗜血支原體。一般情況下，該病原具備多種形態(tài)，可附著在紅細(xì)胞表面，也可在血漿內(nèi)游離。對(duì)丫淀橙染色和姬姆薩染色后的血涂片進(jìn)行鏡檢，可發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體大多為圓形顆粒，直徑為0.5 μm ，革蘭氏染色呈陰性，姬姆薩氏染色呈紫紅色，瑞氏染色為藍(lán)色。

2 傳播途徑

附紅細(xì)胞體主要由吸血類昆蟲進(jìn)行傳播，附紅細(xì)胞體主要在動(dòng)物血液內(nèi)寄生，暴發(fā)季節(jié)多在夏秋高溫季。此外，附紅細(xì)胞體病也可以通過直接接觸、消化道、垂直等方式傳播。

3 臨床癥狀與流行病學(xué)

在臨床上該病主要表現(xiàn)為發(fā)熱、黃疸、貧血以及生殖系統(tǒng)出現(xiàn)紊亂等癥狀，并且羊附紅細(xì)胞體病極易與其他疾病發(fā)生混合感染。在一年四季皆可發(fā)病，秋季為該病的高發(fā)時(shí)期。從流行病學(xué)來看，羊附紅細(xì)胞體的宿主種屬特異性目前存在較大爭(zhēng)議，其中綿羊與山羊能夠感染羊附紅細(xì)胞體已經(jīng)被證實(shí)，在馴鹿和白尾鹿等一些野生動(dòng)物中也存在該病原。但能否感染哺乳動(dòng)物還需要進(jìn)一步研究。動(dòng)物感染附紅細(xì)胞體后往往會(huì)引起免疫應(yīng)答和生理紊亂的病理變化。通過研究表明，紅細(xì)胞感染附紅細(xì)胞體后的早期，細(xì)胞膜會(huì)變厚，并且附紅細(xì)胞體還會(huì)使紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，造成紅細(xì)胞損傷，導(dǎo)致其壽命縮短。還有研究表明，紅細(xì)胞感染附紅細(xì)胞體后其表面抗原結(jié)構(gòu)也會(huì)發(fā)生變化，機(jī)體免疫系統(tǒng)將感染的紅細(xì)胞視為從外界侵入的有害抗原，免疫系統(tǒng)會(huì)攻擊感染后的紅細(xì)胞，導(dǎo)致出現(xiàn)貧血等癥狀。

4 診斷方法

4.1 形態(tài)學(xué)診斷

通過顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)診斷是一種快速簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法，一般包括涂片染色法及鮮血觀察法。涂片染色法主要包括吖啶橙染色法、瑞氏染色法、姬姆薩氏染色法，采用涂片染色法具有操作簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)，在臨床上常用于初步診斷附紅細(xì)胞體病。使用鮮血壓片法能夠?qū)t細(xì)胞變形進(jìn)行直接觀察，但在壓片視野下易將血小板、乳糜等物質(zhì)誤判定為病原體，導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

4.2 動(dòng)物試驗(yàn)

動(dòng)物試驗(yàn)是對(duì)該病進(jìn)行診斷的重要方法，具體操作時(shí)，抽取疑似附紅細(xì)胞體感染動(dòng)物的血液，接著接種于易感動(dòng)物，對(duì)其進(jìn)行觀察，通過是否會(huì)存在特異性的臨床癥狀以明確有無患病。

4.3 血清學(xué)診斷

附紅細(xì)胞體感染的動(dòng)物機(jī)體通常會(huì)誘發(fā)較強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，采用血清學(xué)診斷法也是一種診斷該病的重要方法。常用的血清學(xué)檢測(cè)法主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）、間接血凝試驗(yàn)（IHA）等，都可用于臨床檢測(cè)該病。

4.4 分子生物學(xué)診斷

采用分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行附紅細(xì)胞體診斷的方法有DNA 探針雜交技術(shù)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)法等。DNA 探針雜交技術(shù)主要是通過帶有32P 標(biāo)記的探針，從疑似附紅細(xì)胞體感染動(dòng)物體內(nèi)提取樣品，對(duì)樣品DNA 進(jìn)行檢測(cè)確診。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)技術(shù)具有敏感度高、準(zhǔn)確率較高，目前已得到廣泛應(yīng)用。此外，由于附紅細(xì)胞體上的16S rRNA 具有高度保守性，可據(jù)此設(shè)計(jì)出特異性引物，并采用PCR檢測(cè)法用于診斷附紅細(xì)胞體病。

5 治療方法

使用中醫(yī)方式對(duì)羊附紅細(xì)胞體病治療時(shí)，應(yīng)堅(jiān)持“殺蟲消積、涼血止血、清熱解毒”的治療原則，具體方劑如下：

方劑1：將45 g 地骨皮、30 g 茵陳、20 g 連翹、15 g 黃芩、15 g 貫眾、15 g 柴胡、15 g 梔子、15 g 花粉、15 g 黃柏、8 g 茯苓、8 g 木通、8 g 桔梗、8 g 牛蒡子、6 g 黃連粉碎，加入至50 kg 飼料內(nèi)為病羊拌料喂服，每日1 劑，連續(xù)用藥7 d。

方劑2：將240 g 生石膏、120 g 水牛角、90 g玄參、90 g 黑梔子、60 g 連翹殼、30 g 丹皮、30 g紫草、30 g 桔梗、30 g 鮮竹葉、30 g 黃芩、30 g 生地、30 g 赤芍加清水煎煮，過濾后為病羊灌服藥液，每日早晚各1次；同時(shí)將藥渣拌入病羊飼料內(nèi)。

方劑3：50 g 石膏、30 g 大青葉、30 g 生地、25 g 常山、25 g 枳殼、25 g 金銀花、25 g 玄參、25 g連翹、25 g 丹皮、20 g 檳榔、20 g 柴胡、20 g 竹葉、15 g 黃芩、15 g 黃連混合后加清水煎煮為病羊灌服，每日用藥1 劑，連續(xù)治療3～5 d。若病羊存在便秘現(xiàn)象，還需在上述藥劑中加入40g 芒硝及20g 大黃；如果病羊無法正常呼吸，還需在上述藥劑中加入35 g 魚腥草；如果病羊體質(zhì)虛弱，還需在上述方劑中加入20 g黨參及20 g黃芩。

采用中藥治療的同時(shí)配合西藥治療達(dá)到理想的治療效果，為病羊靜脈注射500 mL10%的葡萄糖溶液以及8 mg/kg·bw 的四環(huán)素，連續(xù)治療3 日；或者為病羊肌肉注射7 mg/kg·bw 的貝尼爾，每2 d 用藥1 次，連續(xù)用藥3 次。

使用四環(huán)素按8 mg/kg 劑量標(biāo)準(zhǔn)將藥物加入500 mL 的10% 葡萄糖溶液中對(duì)病羊進(jìn)行靜脈注射，1 天1 次，連用3 d；也可使用貝尼爾按7 mg/kg 劑量進(jìn)行肌肉注射，每2 d 注射1 次，連用3 次即可。同時(shí)加強(qiáng)護(hù)理，給病羊提供舒適、衛(wèi)生的生活環(huán)境，喂食易消化飼料，可在飼料內(nèi)適量添加一些微量元素，口服補(bǔ)液鹽，或者補(bǔ)充電解質(zhì)，以促進(jìn)病羊恢復(fù)健康。

6 防范措施

6.1 做好清潔衛(wèi)生工作

羊群生活環(huán)境會(huì)對(duì)疾病發(fā)生、傳播產(chǎn)生較大的影響。因此，為了有效預(yù)防羊只感染附紅細(xì)胞體病，養(yǎng)殖戶需要做好羊舍及場(chǎng)內(nèi)的清潔衛(wèi)生工作，及時(shí)清除羊舍內(nèi)的糞便污物，適量撒一些生石灰，保持羊舍清潔，干燥通風(fēng)。除此之外，還要及時(shí)清除場(chǎng)內(nèi)及周圍的雜草，每天都要及時(shí)清除場(chǎng)內(nèi)散落的糞便及垃圾，并倒入糞窖進(jìn)行集中發(fā)酵處理，定期對(duì)羊舍及場(chǎng)內(nèi)噴灑殺蟲消毒藥劑，減少蚊蠅滋生。

6.2 提高飼養(yǎng)管理水平

在養(yǎng)殖過程中，養(yǎng)殖戶在日常中要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，不斷提高飼養(yǎng)管理水平，在夏秋高溫季節(jié)做好場(chǎng)內(nèi)滅蚊工作，同時(shí)對(duì)羊群做好驅(qū)螨工作，盡量減少長(zhǎng)途或高坡放牧。發(fā)現(xiàn)有羊只出現(xiàn)附紅細(xì)胞體病癥狀時(shí)，應(yīng)及時(shí)對(duì)病羊采取隔離措施，在診斷基礎(chǔ)上采取針對(duì)性的治療措施，并及時(shí)對(duì)羊舍及場(chǎng)內(nèi)開展消毒工作。

羊附紅細(xì)胞體病危害較大，養(yǎng)殖戶應(yīng)采取合理措施進(jìn)行預(yù)防。在養(yǎng)殖中發(fā)現(xiàn)有羊只感染附紅細(xì)胞體病時(shí)，要及時(shí)隔離病羊，同時(shí)使用藥物積極進(jìn)行治療。同時(shí)對(duì)羊舍及場(chǎng)內(nèi)環(huán)境進(jìn)行徹底消毒，防止該病在羊群中傳播蔓延，保障實(shí)現(xiàn)良好的經(jīng)濟(jì)效益。