豐隆穴配伍脾俞穴對(duì)肥胖模型大鼠體質(zhì)量、肝臟系數(shù)和TC、TG 的影響

邊 靜，楊 東，張為民，閆 雪，宣立娜

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)春 130117）

肥胖是脂肪組織與脂肪細(xì)胞增長(zhǎng)所致體質(zhì)量或體脂率異常增高的一種沉積脂肪的病理狀態(tài)，是影響人類健康的第五大危險(xiǎn)因素[1-3]。可導(dǎo)致如高血壓、代謝疾病、心臟疾病、腦血管疾病以及某些癌癥[4-6]，肥胖產(chǎn)生的問(wèn)題不止停留在生理健康層面，還極大的影響心理健康，降低生活質(zhì)量[7]。目前，如何防治肥胖是諸多疾病的上游目標(biāo)。中醫(yī)學(xué)和西醫(yī)學(xué)對(duì)肥胖的研究和治療已取得一定的成效，西醫(yī)學(xué)主要以生活方式干預(yù)為主，輔以降糖降脂口服藥物達(dá)到維持相關(guān)指標(biāo)的穩(wěn)定，但長(zhǎng)期服用藥物損害肝腎功能，停藥后維持效果較差[8]。中醫(yī)學(xué)以整體觀念、辨證論治為指導(dǎo)原則，在治療肥胖方面擁有豐富的理論基礎(chǔ)，且療效較好，也越來(lái)越受到更多的關(guān)注[9-10]。中藥內(nèi)治法在指導(dǎo)原則下結(jié)合體質(zhì)學(xué)對(duì)肥胖的調(diào)控效果顯著[11-12]，本課題為了探尋簡(jiǎn)便、有效、易于推廣的治療方法，探討豐隆穴配伍脾俞穴對(duì)肥胖模型大鼠體質(zhì)量、肝臟系數(shù)和三酰甘油（TC）、總膽固醇（TG）的影響，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF 級(jí)雄性Wistar 大鼠（170±10） g，30 只，購(gòu)自長(zhǎng)春億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司。動(dòng)物飼養(yǎng)室溫度21 ～22 ℃，相對(duì)濕度55%～60%，12 h光照：12 h 黑暗周期中，適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周，免費(fèi)供應(yīng)普通飼料，飲用蒸餾水。將30 只大鼠隨機(jī)分為空白組（n= 10）和其他組（n= 20）。空白組喂養(yǎng)普通飼料，飲用蒸餾水。其他組喂養(yǎng)高脂飼料（普通飼料47%、蔗糖10%、蛋黃粉20%、豬油20%、膽固醇2%、脫氧膽酸鈉1%），飲用10%（m/v）的果糖溶液。成模時(shí)間8 周，期間每周測(cè)量所有大鼠體質(zhì)量，以其他組大鼠體質(zhì)量均值超過(guò)空白組體質(zhì)量均值1.4 倍為造模成功標(biāo)志[13]。造模成功后，將其他組（n= 20）隨機(jī)分為模型組（n= 10）和針刺組（n= 10）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 成模后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，空白組維持普通飼料喂養(yǎng)，飲用蒸餾水直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。模型組、針刺組維持高脂飼料喂養(yǎng)，飲用果糖溶液直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。期間空白組、模型組同針刺組相同方法固定大鼠，不參與針刺。頻次時(shí)間均與針刺組相同，固定方法體現(xiàn)人文關(guān)懷。

針刺組大鼠固定后選用安迪牌1 寸常規(guī)針具（0.25 mm×25 mm）針刺大鼠脾俞穴、雙側(cè)豐隆穴，連續(xù)治療5 d 休息2 d，每次20 min，共治療4 周。脾俞穴[14]：第12 胸椎下兩旁肋間；斜刺5 ～7 mm。豐隆穴[15]：小腿中點(diǎn)處腓骨后緣，直刺5 ～7 mm。

1.3 標(biāo)本制備 針刺期間，每7 d 測(cè)量全部大鼠體質(zhì)量并記錄。末次針刺后，禁飼料不禁蒸餾水12 h。稱重后2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，血液樣品37 ℃恒溫箱孵育1 h 后4 ℃恒溫放置3 h，隨后5 000 r/min 離心10 min，采集血清。隨后脫頸處死大鼠解剖摘取肝臟，去除臟器周圍結(jié)締組織與臟器表面血，測(cè)量肝臟重量，記錄后立即放置液氮中留存?zhèn)溆谩Ｗ罱K將收集到的血清、肝臟分裝置于-80 ℃留存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 肝臟系數(shù)（LW/BW） 計(jì)算肝臟質(zhì)量（LW）與體質(zhì)量（BW）的比值，即肝臟系數(shù)（LW/BW），以此評(píng)價(jià)肝臟病變程度。

1.5 生化指標(biāo) TC、TG 均采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定，ELISA 試劑盒購(gòu)買于上海晶美生物技術(shù)有限公司，按照廠家說(shuō)明方法檢測(cè)血清中三酰甘油（TC）、總膽固醇（TG）水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。全部數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各組間數(shù)據(jù)采用方差比較分析（One-Way ANOVA）。以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 體質(zhì)量變化 造模期間，與空白組相比，其他組大鼠腹圓形寬，飲用食水量增多，體質(zhì)量有明顯提升，高于空白組1.4 倍。見表1。

表1 造模期間各組大鼠體質(zhì)量均值變化（± s） g

表1 造模期間各組大鼠體質(zhì)量均值變化（± s） g

組別 例數(shù) 初始體質(zhì)量 第2 周 第4 周 第6 周 第8 周空白組 10 170.63±2.47 227.34±7.07 293.94±8.88 359.52±8.53 401.69±13.79其他組 20 169.85±4.23 294.77±13.07 388.70±14.40 477.40±31.47 573.30±13.30

實(shí)驗(yàn)開始后，空白組、模型組、針刺組體質(zhì)量較前均有不同程度下降。針刺組較模型組有明顯下降（P＜0.01），第1 周最明顯，有逐漸遞減趨勢(shì)。見表2，圖1。

圖1 實(shí)驗(yàn)期間大鼠體質(zhì)量分布圖

表2 實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體質(zhì)量均值變化（± s，n = 10） g

表2 實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體質(zhì)量均值變化（± s，n = 10） g

注：與模型組比較，## P ＜0.01

組別 第1 周 第2 周 第3 周 第4 周空白組 392.38±10.92 383.86±9.57 375.72±8.48 369.64±9.23模型組 557.98±13.63 545.05±13.33 535.14±11.57 527.55±10.92針刺組 526.48±16.37## 489.89±11.48## 463.19±12.08## 444.72±15.4##

2.2 肝臟系數(shù) 與空白組相比，模型組肝臟系數(shù)明顯增加（P＜0.01）；針刺組肝臟系數(shù)有所增加（P＜0.05）。與模型組相比，針刺組肝臟系數(shù)顯著下降（P＜0.01）。見表3。

表3 各組大鼠肝臟系數(shù)（± s，n = 10）

表3 各組大鼠肝臟系數(shù)（± s，n = 10）

注：與空白組比較，# P ＜0.05，## P ＜0.01；與模型組比較，△△P ＜0.01

序號(hào) 空白組 模型組 針刺組肝臟/g 肝臟系數(shù)/% 肝臟/g 肝臟系數(shù)/% 肝臟/g 肝臟系數(shù)/%1 9.0 24.66 17.7 34.20 12.6 27.96 2 10.0 27.51 20.1 37.40 12.9 29.11 3 10.2 28.70 17.1 32.71 12.8 29.68 4 10.0 26.08 17.3 32.55 12.7 29.24 5 9.8 26.09 15.6 29.58 14.8 32.28 9.4 25.36 16.4 31.51 12.6 27.13 7 10.4 28.92 16.8 32.34 13.1 27.84 8 9.7 25.89 18.3 35.54 11.4 26.40 6 10.2 26.72 19.4 35.24 12.5 28.72 10 10.3 28.07 17.9 33.56 12.6 29.49均值 26.80 33.46## 28.78#△△9

2.3 生化指標(biāo) 與空白組相比，模型組TC、TG 水平均有顯著提高（P＜0.05）；與模型組相比，針刺組TC、TG 水平顯著降低（P＜0.05）。見圖2。

圖2 針刺對(duì)大鼠TC、TG 水平的影響

3 討論

在能量代謝途徑中[16-18]，肝臟功能的強(qiáng)弱是代謝的重要環(huán)節(jié)，肝臟系數(shù)能夠直接反映出肝臟功能的強(qiáng)弱和代謝的情況，進(jìn)而表現(xiàn)為大鼠機(jī)體的健康狀態(tài)[20]。脂肪組織是平衡人體能量的重要調(diào)節(jié)器[19]，脂肪組織的沉積直接體現(xiàn)于體質(zhì)量的升高。本研究結(jié)果顯示，體質(zhì)量的上升與肝臟系數(shù)的增加呈正比，這說(shuō)明肝臟系數(shù)的變化可作為檢測(cè)療效的重要參考指標(biāo)。

中醫(yī)認(rèn)為，脾主運(yùn)化，脾俞穴位于足太陽(yáng)膀胱經(jīng)，是脾之背俞穴，是治療消化、內(nèi)分泌系統(tǒng)相關(guān)疾病的常用腧穴[21-23]。胃為受谷納食之所，豐隆穴位于足陽(yáng)明胃經(jīng)，是多氣多血之經(jīng)[24]，為胃經(jīng)絡(luò)穴，可以連通脾胃二經(jīng)經(jīng)氣，是祛痰要穴，被證實(shí)有降脂之功[25]。兩穴配伍使用，能夠共助脾胃升降之司，通過(guò)增強(qiáng)全身水液能量的運(yùn)化之力來(lái)減輕肥胖程度。通過(guò)本研究結(jié)果可以觀察到，相較于模型組，針刺組體質(zhì)量、肝臟系數(shù)和TC、TG 水平均有明顯降低（P＜0.05），說(shuō)明豐隆穴配伍脾俞穴可以有效降低脂肪沉積病理狀態(tài)與TC、TG 水平，能夠有效抑制肥胖的發(fā)展。

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，豐隆穴配伍脾俞穴不僅可以有效降低體質(zhì)量與改善肝臟系數(shù)，還可以降低TC、TG 水平，從而一定程度上恢復(fù)機(jī)體正常的能量代謝功能，改善脂肪沉積病理狀態(tài)而減輕肥胖程度。且體質(zhì)量、肝臟系數(shù)與TC、TG 水平呈正相關(guān)。證明豐隆穴配伍脾俞穴能夠通過(guò)機(jī)體代謝途徑改善脂肪沉積病理狀態(tài)，改善TC、TG 水平。