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    ELISA 及ECLIA 法在乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用效果對(duì)比

    2023-10-09 13:04:28熊鉆梅玉峰王亞劉慶沈利華
    中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2023年17期
    關(guān)鍵詞:病毒感染肝炎肝細(xì)胞

    熊鉆 梅玉峰 王亞 劉慶 沈利華

    乙型肝炎是嚴(yán)重威脅我國人民健康的慢性傳染性疾病, 可以引起肝炎、肝纖維化、肝硬化, 甚至肝癌的發(fā)生[1]。乙型肝炎病毒感染人群分為慢性攜帶者及慢性肝炎患者, 慢性攜帶者不會(huì)有明顯自覺不適, 可以像健康人一樣的工作或者生活;慢性肝炎患者感染乙型肝炎病毒后出現(xiàn)慢性肝臟損傷, 反復(fù)出現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶異常或膽紅素升高, 患者自我感覺出現(xiàn)乏力、食欲差, 尿的顏色變黃等相應(yīng)表現(xiàn), 如果乙型肝炎病毒不能有效控制, 引起肝臟硬化改變, 外觀出現(xiàn)慢性肝病體征, 包括肝掌、蜘蛛痣、面色晦暗, 嚴(yán)重者出現(xiàn)肝臟功能失代償?shù)谋憩F(xiàn), 如消化道出血、嘔血或者便血。部分患者出現(xiàn)門脈高壓的表現(xiàn)、側(cè)支循環(huán)形成, 表現(xiàn)為腹水、肚子明顯膨隆、雙下肢浮腫, 嚴(yán)重者出現(xiàn)肝性腦病、意識(shí)障礙、行為異常。因此, 對(duì)乙型肝炎病毒感染進(jìn)行早期監(jiān)測(cè)具有重要的臨床價(jià)值[2]。本研究選取2020 年6 月~2021 年2 月本院收治的乙型肝炎病毒感染患者90 例, 探究乙型病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物應(yīng)用ELISA 及ECLIA 法檢測(cè)的效果, 現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2020 年6 月~2021 年2 月本院收治的乙型肝炎病毒感染患者90 例, 納入標(biāo)準(zhǔn):符合世界衛(wèi)生組織制定的乙型肝炎病毒感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3];經(jīng)臨床影像學(xué)資料、實(shí)驗(yàn)室檢查、臨床特征明確診斷。排除標(biāo)準(zhǔn):嚴(yán)重心、肺、肝、腎功能異?;颊撸谎合到y(tǒng)疾病、惡性腫瘤、肝癌、其他類型肝炎病毒感染患者;妊娠期、哺乳期女性;認(rèn)知功能障礙患者。年齡27~48 歲, 平均年齡(36.2±4.5)歲;其中女48 例,男42 例;病程1~5 年, 平均病程(3.1±0.9)年。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.2 方法 采集所有患者4 ml 空腹靜脈血, 離心10 min, 3000 r/min, 分離血清, 在-20℃的環(huán)境下置存血清標(biāo)本, 予以ELISA 及ECLIA 法檢測(cè)。儀器:科美LicA500 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀、深圳匯松MB-580酶標(biāo)儀、北京普朗DNX-9620A 全自動(dòng)洗板機(jī)。試劑:博陽生物科技(上海)有限公司、英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司提供試劑盒。

    1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)比兩組檢測(cè)方式的診斷準(zhǔn)確率及對(duì)乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物的陽性檢出率,HBeAb、HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb 的吸光度值/臨界值(S/CO 比值)>1 為陽性, <1 為陰性[4]。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩種檢測(cè)方式的診斷準(zhǔn)確率對(duì)比 ECLIA 法診斷準(zhǔn)確率高于ELISA 法, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

    表1 兩種檢測(cè)方式的診斷準(zhǔn)確率對(duì)比(n, %, n=90)

    2.2 兩種檢測(cè)方式對(duì)乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物的陽性檢出率對(duì)比 ECLIA 法對(duì)HBeAb、HBsAg、HBeAg的陽性檢出率顯著高于ELISA 法, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩種檢測(cè)方式對(duì)HBsAb、HBcAb 的陽性檢出率對(duì)比, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

    表2 兩種檢測(cè)方式對(duì)乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物的陽性檢出率對(duì)比[n(%), n=90]

    3 討論

    肝臟是消化系統(tǒng)最大的腺體器官, 是一個(gè)“化工廠”, 包括食物的加工、轉(zhuǎn)化、合成等, 另外還能促進(jìn)某些有毒物質(zhì)的轉(zhuǎn)換和排泄[5,6]。甲型肝炎(甲肝)、戊型肝炎(戊肝)是通過消化道傳染的可以治愈的急性傳染病。甲型肝炎和乙型肝炎大致相同, 比乙型肝炎更容易發(fā)展為肝炎后肝硬化或肝癌。乙型肝炎是指乙型肝炎病毒檢測(cè)為陽性, 病程>6 個(gè)月或發(fā)病日期不明確而臨床有慢性肝炎表現(xiàn)者, 根據(jù)臨床表現(xiàn)可分為輕度、中度、重度[7,8]。慢性乙型肝炎攜帶者是指血清轉(zhuǎn)氨酶在1 年內(nèi)均正常, 肝組織學(xué)檢查正常, 無慢性肝炎臨床特征, 但乙型肝炎病毒檢測(cè)為陽性者[9,10]。2017 年10 月27 日, 世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)公布的致癌物清單初步整理參考, 乙型肝炎病毒慢性感染被列為Ⅰ類致癌物。全世界約有3.5 億乙型肝炎患者, 我國HBsAg 陽性率為9.09%, 每年有1 百萬人死于肝衰竭或肝癌, 為全球第9 位死亡原因[11]。乙型肝炎病毒感染可通過血液傳播、醫(yī)源性傳播、母嬰傳播、密切接觸、性傳播等[12]。乙型肝炎病毒是一種嗜肝病毒, 主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)并損害肝細(xì)胞, 引起肝細(xì)胞炎性反應(yīng)、壞死、纖維化。病毒性肝炎的病理機(jī)制尚不能完全闡明, 肝細(xì)胞內(nèi)乙型肝炎病毒逐漸復(fù)制, 機(jī)體的免疫應(yīng)答可決定肝細(xì)胞病變程度[13]。病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制目前尚不能充分闡明, 乙型肝炎病毒感染肝細(xì)胞并在其中復(fù)制, 一般認(rèn)為不直接引起肝細(xì)胞病變,主要取決于機(jī)體的免疫應(yīng)答。乙型肝炎病毒進(jìn)入機(jī)體后, 通過血液到達(dá)肝臟和肝外組織, 引起相應(yīng)的病理改變和免疫功能改變, 以肝臟病變最為突出, 肝外損傷主要由免疫復(fù)合物引起。乙型肝炎病毒感染的潛伏期為6 周~6 個(gè)月, 一般為3 個(gè)月, 潛伏期病原體的毒力、數(shù)量、種類和機(jī)體免疫功能密切相關(guān), 同時(shí)隨著病情的逐漸進(jìn)展可出現(xiàn)黃疸、肝區(qū)疼痛、肝脾大、肝外表現(xiàn)、肝纖維化等[14]。

    ECLIA 法是一種臨床常用的檢測(cè)方法, 具有高選擇性和高靈敏度的特點(diǎn), 可以用來檢測(cè)一些傳染性疾病, 比如乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病等, 也可以用于內(nèi)分泌疾病的激素檢測(cè), 比如甲狀腺功能、性腺垂體激素、皮質(zhì)醇等內(nèi)分泌激素的檢查。ELISA 法的原理為, 首先把酶分子與抗體或抗原相結(jié)合, 這種結(jié)合不會(huì)改變抗體和抗原的免疫學(xué)特性, 又保留了酶的活性;然后用酶標(biāo)記的抗體或抗原與吸附在固相載體上的已知抗原或抗體發(fā)生特異性的結(jié)合;最后加入底物溶液, 使其發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。如果抗原抗體發(fā)生了特異反應(yīng), 則底物的顏色就會(huì)發(fā)生變化, 而顏色變化的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原的含量成正比。ECLIA 法的可測(cè)總范圍更廣, 其應(yīng)用的反應(yīng)總時(shí)間更少, 可簡(jiǎn)便操作, 準(zhǔn)確性更高, 臨床檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確。若HBeAg、HBsAg、HBcAb 乙型肝炎病毒的血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果為陽性, 說明機(jī)體感染了乙型肝炎病毒, 同時(shí)其傳染性更強(qiáng);而HBsAg、HBeAb、HBcAb 結(jié)果陽性提示機(jī)體感染了乙型肝炎病毒, 但其傳染性較低。

    綜上所述, ECLIA 法檢測(cè)乙型肝炎病毒感染的準(zhǔn)確性和對(duì)乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物的陽性檢出率均顯著高于ELISA 法, 同時(shí)可對(duì)病情進(jìn)行監(jiān)測(cè), 具有更高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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