佛手類黃酮和香豆素類物質(zhì)的靶向篩查和定量分析研究

譚濤,董思龍,秦艷,趙希娟*,焦必寧*

1(西南大學(xué) 園藝園林學(xué)院,重慶,400715)2(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部柑橘類果品質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部柑桔及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(西南大學(xué)),重慶,400715)3(西南大學(xué) 柑桔研究所,重慶,400712)

佛手(CitrusmedicaL.var.sarcodactylisSwingle)是蕓香科柑橘屬植物,在我國(guó)廣西、廣東、四川、云南、福建、浙江等地均有栽培,根據(jù)產(chǎn)地的不同,可分為廣佛手、川佛手和金佛手。佛手果實(shí)藥食兩用歷史悠久,研究表明佛手具有保護(hù)心臟,降低血壓血脂,鎮(zhèn)痛,抗癌等多種藥理作用[1]。佛手能為人類健康帶來(lái)益處與其中含有豐富的類黃酮和香豆素等次生代謝產(chǎn)物密不可分。

類黃酮在植物生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要的作用,包括抵御病原體攻擊,紫外線保護(hù),調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素運(yùn)輸,充當(dāng)抗氧化劑等[2]。香豆素也被認(rèn)為是柑橘屬植物重要的活性物質(zhì)之一,對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程有著重要的意義,例如調(diào)節(jié)根系微生物群落結(jié)構(gòu),延遲種子萌發(fā)[3]等。目前,對(duì)佛手果實(shí)類黃酮和香豆素類物質(zhì)等次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定和分析檢測(cè)的研究已有報(bào)道。吳學(xué)峰[4]從廣佛手中鑒定出12種黃酮及黃酮苷和22種香豆素;胡瀚文等[5]從四川佛手中鑒定了16種黃酮類,17種香豆素類;ZHONG等[6]從廣佛手中檢驗(yàn)出21種香豆素。但是他們只對(duì)佛手中的生物化學(xué)成分進(jìn)行了非靶向篩查和鑒定,并沒(méi)有進(jìn)行定量分析。陳燕霞[7]運(yùn)用HPLC測(cè)定了廣佛手中橙皮苷和檸檬內(nèi)酯的含量;張璐等[8]使用HPLC測(cè)定了6個(gè)不同產(chǎn)地佛手中橙皮苷的含量;曹士政等[9]基于HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地佛手中6種化學(xué)成分的含量,包括檸檬內(nèi)酯、濱蒿內(nèi)酯、橙皮苷、地奧司明、水合氧化前胡素和佛手苷內(nèi)酯;左龍亞[10]使用HPLC定量了重慶佛手中圣草次苷,地奧司明,甜橙黃酮和桔皮素的含量。但是這些研究均使用HPLC對(duì)佛手的生物活性成分進(jìn)行定量分析,所測(cè)成分較少或者洗脫時(shí)間偏長(zhǎng),基于質(zhì)譜的定量分析方法很少。因類黃酮和香豆素類物質(zhì)同分異構(gòu)體較多,使用高效液相色譜-二級(jí)管陣列檢測(cè)器法(high performance liquid chromatography with diode array detector,HPLC-DAD)不能有效地完成幾十種物質(zhì)且包含多種同分異構(gòu)體同時(shí)分離檢測(cè)的需求,而使用超高效液相色譜三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法(ultra-high performance liquid chromatography coupled with triple-quadrupole mass spectrometry, UPLC-QqQ-MS/MS)中的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式可有效避免因同分異構(gòu)體帶來(lái)的定性和定量不準(zhǔn)確的問(wèn)題,與傳統(tǒng)的HPLC-DAD檢測(cè)方法相比,具有更高的分離度、靈敏度和更快的分析速度。因此,本研究擬基于UPLC-QqQ-MS/MS技術(shù),采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式對(duì)金華佛手和云南佛手中的36種類黃酮和23種香豆素類物質(zhì)同時(shí)進(jìn)行靶向篩查和定量分析,其中包含了13對(duì)同分異構(gòu)體,相比于以往的研究,鑒定和定量的物質(zhì)種類更多,這對(duì)評(píng)估佛手的營(yíng)養(yǎng)功能品質(zhì)以及后續(xù)的資源利用具有一定的借鑒意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本研究中使用的金華佛手采自浙江省金華市金東區(qū)赤松鎮(zhèn),云南佛手采自云南省紅河自治州蒙自市。于成熟期挑選大小適宜、無(wú)病蟲(chóng)害的優(yōu)質(zhì)果實(shí)作為實(shí)驗(yàn)材料。

甲醇(色譜純),美國(guó)Sigma-Aldrich公司,甲酸(色譜純),上海吉至生化科技有限公司。

實(shí)驗(yàn)中所使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括36種類黃酮和23種香豆素類物質(zhì)如表1所示,購(gòu)買自成都克洛瑪生物科技有限公司和上海源葉生物科技有限公司,具體信息參照課題組已有的報(bào)道[11-12]。

表1 物質(zhì)及方法相關(guān)信息Table 1 Information of parameters related to compounds and method

1.2 次生代謝產(chǎn)物的提取

在邢天天[13]的方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn),大致如下:取金華佛手和云南佛手將其切成細(xì)條狀,分別放入烘盤(pán)標(biāo)記后置于烘箱中烘干48 h,經(jīng)打粉機(jī)粉碎后,用封口袋收集保存于常溫干燥條件下備用。精確稱取樣品粉末0.5 g,每個(gè)樣品設(shè)置3個(gè)生物重復(fù),分別置于10 mL 離心管中,加入7 mL甲醇搖勻,室溫條件下300 W超聲30 min,取上清液于25 mL棕色容量瓶中,殘?jiān)? mL甲醇再提取,重復(fù)上述操作2次。合并以上3次提取的上清液并用甲醇定容至25 mL,儲(chǔ)存于4 ℃ 冰箱。取樣品提取液2 mL于2 mL圓底連蓋離心管中作為原液,再將每種樣品提取液及其生物重復(fù)液用無(wú)水甲醇分別稀釋10倍、100倍、1 000倍、10 000倍和100 000倍,稀釋液均取1 mL于2 mL圓底連蓋離心管中。最后使用0.22 μm親水性聚四氟乙烯(poly tetra fluoroethylene,PTFE)針式濾器過(guò)濾至進(jìn)樣小瓶中備用。

1.3 UPLC-QqQ-MS/MS條件

UPLC使用的是島津的Nexera X2 UPLC系統(tǒng)(日本),色譜柱為ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm, 1.8 μm, Waters公司),色譜柱溫度為40 ℃,流速為0.3 mL/min,進(jìn)樣量為1.0 μL,樣品室溫度為15 ℃,流動(dòng)相為含有0.10%(體積分?jǐn)?shù))甲酸的純水(A)和乙腈(B),洗脫程序與GUO等[11]的報(bào)道一致。

三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜使用的是SCIEX QTrap?6500+MS/MS系統(tǒng)(美國(guó))。采用電噴霧離子源(turbo spray),正離子模式(ESI+)和負(fù)離子模式(ESI-),采集模式為程序多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式,參數(shù)設(shè)置參照GUO等[11]的研究。

將混標(biāo)稀釋為0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、10、20、25、50、100 μg/L的一系列溶液,13個(gè)連續(xù)稀釋的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用于59種次生代謝產(chǎn)物的線性評(píng)估。

2 結(jié)果與分析

2.1 佛手果實(shí)中類黃酮和香豆素類物質(zhì)的靶向篩查

使用實(shí)驗(yàn)室已建立好的UPLC-QqQ-MS/MS靶向篩查方法,對(duì)佛手樣品中的36種類黃酮和23種香豆素類物質(zhì)進(jìn)行了靶向篩查,59種目標(biāo)化合物中共存在13對(duì)同分異構(gòu)體,分別是橙皮苷和新橙皮苷、香蜂草苷和枸橘苷、4′,5,7,8-四甲氧基黃酮和4′,5,6,7-四甲氧基黃酮、牡荊素和異牡荊素、蕓香柚皮苷和柚皮苷、野漆樹(shù)苷和牡荊素鼠李糖苷、3′,4′,5,5′,6,7-六甲氧基黃酮和川陳皮素、甜橙黃酮和異橙黃酮、歐前胡素和異歐前胡素、濱蒿內(nèi)酯和檸檬內(nèi)酯、佛手苷內(nèi)酯和花椒毒素、補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素、橙皮內(nèi)酯和異橙皮內(nèi)酯。為了更準(zhǔn)確地實(shí)現(xiàn)靶向篩查定性,使用離子對(duì)和保留時(shí)間2項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行確證以更好地區(qū)分同分異構(gòu)體。表1顯示了用于篩查的59種目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的離子對(duì)和保留時(shí)間,使用至少5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)據(jù)對(duì)每種化合物進(jìn)行線性擬合,結(jié)果表明,59種化合物的線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99,峰面積與化合物濃度之間具有良好的線性關(guān)系。59種目標(biāo)物的標(biāo)準(zhǔn)品混合物總離子流圖和提取離子流圖如圖1所示。大部分類黃酮和香豆素類物質(zhì)在正離子模式下電離信號(hào)較強(qiáng),因此正離子模式下出峰較多(圖1-B),負(fù)離子模式下出峰較少(圖1-C)。使用該方法對(duì)云南佛手和金華佛手果實(shí)的甲醇提取物進(jìn)行了靶向篩查(圖1-D和圖1-E)。結(jié)果顯示,2個(gè)品種共篩查出36種類黃酮和21種香豆素,對(duì)其中的34種類黃酮和21香豆素進(jìn)行了準(zhǔn)確定量(表2,表3),各物質(zhì)的定量離子對(duì)、線性方程、相關(guān)系數(shù)和線性范圍如表1所示。枸橘苷和川陳皮素有檢出,但無(wú)法定量,花椒毒素和異補(bǔ)骨脂素?zé)o檢出。梔子黃素B在云南佛手中的含量低于0.1 μg/g,在金華佛手中有檢出,但不能準(zhǔn)確定量。其余的33種類黃酮和21種香豆素在2個(gè)品種中均能被準(zhǔn)確定量,表明2種佛手的次生代謝產(chǎn)物在種類上基本一致。這是目前對(duì)佛手果實(shí)所含次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析報(bào)道中涉及物質(zhì)數(shù)量最多的研究。

A-混標(biāo)總離子流色譜圖;B-混標(biāo)正離子模式下提取離子流色譜圖;C-混標(biāo)負(fù)離子模式下提取離子流色譜圖;D-云南佛手總離子流色譜圖;E-金華佛手總離子流色譜圖圖1 UPLC-QqQ-MS/MS色譜圖Fig.1 UPLC-QqQ-MS/MS chromatograms注:圖1-B和圖1-C中的序號(hào)對(duì)應(yīng)物質(zhì)與表1中一致。

表2 兩種佛手中類黃酮含量Table 2 Flavonoid contents in two kinds of fingered citrons

表3 2種佛手中香豆素含量Table 3 Contents of coumarins in two kinds of fingered citrons

吳學(xué)峰[4]對(duì)廣佛手的活性物質(zhì)進(jìn)行了分析鑒定,其中鑒定出的圣草次苷、蘆丁、香葉木素、地奧司明、橙皮苷和橙皮素等6種類黃酮以及東莨菪亭、濱蒿內(nèi)酯、檸檬內(nèi)酯、水合氧化前胡素、氧化前胡素、傘形花內(nèi)酯、佛手苷內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素和珊瑚菜素等10種香豆素類物質(zhì),本研究在云南佛手和金華佛手果實(shí)中也有檢出。胡瀚文等[5]曾報(bào)道四川佛手中含有維采寧-2、蘆丁、牡荊素、水仙苷、野漆樹(shù)苷、柚皮素、香葉木素、地奧司明、橙皮苷、橙皮素、甲基橙皮苷、川陳皮素等12種類黃酮和傘形花內(nèi)酯、濱蒿內(nèi)酯、檸檬內(nèi)酯、佛手苷內(nèi)酯、歐前胡素、珊瑚菜素、異歐前胡素、香柑醇、東莨菪亭等9種香豆素,本研究發(fā)現(xiàn)云南佛手和金華佛手果實(shí)中同樣含有以上類黃酮和香豆素類物質(zhì),除此之外,本研究靶向篩查鑒定出的類黃酮和香豆素類物質(zhì)的數(shù)量多于相關(guān)文獻(xiàn)中已有的報(bào)道,而且有14種類黃酮和4種香豆素是首次在佛手中檢出,分別是牡荊素鼠李糖苷,5-羥基-7,8,4′-三甲氧基黃酮、半齒澤蘭素-5-甲醚、根皮素、根皮苷、蔓荊子黃素、異橙黃酮、4′,5,7,8-四甲氧基黃酮、4′,5,6,7-四甲氧基黃酮、芹菜素、梔子黃素B、櫟精-3,7,3′,4′-四甲醚、金合歡素、3′,4′,5,5′,6,7-六甲氧基黃酮以及6′,7′-環(huán)氧香檸檬亭、6′,7′-二羥基香檸檬亭、5-牻牛兒醇基-7-甲氧基香豆素和異紫花前胡內(nèi)酯。同時(shí),本研究對(duì)34種類黃酮和21種香豆素進(jìn)行了準(zhǔn)確定量。

2.2 佛手果實(shí)中類黃酮組分與含量分析

本研究一共檢出并準(zhǔn)確定量了34種類黃酮,包括6種黃酮、9種黃烷酮、6種黃酮醇、2種二氫查爾酮和11種多甲氧基黃酮。金華佛手和云南佛手總類黃酮含量分別為(757.11±27.12) μg/g和(803.98±29.41) μg/g。地奧司明是2種佛手中含量最高的類黃酮,在金華佛手中含量為(345.85±19.92) μg/g,在云南佛手中含量為(417.73±12.13) μg/g,橙皮苷次之,含量均在200 μg/g以上(表2,圖2-A)。2種佛手中定量的類黃酮平均含量高于10 μg/g的物質(zhì)從高到低依次為地奧司明、橙皮苷、蘆丁、水仙苷。金華佛手中圣草次苷和香蜂草苷的含量也高于10 μg/g,分別為(33.01±1.48) μg/g和(24.70±1.24) μg/g(圖2-B)。而且,金華佛手中新橙皮苷,香蜂草苷、圣草次苷、蘆丁以及水仙苷的含量均高于云南佛手,而云南佛手中維采寧-2的含量略高于金華佛手。除甜橙黃酮外,其余的多甲氧基黃酮在云南佛手中的含量均不足1 μg/g(表2)。

A-高含量的3種類黃酮的含量比較;B-其余31種類黃酮的含量比較圖2 類黃酮在2種佛手果實(shí)中的含量比較Fig.2 Content comparison of flavonoids in two kinds of fingered citrons

從類黃酮的種類來(lái)看,大部分柑橘以黃烷酮為主[14]。比如甜橙中的橙皮苷[15],柚中的柚皮苷[16]含量都極為豐富。但在本研究中,佛手與橙、寬皮柑橘等的類黃酮組成具有較大差異。2種佛手的類黃酮中黃酮總含量占比最高,金華佛手和云南佛手占比分別高達(dá)47.68%和54.02%,含量最高的黃酮是地奧司明。黃烷酮也是2種佛手重要的類黃酮物質(zhì),占比在30%以上,但柚皮苷,柚皮素,蕓香柚皮苷等柑橘屬含量較高的黃烷酮在佛手類黃酮中占比都不足1%。值得注意的是,多甲氧基黃酮是柑橘屬特有的一類類黃酮物質(zhì),尤其在果皮中含量較高,川陳皮素幾乎是所有柑橘中含量最高的多甲氧基黃酮[17]。但在本研究中,金華佛手多甲氧基黃酮含量占類黃酮總含量的比例僅為1.78%,而云南佛手不足1%,且2種佛手中的川陳皮素含量很低。

CHU等[18]測(cè)定廣佛手中地奧司明含量為(462.3±7.7) μg/g,張璐等[8]測(cè)得金華佛手橙皮苷含量為250 μg/g,這與本研究結(jié)果基本一致。曹士政等[9]也在云南佛手和金華佛手中檢出了地奧司明和橙皮苷,但與本研究在含量上具有一定差異,這可能與樣品采收時(shí)間和檢測(cè)方法不同有關(guān)。此外,與已有文獻(xiàn)不同的是,本研究首次報(bào)道云南佛手和金華佛手中含有牡荊素鼠李糖苷、5-羥基-7,8,4′-三甲氧基黃酮、半齒澤蘭素-5-甲醚、根皮素、根皮苷、蔓荊子黃素、異橙黃酮、4′,5,7,8-四甲氧基黃酮、4′,5,6,7-四甲氧基黃酮、芹菜素、梔子黃素B、櫟精-3,7,3′,4′-四甲醚、金合歡素、3′,4′,5,5′,6,7-六甲氧基黃酮,并對(duì)這些類黃酮進(jìn)行了準(zhǔn)確定量。這些物質(zhì)中在金華佛手和云南佛手中含量最高的是牡荊素鼠李糖苷,分別為(5.67±0.07) μg/g和(3.65±0.11) μg/g,僅次于維采寧-2,此外在金華佛手中蔓荊子黃素和半齒澤蘭素-5-甲醚的含量均高于1 μg/g,分別為(4.88±0.13) μg/g和(1.09±0.06) μg/g。

2.3 佛手果實(shí)中香豆素類物質(zhì)組分與含量分析

本研究中一共檢出并準(zhǔn)確定量了21種香豆素,包括12種呋喃香豆素和9種簡(jiǎn)單香豆素(表3)。金華佛手和云南佛手總香豆素含量分別為(1 102.72±13.29) μg/g和(676.97±49.77) μg/g。金華佛手和云南佛手中的香豆素以簡(jiǎn)單香豆素為主,占比分別高達(dá)86.49%和83.51%,檸檬內(nèi)酯是2種佛手中含量最高的簡(jiǎn)單香豆素,分別為(946.17±10.78) μg/g和(561.00±46.42) μg/g(圖3-A),濱蒿內(nèi)酯次之,含量分別為(5.96±0.02) μg/g和(2.79±0.10) μg/g,其他的簡(jiǎn)單香豆素在2種佛手的含量均不足1 μg/g。呋喃香豆素僅占約10%,氧化前胡素是金華佛手和云南佛手中含量最高的呋喃香豆素,也是含量第二高的香豆素類物質(zhì)(圖3-A),分別為(91.9±1.48) μg/g和(78.38±1.08) μg/g。除此之外,金華佛手中含有較多的8-氧甲基異歐前胡內(nèi)酯和珊瑚菜素,二者的含量均在云南佛手的6倍以上,而云南佛手含有較高含量的水合氧化前胡素(圖3-B)。蛇床子素和 6′,7′-環(huán)氧香檸檬亭在2種佛手中的含量都極低,花椒毒素和異補(bǔ)骨脂素在2種佛手中均未檢出。

A-高含量的2種香豆素類物質(zhì)的含量比較;B-其余19種香豆素類物質(zhì)的含量比較圖3 香豆素類物質(zhì)在2種佛手果實(shí)中的含量比較Fig.3 Content comparison of coumarins in two kinds of fingered citrons

劉盼等[19]檢測(cè)到檸檬內(nèi)酯在金華佛手和云南佛手干燥果實(shí)甲醇提取液中的含量分別為730 μg/g、510 μg/g,與這本研究結(jié)果基本一致,魏瑩等[20]用同樣的提取方法測(cè)得5種廣佛手檸檬內(nèi)酯含量為1 000 μg/g左右,結(jié)合以往研究,相比于金華佛手和廣佛手,云南佛手中檸檬內(nèi)酯含量較低。值得注意的是,CHU等[18]使用HPLC方法檢測(cè)到廣佛手濱蒿內(nèi)酯的含量為(100.5±0.2) μg/g,吳春蓉[21]使用HPLC測(cè)得濱蒿內(nèi)酯在四川佛手含量為364.83 μg/g,廣佛手含量為179.89 μg/g,崔廣林等[22]使用HPLC法測(cè)得48種川佛手的濱蒿內(nèi)酯和東莨菪亭含量基本在100 μg/g以上,而本研究使用UPLC-QqQ-MS/MS方法測(cè)得2種佛手的濱蒿內(nèi)酯和東莨菪亭含量均低于10 μg/g,檢測(cè)方法以及樣品來(lái)源和前處理的差異均會(huì)造成最終定量結(jié)果的差異。此外,本研究首次發(fā)現(xiàn)云南佛手和金華佛手中含有6′,7′-環(huán)氧香檸檬亭、6′,7′-二羥基香檸檬亭、5-牻牛兒醇基-7-甲氧基香豆素和異紫花前胡內(nèi)酯,并對(duì)這些香豆素類物質(zhì)進(jìn)行了準(zhǔn)確定量,這4種物質(zhì)在2種佛手的含量均不足1 μg/g。

2.4 佛手果實(shí)中類黃酮和香豆素類物質(zhì)含量的比較

2個(gè)產(chǎn)地的佛手所測(cè)香豆素總含量和類黃酮總含量有所差別,金華佛手的香豆素總含量高于類黃酮,云南佛手中總香豆素略低于總黃酮的含量,造成這種差異的原因是云南佛手含有較高的橙皮苷和地奧司明,而檸檬內(nèi)酯含量遠(yuǎn)低于金華佛手。就單個(gè)物質(zhì)而言,檸檬內(nèi)酯是2種佛手主要的香豆素,地奧司明和橙皮苷是主要的類黃酮,2個(gè)產(chǎn)地的佛手中檸檬內(nèi)酯的含量都高于地奧司明或橙皮苷(圖4)。結(jié)合以往的研究,CHU等[18]檢測(cè)到廣佛手中檸檬內(nèi)酯、地奧司明和橙皮苷的含量分別為(1 206.6±11.7) μg/g、(462.3±7.7) μg/g和(243.4±4.4) μg/g,崔廣林等[22]對(duì)48個(gè)產(chǎn)地的川佛手的8種成分進(jìn)行含量測(cè)定,除少數(shù)產(chǎn)地的川佛手中橙皮苷含量略高于檸檬內(nèi)酯外,川佛手中檸檬內(nèi)酯的含量遠(yuǎn)高于橙皮苷,這與本研究結(jié)果一致。而目前對(duì)其他柑橘類果實(shí)次生代謝產(chǎn)物的研究表明,檸檬中含量最高的類黃酮和香豆素分別是橙皮苷和檸檬內(nèi)酯,但橙皮苷的含量遠(yuǎn)高于檸檬內(nèi)酯[23],酸橙果皮和果實(shí)中均含有類黃酮和香豆素,且均以黃烷酮類成分即柚皮苷、新橙皮苷的含量較高[24],金柑中類黃酮占總物質(zhì)含量的80.70%～97.16%[25]。與其他柑橘類果實(shí)不同的是,佛手中含量最高的是香豆素而不是類黃酮。

圖4 兩種佛手中含量最高的香豆素和類黃酮的比較Fig.4 Comparison of coumarins and flavonoids with higher contents in two kinds of fingered citrons

3 結(jié)論

本研究采用UPLC-QqQ-MS/MS對(duì)金華佛手和云南佛手的類黃酮和香豆素類物質(zhì)進(jìn)行了靶向篩查和定量分析,得到了34種類黃酮和21種香豆素類物質(zhì)的含量。結(jié)果表明,2種佛手中類黃酮種類均以黃酮為主,地奧司明是金華佛手和云南佛手含量最高的類黃酮,橙皮苷次之,2種佛手中香豆素種類均以簡(jiǎn)單香豆素為主,檸檬內(nèi)酯是2種佛手中含量最高的香豆素類物質(zhì),氧化前胡素次之。此外,2個(gè)產(chǎn)地的佛手中檸檬內(nèi)酯的含量都高于地奧司明。本研究結(jié)果可以為更好地發(fā)掘應(yīng)用佛手資源、評(píng)價(jià)佛手的品質(zhì)提供數(shù)據(jù)支持。