3種滇產(chǎn)烏頭的生藥學(xué)鑒別

王麗， 朱兆云， 王京昆， 曾榕姍， 符德歡，朱高倩， 周培軍， 李雙良

（1.云南省藥物研究所，云南昆明 650111；2.云南白藥集團(tuán)創(chuàng)新研發(fā)中心，云南昆明 650111；3.云南省中藥和民族藥新藥創(chuàng)制企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明 650111；4.桂林醫(yī)學(xué)院，廣西桂林 541010）

烏頭藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為下品[1]。烏頭屬植物多具有祛風(fēng)除濕、散寒止痛的功效，可用于風(fēng)寒濕痹、關(guān)節(jié)疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛、麻醉止痛等[2]。《中華人民共和國(guó)藥典》1990—2015 年版及《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》第1 ～19冊(cè)中含有烏頭類的中成藥制劑約有340種，占比較大?？梢?jiàn)烏頭屬植物有較高的藥用價(jià)值和開(kāi)發(fā)前景。毛茛科烏頭屬植物全世界約有350種，我國(guó)約有167種，大多分布于云南北部、四川西部和西藏東部的高山地帶[3]。云南省成為烏頭屬植物的集中分布區(qū)域之一，約有66 種，25 變種，4 變形[4]。由于烏頭屬植物種類繁多，形態(tài)分類困難，藥材性狀相似，市場(chǎng)藥材難辨，品種使用混亂。本研究特選取滇產(chǎn)主流藥材黃草烏及同屬易混淆且文獻(xiàn)報(bào)道較少或未見(jiàn)報(bào)道的馬耳山烏頭和中甸烏頭進(jìn)行生藥學(xué)比較，以期為澄清藥材混亂，以及進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用這3種滇產(chǎn)烏頭藥材提供鑒別依據(jù)，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料

1.1 藥材實(shí)驗(yàn)藥材經(jīng)中國(guó)科學(xué)院華南植物園楊親二研究員鑒定，詳細(xì)信息見(jiàn)表1。

1.2 儀器TS-12A生物組織自動(dòng)脫水機(jī)、BM-Ⅸ生物組織包埋機(jī)/包埋冷凍臺(tái)、QP-Ⅵ生物組織切片機(jī)、CS-IV 型生物組織攤片烤片機(jī)（湖北省孝感市宏業(yè)醫(yī)用儀器公司）；Nikon ECLIPSE E400 顯微鏡（日本尼康公司）。

1. 3 試劑無(wú)水乙醇（分析純，安徽安特生物化學(xué)有限公司）；石蠟（56～58 ℃，上海永華石蠟有限公司）；TO 型生物透明劑（廣西岑溪市松香廠）；番紅（上海三愛(ài)思試劑有限公司）；固綠（上海化學(xué)試劑站）；甘油（上海申博化工有限公司，批號(hào):0605101）；中性樹(shù)膠（無(wú)錫市江原實(shí)業(yè)技貿(mào)總公司）；水合氯醛（上海善普化工科技有限公司）。

表1 3種烏頭藥材信息Table 1 The information of the three species of Aconitum materials

2 觀察內(nèi)容

2. 1 原植物鑒別通過(guò)觀察黃草烏、馬耳山烏頭、中甸烏頭原植物形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)其具有各自獨(dú)特的形態(tài)特征，可作為物種之間的區(qū)別點(diǎn)，主要表現(xiàn)在植物生長(zhǎng)方式、葉及葉柄的長(zhǎng)度等方面。3種烏頭屬植物形態(tài)特征比較見(jiàn)圖1、表2。

2. 2 性狀鑒別通過(guò)觀察黃草烏、馬耳山烏頭、中甸烏頭藥材性狀特征，包括形狀、表面顏色、須根疏密、側(cè)根多少、表面紋理等。發(fā)現(xiàn)3種烏頭藥材性狀特征存在一定的差異，主要表現(xiàn)在藥材表面顏色及側(cè)根數(shù)目等方面，其特征比較見(jiàn)圖2、表3。

2.3 顯微鑒別

2.3.1 塊根橫切面特征 相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道顯示，大多烏頭屬植物母根、子根的上、中、下段組織特征存在差異[5]。本研究針對(duì)黃草烏、馬耳山烏頭、中甸烏頭母根、子根的上、中、下段組織特征進(jìn)行比較，觀察后生皮層、皮層細(xì)胞列數(shù)，石細(xì)胞多少，篩管群有無(wú)，形成層是否連續(xù)，維管束個(gè)數(shù)，木質(zhì)部導(dǎo)管排列形狀，髓部是否明顯等，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3種烏頭在石細(xì)胞多少、篩管群有無(wú)、維管束個(gè)數(shù)等方面均存在差異。具體特征見(jiàn)圖3 ～8、表4。

表2 3種烏頭屬藥材植物形態(tài)特征Table 2 The appearance characteristics of the three species of Aconitum plants

圖2 3種烏頭藥材性狀圖Figure 2 The characteristics of the three kinds of Aconitum medicinal materials

2.3.2 塊根粉末特征 對(duì)3 種滇產(chǎn)烏頭塊根粉末進(jìn)行水合氯醛及醋酸甘油制片后觀察，發(fā)現(xiàn)3種滇產(chǎn)烏頭塊根內(nèi)含物種類相同，均為后生皮層細(xì)胞、石細(xì)胞、淀粉粒、導(dǎo)管、纖維、薄壁細(xì)胞，僅在形狀或數(shù)量上有所不同，具體特征見(jiàn)圖9、表5。

表3 3種烏頭藥材性狀特征Table 3 The characteristics of the three kinds of Aconitum medicinal materials

3 討論

圖3 黃草烏母根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 3 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the mother roots of Aconitum vilmorinianum（10×10）

圖4 馬耳山烏頭母根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 4 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the mother roots of Aconitum delavayi（10×10）

本研究觀察了滇產(chǎn)3種烏頭藥材的原植物、性狀、顯微特征，結(jié)果表明，3 種烏頭無(wú)論植物形態(tài)特征、藥材性狀特征、橫切面組織構(gòu)造及粉末特征均存在差異。黃草烏為藤本、葉柄與葉片近等長(zhǎng)，馬耳山烏頭為藤本或直立草本、葉柄比葉片長(zhǎng)，中甸烏頭為直立草本、葉柄比葉片短；黃草烏側(cè)根少、黃褐色，馬耳山烏頭側(cè)根少、深褐色，中甸烏頭側(cè)根多、棕褐色；黃草烏、中甸烏頭、馬耳山烏頭子根、母根的上、中、下段維管束個(gè)數(shù)及排列、形成層環(huán)的形狀、篩管群的有無(wú)、淀粉粒形狀特征及數(shù)量均存在差異。本研究所列出3 種烏頭的鑒別點(diǎn)，可用于藥材的品種鑒定，澄清藥材品種混亂。

圖5 中甸烏頭母根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 5 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the mother roots of Aconitum piepunense（10×10）

圖6 黃草烏子根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 6 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the subroots of Aconitum vilmorinianum（10×10）

目前，烏頭類藥材生藥鑒定已報(bào)道20 余種[5-12]。本研究對(duì)滇產(chǎn)3 個(gè)物種生藥特征進(jìn)行了初步鑒別，其中中甸烏頭為首次報(bào)道。烏頭類藥材種類繁多，為進(jìn)一步完善烏頭屬植物的生藥學(xué)相關(guān)資料，烏頭屬未見(jiàn)報(bào)道物種還需進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)。

圖7 馬耳山烏頭子根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 7 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the subroots of Aconitum delavayi（10×10）

圖8 中甸烏頭子根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 8 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the subroots of Aconitum piepunense（10×10）

表4 3種烏頭藥材橫切組織特征Table 4 The cross-cutting characteristics of the three kinds of Aconitum materials

圖9 3種烏頭藥材粉末特征（10×40）Figure 9 The powder characteristics of the three Aconitum species（10×40）

表5 3種烏頭藥材粉末特征Table 5 The powder characteristics of the three Aconitum species