宮頸癌患者血清HE4、CEACAM6、AFP表達(dá)水平及其與臨床病理特征的相關(guān)性

何涯麗，王玉，薛小芳，李森森，崔娟

南陽(yáng)南石醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 南陽(yáng) 473000

宮頸癌是臨床常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，在全球范圍內(nèi)其發(fā)病率僅次于乳腺癌，而宮頸癌發(fā)病率在發(fā)展中國(guó)家位居首位，據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)每年宮頸癌新發(fā)病例約有13 萬(wàn)例，約占全球新發(fā)病例的28%[1]。宮頸癌早期無(wú)典型臨床癥狀，極易造成誤診、漏診，待出現(xiàn)明顯癥狀時(shí)患者已錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)期，可見(jiàn)，尋找一些安全有效的血清標(biāo)記物對(duì)宮頸癌早期診斷具有重要意義。人附睪蛋白4(HE4)屬于蛋白酶抑制劑，在卵巢癌等上皮細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)，可作為婦科腫瘤診斷標(biāo)記物[2]。癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子6(CEACAM6)屬于癌胚原家族成員，與細(xì)胞極性、結(jié)構(gòu)破壞密切相關(guān)，可通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞黏附進(jìn)而參與腫瘤細(xì)胞增殖分化、凋亡等過(guò)程[3]。甲胎蛋白(AFP)屬于糖蛋白，主要由胎兒肝細(xì)胞和卵黃囊合成，相關(guān)研究顯示，在多種腫瘤內(nèi)AFP含量較高，可介導(dǎo)參與多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展[4]?；诖耍狙芯繃L試分析宮頸癌血清HE4、CEACAM6、AFP 水平，并探究其與宮頸癌患者臨床病理特征的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年5月至2022年10月南陽(yáng)南石醫(yī)院收治的92 例宮頸癌患者作為宮頸癌組。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合宮頸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，經(jīng)病理學(xué)等檢查確診；首次確診為宮頸癌，未采取任何放化療等相關(guān)治療；預(yù)計(jì)生存時(shí)間≥1年。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在陰道毛滴蟲(chóng)等感染病史；其他惡性腫瘤；合并生殖道結(jié)核；血液疾病；既往存在子宮或?qū)m頸手術(shù)史；免疫性疾?。辉袐D或哺乳期女性；存在語(yǔ)言、精神障礙等。選擇同期46例宮頸上皮內(nèi)瘤變患者作為良性組，46例健康體檢者作為對(duì)照組，其中良性組經(jīng)病理檢查確診為宮頸上皮內(nèi)瘤變；對(duì)照組宮頸無(wú)異常，人類乳頭瘤病毒呈陰性；良性組、對(duì)照組均排除惡性腫瘤遺傳病史、存在感染手術(shù)史、其他生殖系統(tǒng)疾病或結(jié)構(gòu)異常等。三組受檢者的基線資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性，見(jiàn)表1。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有入組者均知情并簽署同意書(shū)。

表1 三組受檢者的基線資料比較[±s,例(%)]Table 1 Comparison of baseline data among the three groups [±s,n(%)]

表1 三組受檢者的基線資料比較[±s,例(%)]Table 1 Comparison of baseline data among the three groups [±s,n(%)]

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1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 收集三組受檢者就診后或體檢當(dāng)日空腹靜脈血5 mL，使用真空采血生化管保存，3 000 r/min離心5 min，收集上清液。

1.2.2 血清HE4、CEACAM6、AFP 水平檢測(cè) 采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)三組血清HE4、CEACAM6、AFP水平，試劑盒均由上海酶研生物科技有限公司提供。

1.2.3 宮頸癌臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)組織2018 年制定的《宮頸癌新分期及診治指南》[6]中宮頸癌的臨床分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期指腫瘤局限在子宮中；Ⅱ期指腫瘤突破子宮，尚未擴(kuò)散至骨盆壁和/或陰道下；Ⅲ期指腫瘤已擴(kuò)散到骨盆壁或陰道下1/3 處；Ⅳ期指腫瘤已擴(kuò)散到膀胱或直腸黏膜。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷以CT結(jié)合最終病理確診。CT診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的標(biāo)準(zhǔn)：淋巴結(jié)軸面的短徑超過(guò)10 mm，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)軸面的短徑超過(guò)8 mm；中央呈現(xiàn)低密度影的壞死灶；3枚以上淋巴結(jié)“成團(tuán)”、“成簇”；淋巴結(jié)的包膜侵犯與四周的脂肪間無(wú)明顯分界[7]。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較三組受檢者的血清HE4、CEACAM6、AFP 水平；(2)分析宮頸癌不同臨床病理特征患者血清HE4、CEACAM6、AFP水平，臨床病理特征包括年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、孕次、宮頸癌家族史、腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、病理類型、是否絕經(jīng)、浸潤(rùn)深度；(3)分析宮頸癌患者血清HE4、CEACAM6、AFP與臨床病理特征的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS25.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采取Bartlett方差齊性檢驗(yàn)與K-S正態(tài)性檢驗(yàn)，均確認(rèn)具備方差齊性和服從正態(tài)分布，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)比較采用LSD-t檢驗(yàn)；采用Spearson 相關(guān)性檢驗(yàn)分析血清HE4、CEACAM6、AFP 水平與臨床病理特征的相關(guān)性。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組受檢者的血清HE4、CEACAM6、AFP水平比較 三組血清HE4、CEACAM6、AFP水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)，且宮頸癌組＞良性組＞對(duì)照組，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 三組受檢者的血清HE4、CEACAM6、AFP水平比較(±s)Table 2 Comparison of serum HE4, CEACAM6, and AFP levels among the three groups of subjects(±s)

表2 三組受檢者的血清HE4、CEACAM6、AFP水平比較(±s)Table 2 Comparison of serum HE4, CEACAM6, and AFP levels among the three groups of subjects(±s)

注：與宮頸癌組比較，aP＜0.05；與良性組比較，bP＜0.05。Note: Compared with the cervical cancer group,aP＜0.05; compared with the benign group,bP＜0.05.

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2.2 宮頸癌不同臨床病理特征患者的血清HE4、CEACAM6、AFP 水平比較 不同年齡、孕次、宮頸癌家族史、腫瘤直徑、病理類型、絕經(jīng)患者血清HE4、CEACAM6、AFP 水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、臨床分期、浸潤(rùn)深度患者血清HE4、CEACAM6、AFP水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)，見(jiàn)表3。

表3 宮頸癌不同臨床病理特征患者的血清HE4、CEACAM6、AFP水平比較(±s)Table 3 Comparison of serum levels of HE4,CEACAM6,and AFP in patients with different clinical and pathological characteristics of cervical cancer(±s)

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2.3 宮頸癌患者血清HE4、CEACAM6、AFP 水平與臨床病理特征的相關(guān)性 血清HE4、CEACAM6、AFP 與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)(P＜0.001)，與分化程度呈負(fù)相關(guān)(P＜0.001)，見(jiàn)表4。

表4 血清HE4、CEACAM6、AFP水平與臨床病理特征的相關(guān)性Table 4 Correlation of serum levels of HE4,CEACAM6 and AFP with clinical and pathological characteristics of cervical cancer

3 討論

血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)已廣泛用于宮頸癌的臨床診斷、預(yù)后等環(huán)節(jié)，HE4是一種小分子糖蛋白分泌物，廣泛表達(dá)于生殖系統(tǒng)上皮組織，也可在正常腺上皮組織內(nèi)表達(dá)[8-9]。研究發(fā)現(xiàn)，HE4可通過(guò)刺激生長(zhǎng)因子或基質(zhì)金屬蛋白酶合成，進(jìn)而參與腫瘤細(xì)胞胞外基質(zhì)降解，加快腫瘤內(nèi)新血管形成，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲能力[10]。正常情況下，人體內(nèi)HE4水平較低，但生殖系統(tǒng)發(fā)生癌變后，HE4 水平顯著升高，如在宮頸癌患者的血清HE4 含量明顯高于良性腫瘤、健康對(duì)照者，可提高臨床診斷宮頸癌陽(yáng)性率[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組、良性組相比，宮頸癌患者的血清HE4 水平呈高表達(dá)，這與陳丹[11]研究相似，表明HE4與宮頸癌發(fā)展密切相關(guān)。經(jīng)Spearson 相關(guān)性分析顯示，血清HE4 水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)，與分化程度呈負(fù)相關(guān)，可能是因?yàn)槠渖吲c腫瘤惡性生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等有關(guān)，腫瘤異常增殖和轉(zhuǎn)移可促進(jìn)新血管形成，進(jìn)而影響患者血液循環(huán)，導(dǎo)致大量HE4釋放進(jìn)入血液內(nèi)，促進(jìn)患者血清內(nèi)HE4含量升高。

CEACAM6是一種細(xì)胞黏附分子，主要位于19號(hào)染色體q13.2 區(qū)域，編碼蛋白含有266 個(gè)氨基酸殘基，廣泛存在于哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面、細(xì)胞膜上[12]。報(bào)道顯示，在腎細(xì)胞癌組織和細(xì)胞內(nèi)CEACAM6 表達(dá)上調(diào)，過(guò)表達(dá)CEACAM6 可促進(jìn)腎細(xì)胞癌細(xì)胞增殖和遷移，干擾CEACAM6 則作用相反[13]。還有研究顯示，CEACAM6 在膽囊癌組織內(nèi)表達(dá)高于癌旁組織，免疫組化顯示，癌組織內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)高于癌旁組織，且細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示，下調(diào)CEACAM6 可明顯抑制膽囊癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[14]。已有研究發(fā)現(xiàn)，CEACAM6在口腔鱗癌、胃癌等組織內(nèi)高表達(dá)，其高表達(dá)與一些臨床病理(如分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等)顯著相關(guān)，其可用作腫瘤診斷和預(yù)后的標(biāo)記物[15-16]。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌患者的血清CEACAM6表達(dá)水平高于對(duì)照組和良性組，可見(jiàn)，CEACAM6 與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。Spearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清CEACAM6表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)，與分化程度呈負(fù)相關(guān)(P＜0.001)，表明血清CEACAM6 表達(dá)變化與宮頸癌患者的臨床病理特征有關(guān)。

AFP 屬于白蛋白家族成員，正常人血清中含量極低，生理狀態(tài)下主要由胎兒肝臟細(xì)胞合成，出生兩周后不再合成，但器官組織發(fā)生癌變后可被激活，導(dǎo)致癌組織內(nèi)AFP 表達(dá)升高[17-18]。楊芳等[19]研究顯示，宮頸癌患者血清AFP 表達(dá)水平升高，且與組織分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究也證實(shí)，宮頸癌患者的血清AFP 表達(dá)水平高于對(duì)照組和良性組，血清AFP 表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)，與分化程度呈負(fù)相關(guān)，與血清HE4、CEACAM6表現(xiàn)一致，表明血清AFP表達(dá)變化可能與宮頸癌臨床病理特征有關(guān)，這與楊芳等[19]研究結(jié)果相似。分析原因認(rèn)為，宮頸癌分化程度、浸潤(rùn)等異?？纱龠M(jìn)新血管生成、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，進(jìn)而影響患者癌組織內(nèi)AFP 表達(dá)。但關(guān)于HE4、CEACAM6、AFP對(duì)宮頸癌的具體調(diào)控作用機(jī)制還不清楚，需要進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)探究。

綜上所述，宮頸癌患者血清內(nèi)HE4、CEACAM6、AFP 呈高水平狀態(tài)，且與宮頸癌患者的臨床病理特征密切相關(guān)，可為宮頸癌的早期診斷提供參考依據(jù)。