豆芽中藥物殘留檢測(cè)方法研究進(jìn)展

于以竹，李 平

（1.貴州省檢測(cè)技術(shù)研究應(yīng)用中心，貴州貴陽(yáng) 550000；2.貴陽(yáng)生產(chǎn)力促進(jìn)中心，貴州貴陽(yáng) 550000）

豆芽，又稱芽苗菜，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，爽脆可口，是廣大消費(fèi)者喜食的一種蔬菜。但是，近年來(lái)，“問(wèn)題豆芽”事件屢屢發(fā)生，有相關(guān)報(bào)道指出在豆芽生產(chǎn)過(guò)程中，一些商販為了牟取更大利益，可能存在違法使用化學(xué)藥物的現(xiàn)象，長(zhǎng)期食用這些含有藥物殘留的豆芽，會(huì)對(duì)人體健康構(gòu)成威脅。針對(duì)這種情況，我國(guó)市場(chǎng)監(jiān)管部門加強(qiáng)了對(duì)豆芽生產(chǎn)過(guò)程中藥物殘留的監(jiān)控，但通過(guò)查閱文獻(xiàn)以及發(fā)布的食品安全抽檢公告，發(fā)現(xiàn)豆芽中藥物殘留的狀況不容樂(lè)觀，亟須建立高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)力度。本文綜述了豆芽中藥物殘留檢測(cè)方法的應(yīng)用情況，為保障豆芽的食品安全提供參考。

1 豆芽中藥物殘留的種類、作用及危害

在豆芽的生產(chǎn)過(guò)程中，使用的藥物主要涉及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、殺菌劑、抗生素、尿素和漂白劑等[1-3]，這些類型的藥物可有效殺菌消毒和防止根部腐爛，具有增產(chǎn)保鮮、延長(zhǎng)貨架時(shí)間、縮短生產(chǎn)時(shí)間、提升產(chǎn)品產(chǎn)量等作用，但各類藥物也會(huì)通過(guò)食物鏈在人體內(nèi)積累，使機(jī)體對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致慢性中毒，使人體內(nèi)激素分泌紊亂，影響機(jī)體代謝平衡等，給人體健康帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)[4]。

2 豆芽中藥物殘留的檢測(cè)方法

目前，國(guó)內(nèi)外豆芽中使用的各類藥物殘留的技術(shù)手段主要有液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法等。

2.1 液相色譜法

液相色譜法主要集中于單個(gè)或某一類別化合物的檢測(cè)。宋薇等[5]利用在酸性條件下呫噸氫醇和尿素反應(yīng)，生成具有熒光特性的產(chǎn)物，經(jīng)C18色譜柱分離，建立了測(cè)定豆芽中尿素的液相色譜熒光檢測(cè)法，并對(duì)實(shí)驗(yàn)室自發(fā)豆芽和市場(chǎng)上購(gòu)買豆芽進(jìn)行了檢測(cè)，部分市售豆芽尿素含量較高，有人為添加的嫌疑。袁文新等[6]利用混合固相萃取柱PXC 結(jié)合超高效液相色譜建立同時(shí)測(cè)定豆芽中4 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑4-氟苯氧乙酸、戊烯基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、6-芐基腺嘌呤的分析方法，減少了樣品雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾；高宗林等[7]基于二維液相色譜，針對(duì)綠豆芽中的干擾物質(zhì)，建立了樣品中6-芐基腺嘌呤、赤霉素、4-氯苯氧乙酸和2,4-D 4 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的分析方法；WANG 等[8]開(kāi)發(fā)了一種攪拌吸附萃?。↖P-SBSE）結(jié)合HPLC-VWD 檢測(cè)3 種酸性植物激素（水楊酸、吲哚-3-乙酸和脫落酸）的分析方法，該方法簡(jiǎn)便，成本低廉、靈敏度高，為豆芽等蔬菜中的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑測(cè)定提供了新的選擇；ZHU 等[9]將PSA 和C18固相萃取柱串聯(lián)使用，結(jié)合HPLC-DAD，同時(shí)測(cè)定獼猴桃、草莓、豆芽和青椒中的13種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，提升樣品前處理的效率；朱群英等[10]利用雙三元液相系統(tǒng)的程序控制流路切換功能，建立在線固相萃取-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定豆芽中6 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、3 種殺菌劑和2 種喹諾酮類藥物，顯著提高了分析效率和穩(wěn)定性。

2.2 液相色譜-質(zhì)譜法

液相色譜-質(zhì)譜法可實(shí)現(xiàn)大批量多組分藥物的同時(shí)快速測(cè)定，其中液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀定量能力較強(qiáng)，以四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜和四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱為代表的高分辨質(zhì)譜，可進(jìn)行非靶向快速篩查。吳少明[11]采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合HLB 固相萃取柱，建立同時(shí)測(cè)定豆芽中喹諾酮類、硝基咪唑類以及喹噁啉類共18 種藥物殘留的方法，擴(kuò)大對(duì)于豆芽中可能使用的殺菌劑類藥物的監(jiān)測(cè)范圍；馬凱等[12]采用分散固相萃取技術(shù)，結(jié)合超高效液相色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜儀，建立豆芽中藥物殘留的非靶向篩查和定量分析方法，準(zhǔn)確評(píng)估豆芽中藥物殘留的狀況；蘇燕等[13]采用PRiME HLB固相萃取小柱凈化方式，建立并優(yōu)化了同時(shí)測(cè)定豆芽、豆干、火鍋底料中喹諾酮類、磺胺類、硝基咪唑類、四環(huán)素類共42 種抗生素的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，極大地提高了檢測(cè)效率；孫曉冬等[14]利用QuEChERS 凈化手段，結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀，研究建立豆芽中硝基咪唑類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、林可酰胺類、 -內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類和磺胺類7 類共51 種抗生素類藥物的快速篩查方法；馮軍軍等[15]建立了QuEChERS 結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)檢測(cè)豆芽中不同類別的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、殺菌劑、殺蟲劑以及抗生素等殘留的方法，大大縮短了檢測(cè)周期。

2.3 氣相色譜法

氣相色譜法在豆芽中藥物殘留檢測(cè)應(yīng)用較少，主要集中在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑方面。曹洪恩等[16]利用乙烯利在堿性條件下加熱可分解為乙烯的原理，采用靜態(tài)頂空-氣相色譜儀測(cè)定，建立了豆芽中乙烯利的殘留分析方法，相對(duì)于氣相衍生法，該方法快速簡(jiǎn)單，檢測(cè)限適宜，選擇性好，減少了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的危害；常宇文等[17]建立了豆芽中2,4-D殘留量的凝膠滲透色譜-衍生化氣相色譜測(cè)定方法，提升了該化合物的檢測(cè)準(zhǔn)確度、靈敏度和精密度，降低了檢測(cè)成本；龔睿蓉等[18]用乙腈提取豆芽中的2,4-二氯苯氧乙酸，用14%三氟化硼甲醇溶液進(jìn)行衍生化處理，正己烷提取，氣相色譜儀使用HP-5 氣相色譜柱，結(jié)合ECD 檢測(cè)器進(jìn)行分析，操作方便，快速和準(zhǔn)確地測(cè)定豆芽中2,4-二氯苯氧乙酸的含量。

2.4 氣相色譜-質(zhì)譜法

氣相色譜-質(zhì)譜法可以有效分離和定量分析揮發(fā)性有機(jī)物，已廣泛應(yīng)用于豆芽中農(nóng)藥、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和化學(xué)污染物殘留的檢測(cè)。張昊等[19]采用C18柱和PSA 柱進(jìn)行樣品前處理，使用氣相色譜-質(zhì)譜儀對(duì)豆芽中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行測(cè)定；乙小娟等[20]使用乙腈提取，濃縮后，再經(jīng)Florisil 柱凈化，建立了氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定豆芽中百菌清的方法；程盛華等[21-22]采用QuEChERS 方法結(jié)合GC-MS/MS 同時(shí)測(cè)定豆芽中的16 種鄰苯二甲酸酯（Phthalic Acid Ester，PAEs）的方法，以及采用酸性乙腈溶液提取豆芽中的農(nóng)藥，用Carb/NH2固相萃取小柱凈化，利用在線凝膠滲透色譜-氣相色譜分析的方法；吳平谷等[23]針對(duì)豆芽生產(chǎn)過(guò)程中可能使用的10 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分級(jí)凈化，采用氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)定，獲得較好的凈化效果，具有較大實(shí)際應(yīng)用價(jià)值；QIN 等[24]使用10%三氟化硼甲醇溶液進(jìn)行衍生，通過(guò)MCS 小柱凈化，利用GC-MS 分析豆芽中的5 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，該方法可靠、選擇性好，準(zhǔn)確度和靈敏度較高。

2.5 其他方法

蘇曉燕等[25]比較了離子色譜法和分光光度法測(cè)定黃豆芽和綠豆芽中的亞硝酸鹽含量，與離子色譜法相比，分光光度法更適合于豆芽中亞硝酸鹽的測(cè)定；陳露等[26]用中空纖維三相液相微萃取技術(shù)，結(jié)合熒光分光光度計(jì)，測(cè)定綠豆芽中的吲哚類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，該方法有效去除了豆芽基質(zhì)中干擾組分的影響；馬占玲等[27]采用充氮蒸餾-氫氧化鈉吸收-鄰苯二甲醛熒光法測(cè)定豆芽中亞硫酸鹽的含量，該方法靈敏、準(zhǔn)確，無(wú)污染；張君等[28]用水浸泡豆芽，通過(guò)活性炭脫色，去除基質(zhì)干擾，與二甲氨基苯甲醛反應(yīng)，建立了測(cè)定豆芽中尿素含量的分光光度法，為精確檢測(cè)豆芽中的尿素含量提供了技術(shù)參考；張萍等[29]應(yīng)用快速溶劑提取前處理技術(shù)與便攜式表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)技術(shù)，建立豆芽中6-芐基腺嘌呤殘留物質(zhì)的快速檢測(cè)方法，為大規(guī)?？焖贆z測(cè)提供了高效、靈敏的解決方案；白新偉等[30]使用3-氨基苯磺酸作為衍生化試劑，對(duì)豆芽中10 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行衍生化，結(jié)合毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行測(cè)定，該方法分離效果好、準(zhǔn)確可靠，有望將該方法用于其他蔬菜、水果中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留的測(cè)定；王乾龍等[31]建立了直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附分析（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）法快速、準(zhǔn)確地對(duì)大批量的豆芽樣品實(shí)現(xiàn)殘留2,4-D 的檢測(cè)，相對(duì)于傳統(tǒng)的色譜法，簡(jiǎn)化了樣品的前處理步驟；郭新穎[32]分別以直接浸泡法和水蒸氣蒸餾法作為前處理方法，利用甲醛與酚試劑反應(yīng)，結(jié)合分光光度法，進(jìn)行定量分析，通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的調(diào)試和比較，水蒸氣蒸餾法回收率較高，可根據(jù)樣品的含量范圍、預(yù)處理液的情況、干擾因素及實(shí)驗(yàn)室具備的條件，選擇合適的方法進(jìn)行檢測(cè)；蘆春梅等[33]建立了離子色譜法分離檢測(cè)不同種類的豆芽中的連二亞硫酸鈉，該方法操作簡(jiǎn)單、分析時(shí)間短。

3 結(jié)語(yǔ)

近年來(lái)，在豆芽的生產(chǎn)過(guò)程中，違規(guī)使用的藥物類型越來(lái)越多，針對(duì)單個(gè)或者某一類別化合物的檢測(cè)，覆蓋面較窄，已不能滿足食品安全事件處置工作中高效率、多組分等要求，因此檢測(cè)類別多、覆蓋面廣、可以實(shí)現(xiàn)大批量樣品中多組分藥物同時(shí)快速測(cè)定的方法，具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)，可開(kāi)發(fā)操作簡(jiǎn)單、靈敏、選擇性強(qiáng)的快速檢測(cè)方法，如酶聯(lián)免疫分析方法、生物傳感器和拉曼光譜法等，用于滿足大批量樣品的現(xiàn)場(chǎng)快速篩查方面的需求，為豆芽食品安全監(jiān)控提供可靠的技術(shù)保障。