鄭州市某寵物醫(yī)院貓皰疹病毒和杯狀病毒流行病學(xué)調(diào)查

陶玉珍，劉燕霏，楊建德

（天津農(nóng)學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院 天津市農(nóng)業(yè)動(dòng)物繁育與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300392）

貓上呼吸道疾?。‵URTD）是貓常見的一種疾病，有多種病原，其中最常見的是貓皰疹病毒（FHV）和貓杯狀病毒（FCV），它們通常都會(huì)引起患貓咳嗽、打噴嚏、流涎等，其中FCV 最易導(dǎo)致患貓口腔潰瘍，嚴(yán)重危害貓的健康。FHV 又被稱為貓鼻支、貓鼻氣管炎病毒，主要侵害幼貓，發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率達(dá)50%[1]，且患貓康復(fù)后也會(huì)繼續(xù)攜帶此病毒，在一定條件下病毒活化，導(dǎo)致貓被反復(fù)感染。貓是該病毒的自然宿主，被感染后出現(xiàn)發(fā)熱、角膜結(jié)膜炎、漿液性眼鼻分泌物，甚至黏膜表面糜爛潰瘍等癥狀[2]。FHV 主要引起急性上呼吸道疾病——貓傳染性鼻氣管炎，目前發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)血清型，不僅能感染家貓，還能感染其他一些貓科動(dòng)物（虎、豹等）[1]。一般情況下，F(xiàn)HV 是通過呼吸道進(jìn)入宿主體內(nèi)，在上呼吸道黏膜生長(zhǎng)復(fù)制，導(dǎo)致宿主發(fā)病。牛江婷等[1]通過參考皰疹病毒科其他成員感染機(jī)制的研究，認(rèn)為FHV 與宿主細(xì)胞融合并進(jìn)行復(fù)制是一個(gè)由病毒囊膜糖蛋白調(diào)控的復(fù)雜級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程，其中g(shù)B、gH、gD 等糖蛋白發(fā)揮著極重要的作用。FCV 又被稱為貓卡里西病毒、貓嵌杯病毒，主要引起呼吸系統(tǒng)的疾病，導(dǎo)致貓傳染性鼻結(jié)膜炎，可感染貓和其他珍貴的野生動(dòng)物（如虎、獅子等）[3]，對(duì)其健康造成嚴(yán)重威脅。目前，發(fā)現(xiàn)FCV 僅有一個(gè)血清型，多個(gè)基因型，貓被感染后會(huì)出現(xiàn)口腔潰瘍、眼鼻分泌物增多、鼻塞等癥狀[4]，據(jù)報(bào)道，高致病性FCV（VS-FCV）病死率高達(dá)67%，即使已經(jīng)免疫的貓也很容易被感染，被感染后會(huì)出現(xiàn)全身性皮膚潰瘍、黃疸、肝炎等癥狀[5]，但高致病性FCV的致病機(jī)理目前尚未研究清楚。FCV 在國(guó)內(nèi)外都廣泛流行，目前臨床上仍沒有特效藥，疫苗是最重要的預(yù)防手段，雖然FCV 僅有一種血清型，但抗原很容易發(fā)生變異，因此疫苗只對(duì)同源病毒有較好的保護(hù)力，無法有效地預(yù)防病毒傳播，但對(duì)于數(shù)量較少的群體效果較好。目前各國(guó)市場(chǎng)上應(yīng)用最廣的是單價(jià)苗，但近年來有新型二價(jià)苗被投入使用。FCV 在56 ℃下30 min 左右便可被滅活，對(duì)氯仿等有機(jī)溶劑有一定的抵抗力，但在酸性或者堿性條件下不穩(wěn)定，可利用此性質(zhì)對(duì)環(huán)境進(jìn)行消毒，同時(shí)要保證飼養(yǎng)環(huán)境干凈通風(fēng)，飼養(yǎng)密度不能過大，有研究表明動(dòng)物絕育后可降低59%的感染率。本研究通過對(duì)鄭州市某寵物醫(yī)院2020 年2 月—2021 年7 月貓感染FHV 和FCV 的病例進(jìn)行調(diào)查，明確與FHV 和FCV 感染相關(guān)的可能因素，為其防控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)動(dòng)物為鄭州市某寵物醫(yī)院2020 年2 月—2021 年7 月被FHV 和FCV 感染的患貓，其中被FHV 感染的患貓有72 只，被FCV 感染的患貓有120 只。

1.1.2 檢測(cè)試劑盒

貓呼吸道病原體核酸五聯(lián)檢測(cè)試劑盒（由西安佰奧萊博生物科技有限公司生產(chǎn)）。

1.1.3 試驗(yàn)儀器

基靈InCycleTM全自動(dòng)核酸檢測(cè)系統(tǒng)（由上?；`生物科技有限公司生產(chǎn)）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 采樣

使用一次性棉簽拭子取待檢貓眼、鼻、口腔分泌物后加入到1 mL 樣本保存液中，將棉簽桿折斷，擰緊蓋子充分混勻，以4 000～8 000 r/min 的速度離心1 min，使用0.2 mL 的一次性滴管取上清液至整管頸長(zhǎng)，即為0.2 mL 樣本。

1.2.2 核酸檢驗(yàn)

將試劑卡第一層膜撕下，樣本處理后，用滴管將0.2 mL 樣本加入到提取艙中，點(diǎn)擊出艙按鈕，將試劑卡放到儀器卡槽中，向右扳動(dòng)卡扣，固定試劑卡，點(diǎn)擊入艙。輸入寵物信息，在儀器左側(cè)刷RFID 卡，錄入試劑信息，開始試驗(yàn)。結(jié)束后，點(diǎn)擊出艙按鈕，向左扳動(dòng)卡扣，取出試劑卡并將試劑盒附帶的黃色貼膜貼在試劑卡上，以防止污染。

1.2.3 結(jié)果判定

若Ct 值≤36 且有特定的S 型擴(kuò)增曲線時(shí)，檢測(cè)結(jié)果為陽性；若Ct 值≥39 或無Ct 值時(shí)，檢測(cè)結(jié)果為陰性；若Ct 值為36～39，建議重復(fù)試驗(yàn)，如結(jié)果仍小于39，曲線有明顯峰值，則判斷樣品為陽性，否則為陰性。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

利用Excel 2016 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 FHV 和FCV 陽性病例分布概況

鄭州市某寵物醫(yī)院2020 年2 月—2021 年7月共有192 個(gè)FHV 和FCV 陽性病例，其中被FHV感染的患貓有72 只，被FCV 感染的患貓有120只，F(xiàn)HV 和FCV 陽性病例分別占發(fā)病總數(shù)的37.5%和62.5%，F(xiàn)CV 的陽性率遠(yuǎn)高于FHV 的陽性率，兩種疾病發(fā)病率的比例大約為1.67∶1.00。

2.2 FHV 和FCV 感染患貓品種分布概況

FHV 和FCV 感染的患貓主要是中華田園貓、英國(guó)短毛貓、美國(guó)短毛貓、布偶貓、暹羅貓、加菲貓和其他雜交品種的貓。其中，對(duì)FHV 比較易感的是中華田園貓和英國(guó)短毛貓，分別占FHV 陽性病例總數(shù)的27.78%和22.22%，患病率最低的是暹羅貓和雜交品種的貓，都占4.17%。對(duì)FCV 比較易感的是布偶貓和中華田園貓，分別占FCV 陽性病例總數(shù)的26.67%和23.33%，患病率最低的是雜種貓，占2.50%，詳見圖1。

圖1 FHV 和FCV 檢出率與品種之間的關(guān)系

2.3 FHV 和FCV 感染患貓發(fā)病年齡分布概況

FHV 陽性病例主要集中在3 月齡以下和10歲以上，分別占FHV 陽性病例總數(shù)的41.67%和25.00%；FCV 陽性病例主要集中在3 月齡以下和3～6 月齡，分別占FCV 陽性病例總數(shù)的35.00%和25.00%；成年貓由于自身抵抗力較強(qiáng)，對(duì)兩種病毒都不敏感，相比之下，患病率較低，詳見圖2。

圖2 FHV 和FCV 檢出率與年齡之間的關(guān)系

2.4 FHV 和FCV 感染患貓性別分布概況

在72 個(gè)FHV 陽性病例中，有40 只公貓和32只母貓，分別占55.56%和44.44%；在120 個(gè)FCV陽性病例中，有69 只公貓和51 只母貓，分別占57.5%和42.5%；兩種病毒感染都無明顯的性別差異，雄性動(dòng)物的發(fā)病率略高于雌性動(dòng)物，詳見圖3。

圖3 FHV 和FCV 檢出率與性別之間的關(guān)系

2.5 FHV 和FCV 感染患貓發(fā)病季節(jié)分布概況

動(dòng)物在冬春季易感染FHV，發(fā)病率分別為36.11%和31.94%，在夏春季易感染FCV，發(fā)病率分別為33.33%和29.17%；FHV 和FCV 都在春季感染率較高，而秋季感染率較低，詳見圖4。

圖4 FHV 和FCV 檢出率與季節(jié)之間的關(guān)系

3 討論

FHV 和FCV 是引起貓科動(dòng)物上呼吸道疾病的常見病毒。在此次調(diào)查中共收集了鄭州市某寵物醫(yī)院2020 年2 月—2021 年7 月192 個(gè)陽性病例，其中FHV 陽性病例有72 例（37.5%），F(xiàn)CV 陽性病例有120 例（62.5%），F(xiàn)CV 的陽性率高于FHV的陽性率，兩者比例約為1.67∶1.00。2020 年楊玥晗[6]調(diào)查了安徽省貓皰疹病毒Ⅰ型和貓杯狀病毒的流行情況，發(fā)現(xiàn)FHV-1 感染率為45.5%，F(xiàn)CV感染率為71.5%，兩者的感染比例約為1.00∶1.57，F(xiàn)CV 的感染率高于FHV-1，與本次調(diào)查結(jié)果一致。許楚楚等[7]對(duì)北京地區(qū)的患貓調(diào)查發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HV 和FCV 的感染率分別是26.3%和46.3%；NGUYEN等[8]對(duì)澳大利亞的患貓調(diào)查發(fā)現(xiàn)FCV 和FHV-1 的陽性率分別是16.0%和7.0%，F(xiàn)CV 的陽性率普遍高于FHV 的陽性率，與本次調(diào)查結(jié)果一致。這可能與疫苗的保護(hù)力和病毒結(jié)構(gòu)有關(guān)[9]，疫苗是目前預(yù)防病毒感染最有效的方法，而FCV 是一種小型RNA 病毒，它的衣殼蛋白進(jìn)化率高導(dǎo)致核苷酸不斷發(fā)生改變，因此，即使FCV 被認(rèn)為只有一種血清型，傳統(tǒng)疫苗仍無法保護(hù)動(dòng)物免受突變體感染[10]；而FHV 是結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的DNA 病毒，因此，疫苗能夠更好地預(yù)防FHV 感染。其次，攜帶FCV的貓會(huì)連續(xù)不斷排毒，而攜帶FHV 的貓是間歇排毒，且病毒多潛伏在三叉神經(jīng)[11]，因此，臨床上對(duì)FHV 檢測(cè)和病毒分離比較困難，這可能也是FHV 檢出率低于FCV 的原因之一。

本研究顯示，中華田園貓和英國(guó)短毛貓F(tuán)HV陽性率最高，分別為27.78%和22.22%，暹羅貓和雜交品種的貓患病率最低，都占4.17%；最易感FCV 的是布偶貓和中華田園貓，分別占26.67%和23.33%，患病率最低的是雜種貓。楊玥晗[6]對(duì)安徽省48 家寵物醫(yī)院進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)外來品種患病率較高；NGUYEN 等[8]對(duì)澳大利亞的患貓調(diào)查發(fā)現(xiàn)家養(yǎng)短毛貓更易感FCV 和FHV，與本次調(diào)查結(jié)果不符。這可能與人們飼養(yǎng)寵物的品種傾向性有關(guān)，不同地區(qū)人們飼養(yǎng)動(dòng)物品種喜好有所不同，對(duì)于純種貓，主人可能更愿意花錢為其診斷治療，且純種貓對(duì)外界抵抗能力更差。FHV 易在冬季和春季感染動(dòng)物，感染率分別為36.11%和31.94%；FCV易在夏季和春季感染動(dòng)物，感染率分別為33.33%和29.17%。鄭思艷等[12]通過對(duì)北京地區(qū)306 個(gè)病例進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)FHV 在10 月份檢出率最高，而FCV 陽性病例在7、8 月份最多，與本次調(diào)查結(jié)果一致。這可能與病毒本身的特性有關(guān)，F(xiàn)HV有囊膜，對(duì)熱敏感，而FCV 無囊膜，對(duì)外界溫度不敏感[13]。兩種病都在春季易發(fā)，可能與春季天氣回暖，環(huán)境更適合病毒生存有關(guān)；同時(shí)，春季大多主人喜歡帶寵物出門，動(dòng)物有更多機(jī)會(huì)接觸病原，增加感染幾率。

本研究將來自鄭州市某寵物醫(yī)院的72 個(gè)FHV 陽性病例和120 個(gè)FCV 陽性病例分成7 個(gè)年齡段進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)3 月齡以下的貓最易感FHV，發(fā)病率為41.67%，其次是10 歲以上的貓，發(fā)病率為25.00%，3～5 歲的貓發(fā)病率最低，約為2.78%，與王吉等[14]研究結(jié)果一致。3 月齡以下和10 歲以上的貓F(tuán)HV 感染率較高，原因可能是幼齡貓失去了母源抗體保護(hù)[15]；很多老齡貓是感染耐過貓，會(huì)終身帶毒，病毒潛伏在三叉神經(jīng)，當(dāng)動(dòng)物受到應(yīng)激后，病毒就會(huì)再次被激活并傳播，而老年貓抵抗力較低，因此感染的可能性也比較大。3 月齡以下的貓對(duì)FCV 最易感，其次是3～6 月齡，發(fā)病率分別為35.00%和25.00%，3～5 歲的貓發(fā)病率最低，約為3.33%。李響[16]通過對(duì)吉林省多個(gè)城市的320 份樣本進(jìn)行采集檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)2～3 月齡的幼貓最易感，其次是4～5 月齡，與本次調(diào)查結(jié)果一致，可能是母源抗體缺失及FCV 的高度變異性[17]導(dǎo)致疫苗保護(hù)力降低。兩種病毒的共同點(diǎn)都是幼貓易感，而3～5 歲的成年貓發(fā)病率最低，原因可能是幼貓本身抗病毒能力低，而大多數(shù)貓都是幼年時(shí)期從貓舍到達(dá)新的家庭，環(huán)境改變易使貓產(chǎn)生應(yīng)激。幼貓斷奶后失去母源抗體保護(hù)，若未及時(shí)免疫，便易受到病毒入侵，且危害較大。研究表明，幼貓受到母源抗體保護(hù)的時(shí)間一般不超過10～14 周，因此，最好在10 周左右進(jìn)行免疫接種，并按要求完成免疫程序。而成年貓抗病毒能力強(qiáng)，大多已經(jīng)進(jìn)行過免疫接種，且對(duì)所生活的環(huán)境已經(jīng)適應(yīng)，故發(fā)病率較低。

4 結(jié)論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)CV 的檢出率高于FHV。中華田園貓和英國(guó)短毛貓最易感FHV，布偶貓和中華田園貓最易感FCV。FHV 主要感染3 月齡以下和10歲以上的貓，F(xiàn)CV 主要感染3 月齡以下和3～6 月齡的貓，3～5 歲的成年貓發(fā)病率最低。兩種病的發(fā)病率均與性別無關(guān)。貓皰疹病毒病在冬春季高發(fā)，貓杯狀病毒病在春夏季頻發(fā)。