多囊卵巢綜合征患者血清分泌型卷曲相關(guān)蛋白4的表達(dá)及其與胰島素抵抗的關(guān)系

姚 青,史琳茜,馬海燕,潘 懿

宜興市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科,江蘇宜興 214200

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種復(fù)雜的內(nèi)分泌和代謝疾病,PCOS具有復(fù)雜的特征和癥狀的異質(zhì)性,與無排卵性不孕癥、代謝綜合征、2型糖尿病和心血管疾病等多種疾病有關(guān),其主要病因和內(nèi)分泌異常是雄激素水平升高和胰島素抵抗(IR)[1]。研究顯示超過60%的PCOS患者伴有IR,IR指外周組織對胰島素的敏感性降低,從而影響葡萄糖的攝取和產(chǎn)生,由于葡萄糖消耗不足導(dǎo)致血糖水平上調(diào),并刺激胰腺β細(xì)胞分泌過多的胰島素以降低血糖,從而導(dǎo)致高胰島素血癥,IR及其介導(dǎo)的代償性高胰島素血癥可直接刺激卵巢雄激素的合成和釋放及垂體分泌更多的促黃體生成素(LH),加重內(nèi)分泌紊亂和排卵障礙,促使病情進(jìn)展[2]。分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)是一種分泌細(xì)胞因子,具有調(diào)節(jié)棕色脂肪細(xì)胞分化、胰島細(xì)胞胰島素分泌等作用,與妊娠期糖代謝紊亂及妊娠期糖尿病有關(guān)[3],被認(rèn)為是β 細(xì)胞功能障礙和IR的新型生物標(biāo)志物[4-5]。血清SFRP4在PCOS的報道尚不多見,其與PCOS患者IR的關(guān)系尚不確定,鑒于此,本研究擬檢測PCOS患者血清SFRP4的表達(dá)及分析其與PCOS患者IR的關(guān)系,以期為臨床診治提供參考?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年2月至2022年2月本院收治的172例PCOS患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《多囊卵巢綜合征中國診療指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)[6];(2)年齡18周歲以上。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)內(nèi)分泌紊亂性疾病、卵巢癌、卵巢腫瘤、卵巢炎等;(2)近期服用激素類藥物治療;(3)雄激素分泌腫瘤、先天性腎上腺增生、庫欣綜合征;(4)子宮畸形、宮腔粘連或輸卵管積水。另選取同期于本院婦科門診體檢的61例健康女性志愿者為對照組,均排除PCOS及其他內(nèi)分泌疾病、糖尿病、高血壓、心血管疾病及肝腎功能異常者。本研究已經(jīng)獲得本院倫理委員會批準(zhǔn),受試者均知情同意簽署同意書。

1.2實(shí)驗(yàn)室檢測 采集空腹靜脈血3 mL注入干燥試管,取凝固后血標(biāo)本上層液離心(3 000 r/min離心10 min,離心半徑10 cm)收集血清,-20 ℃保存?zhèn)錂z。SFRP4檢測:FK-SY96S多功能酶標(biāo)分析儀(山東方科儀器有限公司)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清SFRP4水平,SFRP4試劑盒購自上海初態(tài)生物科技公司。iBright化學(xué)發(fā)光分析儀(美國賽默飛公司)檢測血清LH、促卵泡激素(FSH)、睪酮(T)。Modular全自動生化分析儀(瑞士羅氏公司),檢測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)。穩(wěn)豪血糖儀(美國強(qiáng)生)檢測末梢血空腹血糖(FPG),ACCESS 2全自動免疫分析(美國貝克曼庫爾特)檢測血清空腹胰島素(FINS)。計算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)= FPG×FINS/22.5。將HOMA-IR≥2.69定義為IR[7],根據(jù)PCOS患者是否發(fā)生IR分為IR組(104例)和非IR組(68例)。

1.3臨床資料采集 收集受試者年齡、體重指數(shù)、卵泡數(shù)、卵巢體積、性激素、糖脂代謝指標(biāo)及血清SFRP4。卵泡數(shù)、卵巢體積采用超聲測量,方法:GE Voluson E 8彩色多普勒超聲診斷儀于月經(jīng)第3～5天 (閉經(jīng)者口服安宮黃體酮,待撤藥性出血后)行經(jīng)陰道超聲檢查,取卵巢最大切面測量卵巢體積,計數(shù)卵泡數(shù)。

2 結(jié) 果

2.1各組超聲和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 IR組、非IR組卵泡數(shù)、卵巢體積大于對照組,體重指數(shù)、T、LH、TC、FPG、FINS、HOMA-IR、血清SFRP4高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);IR組體重指數(shù)、T、TC、FPG、FINS、HOMA-IR、血清SFRP4高于非IR組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其他指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組超聲和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.2血清SFRP4水平與PCOS患者臨床特征的相關(guān)性分析 血清SFRP4水平與體重指數(shù)、卵泡數(shù)、卵巢體積、T、TC、FPG、FINS、HOMA-IR呈正相關(guān)(P<0.05),血清SFRP4與其他指標(biāo)之間無相關(guān)性(P>0.05)。見表2。

表2 血清SFRP4水平與PCOS患者臨床特征的相關(guān)性分析

2.3影響PCOS患者IR的因素分析 以體重指數(shù)、T、TC、FPG、FINS、血清SFRP4為自變量,PCOS患者IR為因變量(賦值:0=否,1=是),Enter法篩選變量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)FINS、血清SFRP4是PCOS患者IR的危險因素(P<0.05),見表3。

表3 影響PCOS患者IR的Logistic回歸方程

2.4血清 SFRP4診斷PCOS患者IR的價值 血清SFRP4診斷PCOS患者IR的最佳臨界值為2.84 ng/mL,曲線下面積為0.823(95%CI:0.757～0.877),靈敏度為81.73%,特異度為82.35%,約登指數(shù)為0.641,見圖1。

圖1 血清SFRP4診斷PCOS患者IR的ROC曲線

3 討 論

PCOS是育齡婦女最常見的與代謝相關(guān)的內(nèi)分泌代謝疾病,其疾病特征為高雄激素血癥、超聲提示多囊卵巢、月經(jīng)不調(diào)、排卵功能障礙和不孕癥,PCOS通常伴有IR,IR可引起慢性炎癥、激素變化、卵泡發(fā)育不良、子宮內(nèi)膜容受性變化及流產(chǎn)或不育,被認(rèn)為是生殖功能障礙的主要病理基礎(chǔ),其增加妊娠期間焦慮、抑郁等心理障礙的風(fēng)險[8]。PCOS患者IR的病因和發(fā)病機(jī)制尚不確定,目前認(rèn)為涉及遺傳、神經(jīng)內(nèi)分泌、生活方式、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、免疫和代謝功能障礙等[9]。高胰島素正常血糖葡萄糖鉗夾技術(shù)是診斷IR的金標(biāo)準(zhǔn),然而這種技術(shù)耗時、勞動密集、成本高且在技術(shù)上具有挑戰(zhàn)性,目前臨床多采用HOMA-IR作為IR評估的替代標(biāo)志物,由于缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的胰島素檢測技術(shù),且受血糖波動影響較大[10],因此探討更有效的生物學(xué)標(biāo)志物十分必要。

血清SFRP4是分泌的卷曲相關(guān)蛋白家族的成員,在C端具有富含半胱氨酸的區(qū)域,在 N 端具有類似 netrin的結(jié)構(gòu)域基序,其高度保守并與卷曲或無翼相關(guān)整合位點(diǎn)(Wnt)信號通路的卷曲受體具有序列相似性,血清SFRP4被認(rèn)為是 Wnt 信號傳導(dǎo)的拮抗劑,主要通過與Wnt結(jié)合并調(diào)節(jié)Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)揮作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化和遷移等病理生理學(xué)過程[11]。既往研究顯示血清SFRP4通過將Wnt配體隔離在細(xì)胞外空間中,作為 Wnt信號傳導(dǎo)的細(xì)胞外抑制劑發(fā)揮作用,在卵巢癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌等各種類型人類癌癥中的異常表達(dá),與癌細(xì)胞增殖、侵襲行為有關(guān)[12]。血清SFRP4與動脈粥樣硬化也存在密切關(guān)系,研究表明血清SFRP4通過抑制Wnt/β-catenin 信號通路減少炎癥和氧化應(yīng)激緩解動脈粥樣硬化進(jìn)程[13],血清SFRP4還參與皮下和內(nèi)臟脂肪組織分化過程,血清SFRP4過表達(dá)影響脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因的表達(dá),導(dǎo)致內(nèi)臟和皮下脂肪組織中脂聯(lián)素和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4表達(dá)上調(diào),改變脂肪因子分泌,影響脂肪細(xì)胞分化和葡萄糖代謝[14]。血清SFRP4通過調(diào)節(jié) β-catenin和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶 B通路直接誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞的終末分化,參與黃體類固醇的生成,與黃體功能退化和排卵后卵巢表面上皮細(xì)胞凋亡有關(guān)[15]。

血清SFRP4與2型糖尿病也存在密切關(guān)系,研究顯示血清SFRP4可刺激脂肪組織中脂肪因子產(chǎn)生,誘導(dǎo)胰腺氧化應(yīng)激,降低胰腺β細(xì)胞中抗氧化酶水平,抑制含胰島素顆粒的胞吐作用,從而導(dǎo)致2型糖尿病的發(fā)生,血清SFRP4還可刺激白細(xì)胞介素-1β分泌增加,促炎細(xì)胞因子通過抑制胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo),在骨骼肌、脂肪組織和肝臟中引起IR[16]。臨床報道顯示妊娠期糖尿病女性血清SFRP4水平顯著增高,是妊娠期糖尿病預(yù)測的標(biāo)志物[17],2型糖尿病和糖耐量異?；颊哐錝FRP4水平顯著增加,且與糖代謝紊亂、葡萄糖刺激胰島素分泌和慢性低度炎癥密切相關(guān)[18]。本研究發(fā)現(xiàn),血清SFRP4與PCOS患者IR有關(guān),IR組血清SFRP4水平高于非IR組和對照組,血清SFRP4與體重指數(shù)、卵泡數(shù)、卵巢體積、T、TC、FPG、FINS、HOMA-IR呈正相關(guān),血清SFRP4是PCOS患者IR的危險因素,表明血清SFRP4可能參與PCOS患者IR過程。推測可能的機(jī)制:(1)血清SFRP4作為一種脂肪因子,在白色脂肪組織中表達(dá)增加,通過降低胰島素受體底物-1和叉頭框蛋白O1的表達(dá)抑制胰島素介導(dǎo)的蛋白激酶B信號傳導(dǎo),減少肝糖原合成,增加糖異生,促使IR發(fā)生[19];(2)Wnt/β-catenin信號通路激活可通過調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起肝細(xì)胞IR[20],血清SFRP4可能通過調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路導(dǎo)致IR;(3)炎癥通路激活降低胰島素依賴受體的數(shù)量和活性,影響人胰腺基因表達(dá)和胰島素的產(chǎn)生,導(dǎo)致IR和糖代謝受損,血清SFRP4可能通過介導(dǎo)炎癥反應(yīng)最終導(dǎo)致IR[21]。

本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示,血清SFRP4診斷PCOS患者IR的曲線下面積達(dá)0.823,說明血清SFRP4在PCOS患者IR診斷方面具有較高的價值,對臨床IR判斷具有重要參考意義?；貧w分析結(jié)果顯示FINS與PCOS患者IR也有密切關(guān)系,這與IR引發(fā)胰島素分泌增加有關(guān),現(xiàn)有研究認(rèn)為IR與高胰島素血癥密切相關(guān),IR可引起胰島素代償性分泌增加以彌補(bǔ)胰島素敏感性降低的不足,當(dāng)代償性高胰島素血癥難以補(bǔ)償IR時,可導(dǎo)致伴高胰島素血癥的嚴(yán)重IR[22]。

綜上所述,發(fā)生IR的PCOS患者血清SFRP4水平顯著增高,高水平血清SFRP4與血清T水平增高、糖脂代謝紊亂和IR有關(guān),是PCOS患者IR的危險因素。血清SFRP4在IR診斷中具有較高的價值,可作為PCOS患者IR的潛在標(biāo)志物。本研究創(chuàng)新之處在于驗(yàn)證了血清SFRP4與PCOS患者IR的關(guān)系,為臨床IR診斷提供了新的標(biāo)志物,本研究也有不足之處,由于目前缺乏對IR的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),以HOMA-IR等于2.69為臨界值進(jìn)行IR分組可能存在一定偏倚,其次尚未對IR進(jìn)行細(xì)化分組,血清SFRP4與PCOS患者IR的關(guān)系尚待進(jìn)一步探討。