山牡荊不同部位提取物藥效學(xué)評(píng)價(jià)研究

呂林艷 劉 洋 方彬又 鄭志遠(yuǎn) 梁云飛 麥志雄　

山牡荊不同部位提取物藥效學(xué)評(píng)價(jià)研究

呂林艷1,2劉 洋1,2方彬又1,2鄭志遠(yuǎn)1,2梁云飛1,2麥志雄1,2

（1.廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司，廣西 梧州 543000；2.廣西天然藥物現(xiàn)代制劑技術(shù)工程研究中心，廣西 梧州 543000）

目的：評(píng)價(jià)山牡荊不同部位提取物的抗細(xì)菌性炎癥及腎保護(hù)的作用。方法：以受精后3天的斑馬魚用于山牡荊樣品抗細(xì)菌性炎癥功效最大檢測(cè)濃度測(cè)定及其功效評(píng)價(jià)；以受精后2天的斑馬魚用于腎保護(hù)功效最大檢測(cè)濃度測(cè)定及其功效評(píng)價(jià)。結(jié)果：山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)和山牡荊根和心材對(duì)模型斑馬魚的MTC均為2000 μg/mL；山牡荊枝葉1000、2000 μg/mL濃度組，山牡荊果實(shí)1000 μg/mL濃度組，山牡荊根和心材500、1000、2000 μg/mL濃度組炎癥部位的中性粒細(xì)胞數(shù)量較模型對(duì)照組減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)和山牡荊根和心材的500、1000、2000 μg/mL濃度組中腎性水腫數(shù)量較模型對(duì)照組顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論：山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)和山牡荊根和心材均具有抗細(xì)菌性炎癥、腎保護(hù)功效。

山牡荊；提取物；斑馬魚；細(xì)菌性炎癥；腎保護(hù)

引言

山牡荊為馬鞭草科植物山牡荊[(Lour.) Will]的干燥根和莖，全年均可采收，除去雜質(zhì)，切段，曬干制成；具有止咳定喘、鎮(zhèn)靜退熱的功效，臨床用于急、慢性氣管炎，支氣管炎，咳喘，氣促，小兒發(fā)熱等[1]。文獻(xiàn)研究表明山牡荊提取物對(duì)慢性腎炎模型大鼠的尿蛋白、血清肌酐、尿素氮、血脂水平均有明顯的改善作用[2]。本文通過建立斑馬魚細(xì)菌性炎癥模型和斑馬魚腎損傷模型，觀察山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)和山牡荊根和心材提取物對(duì)炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量、腎性水腫數(shù)量等的影響，為山牡荊抗炎和腎保護(hù)作用提供依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)樣品

將山牡荊不同部位粉碎制成樣品，取山牡荊枝葉（過3號(hào)篩，50目）527.4 g、山牡荊果實(shí)（過3號(hào)篩，50目）563.3 g、山牡荊根和心材（過3號(hào)篩，50目）525.1 g。藥粉加5倍量純化水提取，保持微沸30分鐘，過濾，藥渣加2～3倍量純化水繼續(xù)提取，保持微沸20分鐘，過濾，合并兩次提取液，加涼開水定量至5倍量（藥粉），即得到200 mg/mL母液的試驗(yàn)樣品，冷凍（-20 ℃）儲(chǔ)存。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)用魚為斑馬魚，由杭州環(huán)特生物科技股份有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK（浙）2022-0004，飼養(yǎng)和管理符合國(guó)際AAALAC認(rèn)證（認(rèn)證編號(hào)：001458）的要求。

轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光品系（MPX）斑馬魚，以自然成對(duì)交配繁殖方式進(jìn)行。年齡為受精后3天（3 dpf）的斑馬魚用于樣品抗細(xì)菌性炎癥功效最大檢測(cè)濃度（MTC）測(cè)定及其功效評(píng)價(jià)。

野生型AB品系斑馬魚，同樣以自然成對(duì)交配繁殖方式進(jìn)行。年齡為受精后2天（2 dpf）的斑馬魚用于樣品腎保護(hù)功效MTC測(cè)定及其功效評(píng)價(jià)。

1.3 儀器、耗材與試劑

試驗(yàn)儀器和耗材：電動(dòng)聚焦連續(xù)變倍熒光顯微鏡（AZ100，Nikon，Japan）；解剖顯微鏡（SZX7，OLYMPUS，Japan）；CCD相機(jī)（VertA1，上海土森視覺科技有限公司，China）；顯微注射儀（IM300，Narishige，Japan）；拉針儀（PC-10，Narishige，Japan）；精密電子天平（CP214，OHAUS，USA）；6孔板（Nest Biotech，China）。

試驗(yàn)試劑：脂多糖（LPS，批號(hào)12180309，Sigma，Israel）；乙酸地塞米松（批號(hào)B1828095，批號(hào)L1931006，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，China）；二甲基亞砜（DMSO，批號(hào)20171016，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，China）；馬兜鈴酸A（批號(hào)WXBD0062V，Sigma，USA）；Dextran tetramethylrhodamine（批號(hào)923446，molecular probes，USA）；甲基纖維素（批號(hào)C2004046，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，China）。

2 試驗(yàn)方法

2.1 抗細(xì)菌性炎癥功效評(píng)價(jià)

2.1.1 MTC測(cè)定

試驗(yàn)在6孔板中進(jìn)行，每孔定容標(biāo)準(zhǔn)稀釋水后含量為3 mL，設(shè)置30尾/孔，試驗(yàn)用魚為3 dpf轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光品系（MPX）斑馬魚。設(shè)置正常對(duì)照組（標(biāo)準(zhǔn)稀釋水處理組，即空白對(duì)照組）和模型對(duì)照組（顯微注射LPS于斑馬魚卵黃囊建立細(xì)菌性炎癥模型），并在細(xì)菌性炎癥模型斑馬魚上分別水溶給予山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材（濃度見表1）。28℃條件下處理5 h后，測(cè)定山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材對(duì)模型斑馬魚的MTC。

2.1.2 抗炎功效評(píng)價(jià)

試驗(yàn)在6孔板中進(jìn)行，每孔定容標(biāo)準(zhǔn)稀釋水后含量為3 mL，設(shè)置30尾/孔，試驗(yàn)用魚為3 dpf轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光品系（MPX）斑馬魚。設(shè)置正常對(duì)照組（標(biāo)準(zhǔn)稀釋水處理組，即空白對(duì)照組）和模型對(duì)照組（顯微注射LPS于斑馬魚卵黃囊建立細(xì)菌性炎癥模型），并在細(xì)菌性炎癥模型斑馬魚上分別水溶給予山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材（濃度見表2），及陽(yáng)性對(duì)照藥乙酸地塞米松，濃度為32.6 μg/mL。28 ℃條件下處理5 h后，在熒光顯微鏡下拍照，每實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)選取10尾，用ImageJ v1.53k軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，分析炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量，并評(píng)價(jià)山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材的抗細(xì)菌性炎癥功效。

2.2 腎保護(hù)功效評(píng)價(jià)

2.2.1 MTC測(cè)定

試驗(yàn)在6孔板中進(jìn)行，每孔定容標(biāo)準(zhǔn)稀釋水后含量為3 mL，設(shè)置30尾/孔，試驗(yàn)用魚為2 dpf野生型AB品系的斑馬魚。設(shè)置正常對(duì)照組（標(biāo)準(zhǔn)稀釋水處理組，即空白對(duì)照組）和模型對(duì)照組（用馬兜鈴酸A水溶給予斑馬魚建立腎損傷模型），并在腎損傷模型斑馬魚上分別水溶給予山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材（濃度見表3）。28 ℃條件下處理2天后，測(cè)定山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材對(duì)模型斑馬魚的MTC。

2.2.2 腎保護(hù)功效評(píng)價(jià)（表型觀察）

試驗(yàn)在6孔板中進(jìn)行，每孔定容標(biāo)準(zhǔn)稀釋水后含量為3 mL，設(shè)置30尾/孔，試驗(yàn)用魚為2 dpf野生型AB品系斑馬魚。設(shè)置正常對(duì)照組（標(biāo)準(zhǔn)稀釋水處理組，即空白對(duì)照組）和模型對(duì)照組（用馬兜鈴酸A水溶給予斑馬魚建立腎損傷模型），并在腎損傷模型斑馬魚上分別水溶給予山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材（濃度見表4），以及陽(yáng)性對(duì)照藥地塞米松，濃度為9.81 μg/mL。28 ℃條件下處理2天后，統(tǒng)計(jì)腎性水腫的發(fā)生率，并評(píng)價(jià)山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材的腎保護(hù)功效。

2.2.3 腎小球?yàn)V過促進(jìn)功效評(píng)價(jià)

試驗(yàn)在6孔板中進(jìn)行，每孔定容標(biāo)準(zhǔn)稀釋水后含量為3 mL，設(shè)置30尾/孔，試驗(yàn)用魚為2 dpf野生型AB品系斑馬魚。設(shè)置正常對(duì)照組（標(biāo)準(zhǔn)稀釋水處理組，即空白對(duì)照組）和模型對(duì)照組（用馬兜鈴酸A水溶給予斑馬魚建立腎損傷模型），并在腎損傷模型斑馬魚上分別水溶給予山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材（濃度見表5），及陽(yáng)性對(duì)照藥地塞米松，濃度為9.81 μg/mL。28 ℃條件下處理1天后，將熒光標(biāo)記物（Dextran tetramethylrhodamine）靜脈注射給各實(shí)驗(yàn)組斑馬魚，繼續(xù)處理1天后，在熒光顯微鏡下拍照，每實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)選取10尾，數(shù)據(jù)的采集和分析是利用NIS-Elements D 3.20高級(jí)圖像處理軟件，以斑馬魚體內(nèi)殘留的熒光強(qiáng)度評(píng)價(jià)山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材的腎保護(hù)功效。

2.3 數(shù)據(jù)分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)的處理結(jié)果用mean±SE表示。用SPSS 26.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，＜0.05表明差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 抗細(xì)菌性炎癥功效評(píng)價(jià)

3.1.1 MTC

在本實(shí)驗(yàn)條件下，山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)和山牡荊根和心材對(duì)模型斑馬魚的MTC均為2 000 μg/mL。詳見表1。

表1 樣品抗炎功效濃度摸索實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=30）

組別濃度/μg·mL-1死亡數(shù)/尾死亡率/%表型 正常對(duì)照組—00未見明顯異常 模型對(duì)照組—00未見明顯異常 山牡荊枝葉12500與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 25000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 50000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 1 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 2 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 山牡荊果實(shí)12500與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 25000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 50000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 1 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 2 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 山牡荊根和心材12500與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 25000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 50000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 1 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 2 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似

3.1.2 抗炎功效評(píng)價(jià)

在本次實(shí)驗(yàn)條件下，模型對(duì)照組斑馬魚較正常對(duì)照組炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量顯著增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001），陽(yáng)性對(duì)照組（乙酸地塞米松）較模型對(duì)照組炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量減少，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001），山牡荊枝葉1 000和2 000 μg/mL濃度組均較模型對(duì)照組炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.05，＜0.001），山牡荊果實(shí)1 000 μg/mL組可以顯著減少炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.05），山牡荊根和心材500、1 000、2 000 μg/mL組可以顯著減少炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均＜0.001）。詳見表2。

表2 樣品抗炎功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=10）

組別濃度/μg·mL-1炎癥部位中性粒細(xì)胞數(shù)量（個(gè)，mean ± SE）正常對(duì)照組—9.00 ± 0.856模型對(duì)照組—140 ± 9.26###乙酸地塞米松32.664.0 ± 2.44***山牡荊枝葉500118 ± 6.031 00099.0 ± 5.22*2 00076.6 ± 5.14***山牡荊果實(shí)500112 ± 5.941 000104 ± 4.65*2 000128 ± 11.0山牡荊根和心材50081.6 ± 7.34***1 00093.3 ± 6.25***2 00072.1 ± 4.77***

注：與正常對(duì)照組比較，###＜0.001；與模型對(duì)照組比較，*＜0.05，***＜0.001。

3.2 腎保護(hù)功效評(píng)價(jià)

3.2.1 MTC測(cè)定

在本實(shí)驗(yàn)條件下，山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材對(duì)模型斑馬魚的MTC均為2 000 μg/mL。詳見表3。

表3 樣品腎保護(hù)功效濃度摸索實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=30）

組別濃度/μg·mL-1死亡數(shù)/尾死亡率/%表型 正常對(duì)照組—00未見明顯異常 模型對(duì)照組—0030尾腎性水腫 山牡荊枝葉12500與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 25000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 50000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳 1 00000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳 2 00000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳 山牡荊果實(shí)12500與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 25000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 50000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳 1 00000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳 2 00000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳 山牡荊根和心材12500與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 25000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 50000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 1 00000與模型對(duì)照組狀態(tài)相似 2 00000較模型對(duì)照組狀態(tài)佳

3.2.2 腎保護(hù)功效評(píng)價(jià)（表型觀察）

在本實(shí)驗(yàn)條件下，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組腎性水腫數(shù)量顯著增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001），腎性水腫發(fā)生率100%，與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性藥地塞米松組腎性水腫數(shù)量顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001），腎性水腫發(fā)生率10%，山牡荊枝葉組和山牡荊果實(shí)組500、1 000、2 000 μg/mL腎性水腫數(shù)量顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均＜0.001），腎性水腫發(fā)生率≤10%，山牡荊根和心材組500、1 000、2 000 μg/mL腎性水腫數(shù)量顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.05，＜0.001，＜0.001），腎性水腫發(fā)生率分別為80%、43%和17%。詳見表4和圖1。

表4 樣品腎保護(hù)功效評(píng)價(jià)（表型觀察）實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=30）

組別濃度/μg·mL-1腎性水腫數(shù)量/尾腎性水腫發(fā)生率/% 正常對(duì)照組—00 模型對(duì)照組—30###100 地塞米松9.813***10 山牡荊枝葉5003***10 1 0002***7 2 0000***0 山牡荊果實(shí)5003***10 1 0000***0 2 0000***0 山牡荊根和 心材50024*80 1 00013***43 2 0005***17

注：與正常對(duì)照組比較，###＜0.001；與模型對(duì)照組比較，*＜0.05，***＜0.001。

圖1 樣品處理后斑馬魚腎性水腫典型圖

注：箭頭所指為腎性水腫。

3.2.3 腎小球?yàn)V過功效評(píng)價(jià)

在本實(shí)驗(yàn)條件下，模型對(duì)照組較正常對(duì)照組全身熒光強(qiáng)度顯著增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001），與模型對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照藥地塞米松可以顯著減少全身熒光強(qiáng)度，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001），山牡荊枝葉500、1 000、2 000 μg/mL組全身熒光強(qiáng)度顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001，＜0.001，＜0.01），山牡荊果實(shí)500、1 000、2 000 μg/mL組全身熒光強(qiáng)度顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.001，＜0.001，＜0.01），山牡荊根和心材500、1 000、2 000 μg/mL組全身熒光強(qiáng)度顯著減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.05，＜0.01，＜0.001）。詳見表5。

表5 樣品腎小球?yàn)V過功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（=10）

組別濃度/μg·mL-1全身熒光強(qiáng)度（像素，mean ± SE）正常對(duì)照組—446 089 ± 22 667模型對(duì)照組—778 694 ± 69 281###地塞米松9.81312 847 ± 12 543***山牡荊枝葉500352 187 ± 12 625***1 000348 159 ± 17 366***2 000371 151 ± 21 534**山牡荊果實(shí)500298 047 ± 10 073***1 000338 076 ± 14 659***2 000364 084 ± 19 045**山牡荊根和心材500375 680 ± 21 647*1 000354 541 ± 17 771**2 000274 747 ± 8 252***

注：與正常對(duì)照組比較，###＜0.001；與模型對(duì)照組比較，*＜0.05，**＜0.01，***＜0.001。

4 結(jié)論

LPS是一種內(nèi)毒素，是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的組成成分，當(dāng)其作用于人類、大小鼠、斑馬魚或其他生物細(xì)胞時(shí)均會(huì)誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生[3]。中性粒細(xì)胞作為免疫應(yīng)答的第一道屏障，具有活躍的變形運(yùn)動(dòng)能力，將LPS注射到斑馬魚上后，中性粒細(xì)胞可迅速穿出血管聚集到炎癥部位進(jìn)行吞噬免疫[4]。熒光顯微鏡下，可直接觀察到中性粒細(xì)胞，通過中性粒細(xì)胞數(shù)量判斷樣品有無抗炎功效。

馬兜鈴酸副作用之一是具有強(qiáng)腎毒性，損傷腎小管上皮細(xì)胞，導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化及腎萎縮，并出現(xiàn)低分子蛋白尿、嚴(yán)重貧血癥狀。在人體和斑馬魚上，馬兜鈴酸均可誘發(fā)腎臟功能異常和腎性水腫，引起不可逆性地腎損傷甚至死亡[5,6]。因斑馬魚幼魚通體透明的特性，馬兜鈴酸處理后，肉眼或在顯微鏡下，可直接觀察到腎性水腫的特征表型；腎小球?yàn)V過功能障礙導(dǎo)致斑馬魚不能將外源注射紅色的熒光物質(zhì)排出體外，因此可觀察斑馬魚全身紅色熒光強(qiáng)度分析腎小球?yàn)V過功能[7]。

通過建立斑馬魚細(xì)菌性炎癥模型，研究發(fā)現(xiàn)山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)和山牡荊根和心材均具有抗細(xì)菌性炎癥功效。其中山牡荊根和心材抗細(xì)菌性炎癥功效最好，其次是山牡荊枝葉。

通過建立斑馬魚腎損傷模型，研究發(fā)現(xiàn)山牡荊枝葉、山牡荊果實(shí)、山牡荊根和心材均具有腎保護(hù)功效，具體表現(xiàn)為減少腎性水腫發(fā)生率和促進(jìn)腎小球?yàn)V過功能。其中山牡荊枝葉和山牡荊果實(shí)的腎保護(hù)功效最好，其次是山牡荊根和心材。

本文通過建立斑馬魚細(xì)菌性炎癥模型和腎損傷模型，發(fā)現(xiàn)山牡荊有抗細(xì)菌性炎癥和腎保護(hù)功效，為進(jìn)一步開發(fā)山牡荊中藥材的藥用用途提供了依據(jù)。

[1]廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局. 廣西壯族自治區(qū)瑤藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(第一卷)[M]. 南寧: 廣西科學(xué)技術(shù)出版社，2014.

[2]王飛娟，景鵬，王燕，等. 山牡荊提取物對(duì)大鼠慢性腎炎模型的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2017，23(8): 28-30.

[3]周俊怡，周嚴(yán)嚴(yán)，邊寶林，等. LPS誘導(dǎo)斑馬魚炎癥實(shí)熱模型構(gòu)建及脂質(zhì)生物標(biāo)志物篩選研究[J]. 浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，42(10): 782-789.

[4]KO E Y, HEO S J, CHO S H, et al. 3-Bromo-5-(ethoxymethyl)-1, 2-benzenediol inhibits LPS-induced pro-inflammatory responses by preventing ROS production and downregulating NF-κB in vitro and in a zebrafish model[J]. International Immunopharmacology, 2019, 67: 98-105.

[5]王雪，劉可春，王希敏，等. 大黃酸對(duì)馬兜鈴A引起的斑馬魚腎臟損傷的保護(hù)作用[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2016，32(3): 361-365.

[6]WANG X, GIUSTI A, NY A, et al. Nephrotoxic effects in zebrafish after prolonged exposure to aristolochic acid[J]. Toxins, 2020, 12(4): 217.

[7]DING Y J, CHEN Y H. Developmental nephrotoxicity of aristolochic acid in a zebrafish model[J]. Toxicology and Applied Pharmacology, 2012, 261(1): 59-65.

Study on Pharmacodynamic Evaluation of Extracts from Different Parts of(Lour.) Will

Objective: To evaluate the anti-bacterial inflammatory and renal protective effects of extracts from different parts of(Lour.) Will. Methods: Using zebrafish from 3 days after fertilization to determine the maximum detection concentration of anti-bacterial inflammation efficacy in(Lour.) Will samples and evaluate its efficacy; the maximum concentration of renal protection was measured in zebrafish 2 days after fertilization and its efficacy was evaluated. Results: The MTC of branches and leaves, fruits, roots and heartwood of(Lour.) Will to model zebrafish were 2000 μg/mL. Compared with the model control group, the number of neutrophils in the inflammatory sites of(Lour.) Will was reduced in 1000 and 2000 μg/mL concentration groups in the branches and leaves of(Lour.) Will, 1000 μg/mL concentration groups in the fruits of(Lour.) Will, 500, 1000 and 2000 μg/mL concentration groups in the roots and heartwood of(Lour.) Will, with statistical difference. The number of renal edema in the 500, 1000, 2000 μg/mL concentration groups of branches and leaves, fruits, roots and heartwood of(Lour.) Will was significantly decreased compared with the model control group, with statistical difference. Conclusion: The branches and leaves, fruits, roots and heartwood of(Lour.) Will have the effects of anti-bacterial inflammation and renal protection.

Vitex quinata (Lour.) Will ; extract; zebrafish; bacterial inflammation; renal protection

R284

A

1008-1151(2023)07-0056-04

2023-01-09

呂林艷（1981－），女，廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司高級(jí)工程師，從事藥理研究和臨床研究工作。

麥志雄（1977－），男，廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司高級(jí)工程師，從事中藥、民族藥藥效學(xué)研究及安全性評(píng)價(jià)工作。