氯氟醚菌唑和丙硫菌唑的抑菌活性及田間藥效比較

賈云鶴 張揚(yáng) 李宏偉 周飛 鄭斐

摘要 ［目的］ 比較氯氟醚菌唑和丙硫菌唑的殺菌譜。［方法］室內(nèi)生測(cè)試驗(yàn)（葉片法、菌絲生長(zhǎng)速率法和盆栽法）和田間小區(qū)藥效試驗(yàn)。［結(jié)果］與對(duì)照藥劑相比，丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病菌、水稻紋枯病菌、小麥白粉病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜白粉病菌和黃瓜炭疽病菌具有較好的室內(nèi)活性，其EC90分別為0.647 1、7.088 4、9.600 7、30.617 1、34.021 7和39.110 1 mg/L，其中對(duì)小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、黃瓜白粉病菌和大豆銹病菌的活性優(yōu)于氯氟醚菌唑；氯氟醚菌唑?qū)π←湴追鄄【⑺炯y枯病菌、大豆銹病菌、小麥赤霉病菌和黃瓜灰霉病菌具有較好的室內(nèi)活性，EC90分別為3.210 6、3.536 1、24.498 2、46.005 2和52.074 3 mg/L。其中對(duì)小麥白粉病菌、水稻紋枯病菌和黃瓜灰霉病菌的活性優(yōu)于丙硫菌唑。田間防效測(cè)定結(jié)果表明，480 g/L丙硫菌唑懸浮劑在135和200 g/hm2試驗(yàn)劑量下對(duì)小麥赤霉病的防效均優(yōu)于同等施藥劑量下10%氯氟醚菌唑懸浮劑的防效；480 g/L丙硫菌唑懸浮劑在150 mg/L劑量下對(duì)黃瓜白粉病的防效略優(yōu)于同等劑量下10%氯氟醚菌唑可溶液劑的防效。［結(jié)論］氯氟醚菌唑和丙硫菌唑的殺菌譜存在差異，兩者針對(duì)不同靶標(biāo)的活性有較大差異。

關(guān)鍵詞 氯氟醚菌唑；丙硫菌唑；抑菌活性；田間藥效

中圖分類號(hào) S482.2? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2023）14-0136-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.14.033

作者簡(jiǎn)介 賈云鶴（1995—），男，遼寧遼陽(yáng)人，從事室內(nèi)生物活性測(cè)定及田間應(yīng)用研究。

氯氟醚菌唑和丙硫菌唑均歸屬于殺菌劑抗性行動(dòng)委員會(huì)（FRAC）分類G1亞組，是甾醇生物合成c-14脫甲基化酶抑制劑（DMI），對(duì)植物體內(nèi)麥角甾醇合成具有抑制作用。截至2020年6月，甾醇生物合成抑制劑G1亞組共包括37個(gè)農(nóng)藥品種，如戊唑醇、丙硫菌唑、氯氟醚菌唑等。

氯氟醚菌唑（mefentrifluconazole）是巴斯夫公司于2016年首次公布的三唑類殺菌劑［ 1］。氯氟醚菌唑分子結(jié)構(gòu)中含有能夠使其在酶作用位點(diǎn)更加緊密結(jié)合的異丙醇基團(tuán)，此基團(tuán)使氯氟醚菌唑能靈活從游離態(tài)自由旋轉(zhuǎn)，與靶標(biāo)結(jié)合成為結(jié)合態(tài)，在酶作用位點(diǎn)更緊密地結(jié)合，從而很好地減少病菌突變，延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展［ 2］。氯氟醚菌唑具有廣譜、高效、內(nèi)吸、鏟除和保護(hù)等作用，適用于玉米、谷物等大田作物，葡萄等經(jīng)濟(jì)作物以及特種作物等60多種作物［ 3］。目前氯氟醚菌唑已在中國(guó)、韓國(guó)、歐盟、澳大利亞、加拿大、美國(guó)等多個(gè)國(guó)家和組織展開登記［ 4］。

丙硫菌唑（prothioconazole）是由拜耳作物科學(xué)公司發(fā)現(xiàn)、開發(fā)和生產(chǎn)的三唑硫酮類殺菌劑，具有很好的內(nèi)吸作用，對(duì)多種病害具有優(yōu)異的保護(hù)、治療和鏟除活性，持效期長(zhǎng)，對(duì)作物安全［ 5］。丙硫菌唑主要用于防治小麥、大麥、油菜、花生、水稻、豆類、甜菜和大田蔬菜等作物上的許多病害。丙硫菌唑幾乎對(duì)所有麥類病害都有很好的防效，如小麥和大麥上的白粉病、紋枯病、穎枯病、葉斑病、銹病、菌核病、網(wǎng)斑病、云紋病、基腐病等；能有效防治油菜和花生田土傳病害，如菌核病，以及主要葉面病害，如灰霉病、黑斑病、褐斑病、黑脛病、菌核病和銹病等［ 6］；還用于防治白菜黑斑病等［ 7］。

筆者采用葉片法、菌絲生長(zhǎng)速率法、盆栽法，比較了氯氟醚菌唑和丙硫菌唑?qū)λ炯y枯病菌、小麥赤霉病菌、小麥白粉病菌、黃瓜霜霉病菌、黃瓜炭疽病菌、黃瓜白粉病菌、黃瓜靶斑病菌、黃瓜灰霉病菌和大豆銹病菌的室內(nèi)活性，并針對(duì)小麥赤霉病和黃瓜白粉病2個(gè)靶標(biāo)進(jìn)行了2種藥劑的田間防效比較，為2種藥劑的進(jìn)一步開發(fā)與應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試靶標(biāo)

小麥赤霉病菌（Fusarium graminearum）、水稻紋枯病菌（Rhizoctonia solani）、小麥白粉病菌（Blumeria graminis）由上海曉明檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司提供；黃瓜霜霉病菌（Pseudoperonospora cubensis）、黃瓜炭疽病菌（Colletotrichum orbiculare）、黃瓜白粉病菌（Erysiphe cichoracearum）、黃瓜靶斑病菌（Corynespora cassiicola）、大豆銹病菌（Phakopsora pachyrhizi）、灰霉病菌（Botrytis cinerea）由沈陽(yáng)中化農(nóng)藥化工研發(fā)有限公司生測(cè)中心提供。

1.2 供試藥劑

1.2.1 室內(nèi)試驗(yàn)藥劑。96%氯氟醚菌唑原藥、95%丙硫菌唑原藥、100%氰烯菌酯原藥、98%己唑醇原藥、97%氟唑菌酰胺原藥、99%氟唑菌酰羥胺原藥，由上海曉明檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司提供；95%代森錳鋅原藥、97%咪鮮胺原藥、95%乙嘧酚原藥、95%啶菌噁唑原藥，由沈陽(yáng)中化農(nóng)藥化工研發(fā)有限公司農(nóng)藥生測(cè)中心提供；43%氟菌·肟菌酯懸浮劑，由拜耳作物科學(xué)有限公司生產(chǎn)。

1.2.2田間試驗(yàn)藥劑。480 g/L丙硫菌唑懸浮劑、10%氯氟醚菌唑懸浮劑，由南通泰禾化工股份有限公司提供；10%氯氟醚菌唑可溶液劑，由上海曉明檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司提供；25%氰烯菌酯懸浮劑，由江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司生產(chǎn)；29%吡萘·嘧菌酯懸浮劑，由先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菌絲生長(zhǎng)速率法（水稻紋枯?。?/p>

稱取適量原藥，用N，N-二甲基甲酰胺溶解成10 000 mg/L母液，用無(wú)菌0.1%吐溫80水稀釋為7個(gè)濃度；取各濃度藥劑各1 mL，分別與49 mL冷卻至70 ℃左右的無(wú)菌PDA培養(yǎng)基混合搖勻，等量倒入3個(gè)直徑9 cm的培養(yǎng)皿中，制成相應(yīng)系列濃度的含藥培養(yǎng)基；培養(yǎng)基冷卻后接種直徑5 mm的供試病原菌菌餅，置于28 ℃生化培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)；待空白對(duì)照菌絲長(zhǎng)至6 cm以上時(shí)，采用十字交叉法，測(cè)量各處理菌落直徑，計(jì)算抑制率。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=（空白對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑-藥劑處理菌落增長(zhǎng)直徑）/空白對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑×100%

1.3.2 葉片法（小麥赤霉病）。

取3 mL 0.1%水瓊脂分裝至玻璃試管中待冷卻后備用，將直徑1 cm的小麥赤霉病菌菌餅菌絲面朝上接種至0.1%水瓊脂試管中，25 ℃黑暗條件培養(yǎng)18 h左右；剪取適量一葉一心期小麥葉片，葉片長(zhǎng)度7 cm左右，將剪好的小麥葉片置于各濃度藥劑中浸泡20 s后取出晾干，將晾干藥液的葉片分裝至對(duì)應(yīng)的試管中，每試管中8片葉，于25 ℃、12 h/12 h光暗培養(yǎng)5～6 d后進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查時(shí)以1%水瓊脂面為起始點(diǎn)，用卡尺測(cè)量菌絲生長(zhǎng)高度并計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。

菌絲生長(zhǎng)抑制率= （空白對(duì)照菌絲生長(zhǎng)高度-藥劑處理菌絲生長(zhǎng)高度）/空白對(duì)照菌絲生長(zhǎng)高度×100%

1.3.3 盆栽法。選擇溫室培養(yǎng)的一葉一心期，間苗至每盆缽25株小麥苗，作為小麥白粉病的試驗(yàn)寄主植物；兩葉期黃瓜苗作為黃瓜霜霉病、黃瓜白粉病、黃瓜炭疽病、黃瓜靶斑病的試驗(yàn)寄主植物；兩葉期的大豆苗作為大豆銹病、大豆灰霉病的試驗(yàn)寄主植物；兩葉期番茄苗作為番茄晚疫病的試驗(yàn)寄主植物。

準(zhǔn)確稱取原藥，溶解于N，N-二甲基甲酰胺中，用0.1%吐溫80水稀釋成各濃度藥劑。噴霧器采用喉頭噴霧器，噴霧壓力為0.3 MPa。處理后的試材自然陰干，24 h后接種病原菌。采用接種器分別將黃瓜霜霉病菌和番茄晚疫病菌孢子（囊）懸浮液（5×104～8×104個(gè)/mL），黃瓜炭疽病、黃瓜靶斑病、大豆銹病和大豆灰霉病病菌孢子懸浮液（5×106～8×106個(gè)/mL）噴霧于寄主植物上，移入人工氣候室（（24±2）℃，RH＞90%，無(wú)光照），24 h后，移入溫室正常管理。另將黃瓜白粉病菌孢子懸浮液（5×105～8×105個(gè)/mL）噴霧于寄主作物上，小麥白粉病菌孢子均勻抖至寄主植物上，置于溫室正常管理。試驗(yàn)材料培養(yǎng)5～15 d，分別調(diào)查殺菌活性。

1.3.4 田間小區(qū)藥效試驗(yàn)。

小麥赤霉病參照中華人民共和國(guó)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 1464.15—2007《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則第15部分：殺菌劑防治小麥赤霉病》，于2020年在江蘇省句容市后白鎮(zhèn)二圣村進(jìn)行，小麥品種為鄭麥9023，揚(yáng)花初期（4月6日）首次施藥，間隔7 d（4月13日）第二次施藥，共施藥2次，用水量450 L/hm2，調(diào)查時(shí)間為第二次藥后29 d（5月12日）。

黃瓜白粉病參照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17980.30—2000《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則（一）殺菌劑防治黃瓜白粉病》，于2022年在浙江省紹興市東浦鎮(zhèn)行宮山村大棚內(nèi)進(jìn)行，5月24日首次施藥，5月31日第二次施藥，共施藥2次。莖葉噴霧，以葉片濕潤(rùn)不滴水為宜。第二次藥后7 d（6月7日）進(jìn)行藥效調(diào)查。

2 結(jié)果與分析

2.1 氯氟醚菌唑和丙硫菌唑?qū)?種病原菌的菌絲生長(zhǎng)抑制活性

氯氟醚菌唑?qū)λ炯y枯病菌的EC90為3.536 1 mg/L，活性優(yōu)于丙硫菌唑（EC907.088 4 mg/L），低于對(duì)照藥劑己唑醇（EC901.452 6 mg/L）。氯氟醚菌唑?qū)π←湷嗝共【腅C90為46.005 2 mg/L，活性低于丙硫菌唑（EC90 30.617 1 mg/L），優(yōu)于對(duì)照藥劑氰烯菌酯（EC90 50.278 4 mg/L）（表1）。

2.2 氯氟醚菌唑和丙硫菌唑?qū)?種病原菌的室內(nèi)盆栽活性

由表2可知，氯氟醚菌唑?qū)?種病害均有不同程度的室內(nèi)活性，其中對(duì)小麥白粉病菌的活性最高，EC90為3.210 6 mg/L，活性優(yōu)于對(duì)照藥劑氟唑菌酰羥胺（EC90 5.423 0 mg/L）；其次為大豆銹病菌、黃瓜灰霉病菌，EC90分別為24.498 2和52.074 3 mg/L，對(duì)大豆銹病菌的活性顯著低于對(duì)照藥劑氟唑菌酰胺（EC90 5.333 8 mg/L），對(duì)黃瓜灰霉病菌的活性（EC9052.074 3）與對(duì)照藥劑啶菌惡唑相當(dāng)（EC90 54.789 4 mg/L）；對(duì)黃瓜白粉病菌、霜霉病菌、靶斑病菌和炭疽病菌的活性較差（EC90值大于100 mg/L）。

丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病菌的活性最高，EC90為0.647 1 mg/L，優(yōu)于對(duì)照藥劑氟唑菌酰胺的活性；其次為小麥白粉病菌、黃瓜白粉病菌和黃瓜炭疽病菌，EC90分別為9.600 7、34.021 7、39.110 1 mg/L，對(duì)小麥白粉病菌和黃瓜白粉病菌2個(gè)靶標(biāo)的活性均低于對(duì)照藥劑氟唑菌酰羥胺、乙嘧酚，對(duì)黃瓜炭疽病菌的活性優(yōu)于對(duì)照藥劑咪鮮胺（EC90 102.290 1 mg/L）；丙硫菌唑?qū)S瓜灰霉病、靶斑病和霜霉病的活性較差（EC90大于100 mg/L）。

氯氟醚菌唑?qū)π←湴追鄄【?、黃瓜灰霉病菌的活性優(yōu)于丙硫菌唑；丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病菌、黃瓜白粉病菌、黃瓜炭疽病菌的活性優(yōu)于氯氟醚菌唑。

2.3 田間藥效試驗(yàn)

2.3.1 小麥赤霉病田間藥效試驗(yàn)。

試驗(yàn)劑量下，480 g/L丙硫菌唑懸浮劑對(duì)小麥赤霉病防效較優(yōu)。在135 g/hm2劑量下，480 g/L丙硫菌唑懸浮劑防效為66.67%，優(yōu)于10%氯氟醚菌唑懸浮劑135 g/hm2的防效（55.14%）。在200 g/hm2劑量下，480 g/L丙硫菌唑懸浮劑防效為86.05%，優(yōu)于10%氯氟醚菌唑懸浮劑200 g/hm2的防效（72.64%），也優(yōu)于對(duì)照藥劑25%氰烯菌酯懸浮劑在750 g/hm2劑量下防效（73.75%）（表3）。丙硫菌唑田間試驗(yàn)結(jié)果與曹小俊等［ 8］的研究結(jié)果一致。

2.3.2 黃瓜白粉病田間藥效試驗(yàn)。

氯氟醚菌唑和丙硫菌唑在試驗(yàn)劑量下對(duì)黃瓜白粉病均表現(xiàn)優(yōu)異的防效。150 mg/L劑量下，480 g/L丙硫菌唑懸浮劑防效達(dá)98.11%，略優(yōu)于10%氯氟醚菌唑可溶液劑的防效（92.35%），2種試驗(yàn)藥劑與對(duì)照藥劑29%吡萘·嘧菌酯懸浮劑的防效（95.26%）相當(dāng)（表4）。

3 結(jié)論

丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病菌、水稻紋枯病菌、小麥白粉病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜白粉病菌和黃瓜炭疽病菌具有較好的室

內(nèi)活性，其EC90分別為0.647 1、7.088 4、9.600 7、30.617 1、34.021 7和39.110 1 mg/L，其中對(duì)黃瓜灰霉病菌、霜霉病菌和靶斑病菌的活性較差；氯氟醚菌唑?qū)π←湴追鄄【?、水稻紋枯病菌、大豆銹病菌、小麥赤霉病菌和黃瓜灰霉病菌具有較好的室內(nèi)活性，EC90分別為3.210 6、3.536 1、24.498 2、46.005 2和52.074 3 mg/L，對(duì)黃瓜白粉病菌、靶斑病菌、霜霉病菌、炭疽病菌的活性較差。氯氟醚菌唑?qū)λ炯y枯病菌、小麥白粉病菌、黃瓜灰霉病菌的活性高于丙硫菌唑，而丙硫菌唑?qū)π←湷嗝共【?、大豆銹病菌、黃瓜白粉病菌、黃瓜炭疽病菌的活性優(yōu)于氯氟醚菌唑。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，480 g/L丙硫菌唑懸浮劑在135和200 g/hm2試驗(yàn)劑量下對(duì)小麥赤霉病的防效均優(yōu)于同等施藥劑量下10%氯氟醚菌唑懸浮劑的防效；480 g/L丙硫菌唑懸浮劑在150 mg/L劑量下對(duì)黃瓜白粉病的防效略優(yōu)于同等劑量下10%氯氟醚菌唑可溶液劑的防效。

三唑類殺菌劑與三唑硫酮類殺菌劑分組相同，但氯氟醚菌唑所屬的三唑類殺菌劑為1H-1，2，4-三唑結(jié)構(gòu)單元，而丙硫菌唑所屬的三唑硫酮類殺菌劑為1H-1，2，4-三唑硫酮結(jié)構(gòu)單元，兩類化合物結(jié)構(gòu)單元不同［9］，這可能是造成氯氟醚菌唑與丙硫菌唑殺菌譜存在較大差異的原因。三唑類殺菌劑品種最早于1976年上市，是人類自主開發(fā)苯并咪唑類殺菌劑后所開發(fā)的第2個(gè)里程碑式的殺菌劑類別，雖然產(chǎn)品類型較老，但市場(chǎng)仍期待有新的產(chǎn)品上市［10］。與此同時(shí)，病原菌抗藥性問題也應(yīng)得到關(guān)注，氯氟醚菌唑特別的分子結(jié)構(gòu)或可在延緩抗性方面發(fā)揮作用。此外，與作用機(jī)制不同的殺菌劑交替或混配使用也可有效延緩抗性的產(chǎn)生與發(fā)展，并同時(shí)擴(kuò)大藥劑的防治范圍。

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