• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    宏基因測序檢出耶氏肺孢子菌的非HIV患者的臨床分析

    2023-08-11 06:01:06徐如意曾麗云陳輝鄭琳於學(xué)嬋虞亦鳴莊起東陳眾博鄧在春
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2023年21期

    徐如意 曾麗云 陳輝 鄭琳 於學(xué)嬋 虞亦鳴 莊起東 陳眾博 鄧在春

    [摘要]?目的?總結(jié)并分析支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar?lavage?fluid,BALF)宏基因組二代測序(metagenomic?next-generation?sequencing,mNGS)檢出低序列耶氏肺孢子菌(Pneumocystis?jirovecii,PJ)的非HIV患者的危險因素、臨床特點、治療及預(yù)后。方法?回顧性分析2018年5月至2022年6月在寧波大學(xué)附屬第一醫(yī)院因不明原因肺炎行氣管鏡檢查且BALF-mNGS檢出PJ的13例非HIV患者的臨床資料。結(jié)果?13例患者中,危險因素以使用糖皮質(zhì)激素最為常見,最常見的癥狀是咳嗽、咳痰,12例患者有血感染指標(biāo)異常,影像學(xué)特點以兩肺彌漫性病變、多發(fā)磨玻璃影為主。12例患者接受抗PJ治療,其中11例患者在治療期間病情好轉(zhuǎn),1例因重癥感染治療無效死亡;1例患者未接受抗PJ治療,在經(jīng)驗性抗感染治療后好轉(zhuǎn)。結(jié)論?經(jīng)BALF-mNGS檢出PJ的非HIV患者臨床特點不典型,結(jié)合mNGS結(jié)果與宿主因素綜合判斷,有助于早診、早治,改善患者的預(yù)后。

    [關(guān)鍵詞]?非HIV患者;肺孢子菌肺炎;宏基因組二代測序;低序列

    [中圖分類號]?R519??????[文獻標(biāo)識碼]?A??????[DOI]?10.3969/j.issn.1673-9701.2023.21.003

    Clinical?analysis?of?non-HIV?patients?with?Pneumocystis?jirovecii?detected?by?metagenomic?sequencing

    XU?Ruyi1,?ZENG?Liyun2,?CHEN?Hui1,?ZHENG?Lin3,?YU?Xuechan1,?YU?Yiming1,?ZHUANG?Qidong1,?CHEN?Zhongbo1,?DENG?Zaichun1

    1.Department?of?Respiratory?and?Critical?Care?Medicine,?the?First?Affiliated?Hospital?of?Ningbo?University,?Key?Laboratory?of?Respiratory?Disease?of?Ningbo,?Ningbo?315010,?Zhejiang,?China;?2.Department?of?Technology,?Hangzhou?Matridx?Biotechnology?Co.,?Ltd,?Hangzhou?310030,?Zhejiang,?China;?3.Microbiology?Department,?the?First?Affiliated?Hospital?of?Ningbo?University,?Ningbo?315010,?Zhejiang,?China

    [Abstract]?Objective?To?summarize?and?analyze?the?risk?factors,?clinical?characteristics,?treatment,?and?prognosis?of?non-HIV?patients?with?low-sequence?Pneumocystis?jirovecii?(PJ)?detected?by?metagenomic?next-generation?sequencing?(mNGS)?of?bronchoalveolar?lavage?fluid?(BALF).?Methods?The?clinical?data?of?13?non-HIV?patients?with?PJ?detected?by?BALF-mNGS?who?underwent?bronchoscopy?due?to?unexplained?pneumonia?in?the?First?Affiliated?Hospital?of?Ningbo?University?from?May?2018?to?June?2022?were?retrospectively?analyzed.?Results?Among?the?13?patients,?the?use?of?glucocorticoids?was?the?most?common?risk?factor,?the?most?common?symptom?was?cough?and?expectoration,?12?patients?had?abnormal?blood?infection?indicators,?and?the?main?imaging?features?were?diffuse?lesions?in?both?lungs?and?multiple?ground?glass?shadows.?12?patients?received?anti-PJ?treatment,?of?which?11?patients?were?improved?during?treatment,?and?one?patient?died?due?to?ineffective?treatment?of?severe?infection.?One?patient?did?not?receive?anti-PJ?therapy?and?improved?after?empirical?anti-infective?therapy.?Conclusion?The?clinical?characteristics?of?non-HIV?patients?with?PJ?detected?by?BALF-mNGS?are?not?typical.?The?combination?of?mNGS?results?and?host?factors?is?helpful?for?early?diagnosis,?treatment?and?improving?the?prognosis?of?patients.

    [Key?words]?Non-HIV?patients;?Pneumocystis?pneumonia;?Metagenomic?next-generation?sequencing;?Low?sequence

    耶氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystis?jirovecii?pneumonia,PJP)是一種致命的機會性真菌感染,近年來,PJP在非HIV感染者中的發(fā)病率有所升高[1-2]。在非HIV感染者中,PJP的死亡率也在增加,HIV陰性的PJP患者的死亡率為25%~50%[3-6]。以往研究表明,在感染耶氏肺孢子菌(Pneumocystis?jirovecii,PJ)的患者中,與HIV陽性患者相比,HIV陰性患者的癥狀不典型,疾病進展更快,并發(fā)感染的風(fēng)險更高,預(yù)后更差,且死亡率更高[7]。這就要求臨床上對PJ應(yīng)早檢出、早治療。作為一種檢測手段,宏基因組二代測序(metagenomic?next-generation?sequencing,mNGS)無須事先根據(jù)臨床表現(xiàn)來預(yù)測可能的病原體,其診斷肺部真菌感染性疾病的敏感性和特異性優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)方法[8-9]。本研究對13例由mNGS檢出PJ陽性的非HIV患者的臨床資料進行回顧性分析和總結(jié),現(xiàn)報道如下。

    1??資料與方法

    1.1??資料

    回顧性分析2018年5月至2022年6月于寧波大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院治療的13例經(jīng)支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar?lavage?fluid,BALF)-mNGS檢出PJ陽性的非HIV患者。從住院患者信息中提取每位病例的基本信息、危險因素、臨床特征、實驗室檢查結(jié)果和胸部CT表現(xiàn),并收集患者的治療方案及隨訪治療效果。本研究經(jīng)寧波大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)(倫理審批號:倫審2023研第082RS號),所有研究對象均被充分告知檢查內(nèi)容及相關(guān)風(fēng)險。

    1.2??支氣管肺泡灌洗液收集

    患者在全身麻醉下,由專業(yè)醫(yī)生進行支氣管鏡檢查,支氣管肺泡灌洗3次(每次20ml)。根據(jù)胸部CT顯示的病灶位置確定灌洗區(qū)域。若雙肺有彌漫性病變,則在右肺中葉進行灌洗,并立即密封兩管3ml?BALF,送至杭州杰毅生物技術(shù)有限公司用于mNGS檢測[10-11]。

    1.3??mNGS的操作步驟

    取1.2ml磷酸緩沖鹽溶液加入標(biāo)本管,置于渦旋震蕩儀震蕩混勻10min。吸取1.2ml標(biāo)本管中液體于2ml震蕩管中。將震蕩管置于生物樣本勻質(zhì)儀中,勻質(zhì)9min,利用高效三維高速碰撞破碎細胞,對樣品進行研磨、裂解、均質(zhì)。取出震蕩管放入離心機中,以12?000轉(zhuǎn)/min離心3min,吸取上清液400μl至小體積基因組核酸提取或純化試劑盒中,放入NGS?master全自動建庫儀進行核酸提取及文庫構(gòu)建。使用DNA降解和環(huán)化將雙鏈DNA文庫轉(zhuǎn)化為單鏈環(huán)狀DNA。最后在Illumina測序平臺進行高通量測序[12-13]。

    2??結(jié)果

    2.1??患者的基本特征及患PJP的危險因素

    共13例非HIV患者通過BALF-mNGS檢測到PJ,男11例,女2例,年齡53~82歲;其中9例患者有兩種或以上基礎(chǔ)疾病,8例有全身糖皮質(zhì)激素使用史,5例有糖尿病,4例有實體器官惡性腫瘤病史,3例有血液系統(tǒng)惡性腫瘤,2例有肝硬化病史,1例有腎臟疾病,1例無感染PJ的危險因素,見表1。

    2.2??臨床癥狀

    在患病過程中,11例有咳嗽癥狀,8例出現(xiàn)勞力性呼吸困難,6例出現(xiàn)發(fā)熱,4例出現(xiàn)乏力,1例有胸痛表現(xiàn),見表2。

    2.3??實驗室檢查及影像學(xué)特點

    在患病過程中,4例患者出現(xiàn)白細胞計數(shù)升高,12例患者出現(xiàn)C反應(yīng)蛋白升高,11例患者出現(xiàn)淋巴細胞計數(shù)下降,8例患者的乳酸脫氫酶水平升高。胸部CT提示多發(fā)磨玻璃影8例,滲出影4例,實變3例,胸腔積液2例。mNGS檢出的PJ序列數(shù)從1至962不等,3例患者僅檢出PJ,10例患者同時檢出其他病原體,見表3。

    2.4??治療及效果

    入院后,因呼吸道癥狀及肺部炎癥,所有患者均接受經(jīng)驗性抗生素治療。在BALF-mNGS檢出PJ后,12例患者在原抗感染治療方案基礎(chǔ)上加用磺胺甲唑–甲氧芐啶(sulfamethoxazole-trimethoprim,SMZ-TMP)治療,1例患者未接受針對PJ的治療??筆J治療后,11例患者癥狀好轉(zhuǎn),其中8例患者在復(fù)查胸部CT時觀察到病灶吸收(典型胸部CT表現(xiàn)見圖1);1例患者基礎(chǔ)狀態(tài)差,有肺惡性腫瘤、2型糖尿病、腦梗死病史,因“咳嗽咳痰伴氣促1周,加重1d”入院,雖在抗PJ治療后患者癥狀曾一度好轉(zhuǎn),但后續(xù)因嚴(yán)重感染,經(jīng)多種抗生素治療后癥狀仍進一步惡化,出現(xiàn)呼吸衰竭、急性左心衰、肝功能異常等表現(xiàn),住院期間因嚴(yán)重感染及多器官損傷經(jīng)治療無效后死亡。1例未接受抗PJ治療的患者在莫西沙星治療后癥狀明顯好轉(zhuǎn),見表4。

    3??討論

    PJP是一種致命的機會性肺部感染性疾病,在非HIV患者中,PJ常定植于肺部,當(dāng)基礎(chǔ)疾病加重或全身情況惡化時,PJ可由定植轉(zhuǎn)為侵襲性感染,繼而出現(xiàn)肺部病灶擴大及發(fā)熱、咳嗽、呼吸困難等非特異性表現(xiàn)[1,5,14]。與HIV患者相比,非HIV患者感染PJ后癥狀更嚴(yán)重,疾病進展更快,呼吸衰竭比例更高,這使得非HIV患者感染PJ后面臨更高的死亡風(fēng)險[7]。

    六胺銀(gomori?methenamine?silver,GMS)染色檢出PJ的特異性很高,有研究證明特異性達到100%,但敏感度低導(dǎo)致GMS染色在診斷PJP時非常容易漏診[15-16]。目前,BALF-mNGS技術(shù)廣泛用于PJ的檢測,在診斷肺部感染性疾病時,敏感度高是mNGS的一個重要優(yōu)勢。研究顯示,BALF-mNGS的敏感度、特異性均顯著高于血清(1,3)-β-D-葡聚糖試驗[17-18]。Jiang[19]等發(fā)現(xiàn)BALF-mNGS診斷PJP的敏感度明顯高于GMS染色。

    有研究表明,PJP患者易出現(xiàn)其他致病菌的合并感染,如巨細胞病毒、EB病毒、單純皰疹病毒1型、念珠菌及細環(huán)病毒[17,?19]。在本研究的13例患者中,有10例患者mNGS檢出其他病原體的序列,以巨細胞病毒、EB病毒、單純皰疹病毒1型為主,這與之前的研究結(jié)果一致。由于PJP患者常有其他病原體的混合感染,mNGS因其診斷混合感染的優(yōu)勢,相比其他微生物學(xué)檢查更適用于PJP的診斷。

    過去,臨床上主要根據(jù)mNGS檢出病原菌的序列數(shù)判斷是否需要治療,但序列數(shù)并不能完全真實反映患者體內(nèi)病原微生物的含量;在mNGS技術(shù)中,微生物讀數(shù)會隨著樣本中宿主細胞濃度的增加而降低[20]。mNGS檢出的PJ序列數(shù)變化很大(2~1?665?693)[21-24]。在本文回顧性研究的13例BALF-mNGS檢出PJ的非HIV患者中,同樣也觀察到低序列數(shù)的PJ,最小序列數(shù)為1。由于PJ在自然界廣泛存在并可能在呼吸道定植,故mNGS檢出PJ并不等同于感染,但目前仍沒有準(zhǔn)確的閾值來判斷BALF-mNGS檢出的PJ是定植還是侵襲性感染[17]。對這些低序列數(shù)患者是否需要抗PJ治療?首先,雖然PJ可定植于肺部,但臨床上在免疫功能正?;蚣韧鶝]有肺部疾病的患者中很少見到PJ感染。本研究納入的患者中,免疫抑制狀態(tài)及肺部基礎(chǔ)疾病十分常見,這一特點與之前報道的PJ感染病例大致相同[1,?4,?25-27]。一項關(guān)于mNGS診斷疑似感染病灶的研究數(shù)據(jù)顯示,對免疫正?;颊叩臉颖具M行mNGS檢測時,很少報告PJ陽性[24]。其次,雖然定植在肺部的PJ有時不直接產(chǎn)生癥狀,但仍可參與激活炎癥反應(yīng),造成肺部損傷,甚至導(dǎo)致其他肺部疾病的惡化[28]。最后,對免疫功能低下的非HIV患者,PJ定植轉(zhuǎn)為侵襲感染時,疾病進展快,預(yù)后差[3,?7]。所以筆者認為對有肺部基礎(chǔ)疾病或免疫損傷危險因素的非HIV患者,即使檢出的PJ序列數(shù)低,預(yù)防性抗PJ治療也非常重要。

    綜上所述,BALF-mNGS檢出PJ陽性的非HIV患者臨床特點不典型,mNGS可幫助檢出PJ,并有助于發(fā)現(xiàn)混合感染的病原體。對mNGS檢出PJ陽性的低序列患者,若有肺部基礎(chǔ)疾病或免疫功能受損等危險因素,應(yīng)盡早開始抗PJ治療,以期改善患者的預(yù)后。

    [參考文獻][1] CHEN?Y?H,?FANG?X?Y,?LI?Y?T,?et?al.?Characterization?of?Pneumocystis?jirovecii?pneumonia?at?three?tertiary?comprehensive?hospitals?in?southern?China[J].?Braz?J?Microbiol,?2020,?51(3):?1061–1069.

    [5] LIU?C?J,?LEE?T?F,?RUAN?S?Y,?et?al.?Clinical?characteristics,?treatment?outcomes,?and?prognostic?factors?of?Pneumocystis?pneumonia?in?non-HIV-infected?patients[J].?Infect?Drug?Resist,?2019,?12:?1457–1467.

    [12] MARAN?M?I?J,?DAVIS?G?D.?Benefits?of?merging?paired-end?reads?before?pre-processing?environmental?metagenomics?data?[J].?Mar?Genomics,?2022,?61:?100914.

    [19] JIANG?J,?BAI?L,?YANG?W,?et?al.?Metagenomic?next-generation?sequencing?for?the?diagnosis?of?Pneumocystis?jirovecii?pneumonia?in?non-HIV-infected?patients:?A?retrospective?study[J].?Infect?Dis?Ther,?2021,?10(3):?1733–1745.

    [25] ZALMANOVICH?A,?BEN-AMI?R,?RAHAV?G,?et?al.?Healthcare-associated?Pneumocystis?jirovecii?pneumonia?(PJP)?infection?in?HIV-negative?adults:?A?multicenter?study[J].?Isr?Med?Assoc?J,?2021,?23(5):?312–317.

    观看美女的网站| 久久久久九九精品影院| 我要看日韩黄色一级片| 淫秽高清视频在线观看| 欧美zozozo另类| 熟女人妻精品中文字幕| 免费人成在线观看视频色| 全区人妻精品视频| 在线免费观看的www视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| bbb黄色大片| 国产色爽女视频免费观看| 757午夜福利合集在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲内射少妇av| 97热精品久久久久久| 国产单亲对白刺激| 欧美+日韩+精品| 亚洲国产精品合色在线| 天天一区二区日本电影三级| 好男人在线观看高清免费视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲久久久久久中文字幕| 午夜视频国产福利| 亚洲午夜理论影院| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久久久久午夜电影| 日韩人妻高清精品专区| netflix在线观看网站| 午夜日韩欧美国产| 韩国av一区二区三区四区| 91九色精品人成在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 国产精品不卡视频一区二区 | 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲精品一区av在线观看| 精品人妻1区二区| 午夜福利在线在线| 丁香欧美五月| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久这里只有精品中国| 日韩高清综合在线| 淫妇啪啪啪对白视频| 欧美三级亚洲精品| 国产三级黄色录像| 成人性生交大片免费视频hd| 欧美日本视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 午夜福利在线观看吧| 欧美另类亚洲清纯唯美| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲美女黄片视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 午夜a级毛片| 亚洲七黄色美女视频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产精品不卡视频一区二区 | www.熟女人妻精品国产| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产不卡一卡二| 69人妻影院| 成年女人毛片免费观看观看9| 色5月婷婷丁香| 国产男靠女视频免费网站| a级毛片a级免费在线| 亚洲人与动物交配视频| av专区在线播放| 国产免费一级a男人的天堂| 国产成年人精品一区二区| 久久午夜福利片| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产黄片美女视频| 88av欧美| 桃红色精品国产亚洲av| 国产美女午夜福利| 久99久视频精品免费| 热99re8久久精品国产| 无人区码免费观看不卡| 欧美潮喷喷水| 久久久久久久久久成人| 精品欧美国产一区二区三| 国产成人aa在线观看| a级一级毛片免费在线观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久人人爽人人爽人人片va | 网址你懂的国产日韩在线| 成人三级黄色视频| 国产成人影院久久av| 久久国产精品人妻蜜桃| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久久久久国产a免费观看| 国产中年淑女户外野战色| 欧美高清成人免费视频www| 神马国产精品三级电影在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产视频内射| 99热这里只有是精品在线观看 | 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 中文字幕熟女人妻在线| 一个人免费在线观看电影| 天天躁日日操中文字幕| 国产精华一区二区三区| 成人性生交大片免费视频hd| 男人狂女人下面高潮的视频| 黄色丝袜av网址大全| 国产欧美日韩精品一区二区| 91狼人影院| 在线观看66精品国产| 亚洲精品在线美女| 日韩中字成人| 男插女下体视频免费在线播放| 免费在线观看日本一区| 精品久久久久久,| 岛国在线免费视频观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 日本a在线网址| 国产精品久久电影中文字幕| 久久久久久九九精品二区国产| 欧美性猛交黑人性爽| 久久99热6这里只有精品| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 久久久色成人| 国产精品不卡视频一区二区 | 国产高清三级在线| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产伦人伦偷精品视频| 真实男女啪啪啪动态图| 国产精品影院久久| 51午夜福利影视在线观看| 极品教师在线视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产三级黄色录像| 中出人妻视频一区二区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 免费观看人在逋| 久久久色成人| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| АⅤ资源中文在线天堂| 午夜激情福利司机影院| 亚洲色图av天堂| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲欧美日韩高清专用| 在线观看舔阴道视频| 精品一区二区免费观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 丁香六月欧美| 国产主播在线观看一区二区| 无人区码免费观看不卡| 久久国产精品影院| 亚洲av电影在线进入| 成年女人毛片免费观看观看9| 在线观看66精品国产| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲欧美激情综合另类| 麻豆成人av在线观看| 精品午夜福利在线看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 一级a爱片免费观看的视频| 久久亚洲真实| 十八禁国产超污无遮挡网站| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 91麻豆av在线| 国产高潮美女av| 超碰av人人做人人爽久久| 日本三级黄在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美+亚洲+日韩+国产| 狠狠狠狠99中文字幕| 乱码一卡2卡4卡精品| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 99国产综合亚洲精品| 别揉我奶头 嗯啊视频| 日韩欧美 国产精品| 欧美一区二区亚洲| 国产成人a区在线观看| 久久久久亚洲av毛片大全| 一区二区三区四区激情视频 | 俄罗斯特黄特色一大片| 真实男女啪啪啪动态图| 3wmmmm亚洲av在线观看| 午夜激情福利司机影院| 亚洲电影在线观看av| 露出奶头的视频| 校园春色视频在线观看| 波多野结衣高清无吗| 欧美激情在线99| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 一级a爱片免费观看的视频| 国产亚洲精品久久久com| 搡老熟女国产l中国老女人| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲国产色片| a级一级毛片免费在线观看| 少妇高潮的动态图| 脱女人内裤的视频| 日本熟妇午夜| 国产视频一区二区在线看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 男人的好看免费观看在线视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 在线播放无遮挡| 美女大奶头视频| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲无线在线观看| x7x7x7水蜜桃| 免费人成在线观看视频色| 12—13女人毛片做爰片一| 男女床上黄色一级片免费看| 国产精品久久电影中文字幕| 国产三级中文精品| 亚洲精品影视一区二区三区av| 看片在线看免费视频| 在线观看一区二区三区| 性欧美人与动物交配| 亚洲国产高清在线一区二区三| 他把我摸到了高潮在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 三级国产精品欧美在线观看| 色吧在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 人人妻人人看人人澡| 大型黄色视频在线免费观看| 国产成年人精品一区二区| 久99久视频精品免费| 久久久久久久久中文| 日韩欧美国产一区二区入口| АⅤ资源中文在线天堂| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品久久久久久久久免 | 国产私拍福利视频在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲精品一区av在线观看| 免费观看的影片在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲真实伦在线观看| 日韩高清综合在线| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲最大成人av| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产精品av视频在线免费观看| 国产日本99.免费观看| 久久香蕉精品热| 69人妻影院| 午夜视频国产福利| 变态另类丝袜制服| 九色国产91popny在线| 丁香欧美五月| 国产69精品久久久久777片| 三级国产精品欧美在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产精品乱码一区二三区的特点| 欧美性感艳星| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 免费黄网站久久成人精品 | 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 简卡轻食公司| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲七黄色美女视频| 少妇的逼水好多| 欧美黄色片欧美黄色片| 乱码一卡2卡4卡精品| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 简卡轻食公司| 亚洲中文字幕日韩| 成人一区二区视频在线观看| 一区福利在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 人人妻人人看人人澡| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 一级作爱视频免费观看| 看十八女毛片水多多多| 国产亚洲欧美在线一区二区| 久久草成人影院| 12—13女人毛片做爰片一| 超碰av人人做人人爽久久| 老司机福利观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 高清毛片免费观看视频网站| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 一级毛片久久久久久久久女| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲av免费在线观看| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 国产乱人伦免费视频| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| av天堂中文字幕网| 色精品久久人妻99蜜桃| 婷婷亚洲欧美| 男女之事视频高清在线观看| 特级一级黄色大片| 俄罗斯特黄特色一大片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 日韩亚洲欧美综合| 亚洲国产高清在线一区二区三| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产毛片a区久久久久| 最近视频中文字幕2019在线8| 成人一区二区视频在线观看| 天堂√8在线中文| 国产 一区 欧美 日韩| 午夜福利欧美成人| 91麻豆av在线| 久久精品国产自在天天线| 欧美色欧美亚洲另类二区| 成人av一区二区三区在线看| 99riav亚洲国产免费| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 嫩草影视91久久| 久久性视频一级片| 一级黄色大片毛片| 性色avwww在线观看| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美黄色淫秽网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品伦人一区二区| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产欧美日韩一区二区三| 久久久久性生活片| 国产精品1区2区在线观看.| 久久人人爽人人爽人人片va | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费看光身美女| avwww免费| 97热精品久久久久久| 国产av一区在线观看免费| 日韩人妻高清精品专区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 性欧美人与动物交配| 在线观看66精品国产| 国产三级黄色录像| 亚洲精品456在线播放app | 黄色日韩在线| 波多野结衣高清作品| 色视频www国产| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 日韩亚洲欧美综合| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产亚洲精品久久久com| 中文亚洲av片在线观看爽| 日韩欧美精品免费久久 | 国产真实乱freesex| 色哟哟哟哟哟哟| 给我免费播放毛片高清在线观看| 动漫黄色视频在线观看| 麻豆国产av国片精品| 亚洲精品在线美女| 午夜精品久久久久久毛片777| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲人成电影免费在线| 日韩精品青青久久久久久| 一进一出抽搐动态| 嫩草影视91久久| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产精品嫩草影院av在线观看 | av中文乱码字幕在线| 亚洲欧美激情综合另类| 日韩欧美精品v在线| 久久久国产成人精品二区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 日本黄色片子视频| 欧美在线黄色| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲精品日韩av片在线观看| 99久国产av精品| 婷婷色综合大香蕉| 色尼玛亚洲综合影院| www.色视频.com| 一本精品99久久精品77| 一二三四社区在线视频社区8| 99热这里只有是精品50| 麻豆国产97在线/欧美| 免费人成在线观看视频色| 国产一区二区在线av高清观看| 免费在线观看日本一区| 90打野战视频偷拍视频| 色5月婷婷丁香| 午夜亚洲福利在线播放| 黄色配什么色好看| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久国产精品影院| 在现免费观看毛片| 久久久久久九九精品二区国产| 可以在线观看的亚洲视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国内精品久久久久久久电影| 美女大奶头视频| 午夜福利成人在线免费观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲av电影不卡..在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产麻豆成人av免费视频| 欧美区成人在线视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲精品在线美女| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲国产欧美人成| 久久人妻av系列| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 免费人成在线观看视频色| 久久精品综合一区二区三区| 久久久久久久久久成人| 日本 欧美在线| 全区人妻精品视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 白带黄色成豆腐渣| 午夜福利在线观看吧| 波野结衣二区三区在线| 51午夜福利影视在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一级a爱片免费观看的视频| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 赤兔流量卡办理| 久久99热这里只有精品18| 亚洲欧美精品综合久久99| 又粗又爽又猛毛片免费看| 成年人黄色毛片网站| 免费无遮挡裸体视频| 免费大片18禁| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美激情国产日韩精品一区| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av熟女| 亚洲三级黄色毛片| 99热只有精品国产| 亚洲国产精品久久男人天堂| 午夜免费成人在线视频| 国产精品久久视频播放| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 嫩草影院精品99| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 草草在线视频免费看| 久久草成人影院| 久久欧美精品欧美久久欧美| 一本一本综合久久| 久久国产精品影院| 色播亚洲综合网| 成人永久免费在线观看视频| 丰满乱子伦码专区| 精品一区二区三区av网在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 两个人的视频大全免费| 久久性视频一级片| 欧美日韩综合久久久久久 | 欧美精品国产亚洲| 级片在线观看| 丰满的人妻完整版| 亚洲男人的天堂狠狠| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产乱人伦免费视频| 亚洲成av人片免费观看| 日本五十路高清| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 五月玫瑰六月丁香| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 久久久久久国产a免费观看| 窝窝影院91人妻| 国产高清视频在线观看网站| 别揉我奶头 嗯啊视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 九九在线视频观看精品| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产精品国产高清国产av| 免费观看人在逋| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| www.999成人在线观看| 国产综合懂色| 日韩欧美三级三区| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 黄色丝袜av网址大全| 国产精品久久久久久精品电影| 99久久成人亚洲精品观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 免费黄网站久久成人精品 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 一级a爱片免费观看的视频| aaaaa片日本免费| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 最后的刺客免费高清国语| av天堂中文字幕网| 色精品久久人妻99蜜桃| av天堂中文字幕网| 成人无遮挡网站| 国产精品亚洲一级av第二区| a在线观看视频网站| 国产精品亚洲一级av第二区| www.www免费av| 全区人妻精品视频| 男人的好看免费观看在线视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 午夜免费激情av| 欧美三级亚洲精品| 亚洲欧美日韩高清专用| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 免费在线观看成人毛片| 亚洲真实伦在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 老司机深夜福利视频在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲不卡免费看| 亚洲国产欧美人成| 精品福利观看| 无人区码免费观看不卡| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产精品野战在线观看| 夜夜爽天天搞| 亚洲电影在线观看av| 成人鲁丝片一二三区免费| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲精品日韩av片在线观看| 看免费av毛片| 久久亚洲真实| 婷婷精品国产亚洲av在线| www.熟女人妻精品国产| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲电影在线观看av| 成年女人毛片免费观看观看9| www.999成人在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲人成电影免费在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产亚洲精品综合一区在线观看| a在线观看视频网站| 日韩成人在线观看一区二区三区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 成人午夜高清在线视频| 中文字幕av成人在线电影| 高清在线国产一区| 欧美性感艳星| 我的老师免费观看完整版| 亚洲人成网站在线播| 成人特级av手机在线观看| 波野结衣二区三区在线| 夜夜夜夜夜久久久久| 99热只有精品国产| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 一进一出好大好爽视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| av女优亚洲男人天堂| 草草在线视频免费看| 韩国av一区二区三区四区| 欧美成狂野欧美在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 色综合婷婷激情| 禁无遮挡网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品人妻久久久久久| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人三级黄色视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久久久国内视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 国模一区二区三区四区视频| 精品久久久久久,| 国产欧美日韩精品一区二区| 在线观看午夜福利视频| 亚洲国产精品999在线| 99久久精品一区二区三区| 99riav亚洲国产免费| av国产免费在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 久久性视频一级片| 最新中文字幕久久久久| 在线观看舔阴道视频| 99在线视频只有这里精品首页| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产精品亚洲美女久久久| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲综合色惰| 日本熟妇午夜| 国内精品久久久久久久电影| 十八禁网站免费在线| 少妇熟女aⅴ在线视频|