紅曲地龍蛋白壓片糖果降脂保肝作用探析

◎ 邸玉青，李 靜

（1.北京核工業(yè)醫(yī)院心血管內(nèi)科，北京 102413；2.煙臺南山學(xué)院，山東 煙臺 265700）

高血脂是臨床常見的疾病，多由長期高糖、高脂、高油飲食引起。高血脂會導(dǎo)致脂肪在肝臟累積，形成脂肪肝，極易引發(fā)心腦血管疾病。據(jù)不完全統(tǒng)計[1-2]，我國成人血脂異?？傮w患病率達(dá)到40.40%，且呈大幅度上升趨勢，而30%～50%高血脂人群會合并脂肪肝。科學(xué)降脂、保肝護(hù)肝成為社會性的自我保健課題，利用藥食同源以及新資源食品資源，探索開發(fā)出具有防治疾病功能的新型食品成為一種新趨勢。

紅曲，又稱紅曲米，古時稱為丹曲，被廣泛用于食物加工烹飪中。紅曲應(yīng)用歷史悠久，《本草綱目》中記載“紅曲：消食、活血、健脾燥胃”等。研究表明[3-4]，紅曲米中的活性成分洛伐他汀和人體膽固醇合成中的羥甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶結(jié)構(gòu)相似，是HMG-CoA還原酶的競爭性抑制劑，能有效減少或阻斷內(nèi)源性膽固醇的合成，從而達(dá)到降脂的作用。

《神農(nóng)本草經(jīng)》《黃帝內(nèi)經(jīng)》中多有記載地龍“活血化瘀”的特性。地龍蛋白是采用現(xiàn)代生物技術(shù)從地龍體內(nèi)提取的復(fù)合營養(yǎng)物，含有膠原酶、纖溶酶、纖溶激活蛋白（FA蛋白）、核酸、微量元素等多種成分，已于2009年被原衛(wèi)生部認(rèn)定為“新資源食品”。地龍中地龍蛋白含量高達(dá)55%～68%，富含纖溶酶、纖溶酶原激活物和膠原酶等活性成分，能溶解微血管內(nèi)的血栓，讓硬化的微血管恢復(fù)彈性，從而解除微血管的堵塞、扭曲變形情況，改善微循環(huán)，對機體心血管系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等有較好的預(yù)防作用[5-6]。壓片糖果作為糖果制品類的一種新型食品形態(tài)發(fā)展迅速，除了工藝先進(jìn)之外，服用也更為方便，深受年輕消費者的喜愛。通過現(xiàn)代化萃取工藝將紅曲米和地龍蛋白包埋添加到壓片糖果中，制成的紅曲地龍蛋白壓片糖果成分天然，咀嚼服用更利于吸收。本實驗旨在探討新型食品紅曲地龍蛋白壓片糖果的降脂保肝作用，為后續(xù)開發(fā)新型食品提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紅曲地龍蛋白壓片糖果（國內(nèi)某食品廠研發(fā)，由紅曲和地龍蛋白組合，其余為輔料，0.45 g/片，推薦食用量為紅曲0.12 g·d-1、地龍蛋白0.6 g·d-1）；辛伐他汀片（杭州默沙東制藥有限公司）；生理鹽水（北京化學(xué)試劑公司）；普通飼料（北京華阜康生物科技股份有限公司）；肝組織生化指標(biāo)試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）。

高脂飼料配比：普通飼料中添加1%膽固醇、10%豬油、0.5%脫氧膽酸鈉（進(jìn)一步誘發(fā)小鼠高脂血癥）及適量膽酸鹽（增加外源性膽固醇的吸收）。

1.2 儀器與設(shè)備

微量移液器，賽默飛世爾科技（中國）有限公司；全自動生化儀、低速冷凍離心機，科大創(chuàng)新股份有限公司；恒溫水浴鍋，南京太倉醫(yī)用設(shè)備儀器廠；MS-TS電子天平，梅特勒-托利多國際有限公司；AH-20全自動均質(zhì)器，睿科集團股份有限公司。

1.3 試驗動物

昆明種清潔級健康雄性小鼠60只，體重21～26 g，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，試驗前適應(yīng)性喂養(yǎng)一周。

1.4 試驗方法

1.4.1 動物造模分組

雄性昆明種小鼠60只適應(yīng)性喂養(yǎng)結(jié)束后，取血檢測，取10只血脂正常小鼠為正常對照組，飼以普通飼料，其余50小鼠飼以高脂飼料，持續(xù)45 d后，禁食不禁水12 h，尾靜脈取血測血脂，總膽固醇（Total Cholesterol，TC）、三酰甘油（Triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）升高、高密度脂蛋白膽固醇（High Density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）降低則為造模成功。取造模成功小鼠40只，按血脂水平將其隨機均分為模型對照組、辛伐他汀組、壓片糖果低（0.15 g·kg-1，即紅曲0.02 g·kg-1、地龍蛋白0.1 g·kg-1）、高劑量組（0.30 g·kg-1，即紅曲0.04 g·kg-1、地龍蛋白0.2 g·kg-1），每組10只。辛伐他汀組每日灌胃10 mL·kg-1辛伐他汀溶液，壓片糖果組給予不同濃度溶液（臨用前用1%羧甲基纖維素鈉溶液配制成相應(yīng)濃度）。正常對照組、模型對照組每日給予等量生理鹽水。5組小鼠的灌胃體積均為10 mL·kg-1，每天1次，持續(xù)6周，飼喂飼料同前。

1.4.2 小鼠血清生化指標(biāo)的測定

末次灌胃后，各組小鼠禁食不禁水12 h，腹部主動脈取血，置于3 200 r·min-1離心機中離心10 min，全自動生化儀測定血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate Aminotransferase，AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine Transaminase，ALT）含量，記錄試驗數(shù)據(jù)。

1.4.3 小鼠肝指數(shù)的測定

處死小鼠，經(jīng)濾紙?zhí)幚砗螅Q量肝臟重量，并根據(jù)公式（1）計算出肝指數(shù)。

1.4.4 小鼠肝臟生化指標(biāo)及氧化指標(biāo)的測定

TC測定：取5 g小鼠肝組織，置于預(yù)冷后的生理鹽水中，制成10%勻漿液，4 ℃下靜置抽提24 h，于3 000 r·min-1離心機中離心15 min，取上清液測定TC含量。

TG、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量測定：取1 g小鼠肝組織置于生理鹽水中，制成10%勻漿液，4 ℃下靜置抽提48 h，于3 000 r·min-1離心機中離心15 min，取上清液測定各指標(biāo)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

所有試驗數(shù)據(jù)使用Excel建立數(shù)據(jù)庫，使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，組間差異采取方差檢驗，P＜0.05表明數(shù)據(jù)具有顯著性差異，P＜0.01表明數(shù)據(jù)具有極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅曲地龍蛋白壓片糖果對血清生化指標(biāo)的影響

表1試驗結(jié)果顯示，模型對照組小鼠TC、TG、LDL-C含量顯著高于正常對照組，HDL-C含量低于正常對照組（P＜0.05或P＜0.01）。與模型對照組相比，辛伐他汀組與壓片糖果低、高各劑量組TC、TG、LDL-C含量顯著降低，HDL-C含量顯著增加（P＜0.05或P＜0.01）。

表1 紅曲地龍蛋白壓片糖果對血清生化指標(biāo)的影響表

2.2 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝指數(shù)及肝臟功能的影響

表2試驗結(jié)果顯示，與模型對照組相比，辛伐他汀組和壓片糖果低、高劑量組的小鼠肝指數(shù)明顯下降，ALT和AST活性明顯降低，各指標(biāo)均有顯著差異（P＜0.05或P＜0.01）。

表2 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝指數(shù)及肝臟功能的影響表

2.3 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝臟生化指標(biāo)及氧化指標(biāo)的影響

表3試驗結(jié)果顯示，與模型對照組相比，辛伐他汀組、壓片糖果各劑量組TC、TG、MDA含量減少，SOD含量增加，各指標(biāo)均有差異顯著（P＜0.05或P＜0.01）。

表3 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝臟生化指標(biāo)及氧化指標(biāo)的影響表

3 結(jié)論與討論

本實驗采用高脂飼料誘導(dǎo)高脂血癥小鼠模型，模型對照組小鼠血清TC、TG、LDL-C含量升高，HDL-C含量降低，表明小鼠造模成功。AST、ALT是臨床上常用于檢測肝功能的指標(biāo)，一般主要存在于肝臟中，當(dāng)肝臟受損，這兩種轉(zhuǎn)氨酶則會被釋放到血清中，使血清中AST、ALT增高[7]。本實驗中，模型組小鼠的AST、ALT活性增高，且肝臟系數(shù)增加，說明小鼠肝臟脂肪顆粒堆積，且出現(xiàn)了一定的肝損傷。試驗結(jié)果顯示，與模型對照組相比，壓片糖果低、高各劑量組TC、TG、LDL-C含量顯著降低，HDL-C含量顯著增加，（P＜0.05或P＜0.01），說明壓片糖果可以調(diào)節(jié)血清中各生化指標(biāo)，調(diào)理血液脂質(zhì)代謝；與此同時，低、高劑量組的小鼠肝指數(shù)明顯下降，血清ALT和AST活性明顯降低，表明壓片糖果可以減輕其脂肪肝，降低肝損傷程度，對肝臟有一定的保護(hù)作用。另外，高脂飼料喂養(yǎng)后，模型對照組小鼠肝臟TC、TG含量增加，體內(nèi)過氧化反應(yīng)增加、肝臟抗氧化能力降低，二者相互作用導(dǎo)致小鼠脂質(zhì)代謝異常。試驗結(jié)果顯示，與模型對照組相比，壓片糖果各劑量組TC、TG、MDA含量減少，SOD含量增加，各指標(biāo)均有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。提示紅曲地龍蛋白壓片糖果可以輔助降低小鼠肝臟脂質(zhì)水平，改善肝臟氧化應(yīng)激的狀態(tài)。

綜上所述，紅曲地龍蛋白壓片糖果可調(diào)節(jié)血脂水平和脂質(zhì)代謝紊亂，減少肝臟氧化應(yīng)激損傷，具有降脂保肝作用，是一款健康的新型食品。