調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與腫瘤免疫治療的研究進(jìn)展△

蘇崢，任海朋，依荷芭麗·遲

1濰坊市人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，山東 濰坊 261041

2中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所內(nèi)科，北京 100021

調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）是免疫負(fù)性調(diào)節(jié)細(xì)胞，表達(dá)CD4 和CD25，在維持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用，也在腫瘤微環(huán)境中扮演抑制角色。減輕或逆轉(zhuǎn)免疫抑制是抗腫瘤免疫治療的思路之一，多個免疫檢查點抑制劑已成熟應(yīng)用于臨床；但治療中仍存在耐藥、超進(jìn)展等問題，聯(lián)合應(yīng)用其他的免疫調(diào)節(jié)手段是探索的方向，其中調(diào)控Treg 是有前景的治療方法之一。本文將闡述Treg 的特征、功能和作用機(jī)制，重點對Treg 在腫瘤免疫治療中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 Treg 的分類和分子標(biāo)記

Treg 分為內(nèi)源性和外源性。內(nèi)源性Treg 絕大部分來源于胸腺，由T 細(xì)胞受體/主要組織相容性復(fù)合體（T cell receptor/major histocompatibility complex，TCR/MHC）多肽誘導(dǎo)產(chǎn)生；還有一部分來源于外周，由低劑量高親和性同源肽誘導(dǎo)，作用是減輕無害抗原的炎癥反應(yīng)。外源性Treg 是在外源性抗原刺激下外周T 細(xì)胞產(chǎn)生的。CD25 和叉頭框蛋白P3（forkhead box P3，F(xiàn)OXP3）是Treg 良好的分子標(biāo)記，F(xiàn)OXP3 更加特異；FOXP3是調(diào)節(jié)Treg 發(fā)育的關(guān)鍵基因，可以誘導(dǎo)傳統(tǒng)T 細(xì)胞（conventional T cell，Tconv）向Treg 轉(zhuǎn)化[1]，與Treg 轉(zhuǎn)錄調(diào)控、表觀基因修飾有關(guān)，還可以通過轉(zhuǎn)錄后修飾影響Treg功能[2]。Treg 的生成和成熟過程中重要的調(diào)節(jié)因子是白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2），當(dāng)胸腺及外周IL-2 降低時，Treg 成熟障礙，自身免疫性疾病發(fā)生率增高[3]。

2 Treg 發(fā)揮免疫抑制功能的機(jī)制

Treg 通過影響抗原呈遞細(xì)胞（antigen-presenting cell，APC）及樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）降低抗原識別的敏感性[4]；通過物理屏障方式[5]以及高表達(dá)的淋巴細(xì)胞活化基因3（lymphocyte activating 3，LAG3）[6]阻止DC 成熟和抗原呈遞；Treg 持續(xù)表達(dá)糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體家族相關(guān)蛋白（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor family associated protein，GITR）、細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4（cytotoxic T-lymphocyte associated protein 4，CTLA4），直接抑制效應(yīng)T 細(xì)胞（effector T cell，Teff）的活性[7-8]；并以高親和力與IL-2 結(jié)合，耗竭微環(huán)境中的IL-2，阻礙Tconv 的功能維持和成熟[9]。Treg 分泌多種免疫抑制激酶直接殺傷Teff，還能誘導(dǎo)其他T 細(xì)胞表達(dá)FOXP3，產(chǎn)生更多Treg，稱為傳染性免疫耐受[10]。

3 Treg 與腫瘤免疫的關(guān)系

腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、DC 等分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、IL-10、CC 趨化因子配體22（CC chemokine ligand 22，CCL22），誘導(dǎo)Treg 向腫瘤局部聚集[11-12]。腫瘤浸潤免疫細(xì)胞（tumor infiltrating immune cell，TIC）中Treg 比例明顯增高，包括子宮內(nèi)膜癌[13]、非小細(xì)胞肺癌[14]、肝癌[15]、膀胱癌[16]、胃癌[17]等，升高的比例與較差的預(yù)后相關(guān)。腫瘤浸潤Treg 高表達(dá)多種免疫抑制分子，如CTLA4、程序性死亡受體配體1（programmed cell death 1 ligand 1，PDCD1LG1，也稱PD-L1）、PD-L2、GITR、LAG3、T 細(xì)胞免疫球蛋白與黏蛋白家族成員3（T-cell immunoglobulin mucin family member 3，TIM3）、腫瘤壞死因子受體超家族成員4（tumor necrosis factor receptor superfamily member 4，TNFRSF4，又稱OX40）等，具有高度抑制活性[18]。Treg 抑制記憶性CD8+T 細(xì)胞的活性，抑制免疫記憶功能[19]，還可以通過細(xì)胞間接觸阻止T 細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移，影響T 細(xì)胞向腫瘤募集[20]。腫瘤細(xì)胞利用糖酵解耗竭微環(huán)境中的葡萄糖，并產(chǎn)生乳酸、脂肪酸等代謝產(chǎn)物[21]；其他T 細(xì)胞依賴葡萄糖轉(zhuǎn)運體和有氧糖酵解，增殖和活性受到抑制；而Treg 依賴脂質(zhì)線粒體氧化和丙酮酸[22]，在脂肪酸聚集的腫瘤微環(huán)境中數(shù)量上調(diào)。

4 調(diào)節(jié)Treg 抗腫瘤的策略和前景

免疫治療是有效的抗腫瘤治療方式。通過調(diào)節(jié)Treg 改變機(jī)體免疫抑制狀態(tài)，配合現(xiàn)有的治療手段，發(fā)揮直接和間接的抗腫瘤活性將成為免疫治療潛在的靶點之一。調(diào)節(jié)Treg 的方法包括減少Treg 數(shù)量和抑制Treg 活性等，根據(jù)作用機(jī)制不同，主要分為以下幾類。

4.1 減少Treg 數(shù)量

通過減少Treg 數(shù)量恢復(fù)抗腫瘤免疫是最早探索的方法。①傳統(tǒng)的化療藥物：低劑量環(huán)磷酰胺（200 mg/m2）、多柔比星（35 mg/m2）、紫杉醇等被證實能夠減少Treg，增加特異性CD8+T 細(xì)胞活性；化療藥物發(fā)揮抗腫瘤作用，釋放腫瘤抗原，是聯(lián)合免疫治療的良好選擇。但是化療藥物作為免疫激活劑的治療窗較窄，劑量過大會殺傷Teff，導(dǎo)致免疫抑制[23]。②特異性抗體：針對CD25 的抗體地尼白介素可以導(dǎo)致小鼠模型50%以上的Treg 減少，但半衰期較短，Treg 可在短期內(nèi)恢復(fù)，并未改善生存。另一種抗體PC-61半衰期較長，能夠降低65%～70%的Treg，聯(lián)合腫瘤疫苗使用可以改善生存，但是剩余30%左右的Treg 還可以發(fā)揮免疫抑制作用，在腫瘤較小時有效率高，較大時療效欠佳[24]。③白喉毒素（diphtheria toxin，DT）：DT 可以消除90%以上表達(dá)DT受體的Treg，并且對PC-61消除效果不佳的Treg有效，但要達(dá)到消除90%以上Treg的DT 劑量較大，機(jī)體難以耐受[25]，在應(yīng)用中受到限制。④其他抗體：IL-2和caspase 3結(jié)合物（IL2-cas）[26]、抗CCR4 免疫毒素[27]等在動物實驗中都可以減少Treg 數(shù)量，起到抗腫瘤活性。直接消耗Treg 無法精準(zhǔn)消耗腫瘤特異性Treg，而且消耗數(shù)量難以控制，過多可能誘發(fā)嚴(yán)重的自身免疫性疾病，過少起不到有效抗腫瘤作用。開發(fā)消耗特異性Treg 的方法和穩(wěn)定持久的藥物，改變腫瘤微環(huán)境的同時盡量減少生理性Treg 消耗，是Treg 清除的研究思路之一。

4.2 抑制Treg 的成熟和功能

4.2.1 GITR 抗體GITR 是腫瘤浸潤Treg 穩(wěn)定表達(dá)的免疫檢查點，GITR 抗體處理后腫瘤浸潤Treg降低50%以上，并可降低FOXP3 表達(dá)，減少IL-10等細(xì)胞因子分泌[28]，降低免疫抑制功能，還可以將Treg 轉(zhuǎn)化為Teff。Treg 可以識別自身抗原，轉(zhuǎn)化而來的Teff 可以攻擊攜帶自身抗原的腫瘤細(xì)胞，這對于低腫瘤突變負(fù)荷（tumor mutation burden-low，TMB-Low）和低腫瘤新抗原負(fù)荷（tumor neoantigen burden-low，TNB-Low）的“冷腫瘤”意義重大[26]。多個GITR 抗體單藥以及聯(lián)合免疫檢查點抑制劑的臨床試驗已經(jīng)開展。MK4166 聯(lián)合帕博利珠單抗用于治療惡性黑色素瘤，客觀有效率（objective response rate，ORR）可達(dá)62%[29]。TRX518 單藥或聯(lián)合化療、聯(lián)合免疫檢查點抑制劑治療的臨床試驗正在開展（NCT01239134、NCT02628574、NCT04021043、NCT02740270、NCT03861403、NCT02598960、NCT04225039）。除此之外，已有4種GITR/CTLA4 雙抗體獲得專利批準(zhǔn)，在結(jié)腸癌荷瘤小鼠的模型中證實可以通過抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）導(dǎo)致腫瘤浸潤Treg 耗竭，發(fā)揮抗腫瘤活性；在多個實體腫瘤和血液腫瘤中正在開展相關(guān)的研究[30]。

4.2.2 LAG3 抗體LAG3 在Treg 上高度表達(dá)，且高表達(dá)LAG3 的Treg 有更強(qiáng)的分泌TGF-β、IL-10的功能，具有更強(qiáng)的抑制活性[31]。針對LAG3 單抗的研發(fā)已經(jīng)較為成熟。RELATIVITY-047 研究表明，惡性黑色素瘤患者接受LAG3 單抗Relatilimab聯(lián)合納武利尤單抗對比單藥納武利尤單抗，中位無進(jìn)展生存期（progression-free survival，PFS）顯著延長（10.1 個月和4.6 個月），總生存期（overall survival，OS）仍在隨訪中。其他的LAG3 單抗（如Fianlimab、TSR-033、RO-7247669、SHR-1802、MGD-013 等）的臨床研究也在進(jìn)行中，該靶點已成為繼程序性死亡受體1（programmed cell death 1，PDCD1，也稱PD-1）/PD-L1、CTLA4 之后最有潛力的免疫治療靶點之一。

4.2.3 具有Ig 和ITIM 結(jié)構(gòu)域的T 細(xì)胞免疫受體（T cell immunoreceptor with Ig and ITIM domain，TIGIT）抗體TIGIT是FOXP3 的直接靶基因，促進(jìn)原始T 細(xì)胞向Treg 轉(zhuǎn)化，增強(qiáng)Treg 特定區(qū)域的脫甲基作用，促進(jìn)Treg 分泌抑制性細(xì)胞因子IL-10 和纖維蛋白原樣蛋白2（fibrinogen like 2，F(xiàn)GL2）[32]。TIGIT 陽性的Treg 具有更強(qiáng)的免疫抑制活性。至少10 余種TIGIT 單抗已被研發(fā)，美國食品藥品管理局已批準(zhǔn)Tiragolumab 聯(lián)合阿替利珠單抗用于驅(qū)動基因陰性PD-L1 高表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌的治療；該藥物用于小細(xì)胞肺癌、食管癌、宮頸癌等腫瘤的臨床試驗也在進(jìn)行中。其他的TIGIT 單抗（如Vibostolimab、BMS-986207、BGB-A1217、EOS-448、HB0030 等）以及PD-1/TIGIT 雙抗體（IBI321）的臨床研究也在進(jìn)行中。

4.2.4 TIM3 抗體TIM3 在超過50%的腫瘤浸潤Treg 上表達(dá)，TIM3 陽性的Treg 表達(dá)更高的FOXP3，分泌更多的穿孔素、顆粒酶、IL-10 等效應(yīng)分子，具有更強(qiáng)的抑制功能，也與更早的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和更差的預(yù)后相關(guān)[33-34]。阻斷TIM3通路在多個腫瘤模型中已經(jīng)取得初步療效，和PD-1 單抗、CTLA4 單抗等聯(lián)合應(yīng)用也取得了協(xié)同作用。免疫檢查點抑制劑耐藥的機(jī)制之一是腫瘤微環(huán)境高表達(dá)TIM3[35]，因此阻斷該通路可以逆轉(zhuǎn)免疫檢查點抑制劑耐藥[36]。TIM3 是免疫治療的靶點之一，已開發(fā)出多個針對TIM3 的單抗（如MBG453、TSR-022、BMS-986258、SHR-1702、KL-A292、BGB-A425 等）以及TIM3/PD-1 雙抗、TIM3/PD-L1 小分子雙靶點抑制劑，其單藥以及和免疫檢查點抑制劑聯(lián)合用藥的研究正在開展。

4.2.5 抗神經(jīng)氈蛋白1（neuropilin 1，NRP1）治療NRP1 在腫瘤浸潤Treg 上特異性表達(dá)，是血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和腦信號蛋白（Sema）叢狀蛋白的共同受體，對維持Treg 激活和功能有重要意義。急性白血病患者外周血Treg 上NRP1 表達(dá)升高，應(yīng)用Sema3A 拮抗后NRP1 表達(dá)降低，Treg 數(shù)量減少，白血病細(xì)胞凋亡增加[37]。Fc（AAG）-TPP11 是NRP1特異性拮抗劑，可以使NRP1 內(nèi)化，降低FOXP3 表達(dá)，影響Treg 的功能和穩(wěn)定性。在小鼠模型中驗證其抗腫瘤效應(yīng)與CTLA4 單抗相當(dāng)[38]。

4.3 通過調(diào)控腫瘤微環(huán)境抑制Treg 功能

4.3.1 干擾IL-33 和γ干擾素（interferon-γ，IFN-γ）IL-33/腫瘤發(fā)生抑制因子2（suppression of tumorigenicity 2，ST2）可以通過誘導(dǎo)IL-10 和TGF-β招募Treg 并提高Treg 活性。通過對食管鱗狀細(xì)胞癌和喉癌標(biāo)本的免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織和腫瘤間質(zhì)中IL-33 表達(dá)顯著增高，增高程度與Treg 浸潤平行，與不良預(yù)后有關(guān)[39-40]。Hatzioannou 等[41]發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)IL-33 缺陷Treg 對腫瘤免疫的抑制作用減弱，敲除IFN-γ可以恢復(fù)抑制作用。利用表達(dá)IL-33 的病毒樣顆粒主動免疫乳腺癌小鼠可以抑制腫瘤，其機(jī)制之一為Treg 減少和IFN-γ表達(dá)增高[42]。所以IL-33 和IFN-γ是值得探索的增強(qiáng)腫瘤免疫的治療方法。

4.3.2 抑制TGF-βTGF-β對Treg 的分化成熟和功能維持至關(guān)重要。TGF-β受體絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑加洛替尼（Galunisertib）可以下調(diào)SMAD家族成員2（SMAD family member 2，SMAD2）磷酸化，阻止經(jīng)典通路激活，逆轉(zhuǎn)Treg 對T 細(xì)胞的抑制作用，使共培養(yǎng)細(xì)胞中CD8+T 細(xì)胞和自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞的數(shù)量增加[43-44]。在三陰性乳腺癌小鼠模型中應(yīng)用加洛替尼可以使腫瘤消退，還可以重建免疫記憶功能，增加抗原的傳播[45]。在胰腺癌[46]、膠質(zhì)瘤[47]、肝癌[48]等腫瘤的臨床研究中證實了加洛替尼的療效。TGF-β受體拮抗劑與免疫檢查點抑制劑具有協(xié)同作用。加洛替尼聯(lián)合德瓦魯單抗（NCT2734160）用于治療復(fù)發(fā)難治的胰腺癌，疾病控制率（disease control rate，DCR）為25%，中位PFS 為5.72 個月[49]。加洛替尼聯(lián)合納武利尤單抗用于治療復(fù)發(fā)難治的非小細(xì)胞肺癌、肝細(xì)胞肝癌的臨床試驗（NCT02423343）正在開展。M7824（MSB0011359C，Bintrafusp-α）是PD-L1 單抗和TGF-β單抗的雙功能融合蛋白，在亞洲人群膽管細(xì)胞癌Ⅰ期臨床試驗中，ORR 為20%，中位PFS 和OS分別為2.5個月和12.7個月[50]；M7824用于放療和替莫唑胺治療失敗的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，DCR為22.9%，中位PFS 和OS 分別為1.4 個月和5.3 個月[51]。針對TGF-β的腫瘤疫苗、反義寡核苷酸分子等也在非小細(xì)胞肺癌、腎癌、惡性黑色素瘤等研究中取得一定的效果[52]。

4.3.3 抑制磷脂酰肌醇-3-羥激酶（phosphatidylinositol3-hydroxy kinase，PI3K）PI3K 抑制劑在惡性黑色素瘤、Lewis 肺癌、胸腺腫瘤等小鼠模型中體現(xiàn)出對Treg 的抑制性[53]。動物實驗發(fā)現(xiàn)，腫瘤疫苗聯(lián)合PI3K 抑制劑顯著減少腫瘤微環(huán)境中Treg 的數(shù)量，增加疫苗誘導(dǎo)的CD8+T 細(xì)胞；PI3K 抑制劑聯(lián)合PD-1 單抗可以使PI3K-蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）-雷帕霉素靶蛋白（mechanistic target of rapamycin kinase，MTOR）通路激活的患者獲得較好的治療反應(yīng)[54]。通過進(jìn)一步分子分型發(fā)現(xiàn)，針對PI3K 不同亞型（PI3Kα和PI3Kβ）的抑制劑對Treg 和Tconv 的作用不同[55]，研發(fā)特異性針對Treg 的PI3K 抑制劑而不影響Tconv功能，是精準(zhǔn)免疫調(diào)節(jié)治療的前景之一。

4.3.4 改變微環(huán)境代謝腫瘤缺氧環(huán)境可以誘導(dǎo)細(xì)胞外腺苷產(chǎn)生，導(dǎo)致Treg 聚集。應(yīng)用聚乙二醇化腺苷脫氨酶（polyethylene glycol adenosine deaminase，PEG-ADA）治療后外周血中腺苷水平下降，Treg 活性也下降[56]。Treg 可以自發(fā)產(chǎn)生細(xì)胞外腺苷，通過降低細(xì)胞外腺苷水平，抑制A2A/A2B 腺苷受體（如咖啡因等）或抑制CD73 等協(xié)同信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子[57]，可以打破Treg 的正反饋機(jī)制，抑制腫瘤生長[58]。攜帶ras 同源家族成員A（ras homolog family member A，RHOA）Y42 基因突變的胃癌能夠激活PI3K/AKT/MTOR 通路，使微環(huán)境中脂肪酸累積，Treg 聚集增加。應(yīng)用PI3K、MTOR 抑制劑可以阻斷代謝異常，減少Treg 聚集，和PD-1 單抗聯(lián)合應(yīng)用有逆轉(zhuǎn)耐藥的理論基礎(chǔ)，期待在更多的臨床研究中證實。

4.3.5 TCRTCR 是Treg 的關(guān)鍵信號通路，對Treg的分化成熟、抑制性蛋白表達(dá)有重要作用。應(yīng)用他莫昔芬可使小鼠模型Treg 的TCR 消退50%～70%，TCR 缺陷的Treg 喪失增殖成熟能力，動物模型中炎癥性疾病和自身免疫性疾病增加[59]。該思路可以在腫瘤免疫治療中借鑒。

4.4 抗血管治療影響Treg

VEGFA 可以通過不成熟DC 誘導(dǎo)Treg 生長，提示VEGFA/血管內(nèi)皮生長因子受體（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）通路在免疫調(diào)節(jié)中有重要意義。轉(zhuǎn)移性腎癌患者經(jīng)舒尼替尼治療可以降低Treg 數(shù)量，下降幅度與生存呈正相關(guān)[60]。在結(jié)直腸癌小鼠模型中應(yīng)用舒尼替尼和VEGFA 抗體治療能使Treg 數(shù)量和比例下降至正常水平，但不影響其他淋巴細(xì)胞亞群。結(jié)直腸癌患者應(yīng)用貝伐珠單抗聯(lián)合化療對比單純化療，Treg 數(shù)量和比例也有顯著下降[61]。抗血管治療中也會因Treg 導(dǎo)致耐藥。通過對VEGF 和VEGFR2 抑制劑耐藥的膠質(zhì)瘤模型研究發(fā)現(xiàn)，抗血管治療可以通過調(diào)節(jié)谷氨酸/胱氨酸逆向轉(zhuǎn)運體，增強(qiáng)Treg 功能，起到免疫抑制的作用，導(dǎo)致治療失敗[62]。因此抗血管治療聯(lián)合Treg抑制治療是避免耐藥的途徑之一。

4.5 免疫檢查點抑制劑對Treg 的影響

前文中已敘述多項關(guān)于免疫檢查點抑制劑聯(lián)合Treg 調(diào)節(jié)治療的策略，是有潛力的免疫治療聯(lián)合方案。免疫檢查點抑制劑治療本身也會對Treg產(chǎn)生影響，機(jī)制較為復(fù)雜。CTLA4 在Tconv 和Treg上都有表達(dá)，某些腫瘤中CTLA4 在Treg 上表達(dá)更高[63]，臨床前研究和臨床研究中發(fā)現(xiàn)CTLA4 單抗可以激活Teff，還可以通過ADCC 或抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的吞噬效應(yīng)（antibody-dependent cellular phagocytosis，ADCP）清除微環(huán)境中的Treg[64]，起到激活腫瘤免疫的作用。但某些試驗也有著不同的結(jié)果，Sharma 等[65]發(fā)現(xiàn)應(yīng)用伊匹木單抗（Ipilimumab）和替西木單抗（Tremelimumab）的惡性黑色素瘤、前列腺癌、膀胱癌患者腫瘤中Tconv 數(shù)量增加，而Treg 數(shù)量未發(fā)生改變，提示上述兩種藥物殺傷Treg的效應(yīng)有待證實。CTLA4 單抗耐藥的機(jī)制之一是腫瘤微環(huán)境中CCR4 配體上調(diào)，誘導(dǎo)Treg 聚集，應(yīng)用CCR4 抗體可以阻斷Treg 聚集，和CTLA4 單抗聯(lián)合應(yīng)用是逆轉(zhuǎn)耐藥的潛在靶點之一[66]。

Tconv 和Treg 都高表達(dá)PD-1，而PD-L1 則主要在Treg 上表達(dá)，該通路調(diào)控Treg 生成、活化以及Treg 與Tconv 的結(jié)合，所以PD-1/PD-L1 單抗對Treg的調(diào)控可能較為復(fù)雜。有的試驗中觀察到PD-1 單抗可以使微環(huán)境中Treg 減少，恢復(fù)抗腫瘤免疫。但動物實驗中也觀察到PD-1 可能是Treg 抑制功能的負(fù)調(diào)節(jié)信號，PD-1/PD-L1 單抗可以降低Treg 表面PD-1 的表達(dá)，增強(qiáng)抑制作用[67]。薈萃分析發(fā)現(xiàn)，在非小細(xì)胞肺癌、胃癌、惡性黑色素瘤患者中，PD-1/PD-L1單抗增加了PD-1陽性Treg的免疫抑制功能[68]。Koh 等[69]通過檢測非小細(xì)胞肺癌患者應(yīng)用PD-1單抗前后外周血中Treg數(shù)量和TGF-β，發(fā)現(xiàn)治療前高Treg 和TGF-β的人群治療反應(yīng)率高，PFS 和OS 延長，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。分離對免疫治療無應(yīng)答患者的Treg，體外培養(yǎng)分析發(fā)現(xiàn)，其表面PD-1 表達(dá)增高，并能抑制共培養(yǎng)中CD8+T 細(xì)胞的活性[70]。因此，腫瘤微環(huán)境中Treg 表面PD-1 的表達(dá)可能是潛在的免疫治療療效差的預(yù)測指標(biāo)。Kamada 等[71]通過對晚期胃癌患者和小鼠模型的研究發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)PD-1 的Treg 在接受PD-1 單抗后活性增加，抑制性增強(qiáng)，是免疫治療超進(jìn)展的機(jī)制之一。因此盡早識別該部分人群，并采用有效措施去除或減少Treg 可能成為預(yù)防超進(jìn)展的策略。

目前免疫檢查點抑制劑對Treg 的影響仍未完全闡明，需要在基礎(chǔ)研究和臨床研究中進(jìn)一步分析；Treg 表面PD-1/PD-L1 的表達(dá)也是值得探索的免疫治療療效、超進(jìn)展和免疫相關(guān)毒性的生物預(yù)測靶標(biāo)。

5 小結(jié)與展望

機(jī)體的免疫系統(tǒng)是復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，Treg 通過多種分子、激酶、細(xì)胞接觸等方式在抗原識別、抗原呈遞、免疫效應(yīng)階段起到抑制作用，對維持免疫穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。在腫瘤的免疫逃逸和免疫抑制中Treg扮演著重要的角色。免疫檢查點抑制劑是近年來腫瘤領(lǐng)域的重大進(jìn)展，在腫瘤治療中的地位日益凸顯；通過調(diào)控Treg 改善腫瘤抑制性微環(huán)境也是免疫治療的手段之一。高效、持久、特異性清除腫瘤微環(huán)境中的Treg 或下調(diào)Treg 功能，開發(fā)針對性的藥物，協(xié)同化療、放療、抗血管治療、免疫檢查點抑制劑等成熟的治療方式，能夠發(fā)揮更有效的抗腫瘤作用，也是提高療效、減少耐藥和減輕不良反應(yīng)的手段之一。因不同腫瘤微環(huán)境存在差異，Treg浸潤程度、Treg 亞型、Treg 分子表型不盡相同，腫瘤浸潤Treg 和外周Treg 也存在差別。因此，精準(zhǔn)檢測淋巴細(xì)胞亞群，合理分型，針對性施治也是未來需要探索的方向。