肉類食品中激素殘留的檢測技術分析

◎ 劉貴州，丘東蔚

（廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，廣東 廣州 510000)

肉類是我國居民飲食中的重要食品，肉類食品中含有人體所需要的營養(yǎng)元素。多年來，我國肉類食品需求量和產(chǎn)量不斷增加，其中豬、牛、羊成為最主要的肉類食品。肉類食品需求和產(chǎn)量增加，代表我國居民生活水平提高，同時伴隨而來的是肉類食品安全的問題。肉類食品中的激素問題頻繁出現(xiàn)，造成民眾食肉恐慌情緒，民眾對肉類食品質(zhì)量管理產(chǎn)生質(zhì)疑，也造成了肉類消費市場波動等問題。因此，在現(xiàn)代肉類食品中增加激素殘留檢測項目非常必要。

1 肉類食品激素殘留檢測的重要性

肉類食品激素殘留檢測的重要性在于食品安全。在肉類食品中之所以存在較多的激素，主要是畜禽類在飼養(yǎng)過程中添加較多的激素類飼料，促使動物快速生長。但是，養(yǎng)殖者僅看到了激素的“利”，卻忽略了激素的“弊”。研究發(fā)現(xiàn)，激素對動物生長會產(chǎn)生較大影響。例如，畜禽以及水產(chǎn)品中，使用性激素、生長激素、甲狀腺素、β-興奮劑等能夠提高動物增重速度，飼料轉(zhuǎn)化利用率高，繼而提升了經(jīng)濟效益。但是，這樣的畜禽以及水產(chǎn)品營養(yǎng)價值低，食用危害極大。

2 肉類食品激素殘留檢測的技術分析

2.1 殘留激素分離技術

①液-液萃?。↙LE）技術。該技術利用分離萃取原理，三氯甲烷作為萃取劑進行分離萃取，具有技術應用簡單，設備條件較低的優(yōu)勢。常規(guī)情況下，激素是穩(wěn)兩性基團，在堿性條件下提取后，調(diào)節(jié)溶液為中性或酸性萃取至有機相，樣品中激素提取率可達90% 以上。

②固相萃?。⊿PE）技術。這是一種較為常見的分離技術。固相萃?。⊿PE）技術分離效率相對比較高。該項技術在實際應用中，有機溶劑使用比較少，能夠減少對環(huán)境的污染。研究發(fā)現(xiàn)采用雙三甲基硅基三氟乙酰氨基作為萃取物進行萃取，回收率能夠達到75%~95%。

2.2 殘留激素檢測技術

在實際檢測工作過程中，由于在肉類食品中激素的含量非常低，所以，對檢測技術的精度、檢測技術的效率要求非常高。通過相關專家的不懈努力，已經(jīng)研究出多種激素殘留檢測方法，常見檢測技術主要有氣相色譜檢測法、高效液相色譜檢測法、免疫分析檢測法、毛細管電泳檢測法、氣質(zhì)聯(lián)用檢測法等。

①氣相色譜檢測法。氣相色譜檢測法是一種常見的技術，在檢測領域中的應用較為廣泛，同時具有檢測精度高、效率高的優(yōu)勢。在利用氣相色譜檢測技術進行檢測的過程中，需要先將激素樣品甲基硅烷化，利用火焰檢測器配合氣相色譜儀實施激素含量檢測。在具體檢測實施的過程中，采用2% OV-17作為填充物，有利于檢測能夠良好開展。

該檢測技術在應用過程中，主要利用激素的物理特性，因為激素本身具有沸點高、揮發(fā)性差的性質(zhì)，不太適用于氣相色譜檢測。但是，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，在實施檢測的過程中，可以利用氣相色譜檢測方法對鹽酸克侖特羅進行檢測，檢測樣品均質(zhì)，并利用超聲萃取進行凈化，凈化時要求采用C18小柱、利用HP-1石英毛細管柱程序升溫，完成以上兩項檢測。利用該方法進行檢測，平均回收率能夠達到86%，相關系數(shù)為0.999 3，線性范圍為0.1~40 mg·L-1。

②高效液相色譜法。高效液相色譜檢測方法在殘留激素檢測中具有良好的效果。該檢測技術應用比較廣泛，最早應用于20世紀70年代，具有高效分離的優(yōu)勢，能夠?qū)Ψ悬c高、摩爾質(zhì)量相對比較大的有機物進行檢測，效果良好，效率高。

相關專家在技術研究中提出，利用SB-C18 柱為固定相，甲醇-水（70∶30）為流動相，對殘留激素進行檢測，檢測效果最佳。通過對該技術研究發(fā)現(xiàn)，該技術方法回收效率超過85%。在檢測過程中，如果己烯雌酚濃度在 0~200 μg/kg 之內(nèi)，檢測值相關系數(shù)超過0.999、靈敏度達到0.15 mg/kg。

在高效液相色譜檢測方法應用過程中，相關專家提出以60% 甲醇超聲提取，用Dianon sil C18 柱為固定相，甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氫鈉(33∶67)為流動相進行檢測。在實施檢測的過程中發(fā)現(xiàn)，該檢測方法要求檢測回收率超過86%、固相萃取檢測實施過程中，可以采用雌雄性激素進行殘留檢測。

高效液相色譜檢測對激素檢測具有良好的適應性。因此，相關專家一直都在針對不同液相和固相進行更換，探討最佳檢測方法。例如，我國化學研究專家已經(jīng)提出甲醇為洗脫液，SUPELCO Discovery C18 5 μm 250 × 4.6 mm 柱為固定相，流動相為甲醇 - 水（85∶15）的相關檢測方法。測算該檢測方法的相關系數(shù)能夠達到0.999、檢出限為9.55 μg/kg、回收效率能夠達到92%~98%，通過回收效率就能確認現(xiàn)代高效液相色譜檢測方法較傳統(tǒng)方法已經(jīng)有非常大的進步，對于激素檢測實施也有重要的影響[1]。

目前，高效液相色譜檢測方法在檢測中應用，已經(jīng)開始提出多激素檢測技術。傳統(tǒng)檢測方法在應用的過程中，單一激素需要置換固相和液相流動相，從而導致檢測效率下降。因此，為解決該問題，相關專家在檢測技術研究過程中針對該技術問題進行深入分析，并提出處理方法。例如，林奕芝等專家在對高效液相色譜檢測方法進行研究的過程中提出HPLC 法，該方法主要流程包括甲醇超聲萃取、離心、濃縮等多項技術，在技術應用過程中，使用0.45 μm FH 膜進行過濾效果更好，從而提升了檢測效率，同時也能夠達到多種元素檢測效果。該檢測方法能夠?qū)Πㄉ扯〈荚趦?nèi)的8種雌性激素進行檢測。最終測定該檢測方法在應用過程中，相關系數(shù)達到0.999，回收率在 84.5%~101%之間，更加滿足現(xiàn)代檢測技術的應用條件，有利于檢測工作良好實施，提升檢測工作質(zhì)量[2]。

2.3 免疫法檢測方法應用

實踐研究發(fā)現(xiàn)，該檢測方法具有良好的檢測效果，操作簡單，靈敏度能夠達到10 ~12 g，其主要確定就是較高的假陽性。因此，該檢測方法經(jīng)常在殘留分析初篩時應用。

①酶聯(lián)免疫分析方法。該檢測方法應用相對廣泛，主要是利用酶聯(lián)競爭的原理進行檢測。相關專家已經(jīng)研究應用丁胺醇殘留酶聯(lián)免疫試劑盒，該試劑盒進行檢測，確認檢測下限為0.1 ng/g、回收檢測率能夠達到75%~105%。另外，相關專家對該方法進行檢測創(chuàng)新，設計應用鹽酸克侖特羅酶聯(lián)免疫試劑盒，該檢測方法能夠?qū)崿F(xiàn)12.5~0.1 ng/mL范圍檢測，相關系數(shù)能夠達到0.998 0、靈敏度也達到0.1 ng/g[3]。

②放射免疫分析法（RIA）是一種比較常見的檢測方法，可以利用生物化學方法進行免疫檢測。微生物活性物質(zhì)具有一定的優(yōu)越性，可以通過生物化學試驗分析活躍度，繼而實現(xiàn)對激素中相關位置的檢測，從而保證檢測達到最佳效果。最初該檢測方法在應用的過程中，不能夠滿足超微量分析精度，因此對激素殘留檢測的效果也不是很好。基于此，提出RIA試劑盒測定方法，該方法能夠?qū)ε８沃械柠}酸克侖特羅進行檢測。通過試驗確定，RIA試劑盒測定方法在檢測實施過程中，能夠提升檢測工作效率，在進行檢測的過程中，當鹽酸克侖特羅的量分別為1 ng/g和2.5 ng/g時，數(shù)據(jù)回收率分別達到95%± 15% 和 89% ± 9 %，通過數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，該檢測工作效率靈敏度比較高。但是，半衰期相對比較短、輻射比較少，從而導致其應用不夠廣泛[4]。

2.4 肉類食品激素殘留檢測技術標準研究

通過本文研究發(fā)現(xiàn)，肉類食品激素殘留檢測技術種類非常多，適合應用于不同肉類、不同激素檢測。我國相關部門還在推動探究新技術，從而解決技術問題，提升檢測技術應用效率。例如，當前我國的肉類食品檢測包括多種，有牛肉中β-雌二醇殘留量的測定、等標準化檢測，更有利于提升檢測精度[5]。

3 結(jié)語

本文針對肉類食品激素殘留檢測技術進行分析，提出多種檢測技術和標準。為確保我國肉類食品使用安全，需要繼續(xù)研發(fā)新技術進行檢測，提升檢測工作效率。