細(xì)菌性膿毒癥患者外周血Th1、Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答檢測及臨床意義

鄧雪平,譚艷桃,林永波,陳宇鋒,蕭飛,黎璐茜,柯霞（廣東省茂名市人民醫(yī)院,廣東 茂名 525000）

膿毒癥指機(jī)體遭受感染、創(chuàng)傷等造成的免疫應(yīng)答失衡性病變，病情具有危重性，特別是細(xì)菌性膿毒癥還具有較強(qiáng)致死性及較高發(fā)病率的特征[1]。機(jī)體免疫功能受損、免疫應(yīng)答機(jī)制紊亂則主要體現(xiàn)在T淋巴細(xì)胞和脾臟細(xì)胞凋亡功能顯著降低，包含輔助性T淋巴細(xì)胞和相應(yīng)免疫應(yīng)答、T淋巴細(xì)胞和相應(yīng)免疫應(yīng)答。其中T淋巴細(xì)胞的主要亞群為輔助性T淋巴細(xì)胞，此在細(xì)菌性膿毒癥患者中抑制病情發(fā)展具備關(guān)鍵性功效[2]。同時，輔助性T淋巴細(xì)胞也可按照其功能分為兩個細(xì)胞亞群，即Th2、Th1，可通過Th1/Th2比值改變評估機(jī)體抗炎性反應(yīng)和炎性反應(yīng)等免疫應(yīng)答是否紊亂[3]，此為輔助性T淋巴細(xì)胞在疾病變化中的基礎(chǔ)。本研究通過分析細(xì)菌性膿毒癥患者，測得其外周血Th1、Th2細(xì)胞和相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物，并分析與病情之間的關(guān)系，以為臨床評估病情提供一定支持。具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年6月-2022年9月ICU收治的50例細(xì)菌性膿毒癥患者作為觀察組，另選取同時期到院的50例ICU非膿毒癥患者作為對照組。觀察組：女性22例、男性28例；年齡41-68歲，平均（52.35±1.02）歲；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）為21.32-27.54kg/m2，平均（24.35±1.02）kg/m2。對照組：女性24例、男性26例；年齡42-69歲，平均（52.65±1.05）歲；BMI指數(shù)為21.65-27.65kg/m2，平均（24.65±1.05）kg/m2。兩組患者基本資料比較，差異不顯著（P＞0.05）。本研究方案經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)后實施。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組患者滿足《中國嚴(yán)重膿毒癥/膿毒性休克治療指南》[4]中細(xì)菌性膿毒癥判定標(biāo)準(zhǔn)；②家屬和研究對象均知情簽字；③有完整病歷。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①全身免疫性病變者；②激素用藥者；③慢性病變者，如糖尿病、高血壓等；④長時間應(yīng)用糖皮質(zhì)激素者；⑤中毒性腎功能異?；蚣谞钆韵俟δ墚惓Ｕ撸虎扪簝艋驘齻颊?；⑦惡性腫瘤者；⑧血液性疾病者，如白血病、再生障礙性貧血等。

1.3 方法 兩組患者入住ICU后及時接受急性生理與慢性健康狀況II評分（APACHE II評分）[5]評估，包含慢性健康評分、年齡評分、急性生理評分三個方面，得分越高則提示病情越重，疾病死亡率越高，預(yù)后越差。

同時采集其外周靜脈血液5ml，用Beckman流式細(xì)胞分析儀（FCM）測得Th2、Th1指標(biāo)和相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物，包含IL-4、CD8+、IL-10、IFN-γ、CD3+、CD4+。

1.4 指標(biāo)判定 此次實驗室檢驗項目由2名專業(yè)且工作經(jīng)驗豐富的醫(yī)生負(fù)責(zé)，若發(fā)生分歧則根據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)商討確定結(jié)果。分析對照組與觀察組患者APACHE II評分，以及Th2、Th1和相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 用統(tǒng)計學(xué)軟件（SPSS22.0版本）分析數(shù)據(jù)，Th2細(xì)胞、Th1細(xì)胞、APACHE II評分、免疫應(yīng)答產(chǎn)物等計量數(shù)據(jù)以（）表示，用t檢驗，用Pearson法分析細(xì)菌性膿毒癥患者APACHE II評分與Th1/Th2比值之間的關(guān)系，若P＜0.05，則表示有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組APACHE II評分比較 比較兩組APACHE II評分，組間數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組APACHE II評分比較(,分)

表1 兩組APACHE II評分比較(,分)

2.2 兩組IFN-γ、CD3+、CD4+、Th1指標(biāo)比較 觀察組CD3+高于對照組，CD4+、Th1低于對照組（P＜0.05），對比IFN-γ值，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組IFN-γ、CD3+、CD4+、Th1指標(biāo)比較(,%)

表2 兩組IFN-γ、CD3+、CD4+、Th1指標(biāo)比較(,%)

2.3 兩組IL-6、CD8+、IL-10、Th2指標(biāo)比較 觀察組IL-6、CD8+、IL-10、Th2均高于對照組（P＜0.05），見表3。

表3 兩組IL-6、CD8+、IL-10、Th2指標(biāo)比較(,%)

表3 兩組IL-6、CD8+、IL-10、Th2指標(biāo)比較(,%)

2.4 APACHE II評分與外周血Th1/Th2比值之間的關(guān)系 觀察組患者Th1/Th2比值為（0.54±0.15），低于對照組的（2.65±0.52），分析Pearson相關(guān)性后得知，觀察組Th1/Th2比值與APACHE II評分為負(fù)性關(guān)系，即r=-0.665，P為0.014，對照組患者Th1/Th2比值與APACHE II評分之間無明顯關(guān)系，即r=0.516，P=0.125。

3 討論

細(xì)菌性膿毒癥病變與免疫應(yīng)答反應(yīng)有密切關(guān)聯(lián)[6]，抗炎和促炎兩者的穩(wěn)定性對機(jī)體細(xì)菌性膿毒癥病情轉(zhuǎn)歸和發(fā)展有直接的影響，一旦發(fā)生免疫應(yīng)答紊亂，則會進(jìn)一步加重病變，甚至導(dǎo)致患者直接因病死亡[7]。細(xì)菌性膿毒癥機(jī)體中所存在的免疫應(yīng)答反應(yīng)，T淋巴細(xì)胞亞群有直接性參與作用，如輔助性T淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞對機(jī)體病情的發(fā)生和發(fā)展有促進(jìn)作用[8]。此免疫應(yīng)答反應(yīng)主要包含CD8+毒性效果和CD4+抗原功能降低，以及Th2增高、Th1降低等，同時Th2和Th1均直接參與多種疾病病變，如惡性腫瘤、自身免疫性病變、細(xì)菌感染等[9]。細(xì)菌性膿毒癥屬于臨床非常常見的危重性病變，Th1、Th2亞型也在細(xì)菌性膿毒癥病變中有重要參與作用。

機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)中，Th1、Th2兩者具備相反的作用。Th1能產(chǎn)生CD3+、CD4+、IFN-γ等免疫應(yīng)答產(chǎn)物，其中具有代表性的產(chǎn)物為IFN-γ，其產(chǎn)生的CD3+、CD4+、IFN-γ均能侵入至體內(nèi)病毒，發(fā)揮殺傷和分化病毒、細(xì)菌的功效，主要經(jīng)非溶細(xì)胞機(jī)制對病毒和細(xì)菌產(chǎn)生殺傷效果，進(jìn)而降低病毒、細(xì)菌水平。Th2則主要產(chǎn)生IL-6、CD8+、IL-10，其中具有代表性的產(chǎn)物為IL-6細(xì)胞因子，IL-6、CD8+、IL-10均對機(jī)體炎性因子生成有促進(jìn)作用，抑制增高機(jī)體抗炎因子，進(jìn)而造成機(jī)體T淋巴細(xì)胞免疫功能異常。此次研究結(jié)果顯示，觀察組CD3+高于對照組，CD4+、Th1低于對照組（P＜0.05），觀察組IL-6、CD8+、IL-10、Th2高于對照組（P＜0.05），此結(jié)果與陳新龍[10]等學(xué)者的報告結(jié)果相符，均表明細(xì)菌性膿毒癥患者體內(nèi)存在Th2介導(dǎo)的IL-6、CD8+、IL-10免疫應(yīng)答和Th1介導(dǎo)的CD3+、CD4+、IFN-γ免疫應(yīng)答，其在病變中發(fā)揮了關(guān)鍵性作用，即Th1指標(biāo)降低，則能進(jìn)一步降低細(xì)菌殺傷能力，Th2指標(biāo)增高，則會降低機(jī)體免疫功能。經(jīng)研究結(jié)果也可推論出，IL-6、CD8+、IL-10和CD3+、CD4+、IFN-γ可分別評估機(jī)體Th1、Th2指標(biāo)在免疫應(yīng)答中的狀態(tài)和功能，但二者的比值（Th1/Th2）漂移方向才為評估機(jī)體炎性反應(yīng)的關(guān)鍵。有報告[11]稱，人體在健康狀況下，Th1/Th2具有動態(tài)平衡性，能保持穩(wěn)定的免疫應(yīng)答功能。目前已有學(xué)者[12]稱，自身免疫性病變往往出現(xiàn)Th1漂移，也就是Th1/Th2比值明顯增高，即Th2指標(biāo)降低、Th1指標(biāo)增高，而在支氣管哮喘、腫瘤等病變中則體現(xiàn)為Th2漂移，Th1/Th2比值降低。細(xì)菌膿毒癥患者體內(nèi)發(fā)生Th2漂移，可讓機(jī)體免疫功能紊亂。此次結(jié)果也顯示，觀察組Th1/Th2比值明顯更低（P＜0.05），表明其漂移方式為Th2漂移，其原因為細(xì)菌性膿毒癥病變的關(guān)鍵。此外，經(jīng)分析相關(guān)性，也再次證實了此結(jié)果，即Th1/Th2比值明顯降低，提示細(xì)菌性膿毒癥者病情更為嚴(yán)重。

綜上所述，細(xì)菌性膿毒癥患者體內(nèi)免疫應(yīng)答和Th1/Th2比值有明顯失衡狀態(tài)，且Th1/Th2比值失衡和疾病病情關(guān)系密切，通過檢測患者體內(nèi)外周血Th1/Th2比值、免疫應(yīng)答產(chǎn)物等，有助于評估疾病病情。