細(xì)菌性血流感染鑒別診斷中PCT及IL-6水平檢測(cè)的臨床價(jià)值

謝中意 李致富 黃昀

細(xì)菌性血流感染為全身性感染疾病，通常是由金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎鏈球菌等入侵血液、參與血液循環(huán)引起的，公共場(chǎng)所較為常見(jiàn)[1]。疾病發(fā)生后，患者可出現(xiàn)不同程度發(fā)熱、寒戰(zhàn)、皮疹、呼吸急促癥狀，病情嚴(yán)重者可出現(xiàn)感染性休克和多臟器功能衰竭等情況，甚至危及生命安全[2]。因此，臨床應(yīng)重視疾病早期診斷，及時(shí)采取對(duì)癥治療措施，以延緩病程降低死亡風(fēng)險(xiǎn)。目前，臨床主要以患者臨床表現(xiàn)為判定依據(jù)來(lái)選擇用藥方式；但該方式過(guò)于依賴個(gè)人經(jīng)驗(yàn)，加上疾病表現(xiàn)特異性不足，可能出現(xiàn)不合理用藥情況，使得患者耐藥性增加，影響抗菌效果。血培養(yǎng)為疾病診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”，但耗時(shí)長(zhǎng)，易為外界環(huán)境干擾；出現(xiàn)假陰性結(jié)果，影響疾病早期診斷，可耽誤最佳治療時(shí)機(jī)，增加疾病復(fù)雜程度和治療難度[3]。分子生物學(xué)檢測(cè)速度快、準(zhǔn)確率高，但技術(shù)要求高、成本貴，無(wú)法應(yīng)用至大范圍篩查中。現(xiàn)階段，免疫技術(shù)迅速發(fā)展，炎癥因子在該疾病的診斷中被廣泛應(yīng)用。降鈣素原（procalcitonin，PCT）為免疫調(diào)節(jié)蛋白，機(jī)體狀態(tài)正常時(shí)，其水平極低，細(xì)菌感染后，其水平明顯上升，可用于疾病鑒別診斷[4]。白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）是機(jī)體炎癥反應(yīng)的重要參與者，其水平可反映感染性疾病嚴(yán)重程度[5]。細(xì)菌性血流感染包括革蘭陽(yáng)性菌感染和革蘭陰性菌感染，致病菌不同，發(fā)病機(jī)制也存在差異；需準(zhǔn)確評(píng)估致病菌類型，鑒別診斷疾病，為治療方案的選擇提供依據(jù)[6]。為此筆者對(duì)PCT和IL-6在細(xì)菌性血流感染鑒別診斷中的應(yīng)用情況進(jìn)行了總結(jié)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

文章納入細(xì)菌性血流感染患者90例，就診時(shí)間為2020年6月—2022年6月，設(shè)置同期90名健康體檢者為對(duì)照組。觀察組49例男性，41例女性，年齡22～75歲，平均（49.57±6.12）歲；病程3～12 d，平均（7.78±2.21）d；感染類型：革蘭陽(yáng)性菌47例（21例金黃色葡萄球菌感染，15例凝固酶陰性葡萄球菌感染，11例鏈球菌感染），革蘭陰性菌43例（18例大腸埃希菌感染，15例肺炎克雷伯菌感染，6例鮑曼不動(dòng)桿菌感染，4例銅綠假單胞菌感染）；血培養(yǎng)結(jié)果評(píng)估感染嚴(yán)重程度：輕度35例，中度31例，重度24例。對(duì)照組44名男性，46名女性，年齡24～75歲，平均（50.16±6.24）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）觀察組均為細(xì)菌性血流感染患者。（2）年齡＞20歲。（3）患者意識(shí)清楚，主動(dòng)配合研究。（4）資料較為完整，數(shù)據(jù)真實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）心、腦、肝、腎結(jié)構(gòu)與功能異常者。（2）免疫系統(tǒng)疾病患者或結(jié)締組織病變患者。（3）其他類型感染疾病者。（4）血清標(biāo)本不合格者。（5）惡性腫瘤患者。研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)，研究對(duì)象了解研究詳情，且自愿參與。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑

醫(yī)用離心機(jī)（生產(chǎn)廠家：長(zhǎng)沙高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)區(qū)湘儀離心機(jī)儀器有限公司，備案號(hào)：湘長(zhǎng)械備20160113號(hào)，型號(hào)規(guī)格：CTKI20C）；全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（生產(chǎn)廠家：深北京熱景生物技術(shù)股份有限公司，醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào)/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)：國(guó)械注準(zhǔn)20183220505，型號(hào)規(guī)格：C200）；IL-6測(cè)定試劑盒（磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法）（生產(chǎn)廠家：深北京熱景生物技術(shù)股份有限公司，醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào)/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)：京械注準(zhǔn)：20172400287，規(guī)格：90人份/盒）。

1.2.2 檢測(cè)方法

檢查前，逐項(xiàng)核對(duì)研究對(duì)象的姓名、年齡和編號(hào)等信息，向其說(shuō)明檢查流程，耐心解答研究對(duì)象的疑問(wèn)，確保其情緒穩(wěn)定；叮囑研究對(duì)象檢查前保持12 h空腹?fàn)顟B(tài)，抽取3～5 mL外周靜脈血，使用離心機(jī)對(duì)血液樣本行離心處理（速度為3000 r/min，時(shí)間為10 min），將分離所得清液作為待測(cè)標(biāo)本。檢測(cè)流程：（1）試劑準(zhǔn)備：試劑平衡至室溫開(kāi)始，將500 μL校準(zhǔn)品稀釋液加入校準(zhǔn)品1（calpain-1，CAL-1）和校準(zhǔn)品2（calpain-2，CAL-2）中，室溫平衡30 min后檢測(cè)。（2）錄入校準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)：打開(kāi)儀器軟件，進(jìn)入曲線添加界面，掃描添加或是手動(dòng)輸入。（3）加樣：將100 μL校準(zhǔn)品加入儀器對(duì)應(yīng)樣本孔，適量血清樣本（＞100 μL）加入儀器樣本位，點(diǎn)擊開(kāi)始。（4）混樣：儀器自動(dòng)吸取樣本、標(biāo)記樣本和包被抗體，各為50 μL，混勻。（5）溫育：在37℃條件下溫育混合樣本30 min。（6）清洗：溫育完成后反復(fù)清洗3次。（7）檢測(cè)：儀器自動(dòng)吸取底物液，混合均勻，測(cè)光，經(jīng)儀器計(jì)算輸出濃度數(shù)據(jù)。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 兩組血清指標(biāo)對(duì)比

比較對(duì)照組與觀察組患者PCT與IL-6水平。

1.3.2 不同類型細(xì)菌感染患者血清指標(biāo)水平

比較革蘭陽(yáng)性菌感染與革蘭陰性菌感染患者PCT、IL-6水平。

1.3.3 不同程度感染患者血清指標(biāo)水平

比較輕度、中度與重度患者PCT、IL-6水平。

1.3.4 診斷效能

采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評(píng)估PCT和IL-6單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)在革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌血流感染鑒別診斷的臨床價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理軟件為SPSS 25.0，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，檢驗(yàn)采用χ2；計(jì)量資料符合正態(tài)分布，以（±s）表示，檢驗(yàn)采用t或F檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清指標(biāo)對(duì)比

與對(duì)照組比較，觀察組PCT、IL-6水平更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 觀察組與對(duì)照組血清指標(biāo)對(duì)比（±s）

表1 觀察組與對(duì)照組血清指標(biāo)對(duì)比（±s）

組別例數(shù)PCT（ng/mL）IL-6（pg/mL）對(duì)照組900.03±0.012.18±0.44觀察組901.48±0.2160.96±7.16 t值-65.43077.735 P值-＜0.001＜0.001

2.2 不同類型細(xì)菌感染患者血清指標(biāo)水平比較

革蘭陽(yáng)性菌與革蘭陰性菌感染患者IL-6水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與革蘭陽(yáng)性菌感染患者相比，革蘭陰性菌感染患者PCT水平更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 革蘭陽(yáng)性菌感染與革蘭陰性菌感染患者血清指標(biāo)水平比較（±s）

表2 革蘭陽(yáng)性菌感染與革蘭陰性菌感染患者血清指標(biāo)水平比較（±s）

組別例數(shù)PCT（ng/mL）IL-6（pg/mL）革蘭陽(yáng)性菌感染470.78±0.2559.18±7.45革蘭陰性菌感染431.56±0.5261.78±7.72 t值-9.1911.625 P值-＜0.0010.108

2.3 不同程度感染患者血清指標(biāo)水平比較

與輕度患者比較，中度與重度患者PCT、IL-6水平更高，重度患者PCT、IL-6水平明顯高于輕度和中度患者，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 輕度、中度與重度感染患者血清指標(biāo)水平比較（±s）

表3 輕度、中度與重度感染患者血清指標(biāo)水平比較（±s）

注：PCT：t輕度vs.中度=12.293，P輕度vs.中度＜0.001；t輕度vs.重度=23.611，P輕度vs.重度＜0.001；t中度vs.重度=13.860，P中度vs.重度＜0.001；IL-6：t輕度vs.中度=26.796，P輕度vs.中度＜0.001；t輕度vs.重度=68.975，P輕度vs.重度＜0.001；t中度vs.重度=44.072，P中度vs.重度＜0.001。

感染程度例數(shù)PCT（ng/mL）IL-6（pg/mL）輕度351.21±0.2424.54±5.32中度312.06±0.3262.27±6.12重度243.72±0.56150.24±8.68 t值-320.8022604.066 P值-＜0.001＜0.001

2.4 診斷效能

PCT聯(lián)合IL-6鑒別診斷不同類型細(xì)菌性血流感染的靈敏度更高，參數(shù)見(jiàn)表4和圖1。

表4 診斷效能

圖1 PCT聯(lián)合IL-6鑒別診斷細(xì)菌性血流感染ROC曲線圖

3 討論

血流感染是病原微生物（包括真菌、細(xì)菌在內(nèi)）入侵血流所致全身性炎癥反應(yīng)綜合征，菌血癥、敗血癥、膿毒血癥、全身炎癥反應(yīng)綜合征均包括在內(nèi)[7]。細(xì)菌性血流感染為疾病主要類型，機(jī)體免疫功能低下、侵入性操作等因素的影響，可增加致病菌入侵風(fēng)險(xiǎn)；在宿主血液內(nèi)大量生長(zhǎng)繁殖，并釋放毒性代謝產(chǎn)物，導(dǎo)致全身性感染疾病。疾病發(fā)生后進(jìn)展迅速，可使得多種組織系統(tǒng)受累，引起炎癥損傷，甚至發(fā)展為感染性休克和多臟器功能衰竭等，對(duì)患者生命安全構(gòu)成威脅[8]?，F(xiàn)階段，導(dǎo)管等醫(yī)療器械使用范圍不斷擴(kuò)大、抗生素也在感染性疾病的治療中被廣泛應(yīng)用，細(xì)菌性感染發(fā)生率明顯上升；需注重疾病鑒別診斷，及時(shí)采取干預(yù)措施，以控制疾病發(fā)展進(jìn)程，減少不良預(yù)后的發(fā)生。

研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌感染發(fā)生發(fā)展與炎癥因子水平有相關(guān)性。血清指標(biāo)檢測(cè)操作簡(jiǎn)便，方便快捷，可重復(fù)進(jìn)行。機(jī)體處于炎癥狀態(tài)時(shí)，可改變炎癥因子水平，可對(duì)相關(guān)指標(biāo)水平進(jìn)行檢測(cè)，以判定患者有無(wú)感染情況，鑒別感染類型[9]。PCT為糖蛋白，由甲狀腺C細(xì)胞分泌而來(lái)，其組成部分包括116個(gè)氨基酸，屬于降鈣素前肽物，細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染、膿毒癥和多臟器功能衰竭等感染性病變均可導(dǎo)致其水平明顯上升，不受病毒感染、自身免疫狀態(tài)和過(guò)敏反應(yīng)的影響[10]。此外，細(xì)菌感染局限性存在時(shí)或慢性炎癥反應(yīng)基本不影響其水平。該指標(biāo)可準(zhǔn)確反映全身炎癥狀態(tài)，被感染器官類型、大小、致病菌類型、炎癥反應(yīng)程度和宿主免疫狀態(tài)均對(duì)其水平有影響。它是診斷與鑒別細(xì)菌炎性疾病感染的重要參數(shù)之一，可準(zhǔn)確區(qū)分細(xì)菌性和非細(xì)菌性炎癥反應(yīng)，也可判定疾病嚴(yán)重性，評(píng)估治療效果，預(yù)測(cè)疾病預(yù)后[11]。機(jī)體狀態(tài)正常時(shí)，PCT水平極低（＜0.05 ng/mL），在致病菌誘導(dǎo)下，2～4 h后其水平開(kāi)始增加，6～8 h后迅速上升，12～48 h其濃度達(dá)到峰值；對(duì)癥干預(yù)2～3 d后，可逐漸降至正常水平。細(xì)菌內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子-α等因素作用于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，可有PCT釋放；其為次級(jí)炎癥因子，并非膿毒血癥直接參與者，但可加重病情，推動(dòng)疾病發(fā)展。IL-6為趨化因子家族成員，由多種細(xì)胞產(chǎn)生，并在多種細(xì)胞上發(fā)揮作用；與血細(xì)胞生長(zhǎng)因子聯(lián)合，可有協(xié)調(diào)作用，可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫狀態(tài)；另外，它也在信息傳遞、免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)、T細(xì)胞與B細(xì)胞活化、增殖分化和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用。該細(xì)胞由Th2輔助細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，生物效應(yīng)復(fù)雜；作為肝細(xì)胞刺激因子，可在感染所致急性炎癥反應(yīng)中誘導(dǎo)急性期反應(yīng)蛋白合成，參與炎癥反應(yīng)。它是一種功能廣泛的細(xì)胞因子，是炎癥反應(yīng)過(guò)程的重要參與者。細(xì)菌性血流感染發(fā)生后，IL-6首先生成，在此基礎(chǔ)上誘導(dǎo)PCT產(chǎn)生，與炎癥反應(yīng)程度密切相關(guān)[12]。

上述對(duì)比顯示，觀察組PCT、IL-6水平更高，且患者病情越嚴(yán)重，血清因子水平越高；可見(jiàn)細(xì)菌性血流感染可導(dǎo)致機(jī)體大量釋放炎癥因子，使得PCT、IL-6水平在短時(shí)間內(nèi)迅速上升，疾病嚴(yán)重程度增加，血清指標(biāo)水平隨之上升，既可用于疾病鑒別診斷，也可判定疾病嚴(yán)重性。

細(xì)菌主要分為革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌兩類，前者可產(chǎn)生外毒素，對(duì)青霉素敏感，后者可產(chǎn)生內(nèi)毒素，對(duì)鏈霉素、氯霉素敏感。微生物和毒素是導(dǎo)致血流感染后炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的重要物質(zhì)，膿毒癥休克患者血液內(nèi)毒素含量高，可導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)。本研究對(duì)比顯示，兩組IL-6水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），革蘭陰性菌感染患者PCT水平更高（P＜0.05）；可見(jiàn)PCT可用于鑒別診斷革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌血流感染，主要因?yàn)楦锾m陰性菌壁上存在脂多糖，生物學(xué)效應(yīng)廣泛，為內(nèi)毒素主要致病因素，可引發(fā)全身炎癥反應(yīng)，與凌利芬等[13]的研究結(jié)論一致。進(jìn)一步對(duì)比顯示，PCT聯(lián)合IL-6鑒別診斷革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌血流感染的靈敏度和特異度最佳；主要是因?yàn)閮H用PCT或IL-6鑒別診斷疾病，僅可反映細(xì)菌性血流感染某一方面的特征，獲取的信息較為片面，聯(lián)合檢測(cè)方式可克服這一不足，獲得更為豐富的信息，可全面評(píng)估疾病性質(zhì)，實(shí)現(xiàn)疾病的準(zhǔn)確診斷。文章中體現(xiàn)了《血流感染實(shí)驗(yàn)診斷與臨床診治》[14]中的臨床參考或執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，PCT與IL-6可用于診斷細(xì)菌性感染，評(píng)估其嚴(yán)重程度，聯(lián)合檢測(cè)可區(qū)分細(xì)菌性感染類型，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。