免疫檢查點(diǎn)分子在妊娠中的研究進(jìn)展

王藝絢，連 方，龐聰慧，于曉娜，官 璐

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250014；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬中西醫(yī)結(jié)合生殖與遺傳中心，山東 濟(jì)南 250014）

免疫檢查點(diǎn)分子是在多種免疫細(xì)胞表面觀察到的共抑制受體，與特異性配體結(jié)合后，這些分子能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制信號(hào)到細(xì)胞內(nèi)負(fù)性調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白（CTLA‐4）、程序性細(xì)胞死亡蛋白（PD‐1）、T 細(xì)胞免疫球蛋白和黏蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白‐3（Tim‐3）是目前被研究最多的免疫檢查點(diǎn)分子，它們的基本生理功能是通過負(fù)性調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞，抑制免疫細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，來防止免疫系統(tǒng)過度激活。因此，這些分子能夠在誘導(dǎo)移植耐受、腫瘤免疫逃逸和預(yù)防自身免疫等方面發(fā)揮重大作用。

正常胚胎不被母體所排斥，且被允許在子宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育直至分娩，這有賴于母胎界面微妙的免疫調(diào)節(jié)。免疫檢查點(diǎn)分子廣泛存在于母胎界面，誘導(dǎo)母體產(chǎn)生免疫耐受，減弱免疫排斥反應(yīng)。這些分子的缺失或失調(diào)可能會(huì)干擾母體‐胎兒之間的對(duì)話，引發(fā)免疫失衡，進(jìn)而導(dǎo)致妊娠丟失或其他妊娠并發(fā)癥的發(fā)生。本文就目前主要免疫檢查點(diǎn)分子在妊娠中的免疫調(diào)節(jié)作用作一綜述，以幫助評(píng)估其在妊娠和妊娠并發(fā)癥中的潛在效用。

1 CTLA-4

CTLA‐4 是最早被發(fā)現(xiàn)的免疫檢查點(diǎn)受體，主要在調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（Tregs 細(xì)胞）中作為細(xì)胞內(nèi)蛋白組成性表達(dá)?；罨?，CTLA‐4 在Tregs 細(xì)胞表面表達(dá)，也在CD4+或CD8+T 細(xì)胞的表面被發(fā)現(xiàn)。CTLA‐4 的主要抑制作用在于它以比T 細(xì)胞活化受體CD28 高十倍的親和力競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合存在于抗原提呈細(xì)胞表面（APCs）的B7 配體CD80/CD86，進(jìn)而抑制T 細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期進(jìn)程和T 細(xì)胞分化等［1］。此外，CTLA‐4 通過與CD80/CD86 結(jié)合誘導(dǎo)APCs 表達(dá)吲哚胺2，3‐雙加氧酶（IDO）的能力也被認(rèn)為是其增強(qiáng)T 細(xì)胞免疫抑制的重要機(jī)制［2］。

1.1 CTLA‐4 在妊娠中的作用

在流產(chǎn)傾向鼠交配的母胎界面CTLA‐4 表達(dá)顯著降低，用抗CD80 和抗CD86 mAb 阻斷CD28/B7 途徑可將CD4+脾T 細(xì)胞中細(xì)胞因子從Th1 優(yōu)勢(shì)轉(zhuǎn)移到對(duì)妊娠有益的Th2 優(yōu)勢(shì)并擴(kuò)展外周Tregs細(xì)胞群體以及增強(qiáng)CTLA‐4 的表達(dá)，進(jìn)而降低胎鼠的 丟 失 率［3］。阻 止CD80/CD86 與CD28 的 結(jié) 合 被認(rèn)為是CTLA‐4 免疫抑制作用的經(jīng)典方式，因此其在提高母胎耐受中可能具有相似作用。CTLA‐4Ig融合蛋白實(shí)驗(yàn)為CTLA‐4 的免疫抑制能力提供了進(jìn)一步證據(jù)。CTLA‐4Ig 擴(kuò)大了易流產(chǎn)小鼠模型的外周Tregs 細(xì)胞群體，下調(diào)Th17 細(xì)胞的表達(dá)，也使血清和胎盤組織培養(yǎng)上清液中的細(xì)胞因子水平向Th2 偏移，并誘導(dǎo)了母胎界面上IDO 和Tregs 的主要調(diào)節(jié)因子叉狀頭轉(zhuǎn)錄因子3 的表達(dá)，改善小鼠的妊 娠 結(jié) 局［4］。腺 病 毒 介 導(dǎo) 的 CTLA4Ig 轉(zhuǎn) 基 因（Ad‐CTLA4Ig）治療也可通過抑制小鼠母體脾淋巴細(xì)胞的增殖和調(diào)節(jié)胎盤單位的凋亡來改善自然流產(chǎn)的結(jié)果［5］。

在人類妊娠早期，外周Tregs 細(xì)胞數(shù)量增加，但正常妊娠者和早孕期自然流產(chǎn)婦女外周血CD4+CD25+T 細(xì)胞內(nèi)CTLA‐4 分子表達(dá)水平無顯著性差異，自然流產(chǎn)患者外周CD28 分子的表達(dá)水平卻顯著高于早孕期正常妊娠者，提示人早孕期婦女外周血CD28+T 細(xì)胞降調(diào)節(jié)可能比CTLA‐4+T細(xì)胞升調(diào)節(jié)更為重要［6，7］。與外周相比，蛻膜Tregs細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)一步增加，在蛻膜Tregs 細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的CTLA‐4 表 達(dá) 的 頻 率 也 有 所 增 強(qiáng)［8］。蛻 膜CT‐LA‐4 的表達(dá)與蛻膜Th2 細(xì)胞因子的產(chǎn)生呈顯著正相關(guān)，與Th1 細(xì)胞因子的產(chǎn)生呈負(fù)相關(guān)，CTLA‐4 的高表達(dá)有助于其抑制母體對(duì)同種異體胎兒的免疫反應(yīng)，并增加胎兒存活率［9.10］。然而有趣的是，Nao‐ko 等［11］發(fā)現(xiàn)正常妊娠者用CTLA‐4/Fc 治療后，CT‐LA‐4 能夠通過誘導(dǎo)產(chǎn)生大量的γ‐干擾素（IFN‐γ）來上調(diào)蛻膜單個(gè)核細(xì)胞中IDO 的表達(dá)，進(jìn)而改善妊娠結(jié)局，但這與蛻膜中的細(xì)胞因子分布以Th2 為主導(dǎo)的狀態(tài)所相悖。蛻膜單個(gè)核細(xì)胞包含產(chǎn)生IFN‐γ 的自然殺傷細(xì)胞（NK 細(xì)胞），T 細(xì)胞，NKT 細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等，因此需要進(jìn)一步的研究來闡明CTLA‐4治療后蛻膜中哪些細(xì)胞產(chǎn)生IFN‐γ［12］。

1.2 CTLA‐4 與妊娠并發(fā)癥

與正常妊娠婦女相比，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（URSA）患者外周和蛻膜Tregs 細(xì)胞明顯減少，CTLA‐4 的表達(dá)及CTLA‐4+/CD28+的比值也隨之下降，母胎界面的細(xì)胞因子以Th1 型為主，導(dǎo)致了妊娠婦女宮腔內(nèi)免疫環(huán)境失常，從而容易引起妊娠丟失。外源性給予與CTLA‐4Ig，可促進(jìn)Tregs 細(xì)胞增殖，抑制Th17 細(xì)胞的發(fā)育分化，改善URSA 患者妊娠結(jié)局［13］。在基因?qū)用?，CTLA‐4 基因的多態(tài)性是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素，CTLA‐4 基因外顯子1 第49 位A/G 的多態(tài)性導(dǎo)致了前導(dǎo)肽中的蘇氨酸到丙氨酸的變化，引起粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白修飾異常，進(jìn)而增加URSA 的易感性。具有基因型AA 的細(xì)胞比基因型GG 的細(xì)胞具有更高的CTLA‐4 表達(dá)，而在URSA 人群中可檢測(cè)到高頻率的CTLA‐4 49 GG基因型［14，15］。

先兆子癇在免疫方面與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有著相同的機(jī)制，Tregs 細(xì)胞數(shù)量的減少以及免疫調(diào)節(jié)的偏移與子癇的發(fā)病密切相關(guān)。CTLA‐4 49A/G 等位基因中的雜合型也是重度子癇前期發(fā)病的易感基因［16］。然而，關(guān)于子癇患者外周血和蛻膜中CT‐LA‐4 表達(dá)模式的研究較少，結(jié)論缺乏一致性，也有表達(dá)模式增加和不變的報(bào)道［17，18］，因此CTLA‐4 在子癇中的發(fā)病機(jī)制還需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

2 PD-1

PD‐1 是 一 種 共 抑 制 受 體，在T 細(xì) 胞、B 細(xì) 胞、NK 細(xì) 胞、APCs 等 細(xì) 胞 上 表 達(dá)［19］。PD‐1 的 配 體PD‐L1 在組織細(xì)胞的分布具有廣泛性，既可以表達(dá)于造血細(xì)胞，如B 細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞，經(jīng)活化后也可在血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維型網(wǎng)狀細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等多種非造血細(xì)胞上表達(dá)［20］，而配體PD‐L2 僅在淋巴組織或慢性炎癥環(huán)境中的APCs 上可檢測(cè)到表達(dá)［21］。PD‐1 與PD‐L1 或PD‐L2 的結(jié)合可以使PD‐1 胞內(nèi)區(qū)的兩個(gè)重要結(jié)構(gòu)免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)換基序和免疫受體酪氨酸抑制基序發(fā)生磷酸化，從而傳遞共抑制信號(hào)，抑制細(xì)胞增殖并減弱效應(yīng)子功能［22］。

2.1 PD‐1 在妊娠中的作用

PD‐1 / PD‐L1 途徑在對(duì)于母胎界面免疫抑制狀態(tài)的建立發(fā)揮了重要作用，并且主要體現(xiàn)在同種異體妊娠小鼠中，對(duì)同基因小鼠妊娠影響不顯著［23］。在 鼠 妊 娠 模 型 中，PD‐L1 的 阻 斷 突 顯 了PD‐1 / PD‐L1 途徑的功能作用。向妊娠雌性小鼠腹腔注射PD‐L1 mAb，PD‐L1 被阻斷后母胎界面Tregs 細(xì)胞數(shù)減少，胚胎吸收率增加，產(chǎn)仔數(shù)減少［24］。將正常妊娠小鼠的Tregs 細(xì)胞過繼轉(zhuǎn)移到易流產(chǎn)模型妊娠小鼠中，易流產(chǎn)小鼠妊娠率提高，隨后用抗PD‐L1 mAb 進(jìn)行 PD‐L1 阻斷取消了Tregs的保護(hù)作用，并導(dǎo)致小鼠流產(chǎn)率增加，若先前耗竭體內(nèi)的Tregs 細(xì)胞，PD‐L1 的阻斷則對(duì)小鼠的妊娠結(jié)局不起作用，因此PD‐1 / PD‐L1 途徑對(duì)母體的免疫耐受作用可能是以Tregs 細(xì)胞為介導(dǎo)的［25］。此外，PD‐1 / PD‐L1 途徑在Teff/Tregs 細(xì)胞平衡以及細(xì)胞因子的精細(xì)調(diào)節(jié)中也發(fā)揮了重要作用，PD‐L1的阻斷抑制了抗原特異性同種異體反應(yīng)性T 細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)了Tregs 細(xì)胞凋亡以及Th17 細(xì)胞向更高頻率轉(zhuǎn)變，胎盤中促炎性Th1 型細(xì)胞因子IFN‐γ 的表達(dá)上調(diào)，胎仔吸收率增加，中和Th17 細(xì)胞因子IL‐17 可消除抗PD‐L1mAb 對(duì)胎仔存活率的影響，并恢復(fù)Tregs 細(xì)胞數(shù)量［26］。

與非妊娠女性相比，健康妊娠女性外周血中表達(dá)PD‐1 的T 淋巴細(xì)胞頻率升高，且可溶性PD‐L1水平在整個(gè)妊娠期間升高。在母胎界面，蛻膜巨噬細(xì)胞（decidual macrophage，DM）是人妊娠期子宮蛻膜最主要的專職抗原呈遞細(xì)胞，PD‐L1 存在于早孕期從子宮蛻膜中分離出的DMs 上，而孕婦外周血PMs 中未檢測(cè)出PD‐L1 的表達(dá)。PD‐1/PD‐L1 相互作用會(huì)對(duì)人類早期蛻膜中活化T 細(xì)胞的IFN‐γ 分泌產(chǎn)生負(fù)面影響。由于IFN‐γ 暴露會(huì)上調(diào)DMs 的PD‐L1，因此DMs 可以通過PD‐1/PD‐L1 途徑介導(dǎo)的負(fù)反饋來集中控制蛻膜IFN‐γ 的水平，進(jìn)而維持母胎界面免疫反應(yīng)的精細(xì)調(diào)控［27］。若阻斷 PD‐1/PD‐L1 信號(hào)通路，早孕期巨噬細(xì)胞向不利于妊娠的M1 型分化，巨噬細(xì)胞的吞噬功能減弱，促炎性細(xì)胞因子生成能力增強(qiáng)，該過程可能是通過促進(jìn)細(xì)胞無氧糖酵解和抑制細(xì)胞脂肪酸氧化實(shí)現(xiàn)的，并且受PI3K/AKT/m‐TOR 和MEK/ERK 信號(hào)分子的調(diào)控［28］。除了固有免疫，PD‐1/PD‐L1 信號(hào)通路對(duì)獲得性免疫也同樣存在調(diào)控效應(yīng)。妊娠期蛻膜CD3+T 淋巴細(xì)胞上PD‐L1 的表達(dá)明顯高于非妊娠子宮內(nèi)膜T 細(xì)胞，且與妊娠期間的外周血相比，蛻膜T 細(xì)胞上PD‐L1 的表達(dá)更為豐富。使用轉(zhuǎn)染PD‐L1 的絨毛膜癌細(xì)胞與 CD4+T 在體外共同培養(yǎng)，發(fā) 現(xiàn)PD‐L1 可 以 抑 制CD4+T 細(xì) 胞 中IFN‐γ 和TNF‐α 的分泌，但對(duì)IL10 的生成卻沒有顯著影響，表明PD‐L1 可導(dǎo)致蛻膜T 細(xì)胞因子的選擇性抑制，而不是全局抑制［29］。此外，妊娠期母體雌激素水平的波動(dòng)、胎盤的發(fā)育以及母胎血流供應(yīng)中氧氣濃度變化也會(huì)對(duì)PD‐1 /PD‐L1 的表達(dá)產(chǎn)生影響［30］。

2.2 PD‐1 與妊娠并發(fā)癥

不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者外周血Th17 細(xì)胞上PD‐1 和PD‐L1 的表達(dá)以及Th1 細(xì)胞上PD‐1 的表達(dá)明顯下調(diào)，Th1 和Th17 免疫反應(yīng)增強(qiáng)，子宮內(nèi)膜容受性下降［31］。淋巴細(xì)胞免疫治療可增強(qiáng)外周血PD‐1 的表達(dá)，使Th1/Th2 免疫平衡向Th2 偏倚，并有利于封閉抗體的產(chǎn)生，進(jìn)而改善URSA 患者的妊娠 結(jié) 局［32］。在 母 胎 界 面，URSA 患 者 蛻 膜 組 織 中PD‐L1 的表達(dá)降低，而PD‐1 的表達(dá)與對(duì)照組相比無明顯差異，但PD‐1+的巨噬細(xì)胞比例顯著降低，M1型巨噬細(xì)胞顯著增加，推測(cè)PD‐1/PD‐L1 通路可能通過影響巨噬細(xì)胞極化來引起妊娠丟失的發(fā)生［33］。

子癇前期婦女的外周血sPD‐1 水平顯著高于正常孕婦，表明子癇前期患者的全身免疫反應(yīng)增強(qiáng)［34］。與正常妊娠組相比，子癇前期患者胎盤中PD‐1 和PD‐L1 表達(dá)水平顯著降低，PD‐1/PD‐L1 信號(hào)通路對(duì)Th17 細(xì)胞增殖的抑制作用減弱。PD‐L1 Fc 可以通過抑制PI3K/AKT/m‐TOR 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和增強(qiáng)磷酸酶和張力蛋白同源物表達(dá)促進(jìn)外周Tregs細(xì)胞分化，為PE 患者的治療提供了新的思路［35］。妊娠糖尿病（GDM）患者體內(nèi)的免疫功能也處于紊亂狀態(tài)，PD‐1 在 GDM 孕婦外周血 T 淋巴細(xì)胞中的表達(dá)水平明顯低于正常妊娠組，經(jīng)治療的GDM患者血糖恢復(fù)至正常水平后PD‐1 的表達(dá)也有所增強(qiáng)，因此外周T 細(xì)胞上PD‐1 表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，可以為GDM 診斷和治療評(píng)估提供理論依據(jù)和生物標(biāo)記［36］。

3 Tim-3

Tim‐3 最初被確定為Th1 特異性細(xì)胞表面分子，傳遞負(fù)性共刺激信號(hào)，后來在其他免疫細(xì)胞如Th17、Tregs、NK 以及NKT 樣細(xì)胞表面也被發(fā)現(xiàn)有不同程度的表達(dá)［37］。Tim‐3 的異常表達(dá)是自身免疫性疾病、感染、移植和癌癥的重要原因。半乳糖凝集 素‐9（Galectin‐9，Gal‐9）是Tim‐3 的 配 體，屬 于S型半乳糖凝集素家族成員之一。因Gal‐9 在增殖期和分泌早期的表達(dá)非常低，而在分泌中期和分泌晚期（著床窗口）的表達(dá)顯著增加，所以被定義為分泌中 晚 期 和 蛻 膜 期 的 子 宮 內(nèi) 膜 標(biāo) 志 物［38］。Gal‐9 與Tim‐3 結(jié)合后，復(fù)合物將導(dǎo)致Tim‐3+Th1 細(xì)胞發(fā)生無能或凋亡，該過程可能是免疫應(yīng)答停止的機(jī)制之一，從而避免了具有潛在有害物質(zhì)的過度炎性免疫反應(yīng)［39］。

3.1 Tim‐3 在妊娠中的作用

小鼠實(shí)驗(yàn)表明，妊娠期子宮和外周血中均存在Tim‐3，并且Tim‐3 在多種免疫細(xì)胞上都有表達(dá)，共同發(fā)揮著免疫抑制作用。較多的相關(guān)研究集中在效應(yīng)細(xì)胞NK 細(xì)胞和T 細(xì)胞上。外周血NK（pNK）細(xì)胞上Tim‐3 的表達(dá)在妊娠前三個(gè)月大量增加，Tim‐3+pNK 細(xì)胞具有強(qiáng)的免疫抑制能力，產(chǎn)生更多的抗炎細(xì)胞因子，如TGF‐β1，IL‐10 和IL‐4，并且對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞毒性降低，有利于免疫耐受微環(huán)境的形成，該過程可能是由IL‐4–STAT6 或孕激素信號(hào)通路介導(dǎo)的［40］。外周血淋巴細(xì)胞上Tim‐3 的表達(dá)和血清中Th1 來源的細(xì)胞因子水平呈負(fù)相關(guān)，Tim‐3 通過抑制促炎性細(xì)胞因子的釋放減弱Th1 相關(guān)的免疫效應(yīng)，并影響妊娠期間外周免疫系統(tǒng)免疫應(yīng)答的平衡［41］。在母胎界面，TIM‐3 通路被阻斷后，小鼠uNK 細(xì)胞產(chǎn)生的促血管生成相關(guān)的細(xì)胞因子IFN‐γ 和VEGF 以及免疫抑制細(xì)胞因子IL‐10 均減少，提示血管重塑的過程被抑制，胚胎著床受阻［42］。在Tregs 細(xì)胞中，Tim‐3 的表達(dá)在妊娠中期達(dá)到峰值，Tim‐3+Tregs 細(xì)胞的活性以及對(duì)Teffs 細(xì)胞增殖的抑制作用明顯優(yōu)于Tim‐3‐Tregs 細(xì)胞。除了效應(yīng)細(xì)胞，Tim‐3 在骨髓源性細(xì)胞上也有所表達(dá)。Tim‐3 阻斷導(dǎo)致小鼠子宮巨噬細(xì)胞吞噬特性降低，不能從子宮中清除凋亡和死亡細(xì)胞，引起兩個(gè)骨髓細(xì)胞亞群M‐MDSC 和CD11b+Ly6CintGhi 的活化，然而抑制性M‐MDSC 未能抵消炎性CD11b Ly6CintGhi 粒細(xì)胞作用的結(jié)果，導(dǎo)致母胎界面局部炎癥增強(qiáng)和胎仔丟失率增加［43］。

與未懷孕的女性相比，Tim‐3 在孕婦外周血中的單核細(xì)胞和NK 細(xì)胞上的表達(dá)顯著上調(diào)。單核細(xì)胞上Tim‐3 的表達(dá)可能受Th2 細(xì)胞因子IL‐4 的調(diào)控，Tim‐3+單核細(xì)胞調(diào)節(jié)組織清除凋亡細(xì)胞，并且通過抗原加工過程促進(jìn)胎兒耐受性［44］。由于Tim‐3與其配體Gal‐9 相互作用的結(jié)果，Tim‐3+NK 細(xì)胞的細(xì)胞毒性顯著低于Tim‐3‐NK 細(xì)胞，并且具有高分泌Th2 型細(xì)胞因子的能力。此外，人滋養(yǎng)層細(xì)胞可通 過 分 泌Gal‐9 與Tim‐3 相 結(jié) 合，誘 導(dǎo)pNK 細(xì) 胞 向dNK 樣表型轉(zhuǎn)化，用抗Tim‐3 中和抗體阻斷Tim‐3信號(hào)通路可消除滋養(yǎng)細(xì)胞誘導(dǎo)的NK 細(xì)胞分化。dNK 細(xì)胞是MFI 下的主要Tim‐3 陽性細(xì)胞類型，dNK 細(xì)胞上Tim‐3 的表達(dá)水平明顯高于pNK 細(xì)胞［45］。促炎細(xì)胞因子的強(qiáng)效誘導(dǎo)劑脂多糖與其配體Toll 樣受體4 結(jié)合后，引起dNK 細(xì)胞產(chǎn)生的TNF‐α 顯著增加，啟動(dòng)強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，Tim‐3 能夠通過激活ERK1/2 通路，抑制NF‐κB 的活化和上調(diào)干擾素調(diào)節(jié)因子4 的表達(dá)來逆轉(zhuǎn)LPS 對(duì)Th2 細(xì)胞因子生成的抑制作用［46］。此外，滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的IL‐27 和Gal‐9 協(xié)同促進(jìn)CD4+T 細(xì)胞中Tim‐3 的表達(dá)和Tim‐3 信號(hào)通路的激活，從而促進(jìn)了Tim‐3+Treg 細(xì) 胞 的 蓄 積 以 及Tregs/Teffs 細(xì) 胞 的平衡［47］。

3.2 Tim‐3 與妊娠并發(fā)癥

在URSA 患者中，pNK 細(xì)胞表達(dá)的Tim‐3 水平低于正常妊娠組，并且來自URSA 患者的Tim‐3+pNK 細(xì)胞免疫抑制活性降低，細(xì)胞毒性增強(qiáng)，表明URSA 患者Tim‐3+pNK 細(xì)胞存在功能缺陷［40］。URSA 患者血清中sTim‐3 含量比正常妊娠婦女增加，而sGal‐9 含量減少，推測(cè)可能增加的sTim‐3 阻 斷 了Tim‐3 與Galectin‐9 的 結(jié) 合，抑 制 了Tim‐3/Galectin‐9 的表達(dá)［48］。在母胎界面，免疫組織化學(xué)研究顯示URSA 婦女的蛻膜組織減少了Tim‐3 的表達(dá)，通過流式細(xì)胞術(shù)在蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中也證實(shí)了相同的發(fā)現(xiàn)。此外，Tim‐3 基因的唯一遺傳多態(tài)性分析是在URSA 患者中進(jìn)行的。Tim‐3的多態(tài)性會(huì)影響配體結(jié)合特性，并可能引起某些免疫介導(dǎo)的疾病。然而，分析Tim‐3 基因啟動(dòng)子區(qū)的多態(tài)性，在健康的孕婦和URSA 患者中沒有觀察到不同基因型頻率之間的差異，但目前相關(guān)的報(bào)道較少，因此需要更多的研究來印證此結(jié)論［49］。

在子癇患者外周血中，T 細(xì)胞、細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞、NK 細(xì) 胞 和 CD56dimNK 細(xì) 胞 的 Tim‐3 表 達(dá) 降低，而 蛻 膜 組 織 中 的Tim‐3 和Gal‐9 的 表 達(dá) 均 被 上調(diào)［50，51］。蛻 膜Tim‐3 和Gal‐9 的 過 度 表 達(dá) 可 能 破 壞了Tim‐3/Gal‐9 通路的平衡，導(dǎo)致Th1 和Th17 細(xì)胞無法有效負(fù)向調(diào)節(jié)，導(dǎo)致Th1 和Th17 細(xì)胞分泌增加，進(jìn)而引發(fā)先兆子癇的發(fā)生［51］。

4 結(jié)論

免疫檢查點(diǎn)分子在胚胎植入、母胎耐受誘導(dǎo)和妊娠進(jìn)程中發(fā)揮重要作用，有望成為臨床干預(yù)妊娠并發(fā)癥的靶標(biāo)。盡管目前關(guān)于免疫檢查點(diǎn)分子參與生殖免疫的機(jī)制研究較為深入，但仍有很多難題尚未解開，近期新出現(xiàn)的幾種免疫檢查分子如淋巴細(xì)胞激活基因 3、T 細(xì)胞免疫受體和 T 細(xì)胞激活的V 域 Ig 抑制因子等成為了接下來的研究熱點(diǎn)。此外，針對(duì) PD‐1/PD‐L1 和 CTLA‐4 通路的免疫檢查點(diǎn)抑制劑是晚期惡性腫瘤的革命性療法，然而免疫檢查點(diǎn)分子的阻斷會(huì)對(duì)妊娠結(jié)局帶來不利影響，因此對(duì)于臨床上應(yīng)用檢查點(diǎn)抑制劑的患者的生殖評(píng)估就顯得尤為重要。

作者貢獻(xiàn)度說明：

王藝絢：論文撰寫、數(shù)據(jù)整理、統(tǒng)計(jì)分析、論文修改；連方：研究指導(dǎo)、經(jīng)費(fèi)支持；龐聰慧：研究指導(dǎo)、論文修改；于曉娜、官璐：數(shù)據(jù)整理。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。