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    p16、Ki-67在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及與患者預(yù)后的關(guān)系

    2023-07-24 00:58:12黃艷艷賈利萍婁雪玲
    癌癥進(jìn)展 2023年10期
    關(guān)鍵詞:陽(yáng)性細(xì)胞分化內(nèi)膜

    黃艷艷,賈利萍,婁雪玲

    1安陽(yáng)市第六人民醫(yī)院婦科,河南 安陽(yáng) 455000

    2鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科,鄭州 450000

    子宮內(nèi)膜癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤,近年來(lái)發(fā)病率逐年上升,且越來(lái)越年輕化[1]。多項(xiàng)研究指出,與其他生殖系統(tǒng)惡性腫瘤相比,子宮內(nèi)膜癌患者的預(yù)后相對(duì)較好,這是由于早期子宮內(nèi)膜癌患者會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則的陰道出血癥狀,使得多數(shù)患者可在早期確診,預(yù)后一般較好[2-3]。但研究顯示,早期子宮內(nèi)膜癌的復(fù)發(fā)率超過(guò)10%,仍會(huì)威脅女性生命健康[4]。目前,臨床對(duì)于子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病原因及機(jī)制并未完全清楚,分子生物學(xué)研究指出,抑癌基因失活和突變與癌基因的非正常激活可能在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[5]。子宮內(nèi)膜癌相關(guān)的癌基因p16在多種惡性腫瘤中均有所表達(dá);原癌基因Ki-67是細(xì)胞核相關(guān)抗原,可參與DNA 合成、細(xì)胞增殖等過(guò)程?;诖?,本研究探討p16、Ki-67 在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及與患者臨床特征和預(yù)后的關(guān)系,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2018 年2 月至2020 年1 月安陽(yáng)市第六人民醫(yī)院收治的子宮內(nèi)膜癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)為子宮內(nèi)膜癌;②存在陰道不規(guī)則流血、排液等癥狀;③術(shù)前未接受過(guò)放化療;④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他類型惡性腫瘤;②合并凝血異常;③合并心、肝、肺等功能障礙;④存在其他類型嚴(yán)重婦科疾病。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn),本研究共納入89 例子宮內(nèi)膜癌患者,年齡33~71 歲,平均(53.68±5.79)歲。另選取同期在安陽(yáng)市第六人民醫(yī)院進(jìn)行子宮切除的75 例子宮肌瘤患者,年齡36~68 歲,平均(55.21±6.43)歲。兩組患者年齡比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò),所有患者均知情同意。

    1.2 免疫組化法檢測(cè)兩組患者的p16、Ki-67 表達(dá)情況

    取89 例子宮內(nèi)膜癌患者的子宮內(nèi)膜癌組織和75 例子宮肌瘤患者的正常子宮內(nèi)膜組織,石蠟包埋和切片,二甲苯脫蠟,乙醇脫水,采用鏈霉抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶(streptavidin-peroxidase,SP)法檢測(cè)p16、Ki-67 表達(dá)情況。滴加鼠抗人p16 多克隆抗體、鼠抗人Ki-67 多克隆抗體,稀釋濃度均為1∶100,以磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered solution,PBS)代替一抗作陰性對(duì)照,二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidine,DAB)顯色,顯微鏡下觀察。判定標(biāo)準(zhǔn):依據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞所占比例及染色強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)分[6-7]:無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)0 分,陽(yáng)性細(xì)胞所占比例<11%計(jì)1 分,陽(yáng)性細(xì)胞所占比例11%~50%計(jì)2 分,陽(yáng)性細(xì)胞所占比例>50%計(jì)3 分;無(wú)著色計(jì)0 分,淡黃色染色計(jì)1 分,棕黃色染色計(jì)2 分,棕褐色染色計(jì)3 分。將陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分和染色強(qiáng)度評(píng)分相乘,≤3 分為陰性,≥4 分為陽(yáng)性。

    1.3 隨訪

    采用門診、電話等方式對(duì)兩組患者進(jìn)行為期2年的隨訪,記錄患者的預(yù)后情況。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 22.0 軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn);子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的影響因素采用Logistic 回歸模型分析;以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 p16、Ki-67 表達(dá)情況的比較

    子宮內(nèi)膜癌組織中p16的陽(yáng)性表達(dá)率低于正常子宮內(nèi)膜組織,Ki-67 的陽(yáng)性表達(dá)率高于正常子宮內(nèi)膜組織,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(表1)

    表1 子宮內(nèi)膜癌組織和正常子宮內(nèi)膜組織中p16、Ki-67表達(dá)情況的比較[n(%)]

    2.2 不同臨床特征子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中p16、Ki-67 表達(dá)情況的比較

    不同年齡、肌層浸潤(rùn)深度子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中p16 蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,F(xiàn)IGO)分期為Ⅲ~Ⅳ期、分化程度為中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中p16蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別低于FIGO 分期為Ⅰ~Ⅱ期、分化程度為高分化、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。不同年齡子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中Ki-67 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);FIGO 分期為Ⅲ~Ⅳ期、分化程度為中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤(rùn)深度>1/2 子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中Ki-67 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別高于FIGO 分期為Ⅰ~Ⅱ期、分化程度為高分化、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤(rùn)深度≤1/2 的患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(表2)

    表2 不同臨床特征子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中p16、Ki-67 表達(dá)情況的比較

    2.3 子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的影響因素分析

    術(shù)后隨訪2 年,89 例子宮內(nèi)膜癌患者死亡24例,生存65 例。單因素分析結(jié)果顯示,F(xiàn)IGO 分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、p16 表達(dá)情況、Ki-67表達(dá)情況均可能與子宮內(nèi)膜癌患者的預(yù)后有關(guān)(P<0.05);多因素分析結(jié)果顯示,F(xiàn)IGO 分期為Ⅲ~Ⅳ期、分化程度為中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、p16 陰性表達(dá)、Ki-67 陽(yáng)性表達(dá)均為子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。(表3)

    3 討論

    子宮內(nèi)膜癌是生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤,其病變主要位于子宮內(nèi)膜上皮,好發(fā)于中老年女性[8]。目前,子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病原因尚未完全明確,但有研究指出,其發(fā)病與高齡、激素藥物濫用及肥胖有一定關(guān)系[9]。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,臨床對(duì)于子宮內(nèi)膜癌的診治取得了較大進(jìn)展,早期子宮內(nèi)膜癌患者采取手術(shù)治療的生存率高達(dá)90%,但中晚期患者的生存率仍相對(duì)較低[10]。研究指出,準(zhǔn)確判斷子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)行為及患者的預(yù)后情況,并給予針對(duì)性治療,對(duì)改善患者的預(yù)后尤為重要[11]。

    p16基因?yàn)橐职┗虻囊环N,其表達(dá)產(chǎn)物p16蛋白為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)4/6 的抑制劑,能對(duì)細(xì)胞周期發(fā)揮負(fù)向調(diào)節(jié)作用,抑制細(xì)胞惡性增殖。本研究結(jié)果顯示,子宮內(nèi)膜癌組織中p16 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率低于正常子宮內(nèi)膜組織,提示p16 可能在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。這可能是因?yàn)閜16基因突變可導(dǎo)致細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)/CDK6、CDK4/磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(phosphorylated retinoblastoma protein,pRb)/轉(zhuǎn)錄因子2(transcription factor 2,E2F)通路失調(diào),從而引起細(xì)胞過(guò)度增殖,引起腫瘤[12]。此外,本研究結(jié)果顯示,F(xiàn)IGO 分期為Ⅲ~Ⅳ期、分化程度為中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中p16蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別低于FIGO分期為Ⅰ~Ⅱ期、分化程度為高分化、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。有研究指出,p16 是評(píng)估腫瘤性質(zhì)及患者預(yù)后的重要指標(biāo)[13]。本研究進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),p16 陰性表達(dá)是子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,p16可用于評(píng)估子宮內(nèi)膜癌患者的預(yù)后。

    Ki-67 是一種主要存在于增殖細(xì)胞核內(nèi)的非組蛋白核蛋白,其在細(xì)胞增殖的G1、S、G2和M 期中均有所表達(dá),但在G0期不表達(dá)[14]。研究指出,Ki-67 在細(xì)胞分裂的不同階段的表達(dá)情況不同,使其對(duì)于反映細(xì)胞分裂增殖狀態(tài)有重要意義,故推測(cè)可將其作為檢測(cè)腫瘤細(xì)胞增殖活性的可靠指標(biāo)[15]。本研究結(jié)果顯示,子宮內(nèi)膜癌組織中Ki-67 的陽(yáng)性表達(dá)率高于正常子宮內(nèi)膜組織,表明Ki-67 在子宮內(nèi)膜癌組織中異常表達(dá),可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生有密切關(guān)系。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),F(xiàn)IGO 分期為Ⅲ~Ⅳ期、分化程度為中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤(rùn)深度>1/2 子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中Ki-67 蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別高于FIGO 分期為Ⅰ~Ⅱ期、分化程度為高分化、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤(rùn)深度≤1/2 患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),提示Ki-67 可能參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。相關(guān)研究結(jié)果顯示,Ki-67 與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn),Ki-67 陽(yáng)性表達(dá)是子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,或可將Ki-67 作為評(píng)估子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的潛在指標(biāo)。

    綜上所述,p16、Ki-67 在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)異常,p16 陰性表達(dá)、Ki-67 陽(yáng)性表達(dá)均為子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,可作為預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的分子標(biāo)志物和潛在治療靶點(diǎn)。

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