補(bǔ)腎健脾方改善宮內(nèi)發(fā)育遲緩的作用及分子機(jī)制研究

邱二娟，葛玲燕，陳娟，任利軍

·論 著·

補(bǔ)腎健脾方改善宮內(nèi)發(fā)育遲緩的作用及分子機(jī)制研究

邱二娟1，葛玲燕1，陳娟1，任利軍2

1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬杭州市中醫(yī)院婦一科，浙江杭州 310007；2.河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南鄭州 450099

研究補(bǔ)腎健脾方改善胎鼠宮內(nèi)發(fā)育遲緩（intrauterine growth retardation，IUGR）的作用及分子機(jī)制。將妊娠SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，對(duì)照組給予常規(guī)飼料喂養(yǎng)，后4組采用低蛋白飼料喂養(yǎng)的方式建立IUGR模型；對(duì)照組和模型組給予生理鹽水灌胃，每日1次，低劑量組、中劑量組、高劑量組分別給予1/2等效劑量、等效劑量、2倍等效劑量的補(bǔ)腎健脾方灌胃，每日1次，各組在妊娠第1～18天連續(xù)給藥，妊娠第18天時(shí)剖宮產(chǎn)取胎盤(pán)及胎鼠，測(cè)量胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)、胰島素抵抗指數(shù)（homeostatic model assessment of insulin resistance，HOMA-IR）、胰島β細(xì)胞功能指數(shù)（homeostasis model assessment-β，HOMA-β）以及胎盤(pán)、胎鼠骨骼肌中磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase，p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylation protein kinase B，p-AKT）、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（glucose transporter 1，GLUT1）的表達(dá)水平。模型組胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)、HOMA-β以及胎盤(pán)、胎鼠骨骼肌中p-PI3K、p-AKT、GLUT1的表達(dá)水平低于對(duì)照組，HOMA-IR高于對(duì)照組（<0.05）；低劑量組、中劑量組、高劑量組胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)、HOMA-β以及胎盤(pán)、胎鼠骨骼肌中p-PI3K、p-AKT、GLUT1的表達(dá)水平高于模型組，HOMA-IR低于模型組（<0.05）；高劑量組的各項(xiàng)測(cè)量指標(biāo)與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05）。補(bǔ)腎健脾方可改善胎鼠IUGR及胰島素抵抗，激活胎盤(pán)、骨骼肌中PI3K/AKT/GLUT途徑是補(bǔ)腎健脾方發(fā)揮上述改善作用可能發(fā)生的分子機(jī)制。

宮內(nèi)發(fā)育遲緩；補(bǔ)腎健脾方；胰島素抵抗；磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B；葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1

胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩（intrauterine growth retardation，IUGR）是一種病理妊娠狀態(tài)，可導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)窘迫，甚至早產(chǎn)、新生兒窒息、死亡等不良妊娠結(jié)局，也會(huì)對(duì)患兒的遠(yuǎn)期產(chǎn)生不良影響、增加兒童時(shí)期發(fā)生認(rèn)知障礙和多動(dòng)癥的風(fēng)險(xiǎn)[1-2]。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為IUGR屬“胎萎不長(zhǎng)”的范疇，治療重在養(yǎng)精血、益胎元、補(bǔ)脾胃、滋化源[3]。補(bǔ)腎健脾方為自擬經(jīng)驗(yàn)方，由四君子湯及壽胎丸化裁而成，具體功效包括補(bǔ)腎健脾、氣血雙補(bǔ)、滲濕化瘀、標(biāo)本兼治、補(bǔ)中寓利。筆者長(zhǎng)期在臨床實(shí)踐中運(yùn)用補(bǔ)腎健脾方進(jìn)行治療，但目前關(guān)于該方用于IUGR治療的分子生物學(xué)證據(jù)較少。因此，本文以低蛋白及限制飲食方法建立的IUGR大鼠模型為對(duì)象，對(duì)補(bǔ)腎健脾方改善胎鼠IUGR的作用及分子機(jī)制展開(kāi)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 8周齡、SPF級(jí)SD雌性大鼠和雄性大鼠共40只，體質(zhì)量200～220g，購(gòu)自上海中科院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)：X1702392）。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵循3C原則，獲得浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬杭州市中醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理審批號(hào)：2022KY066）。

1.1.2 藥物 補(bǔ)腎健脾方（黨參30g、黃芪30g、淫羊藿15g、菟絲子15g、補(bǔ)骨脂12g、巴戟天12g、續(xù)斷10g、白術(shù)10g、甘草6g）由浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬杭州市中醫(yī)院藥劑科提供。

1.1.3 試劑與儀器 葡萄糖及胰島素檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海邦景實(shí)業(yè)有限公司，總RNA提取試劑盒、cDNA第一鏈合成試劑盒、熒光定量檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京天根生化公司，磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）、磷酸化PI3K（phosphorylation PI3K，p-PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）、磷酸化AKT（phosphorylation AKT，p-AKT）的一抗購(gòu)自CST公司，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（glucose transporter 1，GLUT1）、β-actin的一抗購(gòu)自Abcam公司，正置光學(xué)顯微鏡凝購(gòu)自上海永科光學(xué)儀器公司，膠成像儀購(gòu)自上海勤翔儀器公司。

1.2 方法

1.2.1 分組與造模 雌性SD大鼠與雄性SD大鼠按照2:1的比例合籠，后進(jìn)行陰道涂片，鏡下見(jiàn)到精子判斷為妊娠，作為妊娠第1天。將妊娠的雌性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組各8只。對(duì)照組在妊娠期間給予常規(guī)飼料（蛋白含量18%，南通特洛菲飼料科技有限公司）喂養(yǎng)；模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組在妊娠期間給予低蛋白飼料（蛋白含量6%～8%，南通特洛菲飼料科技有限公司）喂養(yǎng)，以建立IUGR模型。

1.2.2 治療方法 對(duì)照組和模型組均從妊娠第1天開(kāi)始治療，給予生理鹽水10ml/kg灌胃，1次/d；低劑量組、中劑量組、高劑量組分別給予1/2等效劑量（6.3g/kg生藥量）、等效劑量（12.6g/kg生藥量）、2倍等效劑量（25.2g/kg生藥量）灌胃，灌胃體積10ml/kg、1次/d。每組均連續(xù)給藥至妊娠第18天。

1.2.3 體質(zhì)量、體長(zhǎng)檢測(cè) 妊娠第17天時(shí)禁食過(guò)夜，于妊娠第18天時(shí)麻醉妊娠大鼠后剖宮取出胎鼠，稱(chēng)量胎鼠體質(zhì)量、測(cè)量胎鼠體長(zhǎng)。

1.2.4 胰島素抵抗水平檢測(cè) 斷頸后在離心管內(nèi)留取胎鼠血液標(biāo)本約1ml，3000轉(zhuǎn)離心10min，分離血清后檢測(cè)空腹血胰島素（fastng insulin，F(xiàn)INS）、空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG），計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（homeostatic model assessment of insulin resistance，HOMA-IR）=FBG×FINS/22.5、胰島β細(xì)胞功能指數(shù)（homeostasis model assessment-β，HOMA-β）=20×FINS/（FBG-3.5）。

1.2.5 mRNA表達(dá)水平檢測(cè) 取妊娠大鼠的胎盤(pán)組織，胎鼠的骨骼肌組織，采用總RNA提取試劑盒提取組織中的總RNA，采用cDNA第一鏈合成試劑盒將組織中的總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用熒光定量檢測(cè)試劑盒對(duì)cDNA中PI3K、AKT、GLUT1的表達(dá)水平，進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)。按照試劑盒說(shuō)明書(shū)配置反應(yīng)體系：cDNA 1μl、反應(yīng)混合液10μl、上下游引物各0.6μl，去離子水補(bǔ)足至20μl；按照試劑盒說(shuō)明書(shū)設(shè)置PCR反應(yīng)程序：95℃預(yù)變性3min，95℃ 15s、特異性退火溫度25s、72℃ 30s，共進(jìn)行40個(gè)反應(yīng)循環(huán)，得到循環(huán)曲線(xiàn)及循環(huán)閾值，以β-actin為內(nèi)參，參照公式2–△△Ct計(jì)算PI3K、AKT、GLUT1的mRNA相對(duì)表達(dá)水平。

1.2.6 蛋白表達(dá)水平檢測(cè) 取妊娠大鼠的胎盤(pán)組織，胎鼠的骨骼肌組織，加入裂解液提取組織蛋白，測(cè)定蛋白濃度后將含有30μg蛋白的樣本用于檢測(cè)。在聚丙烯酰胺凝膠中電泳分離不同分子量的蛋白，4℃孵育PI3K一抗（1: 500稀釋?zhuān)-PI3K一抗（1: 500稀釋?zhuān)?、AKT一抗（1: 400稀釋?zhuān)?、p-AKT一抗（1: 400稀釋?zhuān)LUT1一抗（1:800稀釋?zhuān)┗颚?actin一抗（1:5000稀釋?zhuān)┻^(guò)夜。次日室溫孵育1:2000稀釋的二抗1h，最后在凝膠成像系統(tǒng)中曝光得到條帶，以β-actin為內(nèi)參，計(jì)算p-PI3K、p-AKT、GLUT1的蛋白表達(dá)水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（百分率）[（%）]表示，組間比較采用2檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-法，<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組胎鼠體質(zhì)量、體長(zhǎng)比較

模型組胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)均低于對(duì)照組（<0.05），低劑量組、中劑量組、高劑量組胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)均高于模型組（<0.05）；其中，低劑量組、中劑量組胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)均低于對(duì)照組（<0.05），而高劑量組胎鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組胎鼠體質(zhì)量、體長(zhǎng)比較（）

注：與對(duì)照組比較，*<0.05；與模型組比較，#<0.05

2.2 各組胎鼠胰島素抵抗水平比較

模型組胎鼠的HOMA-IR水平高于對(duì)照組、HOMA-β水平低于對(duì)照組（<0.05），低劑量組、中劑量組、高劑量組胎鼠的HOMA-IR水平低于模型組、HOMA-β水平高于模型組（<0.05）；其中，低劑量組胎鼠的HOMA-IR水平高于對(duì)照組、HOMA-β水平低于對(duì)照組（<0.05），而中劑量組、高劑量組胎鼠的HOMA-IR、HOMA-β水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05），見(jiàn)表2。

表2 各組胎鼠胰島素抵抗水平比較（）

注：與對(duì)照組比較，*<0.05；與模型組比較，#<0.05

2.3 各組胎盤(pán)中PI3K/AKT/GLUT1途徑mRNA表達(dá)比較

各組胎盤(pán)中PI3K、AKT的mRNA表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05）。模型組胎盤(pán)中GLUT1的mRNA表達(dá)水平低于對(duì)照組（<0.05），低劑量組、中劑量組、高劑量組胎盤(pán)中GLUT1的mRNA表達(dá)水平高于模型組（<0.05）；低劑量組、中劑量組胎盤(pán)中GLUT1的mRNA表達(dá)水平低于對(duì)照組（<0.05），而高劑量組胎盤(pán)中GLUT1的mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05），見(jiàn)表3。

表3 各組胎盤(pán)中PI3K/AKT/GLUT1途徑mRNA表達(dá)水平比較（）

注：與對(duì)照組比較，*<0.05；與模型組比較，#<0.05

2.4 各組胎鼠骨骼肌中PI3K/AKT/GLUT1途徑mRNA的比較

各組胎鼠骨骼肌中PI3K、AKT的mRNA表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05）。模型組胎鼠骨骼肌中GLUT1的mRNA表達(dá)水平低于對(duì)照組（<0.05），低劑量組、中劑量組、高劑量組胎鼠骨骼肌中GLUT1的mRNA表達(dá)水平模型組（<0.05）；其中，低劑量組、中劑量組胎鼠骨骼肌中GLUT1的mRNA表達(dá)水平低于對(duì)照組（<0.05），而高劑量組胎鼠骨骼肌中GLUT1的mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（>0.05），見(jiàn)表4。

表4 各組胎鼠骨骼肌中PI3K/AKT/GLUT1途徑mRNA表達(dá)水平的比較（）

注：與對(duì)照組比較，*<0.05；與模型組比較，#<0.05

3 討論

西醫(yī)治療IUGR多采用低分子肝素改善胎盤(pán)血流灌注、補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等，效果并不理想[4]。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為IUGR屬“胎萎不長(zhǎng)”的范疇，疾病的病位主要在脾、胃，辨證特征包括氣血虛弱、脾腎不足、血寒宮冷、陰虛血熱、血瘀等，治療重在養(yǎng)精血、益胎元、補(bǔ)脾胃、滋化源。中醫(yī)藥治療“胎萎不長(zhǎng)”有其獨(dú)到之處，經(jīng)過(guò)數(shù)千年的臨床實(shí)踐積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)且療效較好，臨床實(shí)踐中未見(jiàn)到對(duì)妊娠婦女及胎兒有不良影響。

補(bǔ)腎健脾方為四君子湯及壽胎丸化裁而成的自擬經(jīng)驗(yàn)方，方中壽胎丸重在補(bǔ)先天腎精，精能生血，故使氣血充調(diào)，胎元得養(yǎng)[5]；四君子湯益氣健脾，白術(shù)“活血、利腰、長(zhǎng)胎”，通達(dá)沖任、為安胎圣藥；茯苓滲濕、助脾健運(yùn)、以復(fù)血生化之源，正所謂“血足則胎自濡、血足則胎自安”[6]。筆者長(zhǎng)期在臨床實(shí)踐中使用健脾補(bǔ)腎方治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、IUGR，但目前關(guān)于該方治療IUGR的基礎(chǔ)研究報(bào)道較少。

妊娠期間低蛋白飲食是IUGR常用的動(dòng)物造模方法[7-8]，本研究從妊娠第1天起給予低蛋白飲食、在妊娠第18天時(shí)解剖胎鼠并對(duì)體質(zhì)量和體長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)量，結(jié)果顯示：接受低蛋白飲食的模型組胎鼠體質(zhì)量和體長(zhǎng)均低于接受常規(guī)飲食的對(duì)照組，表明IUGR造模成功。在妊娠第1～18天時(shí)采用不同劑量補(bǔ)腎健脾方灌胃的方法對(duì)IUGR模型大鼠進(jìn)行治療，妊娠第18天時(shí)胎鼠的測(cè)量結(jié)果顯示：不同劑量補(bǔ)腎健脾方治療能明顯增加胎鼠的體質(zhì)量和體長(zhǎng)，其中高劑量補(bǔ)腎健脾方治療后IUGR胎鼠的體質(zhì)量和體長(zhǎng)與對(duì)照組比較相似，提示高劑量補(bǔ)腎健脾方能顯著糾正胎鼠IUGR，使IUGR胎鼠的生長(zhǎng)達(dá)到正常水平。

胰島素是妊娠過(guò)程中保證胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的重要激素之一，胰島素與胰島素受體結(jié)合后通過(guò)下游PI3K/AKT進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，發(fā)生磷酸化的PI3K和AKT能夠增加GLUT1的表達(dá)并促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)而保證胎兒正常的生長(zhǎng)發(fā)育[9-11]。在IUGR的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中存在胰島素抵抗，包括母胎之間的胎盤(pán)以及胎兒的骨骼肌等組織中均存在胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常[12-14]。本研究對(duì)IUGR模型大鼠的檢測(cè)結(jié)果也證實(shí)：模型組的胎鼠HOMA-IR水平明顯增加，而胎盤(pán)組織及胎鼠骨骼肌組織中p-PI3K、p-AKT、GLUT1 mRNA的表達(dá)水平均明顯降低，表明IUGR胎鼠存在胰島素抵抗且IUGR胎盤(pán)、胎兒骨骼肌中PI3K/AKT通路激活受阻、GLUT1表達(dá)降低，多個(gè)組織中PI3K/AKT/GLUT1途徑受抑制可能是導(dǎo)致IUGR發(fā)病過(guò)程中胰島素抵抗的生物學(xué)機(jī)制。

國(guó)內(nèi)一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)：補(bǔ)腎健脾方改善卵巢早衰大鼠性腺功能的作用與激活A(yù)KT通路有關(guān)[15]，提示補(bǔ)腎健脾方對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路具有調(diào)控作用。另有相關(guān)的臨床研究證實(shí)：補(bǔ)腎健脾方用于多囊卵巢綜合征的治療能夠改善患者的胰島素抵抗、激活A(yù)KT通路[16-17]。本研究使用不同劑量補(bǔ)腎健脾方對(duì)IUGR模型大鼠進(jìn)行治療后，胎鼠的胰島素抵抗明顯減輕且胎盤(pán)組織及胎鼠骨骼肌組織中p-PI3K、p-AKT、GLUT1的表達(dá)水平均明顯增加，其中高劑量補(bǔ)腎健脾方治療后IUGR胎鼠的胰島素抵抗程度及PI3K/AKT/GLUT1途徑的激活程度與對(duì)照組相當(dāng)，提示高劑量補(bǔ)腎健脾方顯著糾正IUGR胎鼠的胰島素抵抗并使PI3K/AKT/GLUT1途徑的功能恢復(fù)正常。

綜上所述，不同劑量補(bǔ)腎健脾方均改善胎鼠IUGR及胰島素抵抗，其中高劑量補(bǔ)腎健脾方能夠是IUGR胎鼠的生長(zhǎng)及胰島素抵抗達(dá)到正常水平；補(bǔ)腎健脾方發(fā)揮上述改善作用的可能分子機(jī)制是激活胎盤(pán)、骨骼肌中PI3K/AKT/GLUT途徑。

[1] PINELES L, MENDEZ H, CHAUHAN P. Diagnosis of fetal growth restriction in a cohort of small-for- gestational age neonates at term: Neonatal and maternal outcomes[J]. Am J Obstet Gynecol MFM, 2022, 4(5): 100672.

[2] SAVAGE M, CHASEN T. Impact of positive preoperative urine cultures before pediatric lower urinary tract reconstructive surgery[J]. Pediatr Surg Int, 2018, 34(9): 983–989.

[3] 劉倩, 黎又樂(lè), 趙巖松. 治療“胎萎不長(zhǎng)”傳統(tǒng)方劑組方用藥規(guī)律分析[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2017, 23(8): 196–201.

[4] 紀(jì)毅梅, 徐麗娟, 周艷茹. 單胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限影響因素分析及低分子肝素治療效果觀察[J]. 中國(guó)全科醫(yī)學(xué), 2019, 22(S1): 68–71.

[5] 劉子平, 尹巧芝, 張?zhí)於? 等. 壽胎丸臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J]. 河北中醫(yī), 2020, 42(5): 784–788.

[6] 張婷, 孫貴香, 消丹, 等. 四君子湯治療脾胃氣虛證的研究進(jìn)展[J]. 江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2020, 32(1): 114–118.

[7] 胡祺雯, 畢正, 劉海萍, 等. 胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué), 2022, 42(5): 423–431.

[8] ABASSI Z, KINANEH S, SKARZINSKI G, et al. Aberrant corin and PCSK6 in placentas of the maternal hyperinsulinemia IUGR rat model[J]. Pregnancy Hypertens, 2020, 21(prepublish): 70–76.

[9] ONG Y Y, SADANANTHAN S A, ARIS I M, et al. Mismatch between poor fetal growth and rapid postnatal weight gain in the first 2 years of life is associated with higher blood pressure and insulin resistance without increased adiposity in childhood: The GUSTO cohort study[J]. Int J Epidemiol, 2020, 49(5): 1591–1603.

[10] JOSHI N P, MANE A R, SAHAY A S, et al. Role of placental glucose transporters in determining fetal growth[J]. Reprod Sci, 2022, 29(10): 2744–2759.

[11] PEREIRA D, SALAZAR E, LOPEZ J, et al. Maternal and fetal pi3k-p110α deficiency induces sex-specific changes in conceptus growth and placental mitochondrial bioenergetic reserve in mice[J]. Vet Sci, 2022, 9(9): 501.

[12] 毛冰昆, 吳雪, 姜亞倩, 等. 預(yù)測(cè)胎兒生長(zhǎng)受限相關(guān)因子的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)醫(yī)藥科學(xué), 2022, 12(11): 72–75.

[13] 亢雪倩, 張少倩, 陳怡, 等. 孕鼠胎盤(pán)組織中GLUT1表達(dá)與其胎鼠宮內(nèi)發(fā)育遲緩的相關(guān)性及機(jī)制研究[J]. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2022, 21(3): 252–255.

[14] 林小琦, 梁衛(wèi)桃, 莫麗芳. PI3K及C-Raf的表達(dá)與胎兒生長(zhǎng)受限關(guān)系的研究[J]. 臨床醫(yī)學(xué)工程, 2019, 26(8): 1055–1056.

[15] 朱景茹, 陳姝婷, 卓澤偉, 等. 補(bǔ)腎健脾方對(duì)卵巢早衰大鼠下丘腦–垂體–性腺軸功能的影響[J]. 福建中醫(yī)藥, 2021, 52(2): 14–17.

[16] 馮曉玲, 趙小萱, 丁寧, 等. 補(bǔ)腎健脾法對(duì)多囊卵巢綜合征先兆流產(chǎn)MCP-1、IL-1β水平及胰島素抵抗的影響研究[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2020, 38(11): 1–5.

[17] 蔣莎, 姜俊竹, 陳璐, 等. 補(bǔ)腎健脾法影響PCOS-IR先兆流產(chǎn)者血清pAkt、mTOR的研究[J]. 天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2018, 37(1): 28–32.

Study on the effect and molecular mechanism of Bushen Jianpi recipe on intrauterine growth retardation

QIU Erjuan, GE Lingyan, CHEN Juan, REN Lijun

1.Department I of Gynecology, Hangzhou TCM Hospital Affiliated to Zhejiang Chinese Medicine University, Hangzhou 310007, Zhejiang, China; 2.Obstetrics and Gynecology Department, the First Affiliated Hospital of Henan University of TCM, Zhengzhou 450099, Henan, China

To study the effect and molecular mechanism of Bushen Jianpi recipe on improving intrauterine growth retardation (IUGR) of fetal rats.Pregnant SD rats were randomly divided into control group, model group, low-dose group, middle dose group and high-dose group. The control group was fed with conventional diet, and the last four groups were fed with low protein diet to establish IUGR model. The control group and the model group were given normal saline by gavage once a day, and the low-dose group, the middle dose group and the high-dose group were given 1/2 equivalent dose, equivalent dose and twice equivalent dose of Bushen Jianpi recipe by gavage once a day. Each group was given continuous medication on the 1st to 18th days of pregnancy. At the 18th day of pregnancy, the placenta and fetal rats were taken by cesarean section, and the body weight, body length, insulin resistance index (HOMA-IR), and homeostasis model assessment-β (HOMA-β) of fetal rats, the expression level of phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinase (p-PI3K), phosphorylated protein kinase B (p-AKT), glucose transporter 1 (GLUT1) in placenta and fetal rat skeletal muscle were detected.Body weight, body length and HOMA-β of fetal rats, the expression levels of p-PI3K, p-AKT and GLUT1 in placenta and fetal rat skeletal muscle in the model group were lower than those of the control group, and HOMA-IR was higher than that of the control group(<0.05). Body weight, body length and and HOMA-β of fetal rats, the expression levels of p-PI3K, p-AKT and GLUT1 in placenta and fetal rat skeletal muscle in the low-dose group, middle dose group and high-dose group were higher than those of the model group, and HOMA-IR was lower than those of the model group(<0.05). There was no significant difference of the above indexes between the high dose group and the control group (>0.05).Bushen Jianpi recipe can improve IUGR and insulin resistance of fetal rats, and the possible molecular mechanism is activating PI3K/AKT/GLUT pathway in placenta and skeletal muscle.

Intrauterine growth retardation; Jianpi Bushen recipe; Insulin resistance; Phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B; Glucose transporter 1

R714.5

A

10.3969/j.issn.1673-9701.2023.18.003

浙江省中醫(yī)藥科技計(jì)劃項(xiàng)目（2022ZA106）

任利軍，電子信箱：814509821@qq.com

（2022–12–09）

（2023–05–23）