來氟米特干預(yù)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠代謝組學(xué)研究*

張欣亞，王碧瑩，賈?？担垛?，2**

1河南中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，鄭州，450046；2河南羚銳制藥股份有限公司，河南信陽，465550

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種進(jìn)行性骨破壞的全身免疫性疾病，其臨床特征為骨膜增殖和骨關(guān)節(jié)損傷[1]。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明[2]，RA 全球發(fā)病率約0.5%，且女性發(fā)病率高于男性。在我國貴州省部分地區(qū)RA 發(fā)病率高達(dá)9.2%，并具有30%～50%的致殘風(fēng)險[3]?，F(xiàn)代臨床研究表明[4]，RA的發(fā)生受到環(huán)境、遺傳等多重因素影響，常涉及免疫細(xì)胞過度活化、免疫細(xì)胞亞群比例失衡、自身免疫炎癥等現(xiàn)象[1]。RA 發(fā)病常伴隨體內(nèi)代謝紊亂。研究表明，RA 患者常出現(xiàn)色氨酸及磷脂代謝異常[5]，體內(nèi)甾體類代謝物顯著升高，出現(xiàn)類固醇代謝異常，而皮質(zhì)類固醇的治療能夠回調(diào)甾體類代謝物的水平，使類固醇代謝趨于正常[6]。這些研究表明內(nèi)源性代謝物的研究，有助于揭示RA 的發(fā)病機制，同時可輔助RA 的早期診斷及藥物評測。

來氟米特是一種具有異噁唑結(jié)構(gòu)的口服免疫抑制劑，臨床用于治療RA 和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫性疾病，療效顯著[7，8]。研究發(fā)現(xiàn)[9]，來氟米特可通過抑制線粒體中二氫乳清酸脫氫酶活性，阻礙細(xì)胞合成尿嘧啶核苷，同時阻止細(xì)胞由G1 期向S 期發(fā)展，直接抑制淋巴細(xì)胞、B 細(xì)胞等免疫細(xì)胞的增殖，發(fā)揮免疫抑制作用。但來氟米特干預(yù)疾病的體內(nèi)變化過程研究尚不完善。本實驗建立了牛Ⅱ型膠原（CⅡ）誘導(dǎo)RA 模型大鼠，利用血清代謝組學(xué)技術(shù)，監(jiān)控機體在疾病狀態(tài)和受到藥物干預(yù)后的內(nèi)源代謝物的水平變化，尋找機體在病理狀態(tài)下和藥物干預(yù)后差異表達(dá)的內(nèi)源代謝物，探討來氟米特干預(yù)RA的關(guān)鍵代謝通路，豐富來氟米特基礎(chǔ)研究，并為RA的治療策略和藥物開發(fā)提供實驗和理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器

超高液相-四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜（美國Agilent 公司，6546 UPLC-Q-TOF-MS 系統(tǒng)），Centrifuge 5810R 高速冷凍離心機（德國Eppendorf 公司）。

1.2 主要藥品和試劑

造模劑采用牛Ⅱ型膠原（批號20021，規(guī)格10mg/瓶）、弗氏完全佐劑（批號7001，規(guī)格5 mL/瓶）、不完全佐劑（批號7002，規(guī)格5 mL/瓶）均購自美國Chondrex 公司；來氟米特片（蘇州長征-欣凱制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20000550，規(guī)格10 mg/片）；IL-1β、IL-6ELISA 試劑盒（杭州聯(lián)科生物技術(shù)有限公司，批號EK301BHS-96、EK306HS-96）；IgG ELISA盒（武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司，批號EEL-R0518c96T）。

乙腈、甲醇、異丙醇為色譜級試劑（美國ThermoFisher 公司，批號A998-4、A452-4、A451-4），純水（屈臣氏公司，規(guī)格600 mL/瓶）。

1.3 實驗動物的分組、造模及給藥

SPF 級Wistar 雌性大鼠，體重180～220 g，購自北京維通利華公司，動物生產(chǎn)許可證編號SCXK（京）2019-0009。飼養(yǎng)過程中大鼠自由攝食攝水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后開始實驗。實驗過程符合河南中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物倫理要求（DWLL20210631）。

隨機選取6 只大鼠為空白組，其余20 只大鼠按照文獻(xiàn)方法[10]建立RA 模型。將完全佐劑與不完全佐劑按3∶1 比例混勻，加入CⅡ膠原，乳化完全后作為造模劑備用。于大鼠尾根部皮內(nèi)注射0.15 mL造模劑完成首次免疫。首次免疫7 天后，造模大鼠尾部皮內(nèi)注射0.10 mL 造模劑進(jìn)行二次免疫，每天觀察造模大鼠狀態(tài)，根據(jù)RA 評分法細(xì)則進(jìn)行評分（RA 評分達(dá)到2 分則造模成功）[11]。剔除未成模大鼠，將造模成功的大鼠隨機被分為模型組和來氟米特組，每組各6 只。

將來氟米特片破碎并制成混懸液用于灌胃。按照來氟米特臨床用藥劑量，換算成大鼠灌胃劑量，前3 天5.25 mg·kg-1，后維持2.1 mg·kg-1，每天灌胃一次。正常組、模型組分別給予等體積0.9%生理鹽水，每天灌胃一次。實驗持續(xù)給藥21 天。

1.4 大鼠各組關(guān)節(jié)炎腫脹度評價

本實驗使用RA 評分法、排水法和游標(biāo)卡尺法量化評價各組大鼠關(guān)節(jié)腫脹度。

RA 評分法：二次免疫結(jié)束后，每7 天觀察一次大鼠關(guān)節(jié)外觀。關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度采用5 級評分量表評分[12]：踝關(guān)節(jié)到整個足腫脹4分，腳趾到踝關(guān)節(jié)腫脹3分，腳趾和腳趾關(guān)節(jié)腫脹2分，腳趾小關(guān)節(jié)紅斑或腫脹1分，無紅斑或腫脹為0 分。每只大鼠的評分為四肢之和，最高關(guān)節(jié)炎評分為16 分。

排水重法[13]：在大鼠腳踝處使用記號筆標(biāo)記一條線，以保證每次稱重均在此線上。在天平上放置一個裝水的燒杯，手持大鼠使其腳踝沒入水中至與線平齊，此時天平示數(shù)即為大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度。

游標(biāo)卡尺法[14]：使用游標(biāo)卡尺測量大鼠足底到腳踝面的高度，量化大鼠關(guān)節(jié)炎腫脹。

1.5 免疫功能測試

大鼠血清中IL-1β、IL-6 和IgG 水平測定：各組大鼠腹腔主動脈取血，并于4℃離心機中8000 r·min-1離心10 min，收集血清，-80℃冰箱保存。采用酶聯(lián)免疫法測定IL-1β、IL-6 和IgG 水平，具體操作按試劑盒說明進(jìn)行。

大鼠脾指數(shù)評價：實驗第21 天記錄大鼠體重。將各組大鼠脾臟完整取出，稱量重量并記錄。按照脾指數(shù)=脾重（mg）/體重（g）計算出各組大鼠脾指數(shù)。

1.6 踝關(guān)節(jié)病理切片染色

剪下各組大鼠的腳踝，剃去肌肉組織，于多聚甲醛中固定24 h，后轉(zhuǎn)移至脫鈣液中脫鈣。脫鈣完成后進(jìn)行脫水、包埋、切片、HE 染色和番紅固綠染色。使用顯微鏡對切片結(jié)果進(jìn)行觀察。

1.7 代謝組學(xué)分析

1.7.1 血清樣品前處理 取大鼠血清100 μL，加入乙腈使蛋白沉淀完全后，置于4℃離心機13 000 r·min-1離心10 min，取上清在真空濃縮儀中干燥，加入80%甲醇-水溶液50 μL 復(fù)溶，離心10 min，取上清液進(jìn)樣。各組血清樣品各取50 μL 混合，按照上述方法制成質(zhì)量控制（quality control，QC）樣品，用于實驗過程中的儀器穩(wěn)定性的分析。

1.7.2 代謝組學(xué)液質(zhì)條件 色譜條件：色譜柱：安捷倫Proshell 120 EC18（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）。以0.1%甲酸水為水相（A），乙腈為有機相（B），行梯度洗脫：0～2 min，5%B；2～3 min，5%→10%B；3～10 min，10%→20%B；10～20 min，20%→100%B；20～22 min，100%B。流速0.3 mL·min-1，自動進(jìn)樣器溫度4℃，進(jìn)樣量1 μL，柱溫箱溫度25℃。

質(zhì)譜條件：采用正、負(fù)離子模式采集質(zhì)譜數(shù)據(jù)。毛細(xì)管電壓3500 V（正）和4000 V（負(fù)），噴嘴電壓500 V（正）和1000 V（負(fù)），鞘氣流速9 mL·min-1，溫度350℃；氮氣流速11 mL·min-1，毛細(xì)管溫度320℃，質(zhì)量掃描范圍50～1500 m/z。

1.7.3 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)分析 處理完成的血清樣品按照色譜質(zhì)譜條件進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，利用Profinder 10.0 軟件（美國Agilent 公司）對數(shù)據(jù)進(jìn)行峰提取及峰對齊等處理，再運用MassHunter Profinder Profile 8.0 軟件進(jìn)行Frequency 篩選，得到由保留時間、峰面積和Mass 值構(gòu)成的三維數(shù)據(jù)，完成后導(dǎo)入Simca P 14.1 軟件（瑞典Umetrics 公司）進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法判別分析（orthogonal partial leastsquares discrimination analysis，OPLS-DA）。

首先，運用PCA 分析法對各組樣品進(jìn)行區(qū)分。再分別對各組進(jìn)行OPLS-DA 分析，以變量重要性投影（variable importance in the projection，VIP）＞1且單因素方差分析P ＜0.05 作為標(biāo)準(zhǔn)，篩選出潛在差異代謝物。再將質(zhì)譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入Metlin 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行匹配，篩選出得分＞80 的化合物，并與HMDB、KEGG、Pubchem、Massbank 等多個在線數(shù)據(jù)庫進(jìn)行對比，根據(jù)二級質(zhì)譜離子碎片和化學(xué)鍵斷裂規(guī)律來推斷其結(jié)構(gòu)。最后，將差異代謝物輸入到Metabo-Analyst 5.0 在線數(shù)據(jù)庫中，利用pathway analysis 富集疾病通路，推斷疾病誘發(fā)體內(nèi)代謝變化及藥物干預(yù)的代謝通路。

1.8 統(tǒng)計學(xué)方法

使用GraphPad prism 7.0 采用單因素方差分析對數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性差異分析，符合方差齊性的采用最小顯著差異法（least-significant difference，LSD），不符合方差齊性的采用Dunnett's T3 法。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠關(guān)節(jié)腫脹評價

造模成功后，模型組大鼠出現(xiàn)小關(guān)節(jié)腫脹，伴有局部皮膚變紅發(fā)熱，隨病情發(fā)展大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹明顯。病程后期，模型組大鼠關(guān)節(jié)嚴(yán)重腫脹，行動減少，整體呈炎癥紅腫狀。與模型組相比，來氟米特組大鼠關(guān)節(jié)腫脹情況明顯減輕，局部關(guān)節(jié)處仍伴有炎癥腫脹現(xiàn)象（圖1A）。

圖1 踝關(guān)節(jié)外觀狀態(tài)（A）；RA 得分（B）；排水重法（C）及游標(biāo)卡尺測量法（D）量化腫脹度結(jié)果（，n=6）

本實驗采用RA 評分法、排水重法和游標(biāo)卡尺測量法量化各組大鼠關(guān)節(jié)腫脹度（圖1B～D）。實驗開始14天，與空白組相比，模型組大鼠RA 得分顯著上升。實驗開始21天，與模型組相比，來氟米特組大鼠RA 得分開始下降（P ＜0.01），腫脹度顯著降低（P ＜0.01）。以上結(jié)果說明給藥后大鼠關(guān)節(jié)腫脹減輕。

2.2 各組大鼠病理切片結(jié)果

HE 染色和番紅固綠染色結(jié)果（圖2）顯示，空白組關(guān)節(jié)邊緣清晰，未見血管翳增生和關(guān)節(jié)侵蝕。與空白組相比，模型組大鼠關(guān)節(jié)處軟骨增生，并侵蝕軟骨及骨小梁，少量覆于軟骨表面形成血管翳，骨關(guān)節(jié)被破壞，關(guān)節(jié)腔內(nèi)可見炎癥細(xì)胞浸潤且細(xì)胞基質(zhì)流失嚴(yán)重。與模型組相比，來氟米特組給藥后在骨侵蝕和血管翳的形成上均有一定程度緩解。

圖2 各組大鼠踝關(guān)節(jié)的HE 染色切片和番紅固綠染色切片結(jié)果

2.3 各組大鼠脾指數(shù)分析

對各組大鼠的脾指數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計分析（圖3）。與空白組相比，模型組大鼠的脾指數(shù)有顯著增加（P ＜0.01）。與模型組大鼠相比，來氟米特組脾指數(shù)有降低趨勢，但不具備統(tǒng)計學(xué)意義。

圖3 各組大鼠脾指數(shù)結(jié)果（n=6）

2.4 各組大鼠血清中IL-1β、IL-6 和IgG 水平

與空白組相比，模型組大鼠血清中IL-1β、IL-6和IgG 含量均顯著升高（P ＜0.01）。與模型組相比，來氟米特組大鼠血清中IL-1β、IL-6 和IgG 含量均顯著降低（P ＜0.01）。結(jié)果見圖4。

圖4 各組大鼠血清中的IL-6（A）、IL-1β（B）及IgG（C）水平（n=6）

2.5 多元統(tǒng)計分析

將各組血清樣品按照“1.7.1”項下方法處理后，經(jīng)過UPLC-Q-TOF-MS 分析，得到總離子流（total ion current，TIC）圖（圖5）。

圖5 空白組（A）、模型組（B）及來氟米特組（C）的TIC圖

各組數(shù)據(jù)進(jìn)行峰提取、峰對齊和峰過濾操作后，得到由保留時間、Mass 值和峰面積組成的三維數(shù)據(jù)矩陣，利用SIMCA P 14.1 軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計分析。首先使用PCA 對各組進(jìn)行無監(jiān)督判別分析。在負(fù)離子模式下，模型組與給藥組數(shù)據(jù)重疊性較大，說明在負(fù)離子模式下所檢測化合物不能體現(xiàn)給藥后大鼠體內(nèi)內(nèi)源性化合物的改變情況；而在正離子模式下，給藥組和模型組有較為明顯的區(qū)分（圖6A），說明藥物干預(yù)的內(nèi)源性化合物在正離子模式下有較強的響應(yīng)，其中R2X 為0.551，說明該PCA 模型可信度高。故在本論文采用正離子模式下所采集數(shù)據(jù)進(jìn)行后續(xù)分析。PCA 得分圖表明，QC 樣品聚合良好，說明儀器在數(shù)據(jù)收集過程中穩(wěn)定，數(shù)據(jù)可信?？瞻捉M、模型組和來氟米特組之間能區(qū)別開，各組的代謝輪廓存在差異。

圖6 各組PCA 分析（A）；空白組和模型組的OPLS-DA分析（B）及OPLS-DA 模型驗證結(jié)果（C）；模型組和來氟米特組的OPLS-DA分析（D）及OPLS-DA 模型驗證結(jié)果（E）

2.5.1 差異代謝物篩選 為區(qū)分各組間的特征變量，獲得組間差異信息，采用OPLS-DA 分析空白組和模型組的差異（圖6B），兩組數(shù)據(jù)能夠明顯地區(qū)分為兩類，說明兩組之間存在明顯差異。對該模型進(jìn)行200 次置換檢驗，檢驗結(jié)果如圖6C 所示，Q2和R2左側(cè)低于最右側(cè)，且Q2交于Y 軸原點以下，說明該模型擬合結(jié)果良好，可信度高。在此模型中，R2Y和Q2Y 分別為0.997 和0.781，說明該模型的解釋能力和預(yù)測能力均良好。在VIP>1 和單因素分析（P<0.05）共同篩選下，通過Metlin 等多個數(shù)據(jù)庫檢索鑒定，共指認(rèn)出51 種與疾病密切相關(guān)的差異代謝物，具體信息見表1。為直觀展示出這些差異代謝物在空白組和模型組中含量分布差異，使用熱圖進(jìn)行結(jié)果展示（圖7A）。將內(nèi)源代謝物的HMDB 號帶入MetaboAnalyst 5.0 在線數(shù)據(jù)庫進(jìn)行pathway analysis，并篩選出P<0.05 的代謝通路。結(jié)果如圖7B 所示，說明牛CⅡ誘導(dǎo)的大鼠RA 模型可引起類固醇激素類生物合成、鞘脂代謝和嘌呤代謝的異常。

表1 疾病相關(guān)差異代謝物信息

表2 來氟米特干預(yù)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病的內(nèi)源差異性代謝物信息

圖7 空白組和模型組差異代謝物熱圖（A）；RA 代謝通路（B）

其次，模型組和來氟米特組進(jìn)行OPLS-DA 分析（圖6D），自動擬合建立代謝輪廓。該模型中R2Y 和Q2Y 參數(shù)分別為0.998 和0.736，說明該模型預(yù)測能力和解釋能力強。對該模型進(jìn)行200 次置換檢驗，檢驗結(jié)果如圖6E 所示，Q2和R2左側(cè)均低于最右側(cè)，且Q2交于Y 軸原點以下，說明該模型擬合結(jié)果良好，進(jìn)一步判斷該模型結(jié)果可信。在前期篩選的51 個疾病相關(guān)差異代謝物的基礎(chǔ)上，根據(jù)VIP ＞1 和單因素分析（P ＜0.05）進(jìn)行再次篩選。結(jié)果表明，來氟米特顯著回調(diào)了14 種內(nèi)源性代謝物，具體信息見表1～2。對14 個差異內(nèi)源標(biāo)記物在各組中的相對含量進(jìn)行分析（圖8）。與空白組相比，除melatonin外，其余13 個內(nèi)源化合物的相對含量在模型組中顯著升高，來氟米特給藥后顯著降低。

圖8 14 種內(nèi)源代謝物在各組的相對含量

2.5.2 代謝通路分析 來氟米特回調(diào)的內(nèi)源化合物的HMDB 號投入Metaboanalysis 5.0 在線網(wǎng)站中進(jìn)行通路分析，并根據(jù)impact>0 篩選。結(jié)果顯示來氟米特主要調(diào)控了谷胱甘肽、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸代謝，還參與了花生四烯酸及嘌呤的代謝網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，從而發(fā)揮對RA 模型大鼠的保護(hù)作用。

3 討論

本文關(guān)節(jié)炎指數(shù)、血清指標(biāo)結(jié)果均說明來氟米特對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠有顯著保護(hù)作用。

代謝通路分析結(jié)果顯示，蛋氨酸通過轉(zhuǎn)硫基途徑代謝產(chǎn)生半胱氨酸，半胱氨酸又是谷胱甘肽的合成的必需底物，這一過程是谷胱甘肽合成速率的主要限制因素[15，16]。在本實驗中，S-adenosylhomocysteine 是蛋氨酸轉(zhuǎn)硫基代謝途徑中的重要中間產(chǎn)物，與空白組相比，S-adenosylhomocysteine 在模型組中含量異常升高，蛋氨酸轉(zhuǎn)硫代謝途徑異常，谷胱甘肽合成受到影響。谷胱甘肽代謝過程產(chǎn)生了大量的還原緩沖劑和抗氧化劑，維持人體細(xì)胞的正常生理活動[17]。模型組中NADPH和S-adenosylhomocysteine 含量異常升高，谷胱甘肽代謝、半胱氨酸和蛋氨酸失衡，是RA 大鼠體內(nèi)氧化和抗氧化機制紊亂，細(xì)胞和組織發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要表現(xiàn)。氧化應(yīng)激過程伴隨氧化自由基和活性氧的大量產(chǎn)生，同時促進(jìn)關(guān)節(jié)腔內(nèi)炎癥反應(yīng)發(fā)展。自由基可降解關(guān)節(jié)蛋白導(dǎo)致關(guān)節(jié)損傷[18]，活性氧會攻擊細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙，最終導(dǎo)致RA 關(guān)節(jié)損傷[19，20]。來氟米特調(diào)控半胱氨酸和蛋氨酸代謝、谷胱甘肽代謝，可緩解RA 自身免疫導(dǎo)致的氧化應(yīng)激，減輕細(xì)胞和組織損傷。

色氨酸及其代謝產(chǎn)物與自身免疫疾病密切相關(guān)，人體內(nèi)95%以上色氨酸經(jīng)由犬尿氨酸代謝途徑、5-羥色胺代謝途徑代謝。在犬尿氨酸代謝途徑中，色氨酸由吲哚胺吡咯2，3-加氧酶催化分解產(chǎn)生犬尿氨酸，后者由于其具有捕獲氧自由基的特性，被稱為內(nèi)源抗氧化劑[21]。在5-羥色胺代謝途徑中，5-羥色胺由色氨酸代謝產(chǎn)生，對多種免疫細(xì)胞有直接或間接作用。5-羥色胺作為melatonin 的前體，促進(jìn)巨噬細(xì)胞M1 極化過程中分泌IL-6 和TNF-α 等多種炎癥因子，促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化，破壞破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞之間的平衡，導(dǎo)致骨穩(wěn)態(tài)失衡，造成骨破壞[22]。5-羥色胺還能刺激巨噬細(xì)胞和成熟樹突狀細(xì)胞釋放超氧化物和多種炎癥因子，加重炎癥反應(yīng)[23]。在模型組中，5-羥色胺代謝轉(zhuǎn)化生成melatonin 途徑受阻，來氟米特干預(yù)后，5-羥色胺代謝途徑恢復(fù)正常，緩解關(guān)節(jié)炎癥和損傷。

環(huán)磷酸鳥苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）是嘌呤代謝通路中的重要代謝產(chǎn)物。有實驗證明，cGMP 的含量異常升高與RA 大鼠的痛敏行為如行走障礙、患側(cè)足趾抬起等密切相關(guān)[24]。花生四烯酸及其代謝產(chǎn)物在RA 患者體內(nèi)表達(dá)升高，并刺激RA 關(guān)節(jié)的炎癥過程，介導(dǎo)關(guān)節(jié)破壞[25，26]。白三烯D4（leukotriene D4，LTD4）是由花生四烯酸通過5-脂氧合酶代謝產(chǎn)生的關(guān)鍵代謝物，可以增加血管的通透性，增加局部炎癥關(guān)節(jié)的滲出，加劇關(guān)節(jié)損傷。LTD4 和其他炎癥介質(zhì)LTC4 和LTB4，可加劇RA 的疼痛反應(yīng)[27]。來氟米特通過回調(diào)環(huán)磷酸鳥苷和LTD4的水平，調(diào)控嘌呤代謝和花生四烯酸代謝，對RA 的炎癥和疼痛的緩解有重要意義。

本研究通過血清代謝組學(xué)，從機體在生理和病理不同狀態(tài)下的內(nèi)源化合物變化，闡述來氟米特干預(yù)RA 的機制。來氟米特作為免疫抑制劑，通過調(diào)控炎癥和免疫反應(yīng)中多種炎癥因子的釋放，干預(yù)谷胱甘肽、半胱氨酸、蛋氨酸、花生四烯酸、色氨酸及嘌呤代謝，發(fā)揮保護(hù)作用。代謝組學(xué)提供的病理條件下的異常代謝產(chǎn)物信息，可為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的預(yù)防與治療提供參考。