腫瘤異常蛋白、熱休克蛋白90α聯(lián)合血清腫瘤標志物檢測對非小細胞肺癌的診斷價值

崔翠蓮，趙遷楠

應急總醫(yī)院檢驗科，北京 100028

肺癌是全球范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，病死率高達90%，非小細胞肺癌占所有肺癌的80%，且約75%的患者就診時已發(fā)展至中晚期，生存率較低[1-2]。因此，早期診斷、及時治療是降低非小細胞肺癌患者死亡率的關(guān)鍵。血清腫瘤標志物檢測具有無不良反應、費用低及操作簡便等優(yōu)點，廣泛應用于臨床[3]。腫瘤異常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）、熱休克蛋白90α（heat shock protein 90α，HSP90α）可作為肺癌的診斷指標，且可準確反映肺癌患者的預后[4-5]。但目前臨床關(guān)于TAP、HSP90α聯(lián)合血清腫瘤標志物檢測診斷非小細胞肺癌的研究較少。因此，本研究探討TAP、HSP90α聯(lián)合神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、細胞角質(zhì)蛋白19 片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1）檢測對非小細胞肺癌的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年5月至2022年4月應急總醫(yī)院收治的非小細胞肺癌患者。納入標準：符合《2015年肺癌診療指南：共識和爭議》[6]中關(guān)于肺癌的診斷標準，經(jīng)病理學檢查確診為非小細胞肺癌；無放化療史。排除標準：合并肺部感染或肝腎功能不全；存在精神、認知功能障礙。依據(jù)納入和排除標準，本研究共納入90 例非小細胞肺癌患者，作為肺癌組，其中男56 例，女34 例；年齡48～76 歲，平均（56.29±5.41）歲；臨床分期：Ⅰ期12 例，Ⅱ期49 例，Ⅲ期29 例。另選取同期在應急總醫(yī)院健康體檢的90 例體檢者，作為對照組，其中男57 例，女33 例；年齡48～75 歲，平均（56.25±5.38）歲。兩組受試者性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P﹥0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意。

1.2 檢測方法

抽取兩組受試者空腹靜脈血5 ml，4000 r/min離心10 min，離心半徑8 cm，-40 ℃冰箱保存待檢。采用化學發(fā)光免疫法檢測兩組受試者血清NSE、CEA、CYFRA21-1 水平，采用酶聯(lián)免疫吸附測定檢測血清HSP90α水平。

采集兩組受試者空腹靜脈血，均勻推片，晾干后每張血片間隔均勻滴加TAP 試劑3 滴，2 h 后測定TAP 面積。

1.3 觀察指標和評價標準

①比較兩組受試者血清TAP 面積及HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平。②以病理學檢查結(jié)果為金標準，評估TAP 面積及HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 聯(lián)合檢測對非小細胞肺癌的診斷價值，將對照組體檢者視為病理結(jié)果陰性。陽性判定標準：TAP 面積為1～120 μm2判定為正?；驘o明顯凝聚物，TAP 面積為121～225 μm2判定為異常且凝聚物較小，TAP 面積﹥225 μm2判定為異常且凝聚物較大，截斷值為203.96 μm2，HSP90α截斷值為64.61 ng/ml，NSE 截斷值為23.33 ng/ml，CEA 截斷值為2.90 ng/ml，CYFRA21-1截斷值為3.66 ng/ml，上述指標高于截斷值則判定為陽性。當聯(lián)合檢測時，任何一個指標陽性即判定為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0 軟件對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；以P﹤0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平和TAP 面積的比較

肺癌組患者血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平均明顯高于對照組，TAP 面積明顯大于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 兩組受試者血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平和TAP 面積的比較

2.2 血清TAP 面積、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 單獨及聯(lián)合檢測對非小細胞肺癌的診斷價值

五項聯(lián)合檢測診斷非小細胞肺癌的靈敏度為93.33%，陰性預測值為91.55%，均高于血清CEA、NSE、CYFRA21-1、TAP 面積、HSP90α單獨檢測。（表2、表3）

表2 血清TAP面積、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1單獨及聯(lián)合檢測診斷非小細胞肺癌的結(jié)果與病理學診斷結(jié)果的對照

表3 血清TAP 面積、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 單獨及聯(lián)合檢測對非小細胞肺癌的診斷價值

3 討論

非小細胞肺癌的發(fā)生與吸煙、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、肺結(jié)核、遺傳等因素有關(guān)，近年來，肺癌的發(fā)病率逐年上升，且呈年輕化趨勢，嚴重威脅患者的生命健康[7-8]。非小細胞肺癌多不易診斷，常因發(fā)病隱匿和早期無明顯癥狀等而延誤診斷。因此，對非小細胞肺癌患者進行早期診斷已成為當今醫(yī)學研究者的工作重點[9]。

在非小細胞肺癌的診斷中，細胞學檢查必不可少，但該方式屬于有創(chuàng)操作，且樣本采集難度較大，操作復雜，難以廣泛應用于早期腫瘤的篩查中；影像學檢查有漏診、誤診的風險，血清腫瘤標志物可為非小細胞肺癌的早期診斷提供參考依據(jù)[10-12]。

CEA 是廣譜腫瘤標志物，是非小細胞肺癌最常見的診斷指標，在健康者體內(nèi)含量較低，而腫瘤患者可分泌CEA，使血液、體液中的CEA 水平異常升高[13-14]。CEA 在肺癌、胃腸腫瘤及乳腺癌等多種腫瘤組織中高表達，F(xiàn)erreira 等[15]研究表明，血清CEA 是非小細胞肺癌患者預后的獨立影響因素。王秀梅[16]的研究結(jié)果顯示，乳腺癌患者血清CEA水平明顯升高，且與患者的不良預后相關(guān)，但CEA單獨檢測診斷非小細胞肺癌的假陽性率較高，需聯(lián)合其他腫瘤標志物共同檢測。NSE 是一種神經(jīng)內(nèi)分泌組織中的糖酵解酶，診斷非小細胞肺癌的靈敏度及特異度均較高，在監(jiān)測非小細胞肺癌和神經(jīng)母細胞瘤病情嚴重程度、臨床療效和預后中有重要意義[17-18]。CYFRA21-1 是由細胞結(jié)構(gòu)中細胞角蛋白19 的兩個單克隆抗體組成，當腫瘤細胞溶解或壞死脫落時，會釋放大量的CYFRA21-1，因此，CYFRA21-1 可反映腫瘤細胞活性[19-20]。TAP 與腫瘤的轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，當腫瘤細胞分化到一定程度時，TAP 釋放入血，大量存在于外周血中。宋妍[21]的研究結(jié)果顯示，TAP 聯(lián)合CYFRA21-1、CEA、NSE 診斷肺癌的靈敏度和特異度均較高。HSP90α是應激蛋白，機體受到刺激產(chǎn)生應激反應時HSP90α大量分泌，能夠被腫瘤細胞分泌到細胞外發(fā)揮作用；且HSP90α具有分子伴侶功能，在細胞內(nèi)可與多種細胞周期信號通路中的關(guān)鍵蛋白酶相互作用，與腫瘤細胞周期、分化等密切相關(guān)[22-23]。

本研究結(jié)果顯示，肺癌組患者血清HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 水平均明顯高于對照組，TAP 面積明顯大于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P﹤0.01）；五項聯(lián)合檢測診斷非小細胞肺癌的靈敏度為93.33%、陰性預測值為91.55%，均高于血清CEA、NSE、CYFRA21-1、TAP 面積、HSP90α單獨檢測，特異度有所降低，表明聯(lián)合檢測可提高非小細胞肺癌的診斷效能，降低誤診率。

綜上所述，TAP、HSP90α、NSE、CEA、CYFRA21-1 聯(lián)合檢測可提高對非小細胞肺癌的診斷效能。