細(xì)菌溶解產(chǎn)物泛福舒作用機(jī)制及防治呼吸系統(tǒng)疾病應(yīng)用進(jìn)展

何龍希，肖 灑，張 琪，朱書瑤，張 劍

（四川大學(xué)華西醫(yī)院，四川 成都 610041）

慢性呼吸系統(tǒng)疾?。–RD）困擾著全世界數(shù)以億計(jì)的人群，世界衛(wèi)生組織（WHO）將慢性呼吸系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病、惡性腫瘤、糖尿病與代謝疾病共同列為全球四大慢性非傳染性疾?。?］。《中國居民營(yíng)養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告（2015 年）》指出，我國每10 個(gè)40 歲及以上人群中就有1 個(gè)患有慢性阻塞性肺疾病（COPD）。CRD 死亡率高達(dá)0.68‰，僅次于心腦血管疾?。?.72‰）和癌癥（1.44‰），成為我國居民主要死因之一［2］。一項(xiàng)針對(duì)中國CRD死亡情況及變化趨勢(shì)的報(bào)告指出，我國2019 年CRD 的死亡人數(shù)和標(biāo)化死亡率均處于較高水平，死亡率位居世界第2（27.3%），標(biāo)化死亡率位居第3，提示CRD 仍是威脅我國人群健康的重要疾?。?-4］。自20世紀(jì)70 年代以來，細(xì)菌衍生物免疫調(diào)節(jié)劑主要用于預(yù)防復(fù)發(fā)性呼吸道感染［5］。細(xì)菌溶解產(chǎn)物泛福舒包含8種呼吸道感染中最常見的微生物（等量）的裂解物，主要適用于反復(fù)呼吸道感染和慢性支氣管炎急性發(fā)作的預(yù)防，以及急性呼吸道感染的輔助治療［6］。泛福舒在臨床治療新型冠狀病毒（簡(jiǎn)稱新冠病毒）肺炎的效果及防治作用均有報(bào)道。本研究中經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索PubMed、萬方、維普數(shù)據(jù)庫自建庫起至2022 年6 月的相關(guān)文獻(xiàn)，共納入65 篇文獻(xiàn)，就泛福舒的作用機(jī)制及在防治呼吸系統(tǒng)疾病、新冠病毒肺炎的應(yīng)用現(xiàn)狀作一綜述。

1 作用機(jī)制

1.1 總體概述

泛福舒屬生物制劑中的細(xì)菌溶解產(chǎn)物，臨床作為非特異性免疫調(diào)節(jié)劑使用，主要由8種常見呼吸道病原菌的凍干溶解物構(gòu)成，其中包括革蘭陰性菌流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌、臭鼻克雷伯菌，以及革蘭陽性菌肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、金黃色葡萄球菌［7］，口服后通過腸黏膜攝取M 細(xì)胞，激活黏膜免疫系統(tǒng)。泛福舒可通過調(diào)節(jié)固有免疫（巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及細(xì)胞因子分泌）和適應(yīng)性免疫（淋巴細(xì)胞亞群分布和免疫球蛋白生成）2個(gè)方面調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能［8］。作用機(jī)制見表1。

表1 泛福舒的作用機(jī)制Tab.1 Mechanism of Broncho-Vaxom

1.2 固有免疫

固有免疫系統(tǒng)由物理屏障（黏膜上皮細(xì)胞）和化學(xué)屏障（包括分泌的黏液、乳酸、不飽和脂肪酸、抗菌肽等）、固有免疫細(xì)胞［吞噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞和?δT 細(xì)胞等］及免疫分子［干擾素、防御素等，補(bǔ)體、抗菌蛋白、酶類物質(zhì)等，白細(xì)胞介素8，細(xì)胞內(nèi)趨化因子如巨噬細(xì)胞炎性蛋白1（MIP-1）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）等］組成，是機(jī)體抵御病原體入侵的第一道防線，可對(duì)病原體入侵即時(shí)應(yīng)答［9-12］。

細(xì)菌、病毒等微生物中特有的、宿主中不存在的保守分子結(jié)構(gòu)稱為病原體相關(guān)分子模式（PAMPs）［13］。而固有免疫細(xì)胞表面存在的可識(shí)別PAMPs 的受體稱為模式識(shí)別受體（PRRs）［14］。固有免疫細(xì)胞通過PRRs 識(shí)別病原體PAMPs，啟動(dòng)即時(shí)效應(yīng)。泛福舒含有PAMPs，可被APC 上的Toll 樣受體（TLRs）識(shí)別，激活固有免疫反應(yīng)，產(chǎn)生非特異性免疫調(diào)節(jié)作用［15］。一項(xiàng)動(dòng)物研究通過構(gòu)建模型小鼠，分析泛福舒在體外和體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，包括促進(jìn)巨噬細(xì)胞分化，體液免疫，調(diào)節(jié)輔助性T1細(xì)胞和輔助性T2細(xì)胞比例（Th1/Th2）平衡等［16］。在小鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞中，觀察到被不同濃度泛福舒刺激40 h后，一氧化氮生成增加，生成量與泛福舒劑量呈正相關(guān)；被10μg/mL 泛福舒刺激2 h后，顯示細(xì)胞核內(nèi)有很強(qiáng)的熒光信號(hào)，提示核因子κB（NF-κB）有明顯遷移。

細(xì)胞黏附分子（CAMs）是啟動(dòng)免疫應(yīng)答和炎性反應(yīng)的重要分子基礎(chǔ)，是眾多介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間相互接觸和結(jié)合分子的統(tǒng)稱，以受體-配體結(jié)合的形式發(fā)揮作用［17］。一項(xiàng)在健康志愿者的單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的研究中，觀察不同濃度泛福舒干預(yù)下巨噬細(xì)胞分化抗原-1（MAC-1）、ICAM-1 的表達(dá)，以1μg/mL脂多糖（LPS）作為活性對(duì)照物。研究顯示，泛福舒可劑量依賴性地增強(qiáng)單核細(xì)胞和粒細(xì)胞上整合素MAC - 1及ICAM-1 的表達(dá)［18］。

吞噬作用主要由巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞進(jìn)行，是重要的固有免疫防御機(jī)制，病原體攝入形成吞噬體后，可通過氧依賴和非氧依賴2種途徑殺傷病原體［19］。一項(xiàng)體外研究分析了泛福舒對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞代謝和功能的刺激作用，以及和巨噬細(xì)胞活化因子（MAF）、細(xì)菌LPS刺激效果的區(qū)別，結(jié)果顯示，泛福舒刺激氮氧化物生成，激活巨噬細(xì)胞的吞噬活性［20］。亞硝酸鹽是呼吸爆發(fā)的重要產(chǎn)物，水平越高，巨噬細(xì)胞吞噬活性越強(qiáng)。體外實(shí)驗(yàn)表明，泛福舒可顯著促進(jìn)巨噬細(xì)胞中亞硝酸鹽的產(chǎn)生，提示巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)作用的增強(qiáng)，表明泛福舒可激活巨噬細(xì)胞的吞噬作用［21］。

此外，泛福舒可提高NK 細(xì)胞活性。NK 細(xì)胞在抗病毒及調(diào)節(jié)其他免疫細(xì)胞中起關(guān)鍵作用，NK 細(xì)胞可不依賴抗體，非特異性地殺傷病毒感染細(xì)胞的淋巴細(xì)胞［22］。一項(xiàng)體外研究中，取健康志愿者的外周血單核細(xì)胞（PBMC），觀察不同濃度泛福舒下NK 細(xì)胞的活性，結(jié)果顯示，泛福舒質(zhì)量濃度在5～1 000μg/mL 范圍內(nèi)均可顯著提升外周血NK細(xì)胞的活性［23］。

1.3 適應(yīng)性免疫

由T 淋巴細(xì)胞和B 淋巴細(xì)胞及其產(chǎn)物組成，又稱獲得性免疫或特異性免疫，具有特異性、多樣性、免疫記憶、特化作用、自我限制、自我耐受等特點(diǎn)，負(fù)責(zé)消除感染后期的病原體［24］。T淋巴細(xì)胞可分化為不同類型的效應(yīng)細(xì)胞。初始T 輔助細(xì)胞（Th0）具有通過產(chǎn)生細(xì)胞因子來刺激其他免疫細(xì)胞的能力，可分化為Th1，Th2，Th17，Treg等多種類型。一項(xiàng)系統(tǒng)性評(píng)價(jià)和Meta分析納入53項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照研究共4 851 例兒童患者，評(píng)估泛福舒在兒童反復(fù)呼吸道感染中的療效及安全性，結(jié)果顯示，相比對(duì)照組，泛福舒可顯著增加T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+，CD4+，CD4+/CD8+）水平［25］。

B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，介導(dǎo)體液性免疫應(yīng)答。其在抗原刺激下可分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可合成和分泌抗體（免疫球蛋白），主要執(zhí)行機(jī)體的體液免疫［26］。一項(xiàng)體外實(shí)驗(yàn)表明，泛福舒可顯著增加B 淋巴細(xì)胞CD40和CD86的表達(dá)，并可提升血清和支氣管肺泡灌洗液（BALF）中病原特異性IgA抗體的水平［27］。

2 應(yīng)用現(xiàn)狀

2.1 小兒呼吸系統(tǒng)疾病

2.1.1 概述

正常新生兒出生后4～12 周才開始產(chǎn)生自身丙種球蛋白，1 歲達(dá)到成人水平的60%，10 歲達(dá)到成人水平［28］；且新生兒的淋巴組織發(fā)育不良，漿細(xì)胞形成遲緩，而血清免疫球蛋白的產(chǎn)生與漿細(xì)胞及淋巴組織密切相關(guān)。故幼小嬰兒產(chǎn)生抗體的反應(yīng)較弱；由母體獲得的抗體可能使嬰兒對(duì)該抗原的刺激受到特異性抑制，即母體抗體的抑制作用。出生后6～9個(gè)月，在大多數(shù)小兒體內(nèi)從母體獲得的被動(dòng)抗體消失［29］。故小兒對(duì)于抵御外界病毒、細(xì)菌、真菌侵襲能力較弱，而泛福舒可通過多途徑強(qiáng)化固有免疫和適應(yīng)性免疫，降低小兒患呼吸系統(tǒng)疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

2.1.2 小兒復(fù)發(fā)性呼吸道感染

復(fù)發(fā)性呼吸道感染（RRTIs）是兒童常見疾病之一［30］。定義為每年頻繁發(fā)生的任何上呼吸道或下呼吸道感染，復(fù)發(fā)的概念目前尚無統(tǒng)一規(guī)定［31］。RRTIs 的持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，可能會(huì)影響兒童的生長(zhǎng)，并增加他們進(jìn)入成年后患其他呼吸系統(tǒng)疾病的機(jī)會(huì)。目前尚無針對(duì)RRTIs 的具體治療指南。從流行病學(xué)的角度來看，IgA和/或免疫球蛋白G（IgG）亞類缺乏癥在復(fù)發(fā)性上呼吸道感染患者中的患病率為25%，在復(fù)發(fā)性肺部感染患者中為22%，在復(fù)發(fā)性毛細(xì)支氣管炎患者中為12.3%［32-33］。IgG 亞類缺乏癥在幼兒中相當(dāng)突出，但在年齡較大的兒童中卻很罕見，表明免疫系統(tǒng)的短暫不成熟是可能的致病因素［34］。免疫系統(tǒng)的缺陷如常見的可變免疫缺陷和選擇性IgA 缺陷，已知與細(xì)菌和病毒的頻繁呼吸道感染有關(guān)。泛福舒可刺激免疫防御及唾液腺和支氣管肺泡IgA，以及血清IgA 和IgG 的產(chǎn)生，從而達(dá)到預(yù)防感染、增強(qiáng)免疫力的作用。YIN 等［25］對(duì)泛福舒在小兒RRTIs 的應(yīng)用進(jìn)行了系統(tǒng)回顧和Meta 分析，計(jì)算機(jī)檢索PubMed，Embase，The Cochrane Library，CBM，及中國知網(wǎng)、萬方、維普數(shù)據(jù)庫中發(fā)表的泛福舒用于兒童RRTIs的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)。根據(jù)Cochrane合作組織的指南進(jìn)行偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，并對(duì)證據(jù)水平進(jìn)行分級(jí)，最終納入53 項(xiàng)、涉及4 851 例兒童患者的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，泛福舒的使用與呼吸道感染頻率的降低呈正相關(guān)［MD= -2.33，95%CI（-2.75，-1.90），P＜0.000 01］；抗菌藥物療程、感染、發(fā)熱、咳嗽、喘息、血清（IgG，IgA，IgM）水平和T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+，CD4+，CD8+）水平升高顯著優(yōu)于對(duì)照組。

2.1.3 小兒哮喘

哮喘是世界上最普遍的慢性呼吸道疾病，近3億人患有哮喘疾?。?5］，是兒童最常見的慢性疾病，衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)越來越重［36］。遺傳學(xué)對(duì)哮喘的具體貢獻(xiàn)尚未完全闡明，但迄今已確定了大量與哮喘和氣道炎癥可靠相關(guān)的遺傳標(biāo)志物［37］。LU等［38］為了評(píng)價(jià)常規(guī)治療聯(lián)合泛福舒預(yù)防兒童哮喘的療效，以及對(duì)自然殺傷T（NKT）細(xì)胞數(shù)量及其細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響，將60 例哮喘患兒分為泛福舒治療組和常規(guī)吸入皮質(zhì)類固醇組，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血NKT 細(xì)胞數(shù)量和CD4+NKT 細(xì)胞數(shù)量，采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)NKT細(xì)胞激動(dòng)劑培養(yǎng)后細(xì)胞γ干擾素（IFN-γ）、白細(xì)胞介素4（IL-4）、白細(xì)胞介素10（IL-10）的水平。治療后，兩組患者哮喘發(fā)作次數(shù)均較治療前明顯減少。但單純泛福舒治療組治療后呼吸道感染較治療前減少。此外，泛福舒治療組哮喘發(fā)作頻率和抗菌藥物的使用量低于常規(guī)吸入皮質(zhì)類固醇組。泛福舒治療后外周血NKT 細(xì)胞和CD4+NKT 細(xì)胞數(shù)量均高于治療前。治療后，與常規(guī)吸入皮質(zhì)類固醇組相比，泛福舒治療組IFN-γ/IL-4和IL-10水平均升高，而IL- 4 水平降低。提示泛福舒聯(lián)合常規(guī)哮喘治療可能通過改變NKT 細(xì)胞的比例和細(xì)胞因子，預(yù)防反復(fù)呼吸道感染，抑制哮喘發(fā)作的嚴(yán)重程度。

2.1.4 小兒復(fù)發(fā)性扁桃體炎

兒童時(shí)期反復(fù)發(fā)作的急性扁桃體炎發(fā)病率較高［39］，其治療方式首選手術(shù)切除。通過扁桃體切除術(shù)可減少咽喉疼痛發(fā)作頻率的證據(jù)水平非常低（中等大小效應(yīng)），且在決定進(jìn)行扁桃體切除術(shù)時(shí)，應(yīng)權(quán)衡其潛在危害，包括術(shù)中和術(shù)后的發(fā)病率［40-41］。BITAR 等［42］對(duì)診斷為復(fù)習(xí)性扁桃體炎的177 例患兒進(jìn)行為期5 年的隊(duì)列研究，回顧性分析患兒的人口學(xué)資料及實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)，評(píng)估接受泛福舒3個(gè)月治療的療效。結(jié)果顯示，在131 例（74%）接受泛福舒作為初始治療的患兒中，99 例（75.6%）患兒急性扁桃體炎發(fā)作頻率有改善，51.2%的患兒完全有效，24.4%的患兒部分有效。長(zhǎng)期隨訪（中位隨訪時(shí)間9個(gè)月）發(fā)現(xiàn)，完全有效的患兒均不需切除扁桃體，34.4%有效的患兒需繼續(xù)切除扁桃體。表明大部分接受泛福舒治療復(fù)發(fā)性急性扁桃體炎的患兒在短期內(nèi)發(fā)作頻率有所降低，很少有患兒在長(zhǎng)期隨訪中最終需要切除扁桃體，對(duì)于治療小兒復(fù)發(fā)性急性扁桃體炎有一定臨床意義。

2.2 老年呼吸系統(tǒng)疾病

老年人由于呼吸系統(tǒng)解剖學(xué)變化、呼吸功能生理性減退，降低了肺通氣換氣能力和咳嗽能力［43］，且隨著年齡的增長(zhǎng)，其降低程度更明顯［44-45］。老年人免疫力低下，易發(fā)生上呼吸道感染，從而引起COPD 急性發(fā)作［46］。積極預(yù)防和控制感染是臨床治療COPD 的重要方式，但抗菌藥物不宜長(zhǎng)期應(yīng)用，臨床常通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能而增強(qiáng)其自身抗感染能力，可取得一定療效［47］。

STEURER-STEY 等［48］于2004 年對(duì)泛福舒治療老年COPD 的臨床效果項(xiàng)進(jìn)行系統(tǒng)回顧研究，通過電子數(shù)據(jù)庫、參考書，以及與文獻(xiàn)作者和制造商聯(lián)系收集數(shù)據(jù)，比較口服泛福舒患者與安慰劑或無治療患者的療效［48］。該研究共納入13 項(xiàng)試驗(yàn)，涉及1 971 例患者。其中，2 項(xiàng)試驗(yàn)（731 例患者）報(bào)道口服泛福舒后病情惡化［RR=0.83，95%CI（0.55，1.25）］，獲益1人需治療人數(shù)（NNTB）為15.4［95%CI（5.5，+∞）］；5項(xiàng)試驗(yàn)（591例患者）報(bào)道口服泛福舒患者癥狀改善［RR= 0.57，95%CI（0.49，0.66）；NNTB = 4，95%CI（2.8，5.4）］；2 項(xiàng)試驗(yàn)（163 例患者）報(bào)道使用泛福舒患者病情加重的平均持續(xù)時(shí)間較短［WMD= - 2.7，95%CI（- 3.5，- 1.8）］；4 項(xiàng)試驗(yàn)（802 例患者）報(bào)道3.3%的泛福舒使用患者發(fā)生瘙癢或皮疹，對(duì)照組為1.0%［OR= 2.94，95%CI（1.12，7.69）］；2項(xiàng)試驗(yàn)（671例患者）報(bào)道8%的泛福舒使用患者發(fā)生泌尿系統(tǒng)不良反應(yīng)，對(duì)照組為3.0%［OR=2.62，95%CI（1.35，5.11）］。

2.3 新冠病毒感染防治

盡管開發(fā)了新冠病毒疫苗，并采取了有效的衛(wèi)生措施，但仍有幾種變異毒株非?；钴S，影響公眾健康［49］。目前，迫切需要開發(fā)新的有效的治療方法，盡量減少嚴(yán)重呼吸道病毒感染和所有相關(guān)后遺癥的負(fù)擔(dān)?；谖⑸镅苌返闹委?，如益生菌和后生物制劑，可以預(yù)防和治療病毒誘導(dǎo)的呼吸道疾?。?0］，但均側(cè)重于通過口服途徑給予微生物治療，誘導(dǎo)腸- 肺軸產(chǎn)生有效的宿主抗病毒反應(yīng)。

CASSAO 等［51］收集來自新冠病毒陽性的住院患者鼻咽部樣本，通過體外實(shí)驗(yàn)探討體外泛福舒暴露在新冠病毒感染患者鼻咽部細(xì)胞中的影響。結(jié)果顯示，泛福舒下調(diào)上述細(xì)胞中新冠病毒N1 基因的表達(dá)，增加維甲酸誘導(dǎo)基因蛋白I（RIG-I）DDX58 基因的表達(dá)，可以確定RIG-I激活可能是新冠病毒感染過程中泛福舒對(duì)鼻咽細(xì)胞作用的相關(guān)途徑之一，這與RIG-I 激活相關(guān)的抗病毒反應(yīng)對(duì)控制新冠病毒感染至關(guān)重要［52］。新冠病毒蛋白可通過與RIG - I 相互作用抑制抗病毒反應(yīng)［53-54］，有效的氣道抗病毒活性可平衡免疫反應(yīng)，清除病毒，幫助患者康復(fù)。

SALZMANN等［55］用免疫激活細(xì)菌提取物泛福舒處理冠狀病毒（MCoV）A59 模型小鼠，用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）、RNA 測(cè)序、組織學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)組織樣本進(jìn)行分析。治療后，肺組織中間質(zhì)巨噬細(xì)胞積累，導(dǎo)致MCoV 感染后Ⅰ型干擾素（IFN-Ⅰ）信號(hào)反應(yīng)加快，對(duì)肺組織產(chǎn)生保護(hù)作用。此外，RNA 測(cè)序顯示，接受泛福舒治療的小鼠肺組織在第4 天類似于健康和病毒感染的肺組織之間的中間階段，表明其更快地恢復(fù)到正常的組織穩(wěn)態(tài)。通過在病毒感染前將受體小鼠的幼稚肺巨噬細(xì)胞過繼轉(zhuǎn)移到肺部來模擬其藥理作用。當(dāng)抑制初始IFN - Ⅰ信號(hào)時(shí)，泛福舒的有益作用被取消。研究表明，泛福舒增強(qiáng)了肺巨噬細(xì)胞，使IFN對(duì)病毒侵襲的反應(yīng)更快，這是經(jīng)口誘導(dǎo)先天免疫系統(tǒng)訓(xùn)練的一部分。先天免疫系統(tǒng)是抵抗新冠病毒感染的強(qiáng)大屏障［56］。因此，要成功對(duì)抗新冠病毒感染，需在早期激活先天免疫系統(tǒng)以抵御病毒感染和控制免疫系統(tǒng)的激活，從而防止器官損傷之間取得適當(dāng)?shù)钠胶猓?7］。通過與人類新冠病毒感染相似的小鼠MCoV 模型研究發(fā)現(xiàn)，灌用泛福舒能使肺中巨噬細(xì)胞數(shù)量增加，導(dǎo)致IFN及其下游靶點(diǎn)增強(qiáng)和更快激活，從而更快清除病毒，同時(shí)減少組織損傷［58］。故可推測(cè)在新冠病毒大流行期間類似的機(jī)制可能是有益的。

口腔、鼻導(dǎo)管和上氣道的上皮細(xì)胞是新冠病毒的主要靶點(diǎn)［59-61］，通過病毒刺突蛋白（S 蛋白）與人血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）等宿主蛋白和糖胺聚糖相互作用［62-63］。ZHANG 等［64］的研究將對(duì)新冠病毒感染的易感性定義為新冠病毒的遺傳變異和宿主的遺傳結(jié)合的結(jié)果，表明病毒S 蛋白的不同基因變體以不同強(qiáng)度與ACE2 變體結(jié)合，這可能在感染的嚴(yán)重程度上有影響。FANG 等［65］研究泛福舒對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞S 蛋白結(jié)合蛋白表達(dá)的影響，使用泛福舒處理支氣管上皮細(xì)胞5 d，采用免疫印跡（Western blot）法和定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測(cè)新冠病毒受體ACE2、跨膜蛋白酶絲氨酸亞型2（TMPRSS2）、二肽基肽酶- 4（DPP4），以及分解蛋白和金屬蛋白酶17（ADAM17）的表達(dá)。采用ELISA 法檢測(cè)可溶性ACE2、硫酸肝素、肝素酶和透明質(zhì)酸。結(jié)果顯示，泛福舒顯著下調(diào)了ACE2（P＜0.001）、TMPRSS2（P＜0.001）、DPP4（P＜0.005）和細(xì)胞硫酸肝素（P＜0.01）的表達(dá)，顯著上調(diào)了ADAM17（P＜0.02）的表達(dá)。此外，泛福舒提高了可溶性ACE2（P＜0.05）、透明質(zhì)酸（P＜0.002）和透明質(zhì)酸合成酶1（P＜0.01）的水平。因此，在泛福舒預(yù)處理的細(xì)胞中，新冠病毒S蛋白偽型慢病毒的感染減少。泛福舒的所有作用均與濃度和時(shí)間有關(guān)。提示泛福舒可能通過修飾宿主細(xì)胞膜蛋白和特異性的糖胺聚糖來減少S 蛋白與上皮細(xì)胞的結(jié)合，其可能是新冠病毒感染肺炎治療的附加藥物。

3 展望

泛福舒作為一種細(xì)菌溶解產(chǎn)物，通過多種途徑強(qiáng)化人體固有免疫和適應(yīng)性免疫，目前廣泛應(yīng)用于小兒與老年患者呼吸道疾病的防治，具有良好的臨床效果。雖然對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的治療并未起到主要作用，但作為輔助用藥或預(yù)防性用藥，可明顯提高患者的免疫力。目前已有文獻(xiàn)報(bào)道了泛福舒在新冠病毒感染防治中的作用，證明泛福舒在新冠病毒傳播阻斷、控制中具有一定作用。但由于文獻(xiàn)質(zhì)量參差不齊，可能存在商業(yè)利益等原因，泛福舒治療新冠病毒感染的真實(shí)作用有待考察，未來仍需大量研究來驗(yàn)證。