益氣固本湯聯(lián)合西藥治療小兒肺腎陽虛型支氣管哮喘的療效及其對(duì)血清MMP-9、TIMP-1、IL-6、IL-8和免疫功能的影響

牟昱丹， 郭艷輝， 李麗， 石艷紅1，

（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510405；2.廣東祈福醫(yī)院，廣東廣州 511495；3.廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬廣州中醫(yī)醫(yī)院，廣東廣州 510130）

小兒支氣管哮喘屬于兒科高發(fā)性呼吸系統(tǒng)疾病，臨床上主要表現(xiàn)為呼吸困難、劇烈咳嗽、氣喘等多種癥狀[1]。西醫(yī)治療小兒支氣管哮喘常用的治療方案包括糖皮質(zhì)激素藥物吸入治療以及白三烯受體拮抗劑藥物治療，上述方案雖然能夠較好地緩解患兒的病情，但難以根治患兒的疾病[2]。支氣管哮喘屬于中醫(yī)學(xué)“哮病”“喘證”的范疇，中醫(yī)認(rèn)為，痰阻是支氣管哮喘的主要病機(jī)，該病的出現(xiàn)與患兒脾、腎、肺功能失調(diào)密切相關(guān)，肺腎陽虛型屬于最常見的中醫(yī)證型之一，其治療關(guān)鍵在于化痰燥濕、補(bǔ)益肺腎。益氣固本湯是全國(guó)名老中醫(yī)徐榮謙教授的臨床經(jīng)驗(yàn)方，是由六君子湯合四物湯以及玉屏風(fēng)散加減組成，具有化痰燥濕、補(bǔ)益肺腎、益氣固本之功效。張玲等[3]的研究發(fā)現(xiàn)，益氣固本湯可以減輕哮喘小鼠的氣道炎癥反應(yīng)，延緩小鼠的哮喘發(fā)作。血清基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物1（TIMP-1）在支氣管哮喘患兒氣道纖維化過程中發(fā)揮著重要的作用，白細(xì)胞介素6（IL-6）和白細(xì)胞介素8（IL-8）在患兒炎性反應(yīng)發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用，而免疫功能與患兒的病情輕重有著直接的關(guān)系[4]。基于此，本研究主要觀察益氣固本湯治療小兒肺腎陽虛型支氣管哮喘的療效及其對(duì)MMP-9、TIMP-1、IL-6、IL-8 和免疫功能的影響，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象及分組選取2019年1月至2020年6月在廣東祈福醫(yī)院就診且明確診斷為肺腎陽虛型支氣管哮喘的患兒，共124 例。按就診先后順序，采用隨機(jī)數(shù)字表法將患兒隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組各62 例。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，且納入研究的所有患兒家長(zhǎng)均簽署了知情同意書。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組修訂的《支氣管哮喘防治指南（2016 年版）》[5]中支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)；中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[6]中肺腎陽虛型哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)①符合上述支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)；②中醫(yī)證型為肺腎陽虛型；③監(jiān)護(hù)人同意參加本研究并簽署了知情同意書的患兒。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)①對(duì)本研究所用藥物過敏的患兒；②存在先天性免疫缺陷的患兒；③合并有重要臟器功能嚴(yán)重衰竭的患兒；④監(jiān)護(hù)人不愿意簽署知情同意書或不配合研究的患兒。

1.5 治療方法

1.5.1 基礎(chǔ)治療 2 組患兒均參照《兒童支氣管哮喘防治常規(guī)（試行）》[7]，接受抗炎、平喘、止咳、吸氧、糾正水電解質(zhì)平衡等基礎(chǔ)治療。

1.5.2 對(duì)照組 給予孟魯司特鈉片口服治療。用法：孟魯司特鈉片（魯南貝特制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20083372），口服，每日1 次，每次5 mg，于睡前服用，持續(xù)用藥時(shí)間為28 d。

1.5.3 觀察組 在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用益氣固本湯治療。方藥組成：人參3 g，炙甘草、川芎、防風(fēng)各4 g，茯苓、白術(shù)、白芍各8 g，當(dāng)歸10 g，法半夏、黃芪、陳皮、炒白術(shù)各12 g，熟地黃16 g，車前草20 g。每日1劑，常規(guī)煎取300 mL，分2次于早晚服用，每次150 mL，持續(xù)用藥時(shí)間為28 d。

1.6 觀察指標(biāo)

1.6.1 哮喘癥狀積分 采用哮喘癥狀積分來評(píng)估患者的哮喘癥狀情況，哮喘癥狀積分分為日間哮喘癥狀積分及晚間哮喘癥狀積分，日間哮喘癥狀積分分值范圍在0～5 分之間，夜間哮喘癥狀積分分值范圍在0～4 分之間。分值越高，表示患兒哮喘癥狀越嚴(yán)重。

1.6.2 血清MMP-9、TIMP-1 及炎癥因子測(cè)定采集2 組患兒早晨空腹肘靜脈血，分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清MMP-9、TIMP-1、白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素8（IL-8）水平。觀察2 組患兒治療前后血清MMP-9、TIMP-1、IL-6、IL-8 水平的變化情況。

1.6.3 免疫功能指標(biāo)測(cè)定 通過全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)2 組患兒外周血中免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）以及免疫球蛋白A（IgA）含量，以評(píng)估2組患兒的免疫功能。觀察2組患兒治療前后血清IgM、IgG、IgA水平的變化情況。

1.6.4 肺功能指標(biāo)檢測(cè) 采用肺功能測(cè)定儀檢測(cè)2組患兒的用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼氣容積（FEV1），并計(jì)算FEV1/FVC 值，以評(píng)估2 組患兒的肺功能。觀察2 組患兒治療前后FVC、FEV1、FEV1/FVC等肺功能指標(biāo)的變化情況。

1.6.5 安全性評(píng)價(jià) 觀察2 組患兒治療過程中的不良反應(yīng)發(fā)生情況，以評(píng)價(jià)2 組治療方案的安全性。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)治療前后比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患兒脫落情況及基線資料比較在研究過程中，對(duì)照組有2例患兒因服用其他藥物而中斷研究，治療組有2 例患兒未完成整個(gè)療程的治療，最終共有120例患兒完成全部療程的治療，其中觀察組和對(duì)照組各60 例。對(duì)照組60 例患兒中，男36 例，女24 例；平均年齡（6.32 ± 2.58）歲。觀察組60 例患兒中，男33 例，女27 例；平均年齡（6.36±2.43）歲。2 組患兒的性別、年齡等基線資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 2組患兒治療前后哮喘癥狀積分比較表1結(jié)果顯示：治療前，2組患兒的日間哮喘癥狀積分及晚間哮喘癥狀積分比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，2 組患兒的日間哮喘癥狀積分及晚間哮喘癥狀積分均較治療前明顯降低（P＜0.05），且觀察組對(duì)日間哮喘癥狀積分及晚間哮喘癥狀積分的降低作用均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后哮喘癥狀積分比較Table 1 Comparison of asthma symptom scores between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，分）

表1 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后哮喘癥狀積分比較Table 1 Comparison of asthma symptom scores between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，分）

注：①P＜0.05，與治療前比較；②P＜0.01，與對(duì)照組治療后比較

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2.3 2組患兒治療前后血清MMP-9 及TIMP-1水平比較表2結(jié)果顯示：治療前，2組患兒血清MMP-9和TIMP-1水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，2 組患兒血清MMP-9 水平均較治療前降低（P＜0.05），血清TIMP-1水平均較治療前升高（P＜0.05），且觀察組對(duì)血清MMP-9水平的降低作用及對(duì)血清TIMP-1水平的升高作用均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表2 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后血清基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物1（TIMP-1）水平比較Table 2 Comparison of serum MMP-9 and TIMP-1 levels between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，μg·L-1）

表2 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后血清基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物1（TIMP-1）水平比較Table 2 Comparison of serum MMP-9 and TIMP-1 levels between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，μg·L-1）

注：①P＜0.05，與治療前比較；②P＜0.01，與對(duì)照組治療后比較

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2.4 2組患兒治療前后血清炎癥因子水平比較表3結(jié)果顯示：治療前，2組患兒血清IL-6、IL-8水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，2 組患兒血清IL-6、IL-8水平均較治療前明顯降低（P＜0.05），且觀察組對(duì)血清IL-6、IL-8 水平的降低作用均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表3 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后血清炎癥因子水平比較Table 3 Comparison of serum inflammatory factors levels between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，ng·L-1）

表3 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后血清炎癥因子水平比較Table 3 Comparison of serum inflammatory factors levels between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，ng·L-1）

注：①P＜0.05，與治療前比較；②P＜0.01，與對(duì)照組治療后比較

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2.5 2組患兒治療前后血清免疫功能指標(biāo)比較表4結(jié)果顯示：治療前，2 組患兒血清IgM、IgG、IgA水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，2 組患兒血清IgM、IgG、IgA 水平均較治療前明顯升高（P＜0.05），且觀察組對(duì)血清IgM、IgG、IgA水平的升高作用均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表4 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后血清免疫功能指標(biāo)比較Table 4 Comparison of serum immune function indices between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，g·L-1）

表4 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后血清免疫功能指標(biāo)比較Table 4 Comparison of serum immune function indices between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s，g·L-1）

注：①P＜0.05，與治療前比較；②P＜0.01，與對(duì)照組治療后比較

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2.6 2組患兒治療前后肺功能指標(biāo)比較表5結(jié)果顯示：治療前，2組患兒的FVC、FVE1、FVE1/FVC等肺功能指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，2 組患兒的FVC、FVE1、FVE1/FVC 等肺功能指標(biāo)均較治療前明顯改善（P＜0.05），且觀察組對(duì)FVC、FVE1、FVE1/FVC 等肺功能指標(biāo)的改善作用均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表5 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后肺功能指標(biāo)比較Table 5 Comparison of lung function indices between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s）

表5 2組肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒治療前后肺功能指標(biāo)比較Table 5 Comparison of lung function indices between the two groups of children with bronchial asthma of lung-kidney yang deficiency syndrome type before and after treatment（±s）

注：①P＜0.05，與治療前比較；②P＜0.01，與對(duì)照組治療后比較

組別觀察組對(duì)照組t值P值例數(shù)/例60 60 FVC/L治療前2.28±0.17 2.26±0.16 0.664 0.508 FVE1/L治療后73.35±1.29①②70.36±1.38①12.260 0.000治療后2.92±0.26①②2.45±0.27①9.713 0.000治療前1.56±0.14 1.55±0.15 0.378 0.706治療后2.12±0.23①②1.72±0.21①9.948 0.000（FVE1/FVC）/%治療前67.85±1.32 67.88±1.45 0.119 0.906

2.7 2組患兒不良反應(yīng)情況治療過程中，2組患兒均未發(fā)生明顯不良反應(yīng)，具有較高的安全性。

3 討論

支氣管哮喘作為一種常見的呼吸系統(tǒng)疾病，在臨床中醫(yī)診療中，肺腎陽虛型是最常見的中醫(yī)證型之一，其治療關(guān)鍵在于化痰燥濕、補(bǔ)腎健脾、益氣固表[8-12]。本研究主要采用益氣固本湯對(duì)肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒進(jìn)行治療，該方是由六君子湯、四物湯、玉屏風(fēng)散加減組方而成。六君子湯可健脾益氣、祛濕化痰；四物湯能補(bǔ)血活血；玉屏風(fēng)散可補(bǔ)益脾肺、益衛(wèi)固表。方中的人參、白術(shù)、黃芪益氣健脾，以固后天之本；當(dāng)歸、白芍、熟地黃養(yǎng)血補(bǔ)血，熟地黃兼能益腎填精以補(bǔ)腎水而固先天之本；川芎活血化瘀兼能祛風(fēng)散邪，防風(fēng)疏風(fēng)散邪、升發(fā)清陽，黃芪、白術(shù)、防風(fēng)相配，可培土生金，健脾益肺，益衛(wèi)固表；陳皮、半夏健脾燥濕化痰、降逆止咳平喘，車前草清肺止咳化痰。諸藥合用，共奏化痰燥濕、益氣固本的功效，能有效緩解支氣管哮喘患兒的哮喘癥狀[9-12]。在本研究中，治療28 d 后，觀察組的日間哮喘癥狀積分及晚間哮喘癥狀積分均明顯低于對(duì)照組，提示益氣固本湯對(duì)支氣管哮喘患兒的哮喘癥狀有明顯的改善作用，與上述研究結(jié)論一致。

血清基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物1（TIMP-1）水平與患兒氣道重塑關(guān)系密切，生理狀態(tài)下肺組織中的MMP-9 呈低表達(dá)狀態(tài)，在病理狀態(tài)下支氣管上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞等的MMP-9 表達(dá)水平升高，可加快患兒氣道纖維化的速度，而TIMP-1對(duì)MMP-9 的活性具有較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)患兒氣道纖維化具有阻止作用[13-14]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)治療28 d 后，觀察組血清MMP-9 水平低于對(duì)照組，血清TIMP-1水平高于對(duì)照組，表明益氣固本湯能夠有效提高血清TIMP-1 水平，降低血清MMP-9 水平，緩解患兒的哮喘癥狀。此外，有研究[15]表明白細(xì)胞介素6（IL-6）和白細(xì)胞介素8（IL-8）水平主要與機(jī)體炎性反應(yīng)密切相關(guān)，IL-6 及IL-8水平升高會(huì)導(dǎo)致機(jī)體炎性反應(yīng)程度加劇。在本研究中，觀察組患兒的血清IL-6 及IL-8 水平均低于對(duì)照組，表明益氣固本湯能有效減輕支氣管哮喘患兒的炎性反應(yīng)?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究也表明，益氣固本湯的藥方組成中，炙甘草的甘草酸成分能夠改善氣道痙攣癥狀，可以對(duì)氣道的高反應(yīng)起到有效抑制作用[16]；熟地黃有一定的消炎的作用，可有效緩解患兒的炎性癥狀，降低血清炎性因子水平[17]。

免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）以及免疫球蛋白A（IgA）水平與患兒的體液免疫功能密切相關(guān)，研究[18-23]發(fā)現(xiàn)，IgM、IgG、IgA 水平上升能夠有效增強(qiáng)患兒免疫功能，提高患兒對(duì)入侵病原體的抵抗能力。在本研究中，觀察組患兒的血清IgM、IgG、IgA水平均明顯高于對(duì)照組，提示益氣固本湯能夠有效改善支氣管哮喘患兒的免疫功能狀況。萬春霞[24]認(rèn)為，益氣固本湯對(duì)支氣管哮喘患兒免疫功能的改善作用可能與方中的黃芪有關(guān)；而丁賀田等[25]的研究發(fā)現(xiàn)，黃芪中的黃芪皂苷成分能夠?qū)χ夤芟純旱捏w液免疫及細(xì)胞免疫系統(tǒng)起到有效調(diào)節(jié)作用。

本研究還觀察到，觀察組患兒的用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼氣容積（FEV1）及FVE1/FVC等肺功能指標(biāo)均高于對(duì)照組，說明益氣固本湯能有效提高患兒肺功能水平，幫助患兒恢復(fù)正常呼吸狀態(tài)?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，方中的陳皮能夠?qū)純褐夤芷鸬接行U(kuò)張作用，同時(shí)還具有較好的祛痰作用[26]；另外，當(dāng)歸也具有解痙平喘的藥效，能夠?qū)純簹夤芗把苓M(jìn)行擴(kuò)張，從而有效改善患兒的肺功能狀況[27]。此外，在本研究中，2 組患兒均未出現(xiàn)不良反應(yīng)，說明益氣固本湯的用藥安全性較高。

綜上所述，益氣固本湯能有效改善肺腎陽虛型支氣管哮喘患兒的哮喘癥狀，其機(jī)制可能與減輕炎性反應(yīng)，增強(qiáng)免疫功能，改善肺功能有關(guān)。但由于本研究的樣本量較少，觀察時(shí)間較短，且僅為單中心的臨床研究，研究結(jié)論可能存在一定偏倚，故確切結(jié)論還需要進(jìn)一步開展多中心、大樣本的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)加以驗(yàn)證。