百合主要有效成分對小鼠B-16細胞黑色素含量、酪氨酸酶活性的影響

彭麗麗 劉朝圣 成雪 陳燕 楊嬌嬌 李翊瀾

〔摘要〕 目的 觀察百合多糖與百合皂苷對小鼠B-16細胞中細胞活力、酪氨酸酶活性及黑色素含量的影響。方法 選用同一傳代小鼠B-16細胞并隨機分為空白細胞組、空白對照組、熊果苷組、百合多糖組、百合皂苷組，共5組?？瞻准毎M加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液；空白對照組加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液和20 μL高密度聚乙烯；熊果苷組、百合多糖組、百合皂苷組分別加入不同濃度（0.2、0.4、0.6、0.8 mg/mL）的熊果苷、百合多糖、百合皂苷，作用3 d后，用CCK-8法檢測B-16細胞活力，用酪氨酸酶-多巴速率氧化法檢測B-16細胞中酪氨酸酶的活性，以MTT法檢測小鼠B-16細胞的黑色素含量。結(jié)果 與空白細胞組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力明顯升高（P<0.01），0.4、0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力均明顯降低（P<0.05，P<0.01）；各濃度熊果苷、百合多糖組和0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯降低（P<0.01），0.2 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性明顯升高（P<0.01）。與空白對照組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力明顯升高（P<0.01），0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力均明顯降低（P<0.01）；各濃度熊果苷、百合多糖組和0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯降低（P<0.01），0.2、0.4 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯升高（P<0.01）。與0.2 mg/mL熊果苷組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力、0.2 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯升高（P<0.01）。與0.4 mg/mL熊果苷組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力、0.4 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯升高（P<0.01）。與0.6 mg/mL熊果苷組比較，0.6 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯升高（P<0.01）。與0.4 mg/mL百合皂苷組比較，0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力均明顯降低（P<0.05，P<0.01）。與0.6 mg/mL百合皂苷組比較，0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力明顯降低（P<0.01）。在0.2、0.4 mg/mL濃度下，百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯高于百合多糖組（P<0.01）。結(jié)論 相較于百合皂苷、熊果苷，百合多糖能夠在不影響小鼠B-16細胞活性的情況下，對B-16細胞內(nèi)酪氨酸酶活性和黑色素含量起到抑制作用，推測百合多糖可能通過抑制細胞內(nèi)酪氨酸酶的活性，進一步抑制黑色素的合成，達到美白的效果。

〔關鍵詞〕 百合多糖；百合皂苷；熊果苷；B-16細胞；酪氨酸酶；黑色素

〔中圖分類號〕R275.9 ? ? ? 〔文獻標志碼〕A ? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０23.04.005

Effects of the main active ingredients from Baihe （Bulbus Lilii） on melanin content and

tyrosinase activity in mice B-16 cells

PENG Lili1， LIU Chaosheng2， CHENG Xue1， CHEN Yan1*， YANG Jiaojiao1， LI Yulan1

1. Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. The First Hospital of Hunan

University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410007， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To investigate the effects of Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharides and Baihe （Bulbus Lilii） saponins on cell viability， tyrosinase activity， and melanin content in mice B-16 cells. Methods Mice B-16 cells from the same passage were randomly allocated into 5 groups： blank cell group， blank control group， arbutin group， Baihe（Bulbus Lilii） polysaccharide group， and Baihe（Bulbus Lilii） saponin group. The blank cell group was supplemented with 180 μL RPMI1640 culture medium， while the blank control group received 180 μL RPMI1640 culture medium and 20 μL HDPE. The arbutin， Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharide， and Baihe （Bulbus Lilii） saponin groups were treated with varying concentrations （0.2， 0.4， 0.6 and 0.8 mg/mL） of arbutin， Baihe ?（Bulbus Lilii） polysaccharide， and Baihe （Bulbus Lilii） saponin， respectively. After 3 d， B-16 cell viability was assessed by CCK-8， tyrosinase activity within B-16 cells was determined via the tyrosinase-dopa oxidation method. Meanwhile， the melanin content in murine B-16 cells was quantified by MTT. Results The cell viability demonstrated a significant increase in the 0.8 mg/mL （P<0.01） and a decrease in the 0.4， 0.6 and 0.8 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin groups （P<0.05， P<0.01） compared with the blank cell group. Tyrosinase activity declined obviously in arbutin groups， Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharide groups， and Baihe （Bulbus Lilii） saponin group （P<0.01）. Tyrosinase activity was notably elevated in the 0.2 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin group （P<0.01）. Compared with the blank control group， cell viability was significantly enhanced in the 0.8 mg/mL arbutin group （P<0.01） and markedly reduced in the 0.6 and 0.8 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin groups （P<0.01）. Tyrosinase activity displayed a significant decrease in the arbutin and Baihe（Bulbus Lilii） polysaccharide groups and the 0.6 and 0.8 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin groups across all concentrations （P<0.01）， while a substantial increase was observed in the 0.2 and 0.4 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin groups （P<0.01）. The cell viability in the 0.8 mg/mL arbutin group and the tyrosinase activity in the 0.2 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin group were significantly elevated compared with the 0.2 mg/mL arbutin group （P<0.01）. In comparison with the 0.4 mg/mL arbutin group， the cell viability in the 0.8 mg/mL arbutin group and the tyrosinase activity in the 0.4 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin group exhibited a significant increase （P<0.01）. The tyrosinase activity in the 0.6 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin group was notably elevated compared to the 0.6 mg/mL arbutin group （P<0.01）. The cell viability was significantly reduced in the 0.6 and 0.8 mg/mL Baihe（Bulbus Lilii） saponin groups compared to the 0.4 mg/mL Baihe（Bulbus Lilii） saponin group （P<0.05， P<0.01）. The cell viability in the 0.8 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin group was markedly lower compared to the 0.6 mg/mL Baihe （Bulbus Lilii） saponin group （P<0.01）. At the concentration of 0.2 and 0.4 mg/mL， the tyrosinase activity in Baihe （Bulbus Lilii） saponin group was significantly higher than that in the Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharide group （P<0.01）. Conclusion In comparison to Baihe （Bulbus Lilii） saponins and arbutin， Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharides were capable of inhibiting tyrosinase activity and melanin content in mice B-16 cells without affecting cell viability. It is speculated that Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharides may further suppress melanin synthesis and achieve the whitening effect by inhibiting intracellular tyrosinase activity.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 ?Baihe （Bulbus Lilii） polysaccharides; Baihe （Bulbus Lilii） saponins; arbutin; B-16 cells; tyrosinase; melanin

百合主要生長在北溫帶及亞熱帶地區(qū)，全世界約有115種，我國產(chǎn)39種及26變種[1-2]?，F(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn)，百合富含多種有效化學成分，如多糖類、甾體皂苷類、生物堿類、黃酮類以及酚類化合物等，有抗氧化、抗炎等藥理作用。其中，百合多糖含量最高可達19.42%，具有明顯的清除氧自由基、提高超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性、降低丙二醛水平的作用[3-6]；百合皂苷含量約為10.45%，有清除羥自由基的強大作用，與劑量成正相關，體外抗氧化能力優(yōu)于人參皂苷[7]。因此，百合具有較好的抗衰、養(yǎng)顏功效，而且本身色白晶瑩，近年來，其在皮膚美白領域的作用被逐漸重視。本團隊前期研究證實，道地藥材湘西龍山百合提取液對小鼠B-16黑色素瘤細胞酪氨酸酶活性有較強的抑制作用，同時也有一定的細胞毒性作用，但未明確其中起作用的主要成分[8]。本研究選擇百合多糖、百合皂苷這兩種百合主要藥效成分，探析其對小鼠B-16細胞的細胞活力、酪氨酸酶活性和黑色素活性的影響，進而發(fā)掘百合發(fā)揮美白作用的成分及機制，為百合在美白領域的臨床應用提供理論依據(jù)和研究基礎。

1 材料

1.1 ?細胞

小鼠B-16黑色素瘤細胞購自百納生物細胞庫。

1.2 ?主要藥物和試劑

龍山百合（湖南龍山新世紀實業(yè)有限責任公司，貨號：AH2ke8Ky）。

二甲基亞砜（貨號：S24295）、熊果苷（貨號：B21402）、MTT試劑盒（貨號：S19063）、胰酶（2.5 g/L，貨號：S10031）、Triton X-100溶液（貨號：R21239）均購自上海源葉生物科技有限公司；小牛血清（上海銳聰科技有限公司，批號：RC03046A）；RPMI1640培養(yǎng)基（北京諾為生物技術有限公司，貨號：11875093）；L-多巴（貨號：SL8050）、AB-8大孔吸附樹脂（貨號：M0042）均購自北京索萊寶科技有限公司；PBS（青島海博生物技術有限公司，貨號：02-24-1ACS）；1，2-丙二醇（中海殼牌石油化工有限公司，批號：MPGTF3T12）；丙酮（北京萬佳首化生物科技有限公司，批號：SH-CA1001900）；D-100大孔吸附樹脂（廊坊淼陽化工有限公司，貨號：DA201）；氯仿（貨號：B01037501）、正丁醇（貨號：B00001801）均購自成都貝斯特試劑有限公司；CCK-8法細胞增殖檢測試劑盒（江蘇凱基生物技術股份有限公司，貨號：KGA317）；無水乙醇（上海麥克林生化科技股份有限公司，貨號：E809056）。

1.3 ?主要儀器

CO2培養(yǎng)箱（上海一恒科學儀器有限公司，型號：BPN-80CW）；倒置熒光顯微鏡（廣州市明美光電有限公司，型號：MF53）；潔凈工作臺（BIOBASE山東博科，型號：BBS-SDC）；離心機（長沙英泰儀器有限公司，型號：TD4A）；多功能酶標儀（Rayto，型號：RT-6100）；全自動高速冷凍離心機（湘儀離心機儀器有限公司，型號：HT165R）；恒溫干燥機（嘉興市中新醫(yī)療儀器有限公司，型號：DHG-9140AS）；微波超聲波組合催化萃取儀（上海新諾儀器集團有限公司，型號：BILON-CW-1000）。

2 方法

2.1 ?百合多糖提取

采用微波萃取法[9]。方法如下：鮮百合→干燥（恒溫干燥箱，50 ℃，3 h）→粉碎→過篩（100目）→水浸泡（75 ℃，10 h）→微波萃取（功率700 W，25 min）→4000 r/min半徑12 cm離心15 min，3次→濃縮（原體積的1/5）→醇沉（4倍量無水乙醇）→4000 r/min半徑12 cm離心15 min，1次→復溶（45 ℃水）→去蛋白（Sevag法，氯仿∶正丁醇=5∶1）→醇沉（無水乙醇）→4000 r/min半徑12 cm離心15 min，1次→洗滌（無水乙醇、丙酮、無水乙醇各洗滌3次）→真空干燥→百合多糖。

2.2 ?百合皂苷提取

采用醇提-大孔樹脂吸附法[10]。方法如下：百合烘干（含水量6%左右）→粉碎（過80目篩）→醇提（70%無水乙醇，固液比1∶8，60 ℃水浴回流提取3 h，提取3次，和/或超聲波30 min）→再用AB-8大孔吸附樹脂分離→無水乙醇→收集脫洗液，并濃縮→百合浸膏→加無水乙醇溶解→丙酮-乙醚混合液分布沉淀→干燥→純百合皂苷。

2.3 ?主要試劑配制

高密度聚乙烯（high density polyethylene， HDPE）：將無水乙醇、1，2-丙二醇、雙蒸水按照體積比3∶5∶2的比例超聲混合均勻，使用0.01 mol/L的PBS稀釋10倍得到100 mL/L的HDPE，作為溶媒。

熊果苷：向20 mg熊果苷粉末中加入400 μL HDPE，得到50 mg/mL的母液，根據(jù)實驗濃度進行對應倍數(shù)稀釋。

百合多糖：稱取百合多糖粉末136 mg，加入2.72 mL HDPE，過濾除菌，得到50 mg/mL的母液，根據(jù)實驗濃度進行對應倍數(shù)稀釋。

百合皂苷：稱取百合多糖粉末152 mg，加入3.04 mL HDPE，過濾除菌，得到50 mg/mL的母液，根據(jù)實驗濃度進行對應倍數(shù)稀釋。

L-多巴：向20 mg L-多巴粉末中加入2 mL二甲基亞砜溶解，混合均勻，得到10 mg/L的L-多巴溶液。

2.4 ?B-16細胞培養(yǎng)及傳代

待B-16黑色素瘤細胞生長至融合狀態(tài)，棄上清液，用PBS洗兩遍，加入0.25%胰酶（含0.02% EDTA）消化，待細胞變圓后，加入含有10％小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液終止消化并收集細胞懸液至10 mL離心管中，1000 r/min半徑12 cm離心3 min，棄上清液，加入培養(yǎng)基重懸細胞；將細胞懸液按照1∶3的比例分配至準備好的培養(yǎng)皿中，做好標記，將細胞置于CO2培養(yǎng)箱37 ℃、5% CO2飽和濕度環(huán)境中進行培養(yǎng)[11]。每一次實驗取自同一傳代細胞，初始接種細胞濃度為5000個/cm2左右。詳見圖1。

2.5 ?實驗分組及細胞培養(yǎng)

將同一傳代小鼠B-16細胞隨機分為空白細胞組、空白對照組、熊果苷組、百合多糖組、百合皂苷組，共5組。取第3～4代的B-16細胞，以6×104個/cm2的密度分別接種于2個96孔板中，分別用于測定黑素細胞活力和酪氨酸酶活性。37 ℃、5%CO2孵箱中培養(yǎng)1 d后，棄上清液，空白細胞組加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液；空白對照組加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液和20 μL HDPE；百合多糖組每孔加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液及20 μL不同濃度（0.2、0.4、0.6、0.8 mg/mL）的百合多糖，百合皂苷組中每孔加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液及20 μL不同濃度（0.2、0.4、0.6、0.8 mg/mL）的百合皂苷；熊果苷組每孔加入180 μL RPMI1640培養(yǎng)液和不同濃度（0.2、0.4、0.6、0.8 mg/mL）的熊果苷。37 ℃、5% CO2孵箱中孵育3 d。每一濃度4個孔，實驗重復3次。

2.6 ?指標檢測

2.6.1 ?CCK-8法檢測B-16細活力 ?藥物作用3 d后，將96孔板中的溶液吸出，每孔加入100 μL 細胞培養(yǎng)液和10 μL CCK-8法細胞增殖檢測試劑，置于培養(yǎng)箱中37 ℃孵育2 h，酶標儀在450 nm波長處檢測每孔的吸光值。

細胞活力[12]=實驗組吸光值/對照組吸光值×100%。

2.6.2 ?酪氨酸酶活性檢測 ?以L-多巴為底物，采用酪氨酸酶-多巴速率氧化法[13]檢測細胞酪氨酸酶活性。藥物作用3 d后，將待測96孔板中的細胞棄上清液，用0.01 mol/L PBS洗滌兩次，每孔加入90 μL 10 mL/L的TritonX-100，震蕩5 min溶解細胞后，每孔加入10 μL 10 mg/mL的L-多巴，于37 ℃孵育30 min，酶標儀在490 nm波長處檢測每孔的吸光值。 酪氨酸酶活性[14]=（1-實驗組吸光值/對照組吸光值）×100%。

2.6.3 ?黑色素含量檢測 ?黑色素含量的測定采用MTT法[15]。將培養(yǎng)的第3～4代黑素細胞以6×104個/cm2的密度接種于6孔板，24 h后換液，實驗組1、實驗組2每孔加入4.5 mL RPMI1640培養(yǎng)液及0.5 mL不同濃度的百合多糖或百合皂苷，對照組以熊果苷溶液代替，空白對照組孔加入4.5 mL RPMI1640培養(yǎng)液和0.5 mL HDPE。每種濃度3個孔，實驗重復3次。3 d后將6孔板中的細胞消化，離心，棄上清液，重懸成單個細胞并計數(shù)，再次離心棄上清液，每組加入1 mL 1 mol/L的NaOH溶液，震蕩5 min，吸取每組液體加入96孔板中，每組設置4個復孔，酶標儀在490 nm波長處檢測每孔的吸光值。

黑色素合成率[16]=[1-（實驗組吸光值/實驗組細胞密度）/（對照組吸光值/對照組細胞密度）]×100%。

2.7 ?統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料若符合正態(tài)分布，用“ｘ±s”形式表示，否則用中位數(shù)表示。計量資料服從正態(tài)分布及方差齊性時，采用參數(shù)檢驗，組內(nèi)比較采用單因素方差分析，組間比較采用t檢驗，方差不齊者用Tambane's T2檢驗；不符合正態(tài)分布時，采用非參數(shù)檢驗。等級資料多樣本比較采用Kruskal-wallis H秩和檢驗。對于多次重復測量數(shù)據(jù)，采用重復測量方差分析。取P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果

3.1 ?不同百合有效成分與熊果苷對小鼠B-16細胞活力的影響

與空白細胞組比較，0.8 mg/mL熊果苷組小鼠B-16細胞活力明顯升高（P<0.01）。與空白對照組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力明顯升高（P<0.01）。與0.2 mg/mL熊果苷組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力明顯升高（P<0.01）。與0.4 mg/mL熊果苷組比較，0.8 mg/mL熊果苷組細胞活力明顯升高（P<0.01）。詳見圖2。

各濃度百合多糖與空白細胞組或空白對照組間細胞活力比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。詳見圖3。

與空白細胞組比較，0.4、0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力均明顯降低（P<0.05，P<0.01）。0.2 mg/mL百合皂苷組細胞與空白細胞組間細胞活力比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與空白對照組比較，0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力均明顯降低（P<0.01）。0.2、0.4 mg/mL百合皂苷組與空白對照組間細胞活力比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與0.4 mg/mL百合皂苷組比較，0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力均明顯降低（P<0.05，P<0.01）。與0.6 mg/mL百合皂苷組比較，0.8 mg/mL百合皂苷組細胞活力明顯降低（P<0.01）。詳見圖4。

3.2 ?不同百合有效成分與熊果苷對小鼠B-16細胞酪氨酸酶的影響

與空白細胞組比較，各濃度熊果苷、百合多糖組和0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯降低（P<0.01），0.2 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性明顯升高（P<0.01）。0.4 mg/mL百合皂苷組與空白細胞組間酪氨酸酶活性比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與空白對照組比較，各濃度熊果苷、百合多糖組和0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯降低（P<0.01），0.2、0.4 mg/mL百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯升高（P<0.01）。在0.2、0.4、0.6 mg/mL濃度下，百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯高于熊果苷組（P<0.01）。在0.2、0.4 mg/mL濃度下，百合皂苷組酪氨酸酶活性均明顯高于百合多糖組（P<0.01）。詳見圖5。

3.3 ?不同百合有效成分和熊果苷對小鼠B-16細胞黑色素合成的影響

與空白細胞組比較，各濃度熊果苷組、百合多糖組和0.2、0.4 mg/mL百合皂苷組黑色素合成率均明顯降低（P<0.01），0.6、0.8 mg/mL百合皂苷組黑色素合成率均明顯升高（P<0.01）。詳見圖6。

4 討論

隨著經(jīng)濟發(fā)展和人們生活水平的提高，越來越多的現(xiàn)代女性推崇以白皙肌膚為美的觀念，各種美白護膚產(chǎn)品層出不窮，使近年來美白類護膚產(chǎn)品在我國美容護膚品消費市場的份額占比升至30%左右[17]。由此可見，美白類護膚品的開發(fā)具有廣闊的發(fā)展前景和市場價值。

導致黑色素在皮膚表面生成的原因復雜多樣，主要包括遺傳因素和環(huán)境因素。目前研究結(jié)果表明，黑色素的主要成因為：在酪氨酸酶的作用下，皮膚細胞中的酪氨酸受各種因素的影響，漸漸被氧化為多巴和多巴醌，經(jīng)過一系列的代謝反應，最終轉(zhuǎn)化為皮膚黑色素，導致皮膚暗沉或者在皮膚表面形成各種斑點[18]。因此，在美白護膚品的開發(fā)過程中，要解決的主要問題就是抑制細胞中酪氨酸酶的活性，減少黑色素的形成和積累。植物類美白劑來自天然，安全性好，同時資源豐富易獲得。中草藥作為在我國有悠久使用歷史的植物，具有較好安全性的同時，還有多種藥理價值，在美白護膚品市場中有巨大的開發(fā)和應用價值[19]。大量研究表明，我國許多傳統(tǒng)中草藥具有美白功效。王佳其[20]研究表明，丹參揮發(fā)油對酪氨酸酶有較好的抑制作用，可作為一種抗氧化、美白功效物質(zhì)應用于膏霜等日化產(chǎn)品中；葉峻宏等[21]研究結(jié)果表明，川芎中含有的川芎嗪能夠有效抑制酪氨酸酶的活性和活性氧基的作用，從而抑制黑色素細胞生長增殖和減少黑色素生成；SONG等[22]研究發(fā)現(xiàn)，玫瑰花瓣提取物RPE通過激活MAPKK-MAPK信號通路，抑制酪氨酸酶活性和減少黑色素積累；任煜等[23]研究發(fā)現(xiàn)，綠茶提取物中的沒食子酸和沒食子兒茶素有利于其發(fā)揮美白功效，可作為添加劑應用于美白護膚品中。

基于前期的研究基礎[8]，本研究旨在明確兩種百合有效成分對小鼠B-16細胞活力、細胞內(nèi)酪氨酸酶活性和黑色素含量的影響，初步探討百合有效成分的美白機制。熊果苷因其美白效果好且不良反應很少，被廣泛地添加于美白類化妝品中[24-25]。因此，本實驗選用熊果苷作為實驗陽性對照藥物，評價百合多糖和百合皂苷的活性。研究結(jié)果顯示：（1）百合多糖與熊果苷在實驗濃度范圍內(nèi)均未表現(xiàn)出對小鼠B-16細胞活力的抑制作用，相反，熊果苷在一定程度上能夠促進B-16細胞的活性，其促進作用隨濃度的增高而增強；百合皂苷則對小鼠B-16細胞活性表現(xiàn)出明顯的抑制作用，且濃度越高，其對B-16細胞活性的毒性越強。（2）百合多糖與熊果苷對酪氨酸酶的抑制作用在濃度為0.4 mg/mL時最強，且百合多糖的抑制作用強于熊果苷；而百合皂苷則在作用濃度較高時對小鼠B-16細胞的酪氨酸酶有抑制作用，其最強作用濃度為0.6 mg/mL。（3）百合多糖和熊果苷對小鼠B-16細胞黑色素合成率的抑制作用隨濃度的增加而變強，而百合皂苷組濃度為0.6、0.8 mg/mL時，對細胞黑色素合成有促進作用；百合皂組濃度為0.6、0.8 mg/mL時，對細胞黑色素抑制作用弱于相同濃度的熊果苷、百合多糖。

本研究初步闡明百合多糖的美白作用機制，為其在美白產(chǎn)品中的應用上提供了理論依據(jù)，有利于為百合開發(fā)更廣闊的臨床市場。

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〔收稿日期〕2022-10-24

〔基金項目〕湖南省教育廳科學研究項目（17C1231）；湖南省中醫(yī)藥科研計劃項目（201519）；湖南省衛(wèi)生健康委員會科學研究課題（20201181）。

〔第一作者〕彭麗麗，女，副教授，碩士研究生導師，研究方向：中醫(yī)護理。

〔通信作者〕*陳 ?燕，女，博士，教授，E-mail：969639737@qq.com。