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    小麥肽對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠骨骼肌蛋白代謝影響及機(jī)制研究

    2015-10-24 06:13:33柏海平
    食品工業(yè)科技 2015年8期
    關(guān)鍵詞:肌球蛋白骨骼肌低氧

    柏海平

    (石家莊學(xué)院體育系,河北石家莊050035)

    小麥肽對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠骨骼肌蛋白代謝影響及機(jī)制研究

    柏海平

    (石家莊學(xué)院體育系,河北石家莊050035)

    目的:探討小麥肽對(duì)模擬高原訓(xùn)練大鼠骨骼肌代謝的影響,以及可能的機(jī)制。方法:75只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(A組)、低氧對(duì)照組(B組)、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(C組)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(D組)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練+補(bǔ)充小麥肽組(E組),每組15只,C組、D組和E組進(jìn)行無(wú)負(fù)重游泳9周,E組大鼠于每次訓(xùn)練后灌服小麥肽溶液。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,檢測(cè)骨骼肌總蛋白(Pro)、肌球蛋白(Myo)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)。結(jié)果:與A組相比,B組大鼠骨骼肌總蛋白(Pro)和肌球蛋白(Myo)含量均顯著降低,C組大鼠骨骼肌Pro含量無(wú)差異,而Myo含量則顯著降低;E組大鼠骨骼肌Pro和Myo含量均高于B組和C組。與A組相比,B組和C組大鼠骨骼肌和血清中胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)含量均降低;E組大鼠骨骼肌和血清中IGF-1含量均高于B組和C組。結(jié)論:補(bǔ)充小麥肽可有效降低模擬高原訓(xùn)練對(duì)大鼠骨骼肌蛋白的影響,可能通過(guò)促進(jìn)IGF-1分泌而加速骨骼肌蛋白的合成代謝。

    小麥肽,大鼠,模擬高原訓(xùn)練,骨骼肌蛋白,機(jī)制

    高原訓(xùn)練有利于促進(jìn)運(yùn)動(dòng)員機(jī)體發(fā)生一系列代償性和適應(yīng)性變化,提高能量代謝及骨骼肌利用氧能力,有助于提高成績(jī),已被作為運(yùn)動(dòng)員一種常規(guī)訓(xùn)練方式[1]。然而,高原訓(xùn)練過(guò)程中由于處于缺氧環(huán)境,易導(dǎo)致肌原纖維收縮蛋白發(fā)生降解,出現(xiàn)肌纖維變細(xì)、肌力降低,有研究指出[2],在高于海拔5km處停留60d以上,會(huì)使大腿肌肉橫斷面積減少10%。因此,如何采取有效的干預(yù)措施以減少高原訓(xùn)練對(duì)運(yùn)動(dòng)員骨骼肌蛋白代謝的影響,對(duì)提高高原訓(xùn)練效果具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

    小麥肽是由小麥谷朊粉經(jīng)酶解、提純等加工而成,具有較高的葡萄糖胺(Gln)和蛋白含量且氨基酸組成較為均衡,具有水溶性佳、易吸收、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),不僅可為人體生長(zhǎng)發(fā)育提供所需的能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而且具有抗氧化、改善人體生理機(jī)能的作用[3]。

    本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),對(duì)模擬高原低氧運(yùn)動(dòng)的大鼠補(bǔ)充小麥肽,探討其對(duì)大鼠骨骼肌蛋白代謝的影響,并對(duì)可能的機(jī)制進(jìn)行探討,以期為實(shí)際工作提供基礎(chǔ)資料。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    實(shí)驗(yàn)鼠 SF級(jí)6周齡雄性SD大鼠75只,體重260~280g,購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,合格證號(hào)SCXK(豫)2011-0003;標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料 北京科澳協(xié)力飼料有限公司;小麥肽 山東中食都慶生物技術(shù)有限公司;BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒 上海索萊寶生物科技公司;ELISA試劑盒 上海江萊生物科技公司。

    JA2003A型電子天平 上海精天電子儀器有限公司;常壓低氧艙 美國(guó)Hypoxico公司;EOXIBLAEPGM-36型氧氣監(jiān)測(cè)儀 美國(guó)華瑞公司;游泳池(100cm×80cm×70cm) 上海艾研生物科技有限公司;2%戊巴比妥鈉 上海江萊生物科技有限公司;富華800電動(dòng)離心機(jī) 金壇市富華儀器有限公司;Dounce勻漿器 美國(guó)ProScientific公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 SD大鼠分組 隨機(jī)分為正常對(duì)照組(A組)、低氧對(duì)照組(B組)、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(C組)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(D組)、低氧+運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練+補(bǔ)充小麥肽組(E組),每組15只。所有大鼠按照組別編號(hào)進(jìn)行分籠飼養(yǎng),每籠飼養(yǎng)5只,自然光照,溫度保持在20℃,上下不超過(guò)2℃,墊料每天更換一次,使籠內(nèi)保持干燥。每晚9點(diǎn)用標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料喂養(yǎng)。

    1.2.2 大鼠游泳訓(xùn)練 訓(xùn)練方法采取無(wú)負(fù)重游泳,一周連續(xù)訓(xùn)練6d,休息1d,首先進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練2周,前3d運(yùn)動(dòng)時(shí)間30m in,1周后達(dá)到60m in,2周內(nèi)將運(yùn)動(dòng)時(shí)間逐漸提高到90m in,共進(jìn)行9周。游泳池水深50cm,水溫保持在32℃,上下波動(dòng)不超過(guò)1℃,2d更換一次池水。游泳時(shí)間安排在下午,游泳過(guò)程中要密切觀察大鼠狀態(tài),以防止溺水發(fā)生。低氧環(huán)境采用常壓低氧艙,利用氧氣監(jiān)測(cè)儀對(duì)低氧艙中氧分壓的進(jìn)行監(jiān)測(cè),在適應(yīng)性2周時(shí)間內(nèi)模擬海拔由1.6km升高到3km,最終氧濃度控制在14.2%。

    1.2.3 大鼠灌胃 E組大鼠于每次訓(xùn)練后,按每kg體重服用500mg的劑量稱取小麥肽,用蒸餾水溶解后進(jìn)行灌服,以相同劑量的蒸餾水作為對(duì)照組;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中五組大鼠均未出現(xiàn)死亡。

    1.2.4 大鼠血液、肌肉指標(biāo)的測(cè)定 所有大鼠于最后一次訓(xùn)練后休息24h,處死前禁食12h,用2%戊巴比妥鈉按50mg/kg劑量進(jìn)行腹腔注射,達(dá)到預(yù)定麻醉效果后經(jīng)腹主動(dòng)脈進(jìn)行取血,取右后肢腓腸肌組織,檢測(cè)骨骼肌總蛋白(Pro)、肌球蛋白(Myo)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)。Pro采用凱氏定氮法檢測(cè),Myo和IGF-1含量利用放射免疫法測(cè)定。

    1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

    所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±S.E)表示,同組大鼠實(shí)驗(yàn)前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn),p<0.05代表具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 五組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化情況

    表1 五組大鼠試驗(yàn)前后體重變化情況(Mean±S.E.,n=15)Table 1 Theweight changes of rats in five groups before and after the test(Mean±S.E.,n=15)

    五組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化見(jiàn)表1。實(shí)驗(yàn)前,五組大鼠體重差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;實(shí)驗(yàn)后,五組大鼠體重均較實(shí)驗(yàn)前顯著增加(p<0.05)。實(shí)驗(yàn)后,B組和C組均較正常對(duì)照組(A組)大鼠體重降低(p<0.05)。長(zhǎng)期處于低氧環(huán)境會(huì)使機(jī)體各項(xiàng)代謝能力下降,有研究指出[4],動(dòng)物長(zhǎng)期暴露在低氧環(huán)境生長(zhǎng)速率下降,體重減輕。登山愛(ài)好者在海拔4km呆1周后,體重會(huì)下降3%,而在海拔6~8km高原呆3個(gè)月體重則會(huì)下降15%[5]。本研究顯示,B組實(shí)驗(yàn)后大鼠體重較正常對(duì)照組下降顯著(p<0.05),說(shuō)明低氧暴露會(huì)使大鼠體重減輕;本研究亦發(fā)現(xiàn),B組大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量均低于A組(p<0.05)(表2),進(jìn)一步說(shuō)明暴露于低氧環(huán)境會(huì)抑制大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白合成,使其含量降低,可能是導(dǎo)致體重降低的原因。

    2.2 五組大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量情況

    表2 五組大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量情況(Mean±S.E.,n=15)Table 2 Contents of skeletal muscle protein and myosin in five groups of rats(Mean±S.E.,n=15)

    不同處理方式對(duì)大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量影響見(jiàn)表2。有研究指出[6-7],抗阻力運(yùn)動(dòng)會(huì)使骨骼肌蛋白含量增加,耐力運(yùn)動(dòng)及耐力組合抗阻運(yùn)動(dòng)亦可使骨骼肌蛋白增加,而缺乏體力活動(dòng)則可引起骨骼肌蛋白大量分解。然而,高原訓(xùn)練過(guò)程中,由于涉及低氧環(huán)境、運(yùn)動(dòng)形式及低氧和運(yùn)動(dòng)的組合形式等多種因素的影響,其對(duì)機(jī)體的影響遠(yuǎn)比常態(tài)下運(yùn)動(dòng)更為復(fù)雜。有研究表明[8],游泳運(yùn)動(dòng)員在模擬2.8km的低壓低氧艙中3周后,體重和瘦體重明顯下降,而血尿素及血清皮質(zhì)醇水平則升高,說(shuō)明低氧運(yùn)動(dòng)能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)分解加速?gòu)亩贵w重降低。本研究顯示,與A組相比,C組大鼠骨骼肌蛋白含量無(wú)差異(p>0.05),而肌球蛋白含量則顯著降低(p<0.05),說(shuō)明在正常狀態(tài)下進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練亦可對(duì)骨骼肌蛋白代謝產(chǎn)生抑制作用,可能是由于大量運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致疲勞不能及時(shí)消除,逐漸形成過(guò)度訓(xùn)練而影響骨骼肌蛋白的合成[9]。同時(shí),D組大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量均低于C組(p<0.05),進(jìn)一步說(shuō)明低氧和大量運(yùn)動(dòng)(高原訓(xùn)練)可對(duì)大鼠產(chǎn)生雙重刺激,從而使骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量均明顯下降。提示高原訓(xùn)練可對(duì)大鼠骨骼肌蛋白合成產(chǎn)生抑制作用,從而導(dǎo)致骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量降低,直接對(duì)高原訓(xùn)練效果產(chǎn)生影響。

    小麥肽是一種寡肽,分子量相對(duì)較小,具有一定的功能性,由小麥蛋白質(zhì)在水解酶的作用下產(chǎn)生,并在水解過(guò)程中發(fā)生了重要結(jié)構(gòu)的重排,使蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的疏水區(qū)能夠充分顯露,從而具有了新的生物學(xué)特性和營(yíng)養(yǎng)功能[10]。本研究顯示,E組大鼠骨骼肌蛋白和肌球蛋白含量均顯著高于C組(p<0.05),補(bǔ)充小麥肽可明顯提高低氧訓(xùn)練大鼠蛋白和肌球蛋白含量,說(shuō)明補(bǔ)充小麥肽對(duì)于模擬高原訓(xùn)練的大鼠骨骼肌蛋白代謝具有積極的促進(jìn)作用,減縮了低氧和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)骨骼肌蛋白的影響,提高了機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力。分析原因:一方面是小麥肽為大鼠提高了豐富的氮源,保證了骨骼肌蛋白合成的順利進(jìn)行,同時(shí),小麥肽具有抗氧化作用[11],能夠?qū)⑦\(yùn)動(dòng)中產(chǎn)生的自由基清除,從而有助于保護(hù)骨骼?。涣硪环矫嫘←滊目赡軙?huì)通過(guò)促進(jìn)某些生物活性物質(zhì)分泌而達(dá)到調(diào)節(jié)骨骼肌蛋白合成代謝的作用[12]。

    2.3 五組大鼠血清和骨骼肌中IGF-1含量情況

    表3 五組大鼠血清和骨骼肌中IGF-1含量情況(Mean±S.E.,n=15)Table 3 Contents of IGF-1 in serum and skeletal muscle in five groups of rats(Mean±S.E.,n=15)

    不同處理方式對(duì)大鼠血清和骨骼肌中IGF-1含量影響見(jiàn)表3。IGF-1主要是由肝臟合成的一種生長(zhǎng)因子,在骨骼肌生長(zhǎng)、分化及修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮重要作用[13]。本研究顯示,B組和C組的骨骼肌和血清中IGF-1含量均低于A組(p<0.05),說(shuō)明低氧環(huán)境和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練均可對(duì)骨骼肌和血清中IGF-1含量產(chǎn)生影響。同時(shí),本研究亦發(fā)現(xiàn),D組大鼠骨骼肌和血清中IGF-1含量顯著低于C組(p<0.05),說(shuō)明在模擬高原訓(xùn)練條件下,同時(shí)受到低氧和運(yùn)動(dòng)雙重負(fù)荷,會(huì)使IGF-1分泌進(jìn)一步降低[14-15]。本研究顯示,E組骨骼肌和血清中IGF-1含量均高于C組(p<0.05),說(shuō)明對(duì)模擬高原訓(xùn)練的大鼠補(bǔ)充小麥肽可增加骨骼肌和血清中IGF-1含量,提示小麥肽可能通過(guò)促進(jìn)IGF-1的分泌,從而促進(jìn)模擬高原訓(xùn)練大鼠骨骼肌蛋白合成,從而減少了由于低氧和運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌蛋白和肌球蛋白的影響。

    3 結(jié)論

    將小麥肽作為補(bǔ)充,對(duì)每天模擬高原訓(xùn)練的大鼠進(jìn)行定量補(bǔ)充,結(jié)果顯示:補(bǔ)充小麥肽可減輕低氧和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)大鼠體重的影響,對(duì)大鼠骨骼肌蛋白代謝具有積極的促進(jìn)作用,減少了低氧和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)骨骼肌蛋白的影響,同時(shí),可增加骨骼肌和血清中IGF-1含量,提示小麥肽可能是通過(guò)促進(jìn)大鼠體內(nèi)IGF-1的分泌,提高血清和骨骼肌中的水平,從而有效促進(jìn)了骨骼肌蛋白的合成代謝。

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    Study on the effects of wheat peptide on skeletal muscle protein metabolism in rats during simulated altitude training and its mechanism

    BAIHai-ping
    (Department of Physical Education,Shijiazhuang College,Shijiazhuang 050035,China)

    Objective:To investigate the effects of wheat peptide on skeletal muscle protein metabolism in ratsduring simulated altitude training and its mechanism. Methods:75 male SD rats were randomly divided intonormal control group(group A),hypoxia group(group B),exercise training group(group C),hypoxic exercisetraining group(group D),hypoxic exercise training + add wheat peptide group(group E),each group had 15rats. Rats in group C,group D and group E were undergoing no load swimming for 9 weeks. Rats in group Ewere fed wheat peptide solution after each train. After the experiment,the skeletal muscle total protein (Pro),myosin(Myo) and insulin-like growth factor-1(IGF-1) were detected. Results:Compared with group A,thetotal protein(Pro) and myosin(Myo) of rat skeletal muscle in group B were significantly reduced,and the Pro ingroup C showed no difference,while Myo content was significantly reduced. The Pro and Myo contents inskeletal muscle of rats in group E were higher than hypoxic control group and exercise training group. Comparedwith group A,the insulin growth factor-l(IGF-1) levels in rat skeletal muscle and serum in group B and groupC were reduced. The IGF-1 levels in rat skeletal muscle and serum in group E were higher than group B andgroup C. Conclusion:Supplying of wheat peptide in rats could effectively reduce the effect of simulated altitudetraining on skeletal muscle protein. It might promote the secretion of IGF -1 to accelerate the anabolism ofskeletal muscle protein.

    wheat pep tide;rat;simulated altitude training;skeletal muscle protein;mechanism

    TS201.1

    A

    1002-0306(2015)08-0348-04

    10.13386/j.issn1002-0306.2015.08.064

    2014-10-20

    柏海平(1978-),男,碩士研究生,講師,研究方向:運(yùn)動(dòng)生理學(xué)。

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