解聚素-金屬蛋白酶17缺失對(duì)鼻咽癌細(xì)胞活性氧產(chǎn)生及線粒體功能的影響

尹永波，李學(xué)申，邱金霞，籍玉青，崔靜

邢臺(tái)市人民醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，河北 邢臺(tái) 054000

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是發(fā)生于鼻咽腔頂部和側(cè)壁的惡性腫瘤［1］，是我國(guó)高發(fā)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率呈遞增趨勢(shì)［2］。由于早期NPC 患者臨床癥狀無明顯特異性，多數(shù)患者確診時(shí)已發(fā)展至中晚期，且放療化療效果較差，極易出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移等情況［3］。因此，探究NPC 發(fā)生的具體分子機(jī)制，尋找可用于NPC 早期診斷評(píng)估的分子標(biāo)志物具有至關(guān)重要的臨床價(jià)值。

解聚素-金屬蛋白酶17（a disintegrin and metalloprotease 17，ADAM17）又稱腫瘤壞死因子α 轉(zhuǎn)換酶，具有水解剪切酶類作用，參與多種人類惡性腫瘤的增殖、遷移和凋亡等生命過程，對(duì)腫瘤患者的臨床診斷具有一定的提示意義［4］。近年來，該靶點(diǎn)在腫瘤中作用機(jī)制的研究倍受關(guān)注。既往研究發(fā)現(xiàn)，ADAM17在卵巢癌中高表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，干擾ADAM17 表達(dá)后可影響腫瘤的生物學(xué)特性，表明改變ADAM17基因的表達(dá)可能是多種腫瘤發(fā)生的因素之一［5］。本研究旨在分析干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)NPC細(xì)胞增殖、體外克隆、凋亡、線粒體膜電位、線粒體氧化損傷產(chǎn)物水平、氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平及線粒體損傷標(biāo)志物蛋白等腫瘤生物學(xué)功能的影響，初步探討NPC的發(fā)病機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞及質(zhì)粒 NPC細(xì)胞株（CNE1）由江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院提供；ADAM17基因干擾質(zhì)粒ADAM17-shRNA1、ADAM17-shRNA2、ADAM17-shRNA3 及空質(zhì)粒ADAM17-shRNA-NC 均由美國(guó)Sigma 公司提供（干擾序列及陰性對(duì)照序列為shRNA1：5'-GCTCTCAGACTACGATATTCT-3'，shRNA2：5'-GCTAGAGCAATTTAGCTTTGA-3'，shRNA3：5'-GGAACTCTTGGATTAGCTTAT-3'，shRNA-NC：5'-GTTCTCCGAACGTGTCACGT-3'）。

1.2 主要試劑及儀器 兔抗人ADAM17多克隆抗體和抗人GAPDH 單克隆抗體購自武漢菲恩生物科技有限公司；HRP 標(biāo)記的羊抗兔IgG 和熒光探針DCFHDA購自北京百奧萊博科技有限公司；LipofectamineTM2000 轉(zhuǎn)染試劑盒購自美國(guó)Invitrogen 公司；CCK-8 試劑盒和Annexin V-FITC 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購自上海翊圣生物科技有限公司；RT-PCR 試劑盒購自美國(guó)GeneCopoeia 公司；BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；兔抗人Bcl-2 單克隆抗體、兔抗人Bax 單克隆抗體、兔抗人cleaved-caspase 9單克隆抗體、兔抗人cas-pase 9 單克隆抗體、兔抗人cleaved-caspase 3 多克隆抗體、兔抗人caspase 3 多克隆抗體和兔抗人c-Myc 多克隆抗體均購自武漢博歐特生物科技有限公司；TRIzol 和逆轉(zhuǎn)錄試劑盒Taq-Man?MicroRNA Reverse Transcription kit 購 自 日 本TaKaRa 公司；丙二醛（mal-ondialdehyde，MDA）試劑盒和超氧化物歧化酶（supe-roxide dismutase，SOD）試劑盒購制武漢伊萊瑞特公司；PBS 緩沖液購自美國(guó)Gibco 公司；PVDF 膜購自上海吉至生化科技有限公司；熒光分光光度計(jì)RF-6000 購自上海佐明機(jī)械設(shè)備貿(mào)易有限公司；熒光顯微鏡購自北京百奧萊博科技有限公司；光學(xué)顯微鏡購自深圳子科生物科技有限公司。

1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 將CNE1 細(xì)胞分成Control、shRNANC、ADAM17-shRNA1、ADAM17-shRNA2 和ADAM17-shRNA3組，根據(jù)LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染試劑說明書要求將各質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至細(xì)胞中，Control組細(xì)胞正常培養(yǎng)。

1.4 各組細(xì)胞干擾效率的檢測(cè)

1.4.1 RT-PCR 法 采用Trizol 法提取各組CNE1 細(xì)胞總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA 的濃度和純度。以其為模板，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，置于4 ℃保存，進(jìn)行熒光定量PCR 擴(kuò)增。反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性10 min；95 ℃變性15 s，60 ℃退火45 s，65 ℃延伸1 min，4 ℃10 min，共40個(gè)循環(huán)。計(jì)算各組細(xì)胞ADAM17基因mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。引物序列如下：ADAM17基因上游引物：5'-AGAGCTGACCCAGATCCCAT-3'，下游引物：5'-TACTCTCTTCCCCTCTGCCC-3'；actin基因上游引物：5'-CCTCGCCTTTGCCGATCC-3'，下游引物：5'-GGATCTTCATGAGGTAGTCAGTC-3'。引物設(shè)計(jì)及合成均由生工生物工程（上海）股份有限公司完成。

1.4.2 Western blot 法 提取各組CNE1 細(xì)胞總蛋白，經(jīng)10%SDS-PAGE 分離后，轉(zhuǎn)移至PVDF 膜上，用5%脫脂奶粉室溫封閉1 h；加入兔抗人ADAM17 多抗（用3%BSA 1∶1 000稀釋），4 ℃孵育過夜，以β-actin為內(nèi)參；用TBST 洗膜3 次，加入HRP 標(biāo)記的羊抗兔IgG（1∶5 000稀釋），室溫反應(yīng)1 h；TBST洗膜，顯影。

1.5 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞增殖能力影響的檢測(cè) 采用CCK-8法。將轉(zhuǎn)染后的各組CNE1細(xì)胞按1×103個(gè)／孔接種于96 孔板，并設(shè)空白對(duì)照組，分別于37 ℃培養(yǎng)24、48、72和96 h后，加入10 μL CCK-8 溶液，避光孵育2 h，于酶標(biāo)儀490 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度值，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。

1.6 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞克隆形成能力影響的檢測(cè) 將轉(zhuǎn)染后的各組CNE1 細(xì)胞按1×104個(gè)／孔的密度接種于6 孔板，于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育48 h；用PBS洗滌2次，胰酶消化離心，重懸計(jì)數(shù)，按500個(gè)／孔接種于新鮮培養(yǎng)基覆蓋的6孔板中，培養(yǎng)14 d；用4%多聚甲醛固定，0.1%結(jié)晶紫染色，拍照計(jì)數(shù)。

1.7 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞凋亡影響的檢測(cè) 采用流式細(xì)胞術(shù)。將轉(zhuǎn)染后的各組CNE1細(xì)胞孵育24 h 后，收集細(xì)胞，111.79×g離心5 min，加入500 μL Annexin V結(jié)合液和5 μL Annexin V-FITC，室溫下避光孵育10 min，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。

1.8 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞線粒體氧化損傷產(chǎn)物活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平影響的檢測(cè) 用DMEM 將熒光探針DCFH-DA 稀釋至1∶1 000，探針濃度為10 μmol／L；取轉(zhuǎn)染后對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的各組CNE1細(xì)胞，用無血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌3 次，并稀釋至1 × 106個(gè)／mL，加入2 mL 制備的DCFH-DA，37 ℃孵育20 min；用DMEM 洗滌3 次，以去除未加載的探針，熒光顯微鏡下觀察熒光強(qiáng)度。

1.9 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞線粒體膜電位影響的檢測(cè) 采用流失細(xì)胞術(shù)。將轉(zhuǎn)染后的各組CNE1 細(xì)胞制成密度為1× 105個(gè)／mL 的懸液，接種于6 孔板中，培養(yǎng)48 h 后加入1 mL JC-1 染色液，37 ℃避光孵育，111.79×g離心5 min，棄上清液，緩沖液沖洗，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)JC-1熒光信號(hào)。

1.10 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1 細(xì)胞氧化應(yīng)激標(biāo)志物SOD 和MDA 含量影響的檢測(cè) 將轉(zhuǎn)染后的各組CEN1 細(xì)胞培養(yǎng)上清液轉(zhuǎn)移至離心管中，111. 79 ×g離心20 min，取上層清液，按照SOD 和MDA 試劑盒要求操作，于450 nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)吸光度值，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中SOD和MDA的含量。

1.11 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1 細(xì)胞線粒體損傷標(biāo)記物蛋白表達(dá)影響的檢測(cè) 采用Western blot法。提取轉(zhuǎn)染后的各組CNE1 細(xì)胞總蛋白，4 ℃，26 952×g離心10 min，用BCA 蛋白濃度試劑盒測(cè)定蛋白濃度，經(jīng)10% SDS-PAGE 分離后，轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，用5%脫脂牛奶室溫封閉1 h；加入Bax、Bcl-2、cleaved-caspase 3、caspase 3、cleaved-caspase 9、caspase 9、ADAM17、c-Myc一抗及內(nèi)參抗體β-actin（均1∶2 000稀釋），4 ℃孵育過夜；加入相應(yīng)二抗（1∶5 000稀釋），室溫孵育1 h；洗膜后進(jìn)行光學(xué)顯微鏡分析。

1.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用單因素方差分析，多組組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組CNE1細(xì)胞的干擾效果 Control與shRNANC 組CNE1 細(xì)胞ADAM17基因mRNA 和蛋白的表達(dá)水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別為5.364和6.418，P分別為0.687和0.784）；與shRNA-NC組相比，ADAM17-shRNA1、ADAM17-shRNA2 和ADAM17-shRNA3 組細(xì)胞ADAM17基因mRNA 和蛋白的表達(dá)水平均明顯降低（mRNA：t分別為8.714、13.227 和9.578，P分別為0.025、0.004 和0.018；蛋白：t分別為8.823、13.727 和9.124，P分別為0.031、0.005 和0.022），其中ADAM17-shRNA2組表達(dá)水平最低。見圖1 ～圖3。表明ADAM17-shRNA2 組對(duì)ADAM17 的表達(dá)抑制作用最明顯，干擾效果最好，因此選擇ADAM17-shRNA2用于后續(xù)試驗(yàn)。

圖1 各組CNE1細(xì)胞ADAM17基因mRNA的轉(zhuǎn)錄水平Fig.1 Transcription level of ADAM17 mRNA in CNE1 cells of each group

圖2 Western blot 檢測(cè)各組CNE1 細(xì)胞ADAM17 蛋白的表達(dá)Fig.2 Detection of expression of ADAM17 protein in CNE1 cells of each group by Western blot

圖3 各組CNE1細(xì)胞ADAM17蛋白的表達(dá)水平Fig.3 Expression level of ADAM17 protein in CNE1 cells of each group

2.2 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1 細(xì)胞增殖能力的影響 Control 與shRNA-NC 組CNE1 細(xì)胞的增殖速率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= 6.774，P= 0.412）；轉(zhuǎn)染后96 h，與shRNA-NC 組相比，ADAM17-shRNA2組細(xì)胞的增殖速率明顯下降（t=8.964，P=0.036）。見圖4。

圖4 各組CNE1細(xì)胞增殖速率的比較Fig.4 Comparison of proliferation rate of CNE1 cells in different groups

2.3 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞克隆形成能力及凋亡的影響 Control與shRNA-NC組CNE1細(xì)胞克隆形成能力和凋亡情況差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別為2.455 和2.681，P分別為0.642 和0.669）；與shRNA-NC 組相比，ADAM17-shRNA2 組細(xì)胞形成的集落數(shù)明顯減小（t= 10.351，P= 0.014），細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯增加（t= 11.25，P= 0.008）。見圖5 ～圖8。

圖5 顯微鏡觀察各組CNE1細(xì)胞的克隆形成能力（×40）Fig.5 Microscopy of clone formation ability of CNE1 cells in each group（×40）

圖6 各組CNE1細(xì)胞的克隆形成率Fig.6 Formation rate of CNE1 cell clones in each group

圖7 流式細(xì)胞術(shù)分析各組CNE1細(xì)胞的凋亡情況Fig.7 Analysis of apoptosis of CNE1 cells in each group by flow cytometry

續(xù)圖7 流式細(xì)胞術(shù)分析各組CNE1細(xì)胞的凋亡情況Fig.7（Continued）Analysis of apoptosis of CNE1 cells in each group by flow cytometry

圖8 各組CNE1細(xì)胞的凋亡率Fig.8 Apoptosis rate of CNE1 cells in each group

2.4 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞ROS水平的影響 熒光顯微鏡觀察顯示，Control 和shRNA-NC組CNE1 細(xì)胞內(nèi)代表ROS 活性水平的綠色熒光強(qiáng)度無明顯變化；而ADAM17-shRNA2 組細(xì)胞內(nèi)綠色熒光多于shRNA-NC組。見圖9。

圖9 熒光顯微鏡觀察各組CNE1細(xì)胞的ROS水平（×200）Fig.9 Fluorescence microscopy of ROS level of CNE1 cells in each group（×200）

2.5 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞線粒體膜電位的影響 Control 和shRNA-NC 組CNE1 細(xì)胞經(jīng)JC-1染色后呈現(xiàn)紅色熒光，表明線粒體膜電位完整。與shRNA-NC 組相比，ADAM17-shRNA2 組細(xì)胞染色后綠色熒光增多，線粒體膜電位顯著下降（t=9.233，P=0.013）。見圖10和圖11。

圖10 流式細(xì)胞術(shù)分析各組CNE1細(xì)胞線粒體膜電位變化Fig.10 Analysis of changes of MMP of CNE1 cells in each group by flow cytometry

圖11 各組CNE1細(xì)胞線粒體膜電位變化Fig.11 Changes of MMP of CNE1 cells in each group

2.6 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1 細(xì)胞SOD 和MDA 含量 的 影 響 Control 與shRNA-NC 組CNE1 細(xì)胞SOD 和MDA 的含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別為3.023和2.837，P分別為0.567和0.678）；與shRNANC 組相比，ADAM17-shRNA2 組細(xì)胞SOD 含量明顯降低（t=7.233，P=0.034），MDA 含量明顯升高（t=7.415，P=0.038）。見圖12。

圖12 各組CNE1細(xì)胞SOD（A）和MDA（B）含量的變化Fig.12 Changes of SOD（A）and MDA（B）contents in CNE1 cells of each group

2.7 干擾ADAM17基因表達(dá)對(duì)CNE1細(xì)胞線粒體損傷標(biāo)記物蛋白表達(dá)的影響 Control 與shRNA-NC 組CNE1細(xì)胞Bax／Bcl-2、cleaved-caspase 9／caspase 9、cleaved-caspase 3／caspase 3 和c-Myc 蛋白的表達(dá)水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別為3.279、1.764、4.748和5.563，P分別為0.624、0.719、0.571 和0.541）；與shRNA-NC 組相比，ADAM17-shRNA2 組細(xì)胞Bax／Bcl-2、cleaved-caspase 9／caspase 9、cleaved-caspase 3／caspase 3的水平均明顯升高（t分別為8.985、9.021和7.789，P分別為0.023、0.011和0.031），c-Myc 蛋白表達(dá)水平明顯減少（t=10.352，P=0.004）。見圖13和圖14。

圖13 Western blot檢測(cè)各組CNE1細(xì)胞凋亡蛋白表達(dá)水平Fig.13 Western blotting of expression of apoptosis protein in CNE1 cells of each group

圖14 各組CNE1細(xì)胞凋亡蛋白表達(dá)水平Fig.14 Expression of apoptosis protein in CNE1 cells of each group

3 討論

NPC 是發(fā)生于鼻咽部黏膜上皮細(xì)胞的常見腫瘤，其發(fā)生發(fā)展可能是由環(huán)境因素和遺傳因素共同作用造成的［2］。目前，NPC 被認(rèn)為是一種多基因遺傳性疾病，這些基因通過調(diào)控多條細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路而影響NPC的發(fā)展，如Wnt通路、Akt通路等，但其具體的分子機(jī)制仍不明確［6-8］。因此，深入研究NPC發(fā)病的作用機(jī)制，尋找NPC 早期診斷和預(yù)后評(píng)估的腫瘤標(biāo)志物具有重要的臨床價(jià)值。

ADAM17 是ADAMs 家族的重要成員之一，參與機(jī)體增殖、遷移、局部淋巴轉(zhuǎn)移、免疫炎癥反應(yīng)、蛋白水解、細(xì)胞信號(hào)等多種生理病理活動(dòng)［9-12］。既往研究結(jié)果證實(shí)，ADAM17 在肝癌、結(jié)腸癌、胃癌等多種人類癌癥中高表達(dá)，并影響腫瘤的發(fā)展進(jìn)程［13-14］，因此，研究ADAM17 在腫瘤中的作用機(jī)制具有較高的價(jià)值。本研究發(fā)現(xiàn)，干擾ADAM17基因表達(dá)，細(xì)胞增殖速率明顯下降，且集落數(shù)和大小顯著減少，細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯增加，提示干擾ADAM17基因表達(dá)具有抑制NPC 細(xì)胞增殖和促進(jìn)凋亡的作用。既往研究表明，沉默ADAM17基因表達(dá)可抑制前列腺癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡［15］。

本研究發(fā)現(xiàn)，干擾ADAM17基因表達(dá)后，CNE1細(xì)胞內(nèi)代表線粒體氧化損傷產(chǎn)物ROS活性水平的綠色熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，干擾ADAM17基因可通過提高細(xì)胞中ROS 含量，抑制NPC 的發(fā)生發(fā)展。ROS 是細(xì)胞氧化還原的主要活性產(chǎn)物，通過參與多種信號(hào)傳導(dǎo)通路調(diào)控細(xì)胞穩(wěn)定性［16］。既往研究表明，過氧化物還原酶4（peroxiredoxin 4，PRDX4）可通過減少轉(zhuǎn)化細(xì)胞中ROS 含量，使細(xì)胞處于利于生長(zhǎng)增殖的微環(huán)境中，促進(jìn)胃癌患者病情惡化［17］。本研究結(jié)果提示，干擾ADAM17基因表達(dá)可增加ROS 含量，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

本研究發(fā)現(xiàn)，干擾ADAM17基因表達(dá)，NPC 細(xì)胞線粒體膜電位明顯降低，SOD 活性水平明顯降低，MDA 表達(dá)水平明顯增高。線粒體膜電位是評(píng)估線粒體功能的重要指標(biāo)［18］。線粒體膜電位改變預(yù)示著細(xì)胞凋亡，當(dāng)細(xì)胞受外界刺激，引起線粒體膜電位改變必然導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［19］，因此，促進(jìn)膜電位下降則促進(jìn)細(xì)胞凋亡。SOD 是體內(nèi)氧自由基清除系統(tǒng)的主要酶，能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，ROS 自由基可引起細(xì)胞生物膜上的脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生MDA，破壞膜的結(jié)構(gòu)和功能，其含量能間接反應(yīng)自由基對(duì)機(jī)體的損傷程度［20］。既往研究表明，心肌缺血再灌注損傷疾病通過治療后，心肌細(xì)胞SOD 活力和線粒體膜電位顯著提高，從而保護(hù)心肌組織［21］。這些研究結(jié)果表明，干擾ADAM17基因可通過降低線粒體膜電位，抑制SOD活性，促進(jìn)MDA含量，加速細(xì)胞凋亡。

本研究還發(fā)現(xiàn)，干擾ADAM17基因表達(dá)，c-Myc蛋白表達(dá)水平明顯降低，Bax／Bcl2、cleaved-caspase 9／caspase 9、cleaved-caspase 3／caspase 3蛋白表達(dá)水平明顯增高，提示干擾ADAM17基因表達(dá)可調(diào)控凋亡蛋白表達(dá)，從而促進(jìn)NPC細(xì)胞凋亡。c-Myc癌基因是人類癌癥中常見的一類由原癌基因myc編碼的一種轉(zhuǎn)錄因子［22］。在凋亡過程中，抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax共同作用可激活caspase 9和caspase 3，引起細(xì)胞凋亡［23］。既往研究表明，敲除SPRY4-IT1、Bcl-2 的蛋白表達(dá)受到抑制，caspase 3、caspase 9、Bax蛋白表達(dá)增加，從而促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的凋亡［24］。本研究結(jié)果提示，干擾ADAM17基因表達(dá)后，可通過上調(diào)促凋亡蛋白Bax 表達(dá)，下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2 和c-Myc蛋白表達(dá)，進(jìn)而影響NPC的發(fā)展進(jìn)程。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)，干擾ADAM17基因表達(dá)可能通過降低線粒體膜電位，促進(jìn)NPC細(xì)胞凋亡，也可通過增加ROS 水平，降低SOD 表達(dá)水平，增加MDA 表達(dá)水平，影響凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)，從而促進(jìn)NPC細(xì)胞凋亡。本研究?jī)H進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)，關(guān)于ADAM17基因在鼻咽癌中具體的作用機(jī)制仍需大量實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。