我國(guó)部分地區(qū)慢性HBV感染者HDV感染情況調(diào)查

劉玉梅 郭小平 張慧敏 白洪霞 王春梅 任姍 蔣永芳 楊勝 彭鋒 王曉忠 于雷 廖柏明 寧玲 何英利 楊霞 黃亮 劉學(xué)恩 莊輝

摘要：目的 了解目前我國(guó)部分地區(qū)慢性HBV感染者丁型肝炎病毒 （HDV） 感染流行情況。方法 2021年3月—2022年6月從全國(guó)10個(gè)省市自治區(qū)收集3 131例慢性HBV感染者血清，用抗-HDV IgG酶聯(lián)免疫試劑檢測(cè)全部血清標(biāo)本。對(duì)抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本用巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （nRT-PCR） 法檢測(cè)HDV RNA。對(duì)HDV RNA陽(yáng)性標(biāo)本的nRT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序后進(jìn)行序列分析，確定HDV基因型。分析抗-HDV IgG陽(yáng)性患者的臨床特征。計(jì)量資料兩組間比較采用Mann-Whitney U秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)。結(jié)果 3 131例慢性HBV感染者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率為0.70%（22/3 131），內(nèi)蒙古自治區(qū)、新疆維吾爾自治區(qū)、北京市和湖南省慢性HBV感染者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率分別為1.81%（16/886）、0.88%（2/226）、0.28%（2/708） 和1.00%（2/200），其中內(nèi)蒙古自治區(qū)慢性HBV感染者抗-HDV IgG陽(yáng)性率顯著高于北京市 （P=0.004），其余地區(qū)間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P值均＞0.05）。對(duì)內(nèi)蒙古自治區(qū)慢性HBV感染者臨床特征分析發(fā)現(xiàn)，抗-HDV IgG陽(yáng)性組蒙古族患者（P=0.001）、ALT異?；颊撸≒=0.007） 和抗病毒治療患者（P=0.029） 的比例顯著高于抗-HDV IgG陰性組，而中位HBV DNA水平明顯較低（P=0.030）。共檢出19例HDV RNA陽(yáng)性標(biāo)本，均為HDV基因1型。結(jié)論 我國(guó)不同地區(qū)HDV流行率差異較大，內(nèi)蒙古自治區(qū)慢性HBV感染者中HDV流行率較高。我國(guó)北方部分省市的HDV流行基因型主要為1型。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒； δ肝炎病毒； 抗-HDV IgG； 基因型

An investigation of hepatitis D virus infection among patients with chronic hepatitis B virus infection in some regions of China

LIU Yumei1， GUO Xiaoping2， ZHANG Huimin2， BAI Hongxia3， WANG Chunmei4， REN Shan5， JIANG Yongfang6， YANG Sheng6， PENG Feng6， WANG Xiaozhong7， YU Lei8， LIAO Boming9， NING Ling10， HE Yingli11， YANG Xia12， HUANG Liang13， LIU Xueen1， ZHUANG Hui1. （1. Department of Microbiology and Center of Infectious Diseases， Peking University Health Science Center， Beijing 100191， China; 2. Chifeng Infectious Disease Prevention Hospital of Inner Mongolia Autonomous Region， Chifeng， Inner Mongolia Autonomous Region 024099， China; 3. Inner Mongolia International Mongolian Medical Hospital， Hohhot 010055， China; 4. Hohhot Second Hospital of Inner Mongolia Autonomous Region， Hohhot 010020， China; 5. Department of Hepatology， Beijing YouAn Hospital， Capital Medical University， Beijing 100069， China; 6. Department of Infectious Diseases， The Second Xiangya Hospital of Central South University， Changsha 410011， China; 7. Department of Hepatology， Traditional Chinese Medicine Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region， Urumqi 830000， China; 8. Department of Infectious Diseases， The Fourth Affiliated Hospital of Harbin Medical University， Harbin 150001， China; 9. Department of Infectious Diseases， The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University， Nanning 530021， China; 10. Department of Infectious Diseases， The First Affiliated Hospital of University of Science and Technology of China & Anhui Provincial Hospital， Hefei 230001， China; 11. Department of Infectious Diseases， The First Affiliated Hospital of Xian Jiaotong University， Xian 710061， China; 12. Jilin Infectious Disease Hospital， Jilin， Jilin 132002， China; 13. Public Health Clinical Center of Chengdu， Chengdu 610066， China）

Corresponding authors：LIU Xueen， xueenliu@bjmu.edu.cn （ORCID：0000-0002-6574-4989）; ZHUANG Hui， zhuangbmu@126.com （ORCID：0000-0001-9119-6325）

Abstract：

Objective

To investigate the prevalence of hepatitis D virus （HDV） infection among patients with chronic hepatitis B virus （HBV） infection in some regions of China. Methods Serum samples were collected from 3 131 patients with chronic HBV infection in 10 provinces， cities， and autonomous regions of China from March 2021 to June 2022， and anti-HDV IgG ELISA was used for the detection of all serum samples. Nested reverse transcription-polymerase chain reaction （nRT-PCR） was used to detect HDV RNA in anti-HDV IgG-positive samples， and the nRT-PCR amplification products of HDV RNA-positive samples were sequenced and analyzed to determine HDV genotype. The clinical features of anti-HDV IgG-positive patients were analyzed. The Mann-Whitney U rank sum test was used for comparison of continuous data between two groups， and the chi-square test or the Fishers exact test was used for comparison of categorical data between two groups. Results The positive rate of anti-HDV IgG in the 3 131 patients with chronic HBV infection was 0.70% （22/3 131）， and that in the patients with chronic HBV infection in Inner Mongolia Autonomous Region， Xinjiang Uygur Autonomous Region， Beijing， and Hunan Province was 1.81% （16/886）， 0.88% （2/226）， 0.28% （2/708）， and 1.00% （2/200）， respectively; the patients with chronic HBV infection in Inner Mongolia Autonomous Region had a significantly higher positive rate of anti-HDV IgG than those in Beijing （P=0.004）， and there was no significant difference between the other regions （P＞0.05）. Clinical features of the patients with chronic HBV infection in Inner Mongolia Autonomous Region showed that compared with the anti-HDV IgG-negative group， the anti-HDV IgG-positive group had a significantly higher proportion of patients with Mongol nationality （P=0.001）， abnormal alanine aminotransferase （P=0.007）， or antiviral treatment （P=0.029）， as well as a significantly lower median HBV DNA level （P=0.030）. A total of 19 HDV RNA-positive samples were identified， all of which had HDV genotype 1. Conclusion The prevalence rate of HDV varies greatly across different regions of China， with a higher prevalence rate of HDV in patients with chronic HBV infection from Inner Mongolia Autonomous Region. HDV genotype 1 is the predominant genotype in some provinces and cities of northern China.

Key words：

Hepatitis B Virus； Hepatitis Delta Virus； Anti-HDV IgG； Genotype

丁型肝炎病毒 （HDV） 是δ病毒科δ病毒屬的唯一成員，是一種缺陷病毒，需要乙型肝炎表面抗原 （HBsAg） 參與才能復(fù)制和組裝成完整病毒體［1］。HDV通過(guò)與HBV相同的鈉離子-牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)多肽 （sodium taurocholate cotransporting polypeptide， NTCP） 受體進(jìn)入肝細(xì)胞［2］。雖然HDV從發(fā)現(xiàn)至今已40余年，但科學(xué)界和公眾對(duì)其關(guān)注有限［3］。我國(guó)1992年和1996年的HDV流行率調(diào)查結(jié)果顯示，HBsAg攜帶者HDV抗體流行率分別為1.15%和1.46%［4-5］。此后，我國(guó)暫無(wú)全國(guó)性的HDV流行情況調(diào)查數(shù)據(jù)。近年來(lái)，多篇系統(tǒng)綜述［6-7］研究結(jié)果顯示，我國(guó)HBsAg攜帶者HDV抗體流行率為2.1%～5.57%，遠(yuǎn)高于早期報(bào)道結(jié)果。HBV感染者感染HDV表現(xiàn)為HBV/HDV聯(lián)合感染和重疊感染2種形式［8］。有研究［9］認(rèn)為，慢性丁型肝炎是導(dǎo)致終末期肝病的重要原因，70%的慢性丁型肝炎患者在確診后5～10年可進(jìn)展為肝硬化，15%的患者僅需1～2年即可進(jìn)展為肝硬化［10］。與HBV單獨(dú)感染者相比，HBV/HDV合并感染者肝細(xì)胞癌 （HCC） 發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)與死亡風(fēng)險(xiǎn)更高 （OR值分別為1.97、2.05）［11］。另外，對(duì)于慢性乙型肝炎、乙型肝炎相關(guān)肝硬化和乙型肝炎相關(guān)肝癌患者，其感染HDV的風(fēng)險(xiǎn)分別是無(wú)癥狀HBsAg攜帶者的3.56倍、6.75倍和5.61倍［11］。目前我國(guó)為HBV中度流行國(guó)家，約有7 000萬(wàn)慢性HBV感染者，其中慢性乙型肝炎患者2 000萬(wàn)～3 000萬(wàn)，HBV相關(guān)肝硬化和HCC患者分別為100萬(wàn)和30萬(wàn)［12］。因此，有必要對(duì)HBV感染者的HDV感染情況進(jìn)行篩查，以利于指導(dǎo)患者的臨床管理和治療。劉慧敏等［13］發(fā)現(xiàn)，近10年間，我國(guó)西南醫(yī)院HBsAg陽(yáng)性患者的HDV篩查率僅1.6% （13 585/832 144），建議加大篩查力度，重視丁型肝炎。由于系統(tǒng)綜述研究結(jié)果差異大，大樣本的真實(shí)世界研究開(kāi)展少，所以目前我國(guó)HDV的真實(shí)流行情況仍未知。本研究對(duì)我國(guó)10個(gè)省市自治區(qū)12家醫(yī)院收集的慢性HBV感染者血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，了解我國(guó)不同地區(qū)HBV感染者的HDV感染流行情況。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 2021年3月—2022年6月，從全國(guó)10個(gè)省、自治區(qū)和直轄市的12家醫(yī)院共收集HBsAg陽(yáng)性慢性HBV感染者 （包括HBsAg陽(yáng)性攜帶者、慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者和乙型肝炎肝癌患者） 血清3 131例，其中赤峰市傳染病防治醫(yī)院500例，內(nèi)蒙古國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院300例，呼和浩特市第二醫(yī)院86例，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬四院400例，吉林市傳染病醫(yī)院100例，北京市佑安醫(yī)院708例，中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院200例，廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院203例，安徽省立醫(yī)院217例，新疆維吾爾自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院226例，西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院135例，成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中心56例。血清標(biāo)本采集后于-20 ℃冰箱保存，通過(guò)冷鏈運(yùn)輸至北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部病原生物系實(shí)驗(yàn)室。HBsAg陽(yáng)性攜帶狀態(tài)、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化的診斷參照《慢性乙型肝炎防治指南 （2019年版） 》［14］，乙型肝炎肝癌的診斷參照《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范 （2019年版） 》［15］。同時(shí)，收集患者的基本人口學(xué)信息，以及乙型肝炎血清學(xué)指標(biāo)5項(xiàng)、HBV DNA、肝功能、HCV和HIV檢測(cè)結(jié)果等。

1.2 抗-HDV IgG檢測(cè) 應(yīng)用萬(wàn)泰抗-HDV IgG試劑檢測(cè)全部3 131例血清標(biāo)本，其中500例血清標(biāo)本并用貝爾抗-HDV IgG試劑檢測(cè)（包括來(lái)自內(nèi)蒙古標(biāo)本450例、北京30例、湖南20例，其中含有全部萬(wàn)泰試劑檢出抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本），2種試劑均獲得北京食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)。嚴(yán)格按照各廠家說(shuō)明書進(jìn)行操作。任一試劑檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性即認(rèn)為該標(biāo)本抗-HDV IgG陽(yáng)性。

1.3 HDV RNA檢測(cè) 采用德國(guó)Qiagen公司 “QIAamp Viral RNA Mini Kit” 對(duì)抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行HDV RNA提取。應(yīng)用巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （nested reverse transcription- polymerase chain reaction， nRT-PCR） 擴(kuò)增部分HDV基因序列，先采用賽默飛世爾公司逆轉(zhuǎn)錄試劑 “RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit” 將HDV RNA轉(zhuǎn)錄為cDNA；然后采用翌圣生物科技公司 “Hieff Canace Gold High Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶” 進(jìn)行nRT-PCR反應(yīng)。嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作。nRT-PCR引物見(jiàn)參考文獻(xiàn)［16］，第一輪引物序列為：HDV-819 （5′-TCC CTT AGC CAT CCG AGT GGA C-3′） 和HDV-1303 （5′-AGG GTT CAC CGA CAA GGA GAG G-3′）。第二輪引物序列為：HDV-856 （5′-GGA TGC CCA GGT CGG ACC G-3′） 和HDV-1282 （5′-AAG GAA GGC CCT CGA GAA CAA G-3′）。引物由上海生工生物工程股份有限公司合成。

1.4 HDV基因型檢測(cè) 將抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本的nRT-PCR產(chǎn)物送至上海生工生物工程股份有限公司進(jìn)行序列測(cè)定。采用Bioedit軟件對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行預(yù)處理；從NCBI GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)下載8個(gè)HDV基因型的參考序列 （見(jiàn)參考文獻(xiàn)［17］），采用MEGA 7.0軟件構(gòu)建基于鄰位連接法的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)進(jìn)行基因型分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以M（P25～P75）表示，兩組間比較采用Mann-Whitney U秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分比表示，兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)。HBV DNA水平以log10 IU/mL表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 慢性HBV感染者抗-HDV IgG陽(yáng)性率 本研究共采集到3 131例慢性HBV感染者血清，共檢出抗-HDV IgG陽(yáng)性血清標(biāo)本22例 （0.70%），其中內(nèi)蒙古自治區(qū)886例標(biāo)本檢出抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本16例 （1.81%）；北京市708例標(biāo)本檢出2例 （0.28%）；湖南省200例標(biāo)本檢出2例 （1.00%）；新疆維吾爾自治區(qū)226例標(biāo)本檢出2例 （0.88%），其余省市自治區(qū)均未檢出抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本。慢性HBV感染者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率及地理分布見(jiàn)圖1。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，內(nèi)蒙古自治區(qū)的抗-HDV IgG陽(yáng)性率顯著高于北京市 （P=0.004） 和其他地區(qū) （除內(nèi)蒙古外的其余9個(gè)地區(qū)） （P＜0.001），其余地區(qū)間抗-HDV IgG陽(yáng)性率比較均無(wú)顯著差異 （P值均＞0.05）。

對(duì)各類慢性HBV感染者分層分析，發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古地區(qū)的慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎肝硬化患者抗-HDV IgG陽(yáng)性率顯著高于其他地區(qū) ［慢性乙型肝炎： 1.71% （9/525） vs 0.31% （4/1 298）， P=0.003; 乙型肝炎肝硬化： 6.06% （2/33） vs 0.23% （1/437）， P=0.014］。對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)有明確診斷的720例各類慢性HBV感染者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率比較，發(fā)現(xiàn)HBsAg攜帶者、慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎肝硬化患者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率逐漸升高，分別為0.63% （1/160）、1.71% （9/525）和6.06% （2/33），但各類型患者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率比較無(wú)顯著差異 （P值均＞0.05），2例乙型肝炎肝癌患者抗-HDV IgG均陰性 （表1）。其他地區(qū) （除內(nèi)蒙古外的其余9個(gè)地區(qū)）抗-HDV IgG陽(yáng)性患者較少 （5例），有明確診斷的2 106例慢性HBV感染者中，各類患者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率比較均無(wú)顯著差異 （P＞0.05）。

2.2 抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本HDV RNA檢測(cè) 22例抗-HDV IgG陽(yáng)性標(biāo)本經(jīng)nRT-PCR檢測(cè)，有19例HDV RNA陽(yáng)性，內(nèi)蒙古自治區(qū)標(biāo)本HDV RNA陽(yáng)性率為1.69% （15/886），北京市標(biāo)本為0.14% （1/708），湖南省標(biāo)本為0.50% （1/200），新疆維吾爾自治區(qū)標(biāo)本為0.88% （2/226）。各省市自治區(qū)HDV RNA陽(yáng)性

標(biāo)本檢出情況見(jiàn)圖1。內(nèi)蒙古自治區(qū)標(biāo)本HDV RNA

陽(yáng)性率明顯高于北京市 （P=0.002） 和其他地區(qū) （除內(nèi)蒙古外的其余9個(gè)地區(qū)） （P＜0.001）。對(duì)19例HDV RNA陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行序列測(cè)定，利用MEGA 7.0軟件構(gòu)建基于鄰位連接法的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，結(jié)果顯示，19條HDV序列均與HDV-1型聚類成簇，屬于HDV基因1型。

2.3 HDV感染者臨床特征分析

2.3.1 總體HDV感染者臨床特征分析 根據(jù)抗-HDV IgG檢測(cè)結(jié)果，對(duì)慢性HBV感染者的臨床特征進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，因部分患者臨床信息缺失，在表2中已標(biāo)出每項(xiàng)檢查有數(shù)據(jù)患者的例數(shù) （n）。3 131例患者中，抗-HDV IgG陽(yáng)性22例，陰性3 109例?？?HDV IgG陽(yáng)性組與陰性組的年齡及性別差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P值均＞0.05）。研究共采集到1 702例患者的抗病毒治療史信息，其中71.21% （1 212/1 702） 進(jìn)行過(guò)抗病毒治療，抗-HDV IgG陽(yáng)性組抗病毒治療率為90.91%（10/11） ，陰性組為 71.08%（1 202/1 691）；同時(shí)陽(yáng)性組HBV DNA為1.48 （1.48 ～ 2.95） log10 IU/mL，陰性組為2.00 （1.30 ～ 3.43） log10 IU/mL，組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P值均＞0.05）。共收集到2 826例患者的臨床診斷信息，診斷為乙型肝炎相關(guān)肝硬化/肝癌患者共684例，其中抗-HDV IgG陰性組681例，抗-HDV IgG陽(yáng)性組3例，兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＞0.05）。根據(jù)慢性HBV感染者民族信息分為漢族、蒙古族和其他少數(shù)民族，經(jīng)Fisher精確檢驗(yàn)，抗-HDV IgG陽(yáng)性組蒙古族患者的比例 （47.37%， 9/19） 明顯高于抗-HDV IgG陰性組 （5.47%， 125/2 287） （P＜0.001）。其余指標(biāo) （如HBV感染相關(guān)指標(biāo)、肝功能指標(biāo)） 在兩組間的比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均＞0.05）。

2.3.2 內(nèi)蒙古自治區(qū)HDV感染者臨床特征分析 本研究檢測(cè)出的抗-HDV IgG陽(yáng)性患者主要來(lái)自內(nèi)蒙古地區(qū)，所以對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)抗-HDV IgG陽(yáng)性和陰性慢性HBV感染者的臨床特征進(jìn)行比較分析。本研究共采集到內(nèi)蒙古自治區(qū)慢性HBV感染者血清886例，抗-HDV IgG陽(yáng)性組16例，陰性組870例，性別和年齡在兩組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P值均＞0.05）?？?HDV IgG陽(yáng)性組蒙古族患者占比60.00%（9/15）、ALT異常 （ALT＞40 U/L） 患者占比57.14%（8/14）、進(jìn)行過(guò)抗病毒治療患者占比87.50%（7/8），均顯著高于陰性組 （P值均＜0.05）。而抗-HDV IgG陽(yáng)性組患者的HBV DNA水平中位數(shù) ［1.90（1.48～3.07） log10 IU/mL］ 顯著低于陰性組 ［2.85（1.48～5.00） log10 IU/mL， P=0.030］（圖2）。其余指標(biāo)如AST、ALP、GGT、HBsAg、HBeAg等在抗-HDV IgG陽(yáng)性和陰性組間均無(wú)顯著差異 （P值均＞0.05）。

3 討論

HDV通過(guò)HBV/HDV聯(lián)合感染或重疊感染2種形式導(dǎo)致急性或慢性丁性肝炎，加速乙型肝炎患者的疾病進(jìn)展［18］。7%～14%的HBV/HDV重疊感染者或2%～3%的HBV/HDV聯(lián)合感染者可發(fā)展為重癥肝炎，90%的HBV/HDV重疊感染者或2%～5%的HBV/HDV聯(lián)合感染者可轉(zhuǎn)為慢性丁型肝炎［19］。慢性丁型肝炎是最嚴(yán)重形式的病毒性肝炎，且疾病進(jìn)展迅速［20］。由于丁型肝炎無(wú)特異性疾病表現(xiàn)，若未進(jìn)行HDV檢測(cè)，難以區(qū)分單純乙型肝炎和HBV/HDV聯(lián)合或重疊感染，因此，有必要對(duì)HBV感染者進(jìn)行HDV感染篩查，使HBV感染者知曉自己的HDV感染情況，有利于丁型肝炎患者的進(jìn)一步臨床管理和治療。目前，無(wú)論是歐美國(guó)家還是我國(guó)的HDV篩查率均較低，這也是很多國(guó)家無(wú)法獲得準(zhǔn)確HDV流行病學(xué)數(shù)據(jù)的原因之一［13，21-22］。一些國(guó)際指南［23-25］建議對(duì)所有慢性HBV感染者或有HDV感染風(fēng)險(xiǎn)因素的HBsAg陽(yáng)性患者進(jìn)行HDV感染篩查。當(dāng)下，丁型肝炎治療藥物研發(fā)已取得很大進(jìn)展，HDV進(jìn)入抑制劑——Hepcludex于2020年7月獲得歐洲藥品管理局有條件批準(zhǔn)上市，用于治療血漿 （或血清） HDV RNA陽(yáng)性的代償期成人慢性丁型肝炎，其他靶點(diǎn)抗HDV治療藥物的臨床試驗(yàn)也在推進(jìn)［26］。因此，及時(shí)掌握HDV感染流行情況，識(shí)別HDV感染者，可使患者盡早納入臨床管理，控制病情發(fā)展，減少終末期肝病發(fā)生，也有利于實(shí)現(xiàn)世界衛(wèi)生組織提出的2030年消除病毒性肝炎公共衛(wèi)生危害的目標(biāo)［3］。

系統(tǒng)綜述研究［6-7］結(jié)果提示，我國(guó)HBsAg攜帶者HDV抗體流行率有所上升，但不同研究結(jié)果差異較大，我國(guó)現(xiàn)階段真實(shí)的HDV感染流行情況仍需進(jìn)一步研究。Roggenbach等［27］收集了我國(guó)11個(gè)省市自治區(qū)的3 065例HBsAg陽(yáng)性患者血清，對(duì)HDV流行情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，內(nèi)蒙古自治區(qū)和新疆維吾爾自治區(qū)HDV流行率偏高，分別為13.9%和3.9%，其余9個(gè)省市未檢出HDV抗體陽(yáng)性標(biāo)本。王彥［28］對(duì)我國(guó)7個(gè)省市自治區(qū)的3 000例慢性乙型肝炎患者進(jìn)行HDV流行情況調(diào)查，發(fā)現(xiàn)單獨(dú)慢性乙型肝炎患者的HDV流行率為0.85%，HIV/HBV合并感染者的HDV流行率為7.91%，四川省 （13.88%） 和廣西壯族自治區(qū) （5.32%） HDV流行率偏高，與納入研究的HIV/HBV合并感染者比例高有關(guān)。本研究對(duì)來(lái)自全國(guó)10個(gè)省市自治區(qū)的3 131例慢性HBV感染者進(jìn)行HDV感染情況調(diào)查，發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古自治區(qū)、北京市、湖南省和新疆維吾爾自治區(qū)慢性HBV感染者的抗-HDV IgG陽(yáng)性率分別為1.81%（16/886）、0.28%（2/708）、1.00%（2/200）和0.88%（2/226），其余地區(qū)未檢出，總體抗-HDV IgG陽(yáng)性率為0.70%（22/3 131）。內(nèi)蒙古自治區(qū)慢性HBV感染者抗-HDV IgG陽(yáng)性率較高，并且蒙古族患者陽(yáng)性率顯著高于漢族和其他民族，其原因可能與民族習(xí)慣有關(guān)，蒙古族使用刀具的機(jī)會(huì)較多，這可能會(huì)使當(dāng)?shù)厝烁腥狙葱詡鞑ゼ膊〉目赡苄栽黾?，?dǎo)致HDV流行率較高；也可能與地理位置毗鄰HDV高流行區(qū) （蒙古國(guó)） 有關(guān)［27］。王彥［28］研究報(bào)道，少數(shù)民族 （以彝族為主） HDV感染者的比例也明顯高于漢族。以上研究結(jié)果提示，HDV在我國(guó)處于低流行態(tài)勢(shì)，不同地區(qū)HDV流行率差異大，高風(fēng)險(xiǎn)人群的HDV流行率高。不同研究對(duì)同一地區(qū)篩查得出的HDV流行率存在差別，可能與研究的地理區(qū)域、納入研究的人群類別及使用的HDV抗體檢測(cè)試劑不同有關(guān)。

另外，本研究在內(nèi)蒙古地區(qū)慢性HBV感染者中發(fā)現(xiàn)，HBV/HDV合并感染者接受抗病毒治療比例高、HBV DNA水平顯著低于HBV單獨(dú)感染者，而ALT異?；颊弑壤@著高于HBV單獨(dú)感染者。Jang等［29］發(fā)現(xiàn)與單獨(dú)慢性乙型肝炎患者相比，合并HDV感染的患者在抗HBV治療1年和2年后 ALT異常的風(fēng)險(xiǎn)分別增加30倍和10倍。既往研究［28，30-31］也發(fā)現(xiàn)，HDV感染可抑制HBV復(fù)制或HBeAg表達(dá)，HDV感染者ALT水平反復(fù)波動(dòng)，ALT異常患者比例更高，可能與HDV感染后進(jìn)一步加重乙型肝炎患者肝損傷有關(guān)。因此，建議對(duì)抗病毒治療后無(wú)生化學(xué)應(yīng)答的慢性乙型肝炎患者，尤其是HBV DNA低水平患者，進(jìn)行HDV感染相關(guān)檢查。但Liao等［32］發(fā)現(xiàn)，對(duì)慢性乙型肝炎患者，HDV感染者的HBV DNA水平明顯低于HBV單獨(dú)感染者；而對(duì)終末期肝病患者，HDV感染者的HBV DNA水平卻明顯較高，可能提示HDV抑制HBV復(fù)制與肝病進(jìn)展情況有關(guān)。

本研究存在一些不足之處。由于本研究為多中心研究，各醫(yī)院開(kāi)展的檢測(cè)項(xiàng)目有差異，收集的臨床資料不夠完善，部分患者檢測(cè)項(xiàng)目信息缺失，給臨床數(shù)據(jù)分析造成影響。其次，本研究中大部分患者都接受過(guò)乙型肝炎抗病毒治療，重癥肝病患者比例少，可能會(huì)影響HDV流行率的估計(jì)。除用于治療乙型肝炎外，聚乙二醇干擾素 （PEG-IFNα） 是目前國(guó)外指南唯一推薦用于治療丁型肝炎的藥物，持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答率為20%～30%［10，33］。因此，對(duì)于使用PEG-IFNα治療的乙型肝炎患者，若合并HDV感染，也有一定治療效果。核苷 （酸） 類似物是另一類用于治療乙型肝炎的藥物，雖然對(duì)丁型肝炎無(wú)治療效果或效果甚微，但可有效控制乙型肝炎患者的病情進(jìn)展［34］。研究［35］認(rèn)為，HDV抗體陽(yáng)性率隨肝病嚴(yán)重程度而明顯增加，在輕癥肝病患者中發(fā)現(xiàn)HDV抗體陽(yáng)性患者的概率小。另外，本研究未招募到高風(fēng)險(xiǎn)人群 （如HIV、HCV感染者，靜脈吸毒者，高風(fēng)險(xiǎn)性行為者等），而有研究［6］發(fā)現(xiàn)，這部分人群的HDV感染率顯著高于普通HBV感染者。

綜上所述，本研究中3 131例慢性HBV感染者的HDV IgG抗體流行率為0.70% （22/3 131），不同地區(qū)HDV流行率差異大，內(nèi)蒙古自治區(qū)抗-HDV IgG抗體陽(yáng)性率 （1.81%） 相對(duì)較高。HDV RNA陽(yáng)性感染者的HDV基因型均為1型。本研究發(fā)現(xiàn)我國(guó)部分地區(qū)HDV流行率較低，但考慮到HDV流行的地區(qū)差異、人群差異和HDV感染后的疾病特點(diǎn)，建議對(duì)重點(diǎn)地區(qū)和高風(fēng)險(xiǎn)人群加大HDV篩查力度，使丁型肝炎患者能獲得及時(shí)有效治療；在開(kāi)展全國(guó)乙型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查時(shí)，對(duì)HBsAg陽(yáng)性人群檢測(cè)抗-HDV IgG，了解我國(guó)一般人群的抗-HDV IgG流行率。

利益沖突聲明：本研究不存在研究者、倫理委員會(huì)成員、受試者監(jiān)護(hù)人以及與公開(kāi)研究成果有關(guān)的利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：劉玉梅完成實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)分析，撰寫論文；郭小平、張慧敏、白洪霞、王春梅、任姍、蔣永芳、楊勝、彭鋒、王曉忠、于雷、廖柏明、寧玲、何英利、楊霞、黃亮參與收集樣本和臨床數(shù)據(jù)；劉學(xué)恩、莊輝負(fù)責(zé)課題設(shè)計(jì)，指導(dǎo)撰寫文章并最后定稿。

參考文獻(xiàn)：

［1］

RIZZETTO M. The adventure of delta［J］. Liver Int， 2016， 36（Suppl 1）： 135-140. DOI： 10.1111/liv.13018.

［2］YAN H， ZHONG G， XU G， et al. Sodium taurocholate cotransporting polypeptide is a functional receptor for human hepatitis B and D virus［J］. Elife， 2012， 1： e00049. DOI： 10.7554/eLife.00049.

［3］MIAO Z， XIE Z， REN L， et al. Hepatitis D： advances and challenges［J］. Chin Med J （Engl）， 2022， 135（7）： 767-773. DOI： 10.1097/CM9.0000000000002011.

［4］DAI ZC， QI GM. National sero-epidemiological survey of viral hepatitis （volume I） 1992-1995［M］. Beijing： Scientific and Technical Documents Publishing House， 1997.

戴志澄， 祁國(guó)明. 中國(guó)病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查 （上卷） 1992—1995［M］. 北京： 科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社， 1997.

［5］ZHAN MY， LIU SL， YI YJ， et al. Molecular biology and sero-epidemiology of hepatitis D virus in China［J］. Bulletin Med Res， 1996， 25（10）： 9-11.

詹美云， 劉善慮， 易炎杰， 等. 我國(guó)丁型肝炎病毒分子生物學(xué)和血清流行病學(xué)研究［J］. 醫(yī)學(xué)研究通訊， 1996， 25（10）： 9-11.

［6］STOCKDALE AJ， KREUELS B， HENRION MYR， et al. The global prevalence of hepatitis D virus infection： systematic review and meta-analysis［J］. J Hepatol， 2020， 73（3）： 523-532. DOI： 10.1016/j.jhep.2020.04.008.

［7］CHEN HY， SHEN DT， JI DZ， et al. Prevalence and burden of hepatitis D virus infection in the global population： a systematic review and meta-analysis［J］. Gut， 2019， 68（3）： 512-521. DOI： 10.1136/gutjnl-2018-316601.

［8］KOH C， HELLER T， GLENN JS. Pathogenesis of and new therapies for hepatitis D［J］. Gastroenterology， 2019， 156（2）： 461-476. DOI： 10.1053/j.gastro.2018.09.058.

［9］FARCI P， NIRO GA. Clinical features of hepatitis D［J］. Semin Liver Dis， 2012， 32（3）： 228-236. DOI： 10.1055/s-0032-1323628.

［10］NIRO GA， FERRO A， CICERCHIA F， et al. Hepatitis delta virus： from infection to new therapeutic strategies［J］. World J Gastroenterol， 2021， 27（24）： 3530-3542. DOI： 10.3748/wjg.v27.i24.3530.

［11］MIAO Z， ZHANG S， OU X， et al. Estimating the global prevalence， disease progression， and clinical outcome of hepatitis delta virus infection［J］. J Infect Dis， 2020， 221（10）： 1677-1687. DOI： 10.1093/infdis/jiz633.

［12］LIU J， LIANG W， JING W， et al. Countdown to 2030： eliminating hepatitis B disease， China［J］. Bull World Health Organ， 2019， 97（3）： 230-238. DOI： 10.2471/BLT.18.219469.

［13］LIU HM， TAN ZX， YANG J， et al. Prevalence and clinical characteristics of hepatitis D in southwest of China［J］. Chin J Exp Clin Virol， 2022， 36（1）： 85-91. DOI： 10.3760/cma.j.cn112866-20210611-00096.

劉慧敏， 譚朝霞， 楊京， 等. 中國(guó)西南地區(qū)丁型肝炎的流行狀況與臨床特征分析［J］. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志， 2022， 36（1）： 85-91. DOI： 10.3760/cma.j.cn112866-20210611-00096.

［14］Chinese Society of Infectious Disesses， Chinese Medical Association； Chinese Society of Hepatology， Chinese Medical Association. Guidelines for the prevention and treatment of chronic hepatitis B （version 2019）［J］. J Clin Hepatol， 2019， 35（12）： 2648-2669. DOI： 10.3969/j.issn.1001-5256.2019.12.007.

中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)， 中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì). 慢性乙型肝炎防治指南 （2019年版）［J］. 臨床肝膽病雜志， 2019， 35（12）： 2648-2669. DOI： 10.3969/j.issn.1001-5256.2019.12.007.

［15］Bureau of Medical Administration， National Health Commission of the Peoples Republic of China. Guidelines for diagnosis and treatment of primary liver cancer in China （2019 edition）［J］. J Clin Hepatol， 2020， 36（2）： 277-292. DOI： 10.3969/j.issn.1001-5256.2020.02.007.

中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管局. 原發(fā)性肝癌診療規(guī)范 （2019年版）［J］. 臨床肝膽病雜志， 2020， 36（2）： 277-292. DOI： 10.3969/j.issn.1001-5256.2020.02.007.

［16］PERVEEN S， NASIR MI， SHAHID SM， et al. Phylogenetic analysis of HDV isolates from HBsAg positive patients in Karachi， Pakistan［J］. Virol J， 2012， 9： 162. DOI： 10.1186/1743-422X-9-162.

［17］LIU YM， BAI HX， MA YH， et al. Evaluation of four anti-HDV IgG detection reagents for hepatitis D virus［J］. Chin J Viral Dis， 2022， 12（3）： 170-174. DOI： 10.16505/j.2095-0136.2022.0024.

劉玉梅， 白洪霞， 馬亞紅， 等. 4種丁型肝炎病毒IgG抗體檢測(cè)試劑的評(píng)價(jià)［J］. 中國(guó)病毒病雜志， 2022， 12（3）： 170-174. DOI： 10.16505/j.2095-0136.2022.0024.

［18］BOTELHO-SOUZA LF， VASCONCELOS MPA， DOS SANTOS AO， et al. Hepatitis delta： virological and clinical aspects［J］. Virol J， 2017， 14（1）： 177. DOI： 10.1186/s12985-017-0845-y.

［19］SAGNELLI C， PISATURO M， CURATOLO C， et al. Hepatitis B virus/hepatitis D virus epidemiology： changes over time and possible future influence of the SARS-CoV-2 pandemic［J］. World J Gastroenterol， 2021， 27（42）： 7271-7284. DOI： 10.3748/wjg.v27.i42.7271.

［20］RIZZETTO M， HAMID S， NEGRO F. The changing context of hepatitis D［J］. J Hepatol， 2021， 74（5）： 1200-1211. DOI： 10.1016/j.jhep.2021.01.014.

［21］EL BOUZIDI K， ELAMIN W， KRANZER K， et al. Hepatitis delta virus testing， epidemiology and management： a multicentre cross-sectional study of patients in London［J］. J Clin Virol， 2015， 66： 33-37. DOI： 10.1016/j.jcv.2015.02.011.

［22］SAFAIE P， RAZEGHI S， ROUSTER SD， et al. Hepatitis D diagnostics： utilization and testing in the United States［J］. Virus Res， 2018， 250： 114-117. DOI： 10.1016/j.virusres.2018.03.013.

［23］European Association for the Study of the Liver. EASL 2017 clinical practice guidelines on the management of hepatitis B virus infection［J］. J Hepatol， 2017， 67（2）： 370-398. DOI： 10.1016/j.jhep.2017.03.021.

［24］TERRAULT NA， LOK ASF， MCMAHON BJ， et al. Update on prevention， diagnosis， and treatment of chronic hepatitis B： AASLD 2018 hepatitis B guidance［J］. Hepatology， 2018， 67（4）： 1560-1599. DOI： 10.1002/hep.29800.

［25］SARIN SK， KUMAR M， LAU GK， et al. Asian-Pacific clinical practice guidelines on the management of hepatitis B： a 2015 update［J］. Hepatol Int， 2016， 10（1）： 1-98. DOI： 10.1007/s12072-015-9675-4.

［26］LIU YM， LIU XE， ZHUANG H. Advances in development of new anti-HDV drugs［J］. Chin J Viral Dis， 2021， 11（6）： 414-419. DOI： 10.16505/j.2095-0136.2021.0054.

劉玉梅， 劉學(xué)恩， 莊輝. 丁型肝炎抗病毒新藥研究進(jìn)展［J］. 中國(guó)病毒病雜志， 2021， 11（6）： 414-419. DOI： 10.16505/j.2095-0136.2021.0054.

［27］ROGGENBACH I， CHI X， LEMPP FA， et al. HDV seroprevalence in HBsAg-positive patients in China occurs in hotspots and is not associated with HCV mono-infection［J］. Viruses， 2021， 13（9）： 1799. DOI： 10.3390/v13091799.

［28］

WANG Y. Survey of HDV infection and molecular characterization of HDV， HBV and HIV-1 among chronic hepatitis B patients in China［D］. Beijing： Chinese Center for Disease Control and Prevention， 2018.

王彥. 我國(guó)丁型肝炎病毒感染情況調(diào)查和病毒分子特性研究［D］. 北京： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心， 2018.

［29］JANG TY， WEI YJ， YEH ML， et al. Role of hepatitis D virus in persistent alanine aminotransferase abnormality among chronic hepatitis B patients treated with nucleotide/nucleoside analogues［J］. J Formos Med Assoc， 2021， 120（1 Pt 2）： 303-310. DOI： 10.1016/j.jfma.2020.10.002.

［30］GU XH， LI QF， WANG YM. Clinical characteristics of the patients with hepatitis B combining hepatitis D infection［J］. Chin J Hepatol， 2001， 9（1）： 34-36.DOI：10.3760/j.issn：1007-3418.2001.01.011.

顧小紅， 李奇芬， 王宇明. 伴HDV感染的乙型肝炎患者的臨床特征［J］.中華肝臟病雜志， 2001， 9（1）： 34-36.DOI：10.3760/j.issn：1007-3418.2001.01.011.

［31］WU S， ZHANG Y， TANG Y， et al. Molecular epidemiology and clinical characteristics of hepatitis delta virus （HDV） infected patients with elevated transaminases in Shanghai， China［J］. BMC Infect Dis， 2020， 20（1）： 565. DOI： 10.1186/s12879-020-05275-1.

［32］LIAO B， ZHANG F， LIN S， et al. Epidemiological， clinical and histological characteristics of HBV/HDV co-infection： a retrospective cross-sectional study in Guangdong， China［J］. PLoS One， 2014， 9（12）： e115888. DOI： 10.1371/journal.pone.0115888.

［33］LEE AU， LEE C. Hepatitis D review： challenges for the resource-poor setting［J］. Viruses， 2021， 13（10）： 1912. DOI： 10.3390/v13101912.

［34］FARCI P， ANNA NIRO G. Current and future management of chronic hepatitis D［J］. Gastroenterol Hepatol （N Y）， 2018， 14（6）： 342-351.

［35］RIZZETTO M， HAMID S. The medical impact of hepatitis D virus infection in Asia and Africa; time for a reappraisal［J］. Liver Int， 2021， 41（1）： 16-19. DOI： 10.1111/liv.14729.

收稿日期：

2022-11-06；錄用日期：2022-12-10

本文編輯：劉曉紅