湖北地區(qū)原發(fā)性高血壓人群藥物相關(guān)基因多態(tài)性研究

任國(guó)慶 易天驕 范浩 康文義 范文

[關(guān)鍵詞]高血壓；高血壓藥物相關(guān)基因；基因多態(tài)性；基因型

高血壓的病因是由遺傳因素和環(huán)境因素共同導(dǎo)致的。我國(guó)最新數(shù)據(jù)顯示18歲以上高血壓患者人數(shù)約為2.45億，已對(duì)我國(guó)居民的身體健康構(gòu)成嚴(yán)重危害[1]。口服降壓藥物是治療高血壓最重要的方法，研究表明相同降壓藥的療效在不同患者間存在明顯差異，藥物相關(guān)的基因位點(diǎn)多態(tài)性可改變藥物代謝酶活性和影響藥物作用靶點(diǎn)，導(dǎo)致個(gè)體差異[2]。通過檢測(cè)高血壓藥物相關(guān)基因的多態(tài)性，可指導(dǎo)醫(yī)師對(duì)常規(guī)用藥療效不佳的患者選擇合適的藥物和給藥劑量。本研究分析目前國(guó)內(nèi)外研究較多的7種抗高血壓藥物相關(guān)基因多態(tài)性[AGTR1（1166A>C）、CYP2C9*3、ACE（I/D）、CYP2D6*10、ADRB1（1165G>C）、NPPA（2238T>C）、CYP3A5*3]在湖北地區(qū)高血壓人群中的分布特征，給個(gè)體化基因?qū)蛑委熖峁├碚撘罁?jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年9月至2022年6月在湖北省中醫(yī)院和各課題參與單位就診的500例原發(fā)性高血壓患者為研究對(duì)象，其中男274例，女226例。經(jīng)湖北省中醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)研究審核通過，患者簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡>18周歲；符合最新版中國(guó)高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]中1級(jí)和2級(jí)原發(fā)性高血壓的新確診患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：繼發(fā)性高血壓；心力衰竭等嚴(yán)重的心臟疾病；慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎等腎臟疾病。

1.2 基因型檢測(cè)

乙二胺四乙酸抗凝管采集2ml靜脈血標(biāo)本，對(duì)采集的血標(biāo)本進(jìn)行核酸提取，并對(duì)提取的核酸進(jìn)行擴(kuò)增，每次實(shí)驗(yàn)保證陰性和陽性質(zhì)控合格。核酸提取儀型號(hào)為GeneRotex96（西安天隆科技有限公司），核酸提取試劑使用Ex-DNA（西安天隆科技有限公司，批號(hào)：21050720T146）；熒光定量PCR擴(kuò)增儀型號(hào)為QuantStudioDx（美國(guó)ABI公司），擴(kuò)增試劑使用PCR-溶解曲線法檢測(cè)試劑（無錫銳奇基因生物科技有限公司，批號(hào)：H242105002）。

1.3 觀察指標(biāo)

基因檢測(cè)結(jié)果分為野生型（WW）、雜合突變型（WM）、純合突變型（MM），等位基因分為野生型等位基因（W）和突變型等位基因（M）。等位基因頻率=某基因的總數(shù)/種群中全部基因的總數(shù)；基因型頻率=某種類型的基因型個(gè)數(shù)/種群的總數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，基因型及基因頻率分布的組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基因型及基因頻率檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)Hardy-Weinberg平衡吻合度檢驗(yàn)結(jié)果（P>0.05），7種高血壓藥物相關(guān)的基因型分布頻率處于遺傳平衡狀態(tài)。其中ADRB1（G/C）和CYP3A5*3等位基因突變頻率超過70%，CYP2D6*10和ACE（I/D）的突變頻率較高分別為55.41%和35.70%，AGTR1（A/C）、CYP2C9*3和NPPA（T/C）突變頻率較低不足10%。見表1。

2.2 各基因型在不同性別、年齡組間的分布頻率比較

7個(gè)抗高血壓藥物相關(guān)基因的分布頻率在男、女間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。老年組和青中年組間，AGTR1（1166A>C）基因型的分布頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），尚未發(fā)現(xiàn)其余6種基因型的分布頻率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.3 湖北地區(qū)高血壓患者與正常人群抗高血壓藥物相關(guān)的等位基因分布頻率比較

500例原發(fā)性高血壓患者中5個(gè)高血壓藥物相關(guān)的等位基因分布頻率與正常人群[2]比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表3。

3 討論

基因多態(tài)性影響藥物療效的作用機(jī)制是藥物基因組學(xué)這門學(xué)科主要的研究?jī)?nèi)容，相關(guān)藥物代謝酶和藥物作用靶點(diǎn)的基因位點(diǎn)可以通過分子診斷技術(shù)被檢測(cè)出來，對(duì)指導(dǎo)臨床精準(zhǔn)用藥和避免用藥不良反應(yīng)的發(fā)生尤為重要。

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（angiotensinconvertingenzymeinhibitor，ACEI）可抑制體內(nèi)的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶，使得血管緊張素轉(zhuǎn)換酶催化血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅱ的功能降低，達(dá)到降低血壓的作用。ACE基因編碼血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的生成，該基因Alu插入片段（I）和缺失片段（D）的多態(tài)性可影響人體血漿ACE濃度（DD型>ID型>II型），導(dǎo)致ACEI降壓療效的差異不同[3]。研究表明[4]，服用相同的ACEI類藥物治療前后，攜帶D等位基因與攜帶I等位基因的高血壓患者相比較，攜帶D等位基因的高血壓患者血壓下降幅度更大。ACE基因可能影響高血壓的發(fā)生發(fā)展，高血壓患者中D等位基因的頻率要高于健康人群[5]，本研究中尚未發(fā)現(xiàn)高血壓患者中的D等位基因與正常人群存在差異。

血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（angiotensionⅡreceptorantagonist，ARB）通過抑制ATⅡ受體，抑制ATⅡ的縮血管作用，從而降低血壓。血管緊張素Ⅱ-1型受體（angiotensinⅡreceptor1，AGTR1）由AGTR1基因編碼，AGTR1（1166A>C）突變可使受體的敏感性提高，可增強(qiáng)ARB的降壓療效。研究表明[6]，AA、AC和CC基因型患者在接受相同劑量的厄貝沙坦治療前后，AC+CC基因型組比AA基因型組療效更好。許景峰等[7]研究發(fā)現(xiàn)高血壓患者中AGTR1（1166A>C）突變頻率顯著低于健康受試者（P<0.05），本研究中AGTR1（A/C）突變型等位基因頻率與中國(guó)健康人群相比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在湖南和福建地區(qū)高血壓患者的AGTR1（A/C）突變型等位基因頻率與中國(guó)健康人群相比較存在差異[8]。受地域和種族影響，尚未得出一致性結(jié)論。此外，AGTR1（1166A>C）基因型在老年組和青中年組間的頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說明AGTR1（1166A>C）突變型等位基因頻率在青中年人群中發(fā)生較高。本研究中CYP2C9*3等位基因突變頻率為5.10%，與文獻(xiàn)[7]研究基本一致。肝臟中的CYP2C9可以代謝ARB類藥物，CYP2C9*3的突變頻率在人群中發(fā)生率不高，但是CYP2C9*3的突變可導(dǎo)致代謝酶的活性大大降低，從而影響ARB的降壓療效。對(duì)于前體藥物氯沙坦，CYP2C9*3突變會(huì)使轉(zhuǎn)換生成羥酸代謝產(chǎn)物減少，攜帶CYP2C9*3突變型等位基因的患者需要增加氯沙坦的劑量；對(duì)于厄貝沙坦和坎地沙坦等原型降壓藥，CYP2C9*3突變會(huì)導(dǎo)致血藥濃度明顯升高，應(yīng)當(dāng)適量減藥[9]。

β1-受體阻滯劑通過與β1腎上腺素受體（β1adrenergicreceptorantibody，β1-AR）的結(jié)合，并通過G蛋白-腺苷酸環(huán)化酶-環(huán)磷酸腺苷-蛋白酶A（GS-AC-cAMP-PKA）通路對(duì)平滑肌產(chǎn)生抑制性效應(yīng)使得血管擴(kuò)張和血壓下降。β1-AR由ADRB1基因編碼，ADRB1（1165G>C）突變可導(dǎo)致受體敏感性提高，增加β1-受體阻滯劑的降壓療效。研究表明[10]，CC基因型患者對(duì)于β1-受體阻滯劑的降壓療效要好于GG和GC基因型患者。肝臟中CYP2D6能代謝β1-受體阻滯劑，CYP2D6*10突變可導(dǎo)致代謝酶活性極大地下降，從而增強(qiáng)β1-受體阻滯劑療效。CYP2D6*10/*10基因型的患者對(duì)于β1-受體阻滯劑的降壓療效要明顯好于其他基因型[11]。本研究結(jié)果尚未發(fā)現(xiàn)CYP2D6*10和ADRB1（1165G>C）等位基因頻率與文獻(xiàn)中健康人群[2]分布存在差異，CYP2D6*10和ADRB1（1165G>C）突變頻率都高于50%，臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)基因檢測(cè)結(jié)果合理使用β1-受體阻滯劑，避免不良反應(yīng)的發(fā)生。

鈣通道阻滯劑（calciumchannelblocker，CCB）主要通過CYP3A5代謝，CYP3A5*3突變可導(dǎo)致代謝酶功能降低，底物在體內(nèi)被降解的時(shí)間延長(zhǎng)，從而增強(qiáng)藥物的療效。CYP3A5不同基因型對(duì)藥物代謝存在差異，需要個(gè)體化治療[12]。使用相同CCB治療方案下，根據(jù)基因型對(duì)高血壓患者進(jìn)行分組比較降壓療效，CYP3A5*3/*3組療效最好，CYP3A5*1/*3組次之，CYP3A5*1/*1組療效較差[13]。本研究中CYP3A5*3突變頻率較高，臨床醫(yī)師在經(jīng)驗(yàn)性用藥時(shí)，應(yīng)當(dāng)適當(dāng)減藥。

目前對(duì)利尿劑藥物療效與NPPA（2238T>C）基因多態(tài)性研究較少，攜帶C等位基因的患者，對(duì)利尿劑藥物的敏感性增加[14]。本研究中，NPPA（2238T>C）在7種基因突變位點(diǎn)中頻率最低僅為0.80%，說明大部分患者對(duì)于利尿劑不敏感，此結(jié)論與楊梅等[15]研究結(jié)論相一致。

本研究旨在分析7種抗高血壓藥物基因多態(tài)性在湖北地區(qū)高血壓人群中的分布特征，與中國(guó)健康人群比較中尚未發(fā)現(xiàn)存在顯著性差異，但是為湖北地區(qū)原發(fā)性高血壓基因庫的擴(kuò)充奠定了基礎(chǔ)。由于標(biāo)本量較少，后期將增加高血壓患者樣本同時(shí)增加對(duì)湖北西部地區(qū)少數(shù)民族高血壓患者的樣本，檢測(cè)其全部7種基因多態(tài)性結(jié)果與用藥療效的相關(guān)性，為湖北地區(qū)高血壓患者提供個(gè)體化臨床治療。