• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    氣體二氧化氯對(duì)葡萄殺菌效果及品質(zhì)的影響

    2023-04-06 03:02:46程傳松郭鳳婷劉斌雄陳登元黃曉燕李長(zhǎng)城
    食品科學(xué) 2023年5期
    關(guān)鍵詞:干冰果蔬菌落

    江 濤,程傳松,郭鳳婷,劉斌雄,陳登元,黃曉燕,李長(zhǎng)城,方 婷*

    (福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,福建 福州 350002)

    葡萄因其果粒飽滿、酸甜可口及汁液豐富而深受消費(fèi)者青睞[1]。作為一種具有極高經(jīng)濟(jì)價(jià)值和市場(chǎng)價(jià)值的水果,據(jù)統(tǒng)計(jì),福建福安‘巨峰’葡萄種植面積高達(dá)4.5萬(wàn) 畝,年產(chǎn)量4.2萬(wàn) t,年產(chǎn)值達(dá)到2.9億 元,已然成為南方沿海最大的葡萄生產(chǎn)基地。當(dāng)前,在冷藏條件下,市售葡萄貨架期約為10 d,最佳食用期約為7 d[2]。然而,由于葡萄富含水分和營(yíng)養(yǎng)成分,采后極易遭受微生物侵染,導(dǎo)致果實(shí)腐敗變質(zhì),甚至造成食源性疾病[3]。此外,葡萄生理代謝旺盛,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗較快,極易造成失水軟化和風(fēng)味劣變,大大降低葡萄品質(zhì)[4]。因此,采用適宜的保鮮技術(shù)處理葡萄以實(shí)現(xiàn)殺菌保鮮效果顯得尤為必要。

    目前,殼聚糖、電解水以及ClO2等新型保鮮技術(shù)已被應(yīng)用于果蔬保鮮。殼聚糖可通過(guò)涂膜等方式施加于果蔬表面,但其抗菌效果不佳(無(wú)法均勻處理),導(dǎo)致保鮮效果參差不齊[5]。電解水法處理果蔬雖然有著不錯(cuò)的抗菌效果,但處理時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng),且受環(huán)境因素等影響,無(wú)法靈活使用,效率較低[6]。ClO2有著強(qiáng)力的抗菌效力,已作為一種廣泛、高效且安全的殺菌劑應(yīng)用于果蔬清洗、殺菌保鮮等領(lǐng)域[7]。研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)經(jīng)ClO2氣體處理后,果蔬表面微生物可被滅活,從而減少果蔬微生物負(fù)荷,提升果蔬抗菌與抗病能力,實(shí)現(xiàn)一定的保鮮效果[8]。Sadeghi等[9]開發(fā)了一款自釋放ClO2薄片,并利用其處理番茄果實(shí),結(jié)果表明該薄片能夠抑制番茄果實(shí)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖,且番茄果實(shí)品質(zhì)保持良好。Wang Lin等[10]使用5 mg/L ClO2氣體處理圣女果5 h,實(shí)現(xiàn)了完全滅活沙門氏菌且保持了圣女果感官品質(zhì)與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。Jin Riya等[11]應(yīng)用10 mg/m3ClO2氣體處理葡萄30 min,灰霉菌、青霉菌及鏈格孢霉減少超過(guò)4(lg(CFU/g)),且能夠抑制VC和還原糖含量消耗。

    然而,氣體ClO2難以制備和控制。氣體ClO2通常采用亞氯酸鈉(NaClO2)與酸(鹽酸、硫酸及草酸等)反應(yīng)制備,因此會(huì)選用大型發(fā)生器或發(fā)生裝置,從而降低了處理的靈活性[12]。NaClO2與干冰反應(yīng)產(chǎn)生ClO2是一種間接反應(yīng)。利用過(guò)量干冰揮發(fā)釋放大量CO2,CO2溶于含有NaClO2溶液的吸收墊從而形成H2CO3,H2CO3可電離產(chǎn)生H+,進(jìn)一步與NaClO2反應(yīng)產(chǎn)生ClO2和其他無(wú)毒化合物(Na2CO3、NaCl和H2O)。由于ClO2極易溶于水,起始ClO2溶解于吸收墊中,當(dāng)溶液飽和后,ClO2迅速逸出。本研究利用NaClO2與干冰間接反應(yīng)開發(fā)一種氣體ClO2處理葡萄的方法,旨在評(píng)估氣體ClO2的殺菌效果。同時(shí),測(cè)定氣體ClO2處理前后葡萄相關(guān)品質(zhì)指標(biāo),旨在評(píng)估氣體ClO2對(duì)其品質(zhì)的影響。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    ‘巨峰’葡萄購(gòu)于福建省福安市象環(huán)村,挑選無(wú)機(jī)械損傷、無(wú)病害、顏色大小相似及成熟度一致的果實(shí)用于研究。

    1%蛋白胨水(peptone water,PW) 北京雙旋微生物制品廠;腦心浸萃液體培養(yǎng)基(brain heart infusion,BHI)、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(tryptic soy agar,TSA)廣州環(huán)凱微生物有限公司;利福平(rifampicin,Rif)美國(guó)Sigma公司;NaClO2固體(純度80%) 上海麥克林生化科技有限公司;干冰 福州佰泉生物有限公司;TaKaRa裂解緩沖液(D304) 北京全式金生物技術(shù)有限公司;2×TsingKE Master Mix(TSE003) 北京奧維森基因科技有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    THZ-92B氣浴振蕩器 上海博迅醫(yī)療生物儀器有限公司;St-16R高速離心機(jī) 美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;BagMixer400拍打勻漿器 法國(guó)Interscience公司;MS-600氣體ClO2檢測(cè)儀 深圳逸云天有限公司;Lc-388立式冷藏冰柜 寧波蘇凝制冷電器商行;YP10001B高精度電子天平 上海力辰科技有限公司;CR-20手持色差計(jì) 日本柯尼卡美能達(dá)公司;XTC-18質(zhì)構(gòu)分析儀 上海寶圣實(shí)業(yè)有限公司;HP-TD1糖度計(jì)成都科啟力利農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司;LRClO2比色計(jì)廣州環(huán)凱微生物有限公司;3730XL測(cè)序儀、2720 thermal cycler聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)儀美國(guó)Applied Biosystem公司;5810R板式離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司;JY04S-3C凝膠成像裝置、JY300C Power Supply電泳儀 濟(jì)南君意生物科技有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 優(yōu)勢(shì)菌分離與鑒定

    取葡萄,用無(wú)菌手術(shù)刀切取葡萄表皮約10 g,放入無(wú)菌采樣袋,加入20 mL 1% PW,放入拍打器(約100 r/min)均質(zhì)2 min,使葡萄表面微生物盡可能被洗下,將葡萄均質(zhì)液用1% PW進(jìn)行10 倍體積梯度遞增稀釋,參照GB 4789.2—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》中的平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定葡萄表面菌落總數(shù),并取適宜濃度的稀釋液100 μL涂布于TSA平板,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24~48 h。依據(jù)所觀察的菌落形態(tài)、大小及顏色不同挑取典型的菌落進(jìn)行劃線培養(yǎng),直至得到單一菌落并于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

    取適量菌體溶于Takara裂解緩沖液中變性后離心取上清液作為模板(模板DNA),反應(yīng)條件為80 ℃、15 min。以通用引物27F和1492R作為擴(kuò)增引物,進(jìn)行正反測(cè)序,擴(kuò)增引物序列分別為27F:5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'、1492R:5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'[10]。經(jīng)PCR儀擴(kuò)增,PCR反應(yīng)體系和條件如表1所示。取2 μL擴(kuò)增液進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳觀察擴(kuò)增產(chǎn)物后,送至北京奧維森基因技術(shù)有限公司進(jìn)行高通量測(cè)序,將測(cè)序結(jié)果用BLAST程序與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中已知菌株的16S rDNA基因序列進(jìn)行相似性比對(duì)分析,并用ClustalX1.83和MEGA4軟件的Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

    表1 PCR擴(kuò)增體系組成及條件Table 1 Composition and conditions of polymerase chain reaction system

    1.3.2 誘導(dǎo)與菌懸液制備

    每一株優(yōu)勢(shì)菌依次接種并轉(zhuǎn)移到含有25、50、75 mg/L和100 mg/L Rif的BHI后,置于氣浴振蕩器,37 ℃振蕩培養(yǎng)(約100 r/min)過(guò)夜。每株優(yōu)勢(shì)菌成功誘導(dǎo)并耐藥穩(wěn)定后,將細(xì)菌培養(yǎng)物劃線于含有100 mg/L Rif的TSA平板上。兩株耐藥菌定期在TSA/Rif平板上劃線并保存于4 ℃生化培養(yǎng)箱。將每株耐藥菌使用無(wú)菌接種環(huán)挑取單菌落轉(zhuǎn)移至10 mL含有100 mg/L Rif的BHI中,于37 ℃振蕩培養(yǎng)18~24 h,使其恢復(fù)生長(zhǎng)。之后,菌懸液4 ℃、5 000 r/min離心10 min,棄去上清液。用10 mL 1% PW重新懸浮菌細(xì)胞,再次重復(fù)上述離心過(guò)程,棄去上清液。重復(fù)洗菌步驟后,用5 mL 1% PW重新懸浮菌細(xì)胞,混勻備用。

    1.3.3 接種

    使用移液槍轉(zhuǎn)移100 μL菌懸液點(diǎn)接于葡萄樣本(40 g)表面,在超凈工作臺(tái)干燥1 h,使菌細(xì)胞附著于樣本表面。葡萄樣本表面接種水平為6.0~7.7(lg(CFU/g))。

    1.3.4 氣體ClO2處理

    如圖1所示,將NaClO2固體溶于去離子水配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)28%的NaClO2溶液,將其滴加于吸收墊,吸收墊內(nèi)部為吸收棉,外部為黏性表面。將吸收墊粘貼至帶有頂蓋的9 L圓柱形便攜式塑料桶(處理室)內(nèi)部,放入一個(gè)網(wǎng)格支架,葡萄樣本放置在支架上,投入過(guò)量干冰(釋放CO2),頂蓋立即密封。氣體ClO2生成包括兩步反應(yīng),如式(1)、(2)所示。

    圖1 氣體ClO2處理方法示意圖Fig.1 Schematic diagram of gaseous ClO2 treatment method

    處理期間,ClO2濃度由ClO2濃度檢測(cè)儀測(cè)定,單位為μL/L。由于ClO2濃度不穩(wěn)定,引入ClO2累積濃度[13]以評(píng)估氣體ClO2的殺菌效果,ClO2累積濃度由ClO2濃度對(duì)時(shí)間的積分計(jì)算所得,如公式(3)所示。處理溫度(25 ℃)和相對(duì)濕度(60%~70%)由溫濕度調(diào)節(jié)系統(tǒng)控制并由溫濕度監(jiān)測(cè)儀監(jiān)測(cè)。

    式中:c為測(cè)定的ClO2濃度/(μL/L);t為處理時(shí)間/h。

    1.3.5 殺菌實(shí)驗(yàn)

    按1.3.4節(jié)所述氣體ClO2處理方法殺滅接種細(xì)菌的葡萄果實(shí)。施加于吸收墊的NaClO2用量分別為112、224、336、448、560 mg和672 mg。干冰投入量為5 g。ClO2氣體處理葡萄樣本3 h后,從桶內(nèi)撤出。使用無(wú)菌手術(shù)刀切割樣本接種表面(約4 g),放入無(wú)菌采樣袋,加入20 mL 1% PW,經(jīng)勻漿器(約100 r/min)拍打2 min,利用已滅菌1% PW進(jìn)行適宜梯度稀釋后涂布于TSA/Rif平板,每個(gè)平板2 個(gè)平行。將涂布好的平板37 ℃培養(yǎng)24~48 h后計(jì)數(shù)。每次實(shí)驗(yàn)以氣體ClO2處理前后葡萄果實(shí)樣本菌落總數(shù)對(duì)數(shù)值減少量(lg(CFU/g))表征殺菌效果。

    1.3.6 貯藏實(shí)驗(yàn)

    選取NaClO2用量112 mg與672 mg處理組分別為氣體ClO2低累積濃度處理組與高累積濃度處理組,記為S1與S2。無(wú)處理為對(duì)照組,記為S0。葡萄(共1.2 kg,每組約100 g)經(jīng)ClO2氣體處理3 h后,將S0、S1及S2裝入1 L食品級(jí)塑料保鮮盒,貯藏于4 ℃冷藏冰柜30 d。每5 d測(cè)定每組葡萄樣本的色澤參數(shù)、果實(shí)硬度、質(zhì)量損失率以及可溶性固形物(total soluble solid,TSS)含量。

    色澤參數(shù)(L*、a*和b*)參照郝燕等[14]的方法,利用手持色差計(jì)測(cè)定。其中L*值表示亮度,a*、b*值分別表示紅綠度和黃藍(lán)度,a*值大于0為紅色,a*值小于0為綠色;b*值大于0為黃色,b*值小于0為藍(lán)色,其絕對(duì)值越大,顏色越深。

    果實(shí)硬度參照Z(yǔ)hou Siyuan等[15]的方法,由質(zhì)構(gòu)分析儀測(cè)定,用直徑為2 mm的探針以1 mm/s的速率穿透葡萄樣品頂部中心10 mm后得到的數(shù)值表示,單位為g。

    質(zhì)量損失率參照張昭等[16]的方法。采用直接稱量法,由高精度電子天平稱量。按式(4)計(jì)算質(zhì)量損失率。

    TSS含量測(cè)定參照顏廷才等[17]的方法。將葡萄榨汁,搖勻,取部分汁液利用HP-TD1糖度計(jì)測(cè)定TSS含量,單位為°Brix。

    ClO2殘留量測(cè)定參照秦惠等[18]的方法。葡萄樣本經(jīng)氣體ClO2處理3 h后,放入一個(gè)無(wú)菌采樣袋,添加200 mL去離子水并反復(fù)用手揉捏振蕩5 min。從采樣袋取10 mL溶液,經(jīng)ClO2比色計(jì)測(cè)定ClO2殘留量,單位為mg/L,經(jīng)公式(5)計(jì)算將單位轉(zhuǎn)換為mg/kg。30 d貯藏期內(nèi),每5 d測(cè)定每組葡萄樣本的ClO2殘留量。

    式中:ρ為測(cè)定的ClO2殘留質(zhì)量濃度/(mg/L);V為去離子水稀釋體積/L;m為葡萄樣本質(zhì)量/g。

    1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

    所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,利用SPSS軟件中Duncan法進(jìn)行顯著性分析,P<0.05表示差異顯著;采用Excel 2010軟件作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 優(yōu)勢(shì)菌分析結(jié)果

    成功提取2 株優(yōu)勢(shì)菌基因組DNA,將其作為模板,以27F和1492R為引物,進(jìn)行16S rDNA PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增后得到的產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分析,如圖2所示,2 株優(yōu)勢(shì)菌在1 500 bp處出現(xiàn)單一清晰的熒光條帶且無(wú)拖尾現(xiàn)象,滿足實(shí)驗(yàn)需求,通過(guò)對(duì)目的片段進(jìn)行瓊脂糖凝膠回收,以備后續(xù)測(cè)序使用。將所測(cè)定的優(yōu)勢(shì)菌基因序列與GenBank內(nèi)已知菌株的相應(yīng)序列進(jìn)行比對(duì),選取BLAST結(jié)果中得分較高菌的16S rDNA序列,使用MEGA5.2.1軟件根據(jù)Neighbor-Joining進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹分析,結(jié)果如圖3所示。根據(jù)系統(tǒng)發(fā)育樹分析,分離所得到的菌株1與大腸桿菌科的2 個(gè)菌屬埃希氏菌(Escherichia)和志賀氏菌(Shigella)的遺傳距離較近,且與菌株E.coli相似度達(dá)到99.3%。張俊杰等[19]從夏黑葡萄表面也分離出埃希氏菌屬-志賀氏菌屬。本研究分離所得到的菌株2與考克氏菌(Kocuria)的遺傳距離較近,且與菌株Kocuria indica相似度達(dá)到99.3%。張家晨[20]也從葡萄表面分離出考克氏菌。因此,可以確定從葡萄表面分離得到的2 株優(yōu)勢(shì)菌為大腸桿菌和考克氏菌。后續(xù)將分離得到的優(yōu)勢(shì)菌接種到葡萄表面,以測(cè)定所應(yīng)用技術(shù)的殺菌效力。

    圖2 葡萄優(yōu)勢(shì)菌16S rDNA基因序列PCR擴(kuò)增電泳檢測(cè)圖譜Fig.2 Electrophoresis of PCR-amplified 16S rRNA sequence from dominant bacteria in grapes

    圖3 以16S rDNA基因序列為分子標(biāo)記的2 株優(yōu)勢(shì)菌系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹Fig.3 Phylogenetic tree of two dominant bacteria based on their 16S rDNA sequences

    2.2 氣體ClO2的生成

    圖4A為112~672 mg NaClO2與5 g干冰反應(yīng)3 h所測(cè)得的ClO2濃度;圖4B為所計(jì)算的ClO2累積濃度。由圖4可知,隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),每個(gè)NaClO2用量梯度所產(chǎn)生ClO2濃度和累積濃度逐步上升。反應(yīng)3 h時(shí),112、224、336、448、560、672 mg NaClO2與5 g干冰反應(yīng)所測(cè)得的ClO2濃度分別為86、134、172、223、300、389 μL/L,所計(jì)算的ClO2累積濃度分別為131、228、266、378、481、599 μL/(L·h)。顯然,隨著NaClO2用量增加,ClO2濃度與累積濃度呈現(xiàn)線性上升趨勢(shì)(圖5)。之前的研究表明,氣體ClO2處理依賴于大型發(fā)生器或處理器,無(wú)法靈活處理且操作難度較大[21]。相較之下,本研究所用方法適用于各種便攜式處理容器,無(wú)需大型發(fā)生器且干冰與NaClO2易獲取,可隨時(shí)隨地制備氣體ClO2,從而提升了氣體ClO2處理的靈活性。本研究所開發(fā)的氣體ClO2處理方法具有安全、靈活便捷、操作簡(jiǎn)單及成本較低的特點(diǎn)。然而,由于氣體ClO2濃度難以控制且具有漂白性,高濃度氣體ClO2將導(dǎo)致樣本漂白從而影響感官品質(zhì)。為此,通過(guò)投入過(guò)量干冰以促進(jìn)反應(yīng)式(1)產(chǎn)生H+后,應(yīng)控制施加的NaClO2用量以控制ClO2濃度與累積濃度防止樣本漂白。

    圖4 NaClO2用量對(duì)ClO2濃度(A)與累積濃度(B)的影響Fig.4 Effect of NaClO2 dosage on concentration (A) and cumulative concentration (B) of ClO2

    圖5 ClO2濃度和累積濃度與NaClO2用量的關(guān)系Fig.5 Relationship between ClO2 concentration and accumulative concentration with the amount of NaClO2

    2.3 氣體ClO2的殺菌效果

    由圖6可知,隨著NaClO2用量梯度上升(112~672 mg),ClO2累積濃度增加(131~599 μL/(L·h)),兩株優(yōu)勢(shì)菌對(duì)數(shù)值減少量總體呈現(xiàn)顯著上升趨勢(shì)(P<0.05)。當(dāng)氣體ClO2累積濃度從131 μL/(L·h)提升至599 μL/(L·h)時(shí),葡萄表皮上Escherichia菌落總數(shù)對(duì)數(shù)值減少量從1.6(lg(CFU/g))提升至3.5(lg(CFU/g)),Kocuria菌落總數(shù)對(duì)數(shù)值減少量從1.0(lg(CFU/g))提升至4.5(lg(CFU/g))。同時(shí),當(dāng)ClO2累積濃度從378 μL/(L·h)提升至599 μL/(L·h)時(shí),Kocuria菌落總數(shù)對(duì)數(shù)減少量明顯高于Escherichia,表明Kocuria更易受到ClO2氣體的影響而失活。Chai等[13]利用NaClO2與HCl或FeCl3反應(yīng)產(chǎn)生的氣體ClO2處理接種于番茄的沙門氏菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌及大腸桿菌。結(jié)果表明,大腸桿菌比沙門氏菌與單核細(xì)胞增生李斯特菌更易受到ClO2氣體的影響而失活,這可能歸因于接種細(xì)菌的不同生理狀態(tài)、活性以及環(huán)境適應(yīng)性等。Zhou Siyuan等[22]利用番茄呼吸釋放的CO2和H2O與NaClO2反應(yīng)產(chǎn)生ClO2氣體處理接種沙門氏菌的番茄果實(shí)24 h,實(shí)現(xiàn)了每果約減少5(lg(CFU))沙門氏菌,相較之下,本研究所應(yīng)用的氣體ClO2處理方法在較短時(shí)間(3 h)內(nèi)即可有效滅活果實(shí)表面的細(xì)菌,更適合處理果蔬。研究表明,氣體ClO2具有極強(qiáng)的氧化性與穿透性,可以穿透微生物細(xì)胞膜,破壞細(xì)胞膜并氧化氨基酸,使微生物失活[23]。因此,利用該氣體ClO2處理方法,設(shè)置適宜的處理時(shí)間和濃度,可有效滅活葡萄表面微生物,減少微生物負(fù)荷,防止果實(shí)腐敗。

    圖6 氣體ClO2對(duì)葡萄優(yōu)勢(shì)菌的殺菌效果Fig.6 Effect of ClO2 gas on inactivation of dominant bacteria from grapes

    2.4 氣體ClO2對(duì)葡萄品質(zhì)的影響

    果蔬色澤是最直接的感官評(píng)價(jià)指標(biāo)。由表2可知,氣體ClO2處理葡萄3 h后,S0、S1及S2組a*、b*與L*值并無(wú)顯著性差異(P>0.05),但S1與S2組L*值較S0組略有增加,這可能歸因于ClO2具有漂白性??傮w而言,氣體ClO2對(duì)葡萄色澤并無(wú)影響或影響較小。Mahmoud等[24]應(yīng)用一種氣體ClO2發(fā)生器制備0.5~5.0 mg/L氣體ClO2以處理生菜,導(dǎo)致生菜L*值隨ClO2濃度增加而增加,這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。此外,隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),葡萄果實(shí)a*與L*值呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì),這可能是由于葡萄褐變所致[25]。

    表2 氣體ClO2處理下葡萄的色澤參數(shù)隨貯藏時(shí)間的變化Table 2 Changes in color parameters of grapes treated with ClO2 gas during storage

    在葡萄貯藏過(guò)程中,由于果實(shí)細(xì)胞壁降解與結(jié)構(gòu)變化,導(dǎo)致果實(shí)硬度下降,出現(xiàn)軟化現(xiàn)象,降低果實(shí)貯藏品質(zhì)。由圖7A可知,隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),葡萄硬度逐漸降低,S2組降低最為緩慢,直至30 d貯藏結(jié)束,S0、S1及S2組果實(shí)硬度分別為141、191 g及298 g。貯藏至15 d后,S2組果實(shí)硬度明顯高于S0與S1組。池致超[26]以‘巨峰’葡萄為實(shí)驗(yàn)材料,評(píng)估氣體ClO2的保鮮效果,其中高濃度(30 mg/m3)氣體ClO2作用葡萄30 min抑制了葡萄硬度降低,本研究結(jié)果與之相似。ClO2氣體可能通過(guò)抑制淀粉水解酶和果膠降解酶活性抑制細(xì)胞壁降解與結(jié)構(gòu)變化,從而抑制果實(shí)軟化[27]。此外,低累積濃度ClO2處理葡萄3 h對(duì)硬度影響不顯著,表明抑制果實(shí)軟化可能取決于氣體ClO2濃度與作用時(shí)間。

    由于葡萄貯藏時(shí)呼吸作用和蒸騰作用使水分喪失,可能導(dǎo)致果實(shí)表皮皺縮,影響果實(shí)感官品質(zhì)[28]。由圖7B可知,隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),葡萄質(zhì)量損失率逐漸上升,但S2組上升最為緩慢,直至30 d貯藏結(jié)束,S0、S1及S2組果實(shí)質(zhì)量損失率分別為5.15%、5.05%及3.96%。當(dāng)貯藏25 d后,S2組果實(shí)質(zhì)量損失率明顯低于S0與S1組。研究表明,氣體ClO2可抑制乙烯生成,促進(jìn)氣孔關(guān)閉,降低呼吸作用和蒸騰作用,防止水分的喪失,從而保持果實(shí)質(zhì)量[29]。顯然,本研究中經(jīng)高濃度氣體ClO2處理葡萄,其質(zhì)量損失率明顯降低,品質(zhì)趨于良好。

    TSS含量是評(píng)價(jià)果蔬新鮮度及風(fēng)味的重要指標(biāo)。由圖7C可知,貯藏期間,葡萄TSS含量呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)。貯藏至第5天,S0、S1及S2組TSS含量分別為16.6、15.7 °Brix及15.8 °Brix,比貯藏前略有增加,這可能是由于果實(shí)采收較早,在貯藏過(guò)程中其內(nèi)部淀粉等有機(jī)物質(zhì)仍可轉(zhuǎn)化為還原糖等可溶性物質(zhì),而后由于自身呼吸作用使果實(shí)內(nèi)部可溶性物質(zhì)消耗。此外,第5天時(shí)S0組TSS含量明顯高于S1與S2組,表明氣體ClO2可能抑制葡萄果實(shí)內(nèi)部有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)化。貯藏20 d后,S2組TSS含量明顯高于S0與S1組,這可能是由于氣體ClO2抑制果實(shí)乙烯釋放和呼吸作用,從而抑制可溶性物質(zhì)的消耗。晉日亞[30]使用實(shí)驗(yàn)室裝置產(chǎn)生高純度ClO2氣體處理葡萄,結(jié)果表明,大于30 mL/m3ClO2氣體處理葡萄后,貯藏期間TSS含量得以有效保持,本研究結(jié)果與之相似。此外,許萍等[31]開發(fā)一款作用于葡萄的固體ClO2保鮮劑,其能顯著抑制TSS含量的降低,有助于保持葡萄品質(zhì)。

    圖7 氣體ClO2處理葡萄貯藏期內(nèi)品質(zhì)的影響Fig.7 Effect of ClO2 gas on the quality of grapes during storage

    2.5 ClO2殘留量

    ClO2氣體處理水果后其表面易產(chǎn)生ClO2殘留,而高濃度ClO2殘留會(huì)危害人體健康[32]。由圖8可知,氣體ClO2處理葡萄3 h后,S1和S2組初始?xì)埩舴謩e為0.19 mg/kg和0.31 mg/kg,隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng)殘留量逐漸降低。Trinetta等[33]應(yīng)用0.1~0.5 mg/L ClO2氣體處理不同水果,并評(píng)估不同水果表面ClO2殘留情況。結(jié)果表明,不同水果表面ClO2殘留量(番茄(0.09 mg/kg)、柑橘(0.08 mg/kg)及蘋果(0.28 mg/kg))普遍低于0.5 mg/kg,本研究結(jié)果與其相似。參照GB 5009.244—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中二氧化氯的測(cè)定》要求ClO2處理水果和蔬菜,其表面殘留量不得高于2 mg/kg,顯然本研究結(jié)果遠(yuǎn)低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,進(jìn)一步提升了該方法商品化應(yīng)用潛質(zhì)。在30 d貯藏期內(nèi),S2組殘留量明顯高于S1組,表明ClO2累積濃度增加,果實(shí)表面殘留也將增加。此外,ClO2殘留隨貯藏時(shí)間延長(zhǎng)略有降低,這也與Trinetta等[33]的研究結(jié)果相似。

    圖8 葡萄貯藏期ClO2殘留量Fig.8 Residual ClO2 on grapes during storage

    3 結(jié) 論

    本研究證明利用NaClO2與干冰間接反應(yīng)制備ClO2氣體的可行性,所開發(fā)的氣體ClO2處理方法對(duì)葡萄具有良好的殺菌效果且有助于提升葡萄品質(zhì)。當(dāng)ClO2累積濃度從131 μL/(L·h)提升至599 μL/(L·h),Escherichia菌落總數(shù)對(duì)數(shù)值減少量從1.6(lg(CFU/g))升至3.5(lg(CFU/g)),Kocuria菌落總數(shù)對(duì)數(shù)值減少量從1.0(lg(CFU/g))升至4.5(lg(CFU/g))。此外,經(jīng)氣體ClO2處理葡萄后,其色澤并無(wú)明顯變化,貯藏期內(nèi)果實(shí)軟化、質(zhì)量損失及TSS含量損失得以有效抑制,且表面ClO2殘留水平較低。未來(lái)的研究可進(jìn)一步調(diào)整處理溫度,在冷藏期間緩慢釋放ClO2氣體處理果蔬或者擴(kuò)大處理容器體積和反應(yīng)物用量,批量處理果蔬。此外,可進(jìn)一步開展感官評(píng)定,并增加其他品質(zhì)指標(biāo)如可滴定酸、抗壞血酸含量等的測(cè)定,以提升該處理方法的應(yīng)用性。

    猜你喜歡
    干冰果蔬菌落
    干冰滅火
    “干冰”不是冰,使用需當(dāng)心
    不同emm基因型化膿性鏈球菌的菌落形態(tài)
    奇思妙想的果蔬們
    童話世界(2019年26期)2019-09-24 10:57:56
    清洗果蔬農(nóng)殘 你做對(duì)了嗎
    啟蒙(3-7歲)(2018年8期)2018-08-13 09:31:14
    這些果蔬能保護(hù)呼吸道
    如果將干冰溶化,能在里面游泳嗎?
    果蔬大作戰(zhàn)
    童話世界(2016年8期)2016-06-02 09:21:05
    食品微生物檢驗(yàn)中菌落總數(shù)測(cè)定的注意事項(xiàng)
    SPC在壓縮干糧菌落總數(shù)監(jiān)測(cè)過(guò)程中的應(yīng)用
    食品工程(2015年3期)2015-12-07 10:20:53
    日本免费在线观看一区| av在线观看视频网站免费| 亚洲美女视频黄频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 97人妻天天添夜夜摸| 欧美成人精品欧美一级黄| 热99久久久久精品小说推荐| 老鸭窝网址在线观看| 久久久久久伊人网av| 高清不卡的av网站| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品国产三级专区第一集| 久久久国产一区二区| 一本久久精品| 国产乱人偷精品视频| 国产成人精品福利久久| 国产麻豆69| 免费观看性生交大片5| 亚洲三区欧美一区| 国产精品二区激情视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 国产成人免费观看mmmm| 美国免费a级毛片| 自线自在国产av| 在线天堂中文资源库| 欧美精品一区二区免费开放| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 天堂俺去俺来也www色官网| 两个人免费观看高清视频| 免费观看在线日韩| xxx大片免费视频| 亚洲欧美清纯卡通| 免费黄频网站在线观看国产| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲美女视频黄频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产男女超爽视频在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 一本久久精品| 日韩视频在线欧美| 国产成人精品无人区| 国产精品人妻久久久影院| 又黄又粗又硬又大视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 99国产综合亚洲精品| 少妇人妻久久综合中文| 久久精品国产综合久久久| 国产深夜福利视频在线观看| av.在线天堂| 女人精品久久久久毛片| 成年人午夜在线观看视频| 日韩视频在线欧美| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费看av在线观看网站| 久久久久久久久久久免费av| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 咕卡用的链子| 日韩电影二区| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 在线免费观看不下载黄p国产| 久热这里只有精品99| 伊人亚洲综合成人网| 欧美精品国产亚洲| 久久久久网色| av视频免费观看在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 国产高清国产精品国产三级| 午夜精品国产一区二区电影| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 美女国产视频在线观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产淫语在线视频| 国产精品成人在线| 人人澡人人妻人| 国产精品久久久久久精品古装| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲天堂av无毛| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产成人欧美| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 日日撸夜夜添| 国产成人aa在线观看| 国产精品国产av在线观看| 国产黄色免费在线视频| 大片电影免费在线观看免费| 激情五月婷婷亚洲| 中文字幕人妻丝袜制服| 精品福利永久在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产精品欧美亚洲77777| 校园人妻丝袜中文字幕| 观看美女的网站| 久久久久精品性色| 18禁观看日本| 日日啪夜夜爽| 午夜福利,免费看| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲精品自拍成人| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久久久久伊人网av| 我的亚洲天堂| 97精品久久久久久久久久精品| 自线自在国产av| 免费黄频网站在线观看国产| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日本-黄色视频高清免费观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 97在线视频观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 韩国精品一区二区三区| 国产午夜精品一二区理论片| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费av中文字幕在线| 日日摸夜夜添夜夜爱| 一区二区三区乱码不卡18| 一本久久精品| 国产亚洲一区二区精品| 久久精品国产亚洲av天美| 美女午夜性视频免费| 亚洲精品一二三| 亚洲中文av在线| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 搡老乐熟女国产| 毛片一级片免费看久久久久| 免费日韩欧美在线观看| 日韩一区二区三区影片| 欧美av亚洲av综合av国产av | 久久av网站| 国产黄色免费在线视频| 久久精品国产综合久久久| 国产日韩欧美在线精品| 两性夫妻黄色片| 日日摸夜夜添夜夜爱| 老女人水多毛片| 人成视频在线观看免费观看| 免费观看性生交大片5| 亚洲少妇的诱惑av| 超色免费av| 黄色毛片三级朝国网站| 午夜免费观看性视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 超碰成人久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲综合色惰| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲第一青青草原| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美日韩av久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产 精品1| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲精品美女久久av网站| 少妇人妻久久综合中文| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久久久久久久人人人人人人| 精品第一国产精品| 国产xxxxx性猛交| 久久精品亚洲av国产电影网| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 最新的欧美精品一区二区| 91精品国产国语对白视频| 国产又爽黄色视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲精品一二三| 一区二区av电影网| 一区二区三区激情视频| 制服丝袜香蕉在线| 成人漫画全彩无遮挡| 乱人伦中国视频| 男的添女的下面高潮视频| 天美传媒精品一区二区| 一个人免费看片子| 国产精品偷伦视频观看了| 精品国产国语对白av| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产高清不卡午夜福利| 丰满乱子伦码专区| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产精品成人在线| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产成人精品在线电影| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲av中文av极速乱| 色播在线永久视频| av视频免费观看在线观看| 人人妻人人澡人人看| 亚洲一区中文字幕在线| 免费高清在线观看日韩| 日本爱情动作片www.在线观看| 一个人免费看片子| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 亚洲国产色片| 夫妻性生交免费视频一级片| 精品少妇久久久久久888优播| 在线观看一区二区三区激情| 最新中文字幕久久久久| 国产精品一二三区在线看| 国产精品av久久久久免费| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 亚洲欧美日韩另类电影网站| 制服丝袜香蕉在线| 99九九在线精品视频| 蜜桃在线观看..| 亚洲美女视频黄频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久免费观看电影| 超碰成人久久| 老司机影院毛片| 欧美精品av麻豆av| 美女午夜性视频免费| 欧美bdsm另类| 超碰97精品在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 激情五月婷婷亚洲| 美女午夜性视频免费| 看非洲黑人一级黄片| 国产 精品1| 国产成人精品在线电影| 久久久久久久精品精品| 1024香蕉在线观看| 亚洲欧洲日产国产| 一级爰片在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 国产亚洲一区二区精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 午夜91福利影院| 亚洲国产精品999| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久精品国产a三级三级三级| 国产极品天堂在线| 国产成人aa在线观看| 亚洲成人av在线免费| 搡老乐熟女国产| 波多野结衣av一区二区av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 热99国产精品久久久久久7| 看免费成人av毛片| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲美女视频黄频| 三上悠亚av全集在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲国产日韩一区二区| 成人漫画全彩无遮挡| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产高清国产精品国产三级| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲精品视频女| 日韩免费高清中文字幕av| 捣出白浆h1v1| 国产高清国产精品国产三级| 久久久精品免费免费高清| 亚洲国产av影院在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 高清黄色对白视频在线免费看| 91精品国产国语对白视频| 18+在线观看网站| 日韩三级伦理在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲欧洲国产日韩| 欧美日韩亚洲高清精品| 最新的欧美精品一区二区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 在线天堂最新版资源| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲久久久国产精品| 亚洲精品国产一区二区精华液| 老熟女久久久| 少妇人妻 视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 曰老女人黄片| 人成视频在线观看免费观看| 久久久久网色| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产成人免费观看mmmm| 免费黄网站久久成人精品| 在线看a的网站| 久久久精品94久久精品| 青春草视频在线免费观看| 亚洲av男天堂| 国产乱人偷精品视频| 日韩中字成人| 欧美成人精品欧美一级黄| 超色免费av| 国产精品99久久99久久久不卡 | 欧美精品国产亚洲| 国产成人精品一,二区| 久久这里只有精品19| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精品,欧美精品| 日韩 亚洲 欧美在线| 制服丝袜香蕉在线| 热99国产精品久久久久久7| 大陆偷拍与自拍| 日日爽夜夜爽网站| 美女高潮到喷水免费观看| 国产综合精华液| 考比视频在线观看| 久久久精品94久久精品| 热99久久久久精品小说推荐| 成人影院久久| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日韩电影二区| 午夜久久久在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av | 国产在视频线精品| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 老司机影院毛片| 在线观看免费高清a一片| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 十八禁高潮呻吟视频| 又大又黄又爽视频免费| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 性少妇av在线| 伊人久久国产一区二区| 国产成人免费观看mmmm| 少妇精品久久久久久久| 日韩中文字幕视频在线看片| 男人添女人高潮全过程视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 成年女人在线观看亚洲视频| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲人成网站在线观看播放| 伦理电影免费视频| 国产伦理片在线播放av一区| 天堂8中文在线网| 亚洲欧美成人精品一区二区| 9色porny在线观看| 欧美+日韩+精品| 成人漫画全彩无遮挡| 1024香蕉在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产人伦9x9x在线观看 | av国产精品久久久久影院| 伦精品一区二区三区| 搡老乐熟女国产| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 久久久久久久久免费视频了| 成年人免费黄色播放视频| 国产成人av激情在线播放| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 亚洲国产精品国产精品| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 99热网站在线观看| 少妇精品久久久久久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 久久久久久久国产电影| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 丁香六月天网| 大码成人一级视频| h视频一区二区三区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产淫语在线视频| www.熟女人妻精品国产| 亚洲国产精品999| 国产成人av激情在线播放| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 看免费av毛片| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲色图综合在线观看| 久久久久久久久久人人人人人人| av不卡在线播放| 满18在线观看网站| 97精品久久久久久久久久精品| freevideosex欧美| 婷婷色av中文字幕| 成人国产麻豆网| 国产乱人偷精品视频| 色吧在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 搡老乐熟女国产| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 中文字幕av电影在线播放| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久久久久久精品精品| 90打野战视频偷拍视频| 我要看黄色一级片免费的| 久久99一区二区三区| 9热在线视频观看99| 一级,二级,三级黄色视频| 人妻系列 视频| 国产精品偷伦视频观看了| 丝袜在线中文字幕| 一区二区av电影网| 亚洲图色成人| 一区在线观看完整版| 三级国产精品片| av网站免费在线观看视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 黄片小视频在线播放| 中文字幕色久视频| 久久久久久人人人人人| 黄频高清免费视频| 热re99久久国产66热| 黄片小视频在线播放| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久久久久人人人人人| 欧美日韩成人在线一区二区| 久久久久精品性色| 欧美激情高清一区二区三区 | 咕卡用的链子| 高清视频免费观看一区二区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 自线自在国产av| 一级片免费观看大全| av电影中文网址| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产极品天堂在线| 久久久久网色| 国产熟女欧美一区二区| av国产精品久久久久影院| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 丝瓜视频免费看黄片| 波多野结衣一区麻豆| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲精品自拍成人| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲av日韩在线播放| 性色avwww在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久精品夜色国产| 男人操女人黄网站| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产激情久久老熟女| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲av成人一区二区三| av网站免费在线观看视频| 久久精品91蜜桃| 国产极品粉嫩免费观看在线| 日本欧美视频一区| 久久热在线av| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 18美女黄网站色大片免费观看| 老司机靠b影院| 操美女的视频在线观看| 黄色女人牲交| 啦啦啦在线免费观看视频4| 久久中文字幕人妻熟女| 一级a爱视频在线免费观看| 一区在线观看完整版| 免费看a级黄色片| 美女扒开内裤让男人捅视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 91在线观看av| 久久精品91无色码中文字幕| 久久久久久人人人人人| 91麻豆av在线| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲五月天丁香| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 成人国产一区最新在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产精品免费一区二区三区在线| 色综合婷婷激情| 男女下面插进去视频免费观看| 动漫黄色视频在线观看| 夜夜夜夜夜久久久久| 日韩欧美一区视频在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 国产成人精品无人区| 国产99白浆流出| aaaaa片日本免费| 两个人免费观看高清视频| 99精品在免费线老司机午夜| а√天堂www在线а√下载| 一区二区三区激情视频| 桃色一区二区三区在线观看| 1024香蕉在线观看| 久久精品国产综合久久久| a级毛片在线看网站| 三上悠亚av全集在线观看| 91麻豆av在线| 久久精品影院6| 超碰成人久久| tocl精华| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产av精品麻豆| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 免费在线观看黄色视频的| 99re在线观看精品视频| 一级毛片女人18水好多| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 久久婷婷成人综合色麻豆| 狂野欧美激情性xxxx| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产精品久久久久成人av| 亚洲人成电影观看| 国产野战对白在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久久久大精品| 一二三四在线观看免费中文在| 黄色片一级片一级黄色片| 搡老岳熟女国产| 国产精品久久电影中文字幕| 黄色女人牲交| 国产高清国产精品国产三级| a级片在线免费高清观看视频| 91大片在线观看| 在线免费观看的www视频| av国产精品久久久久影院| 国产免费现黄频在线看| 日韩国内少妇激情av| 1024视频免费在线观看| 黄色 视频免费看| 99久久国产精品久久久| 日本欧美视频一区| 久久影院123| 国产午夜精品久久久久久| 日韩免费高清中文字幕av| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 男女下面插进去视频免费观看| 久久国产精品影院| 青草久久国产| 18禁观看日本| 免费不卡黄色视频| 亚洲国产看品久久| 国产精品永久免费网站| 日本精品一区二区三区蜜桃| 午夜免费鲁丝| 五月开心婷婷网| 一本综合久久免费| 最近最新中文字幕大全免费视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 香蕉国产在线看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| av片东京热男人的天堂| 无遮挡黄片免费观看| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲视频免费观看视频| 成人18禁在线播放| 亚洲精品一二三| 两个人看的免费小视频| 男女床上黄色一级片免费看| 午夜免费鲁丝| 在线天堂中文资源库| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲久久久国产精品| xxxhd国产人妻xxx| 国产黄a三级三级三级人| 久久 成人 亚洲| videosex国产| 黑人操中国人逼视频| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲国产精品合色在线| 69av精品久久久久久| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲精品国产区一区二| 99久久国产精品久久久| 亚洲国产精品999在线| 多毛熟女@视频| av视频免费观看在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| videosex国产| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产av在哪里看| 欧美中文综合在线视频| www.999成人在线观看| 91在线观看av| 精品福利永久在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码| av在线播放免费不卡| 9色porny在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 成年版毛片免费区| 男人操女人黄网站| 国产亚洲精品第一综合不卡| 成人18禁在线播放| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日韩大码丰满熟妇| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品久久久久久成人av| 久久精品影院6|