蝦青素軟膠囊祛黃褐斑功能評價

杜偉春，余紹蕾*，鴨喬，王琳

1.云南綠A生物工程有限公司（昆明 650106）；2.云南綠A生物產(chǎn)業(yè)園有限公司（麗江 674202）

黃褐斑是臨床較為常見的皮膚病，患病率可高達(dá)50%，其形成因素包括紫外線照射、性激素水平變化、家族遺傳等[1]。黃褐斑的發(fā)病機(jī)理雖尚不完全明確，但近年的研究結(jié)果顯示氧化應(yīng)激是影響黃褐斑形成的因素之一[2]。蝦青素是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的抗氧化劑，可以清除體內(nèi)過多的氧化自由基，達(dá)到抗氧化應(yīng)激的作用[3]。我們采用雨生紅球藻中提取的蝦青素與膠原蛋白肽、透明質(zhì)酸鈉、維生素E等成分配伍組方，開發(fā)了蝦青素軟膠囊。研究對蝦青素軟膠囊祛黃褐斑功能進(jìn)行臨床觀察，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料對象與方法

1.1 試驗(yàn)對象的選擇

按自愿原則在填寫知情同意書后，選擇符合下述標(biāo)準(zhǔn)者作為受試者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：面部淡褐色至深褐色，界限清楚的斑片，通常對稱性分布，無炎性表現(xiàn)及鱗屑。無明顯自覺癥狀。主要發(fā)生在青春期后，女性多發(fā)。病情有一定的季節(jié)性，夏重冬輕。無明顯內(nèi)分泌疾病，并排除其他疾病引起的色素沉著。

排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡在18歲以下或65歲以上者，妊娠或哺乳期婦女，過敏體質(zhì)及對本保健食品過敏者；合并有心血管、腦血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病及內(nèi)分泌疾病，精神病患者；嗜酒者或吸煙者；短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對結(jié)果的判斷者；未按規(guī)定服用受試樣品，無法判定功效或資料不全影響療效或安全性判斷者。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計與分組

納入受試者102例，隨機(jī)分為試食組（51例）和對照組（51例）。經(jīng)檢驗(yàn)，兩組受試者年齡、性別、黃褐斑顏色積分、黃褐斑面積及戶外活動時間無顯著性差異（P＞0.05），資料均衡性較好。具有可比性。兩組一般資料比較見表1。

表1 兩組受試者一般情況比較（x±SD）

1.3 樣品和服用方法

蝦青素軟膠囊由云南綠A生物工程有限公司提供，批號20170403。包裝規(guī)格500 mg/粒×60粒/瓶。

試驗(yàn)組每日口服蝦青素軟膠囊2次，每次1粒。對照組采用服用等劑量的安慰劑。受試物服用時間為連續(xù)45 d。受試者在試驗(yàn)期間停止使用其他口服及外用有關(guān)養(yǎng)顏祛斑的用品。試驗(yàn)期間不改變原來的飲食習(xí)慣，正常飲食。

1.4 儀器與試劑

Modular P全自動生化分析儀（德國羅氏診斷公司）：TBA-120全自動生化分析儀[日本東芝（TOSHIBA）公司]；Clinitek Advantus尿分析儀（SIEMENS公司）；Sysmex-K21三分類血液分析儀（Sysmex公司）；Sysmex血細(xì)胞分析稀釋液（Sysmex公司）；Multistix10SG尿分析試劑帶（SIEMENS公司）：生化試劑盒由德國羅氏診斷有限公司生產(chǎn)，由德國羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司提供。

1.5 觀察指標(biāo)

1.5.1 一般情況

受試者在試食期間的精神、飲食、睡眠、大小便、血壓、心率等。

1.5.2 安全性指標(biāo)觀察

血、尿、便常規(guī)檢查：紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞計數(shù)、血小板計數(shù)、尿、便常規(guī)檢查；肝、腎功能檢查：谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血清總蛋白、白蛋白、尿素、肌酐、甘油三酯、總膽固醇、血糖；胸透、心電圖、腹部B超檢查。

1.5.3 功效性指標(biāo)觀察

1.5.3.1 顏面部黃褐斑面積大小檢測

用標(biāo)尺測量受試前后整個顏面部黃褐斑的面積（mm2）。

1.5.3.2 顏面部黃褐斑顏色深淺檢測

按照中國科學(xué)院地理研究所設(shè)計研制，測繪出版社1992年出版的《實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)色卡》（第一版）中的棕色（Y+M+BK，即黃+品紅+黑的疊色）色卡為黃褐斑深淺的判斷標(biāo)準(zhǔn)：I度（15，20，5），Ⅱ度（30，40，10），Ⅲ度（40，60，15）。

1.6 功效判定標(biāo)準(zhǔn)

對試食前后黃褐斑顏色積分和面積變化進(jìn)行統(tǒng)計，同時計算有效率。色卡I度、Ⅱ度和Ⅲ度分別計1，2和3分。有效：黃褐斑顏色下降I度，面積減少大于10%，且不產(chǎn)生新黃褐斑；無效：黃褐斑顏色及面積無明顯變化。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

使用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)為計量資料，可用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。凡自身對照資料可以采用配對t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)：若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t’檢驗(yàn)：但變異系數(shù)太大（如C.V.＞50%）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 試食前后兩組安全性指標(biāo)比較

受試者的精神、睡眠、飲食、大小便、血壓及心率均未見異常。試食前受試者胸透、心電圖、腹部B超檢查（肝、膽、脾、雙腎）檢查均未見異常。試食前后兩組血尿常規(guī)和便常規(guī)未見明顯異常。血尿便常規(guī)及生化指標(biāo)的檢驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 試食前后兩組受試者血壓心率血尿便常規(guī)及生化指標(biāo)的比較（x±SD）

接表2

2.2 不良反應(yīng)觀察

未見過敏及其他不良反應(yīng)。

2.3 試食前后兩組功效性指標(biāo)比較

2.3.1 試食前后兩組受試者黃褐斑顏色積分比較

試食組試食前后自身配對比較黃褐斑顏色積分差異有顯著性差異（P＜0.001），試食后低于試食前；對照組試食前后自身配對比較黃褐斑顏色積分差異無顯著性（P＞0.05）；試食前試食組與對照組相比較，黃褐斑顏色積分差異無顯著性（P＞0.05）；試食后試食組黃褐斑顏色積分低于對照組（P＜0.001）。結(jié)果見表3。

表3 試食前后兩組受試者黃褐斑顏色積分比較（x±SD）

2.3.2 試食前后兩組受試者黃褐斑面積比較

試食組試食前后自身配對比較黃褐斑面積差異有顯著性差異（P＜0.001），試食后低于試食前，面積減少百分率達(dá)11.15%，對照組試食前后自身配對比較黃褐斑面積差異無顯著性（P＞0.05）；試食前試食組與對照組相比較，黃褐斑面積差異無顯著性（P＞0.05）；試食后試食組黃褐斑面積明顯低于對照組（P＜0.01），且未產(chǎn)生新的黃褐斑。結(jié)果見表4。

表4 試食前后兩組受試者黃褐斑面積比較（x±SD）

2.3.3 試食后兩組受試者有效率比較

由表5可知，試食組總有效率為52.9%，對照組總有效率為0，兩組總有效率比較差異具有顯著性（P＜0.001）。

表5 試食后兩組受試者的有效率比較 單位：%

3 討論與結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)期間受試者精神、睡眠、飲食、大小便未見異常，體檢各項(xiàng)安全性指標(biāo)也未見異常，表明受試樣品對人體無不良影響。試驗(yàn)期45 d后，試食組自身比較黃褐斑面積明顯減少（P＜0.001），且平均減少百分率為11.15%，高于對照組（P＜0.001）；試食組黃褐斑面積明顯小于對照組（P＜0.01），且未產(chǎn)生新的黃褐斑。試食組自身比較黃褐斑顏色積分明顯下降（P＜0.001）；且黃褐斑顏色積分明顯低于對照組（P＜0.001）。試食組總有效27例，總有效率為52.9%。根據(jù)《保健食品功能學(xué)評價程序與檢驗(yàn)方法規(guī)范》（2003年版）中祛黃褐斑功能人體試食試驗(yàn)的判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示蝦青素軟膠囊具有祛黃褐斑的功能。

皮膚表皮基底層和棘層的黑素增加是黃褐斑形成的原因之一。黑素細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平又與其色素積累密切相關(guān)。細(xì)胞氧化、紫外線輻射在皮膚細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧，使黑素細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激發(fā)生，導(dǎo)致黑色素在局部皮膚大量積累形成黃褐斑[4-5]。蝦青素軟膠囊主要原料為雨生紅球藻中提取的蝦青素、透明質(zhì)酸鈉、維生素E。蝦青素是一類斷鏈抗氧化劑，能夠向自由基提供電子或與自由基進(jìn)行反應(yīng)，從而中斷自由基的氧化反應(yīng)過程，而起到抗氧化的作用。其中雨生紅球藻中的蝦青素以3S，3’S構(gòu)型為主，具有親水親脂的結(jié)構(gòu)特征，與動物體內(nèi)的蝦青素構(gòu)型基本一致，可跨膜被吸收[6-7]。透明質(zhì)酸鈉和維生素E可協(xié)同提升蝦青素抗氧化能力[8-9]。試驗(yàn)結(jié)果也顯示服用蝦青素軟膠囊可減少黃褐斑的顏色和面積，并減少黃褐斑的新增，其作用機(jī)理可能是通過抗氧化減少黑素細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激來實(shí)現(xiàn)的。詳細(xì)作用機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。