OSA改性多孔淀粉負(fù)載并改善柚皮苷生物利用度

王 璐，丁 喆，2，陸勝民，*，姜 昊，3，鄭美瑜，楊 穎

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 食品科學(xué)研究所，浙江 杭州 310021; 2.浙江工業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院， 浙江 杭州 310014; 3.奧克蘭大學(xué) 化學(xué)科學(xué)學(xué)院， 奧克蘭1010)

辛烯基琥珀酸酐淀粉酯(OSA改性淀粉)俗稱純膠，是淀粉和辛烯基琥珀酸酐(OSA)在一定條件下酯化得到的具有高生物可降解性和高食用安全性的乳化、增稠劑，也是目前唯一一種被允許應(yīng)用于食品中的烯基淀粉酯[1-2]。OSA改性淀粉結(jié)構(gòu)中淀粉的多糖長鏈、親水的羧酸基團和疏水的烯基長鏈賦予了OSA改性淀粉優(yōu)異的壁材特性和兩親性，加之其兼具成本低廉、綠色可再生、無污染等優(yōu)勢，使其逐漸成為科技工作者研究和關(guān)注的熱點[3-6]。多孔淀粉是一種無毒、經(jīng)濟的吸附劑，它已經(jīng)作為藥物載體、污染物吸附劑、包封囊材在食品、制藥和環(huán)境工業(yè)等領(lǐng)域中有所研究[7-8]，應(yīng)用多孔淀粉來包封和緩慢釋放食品成分，不僅可以提升被吸附分子的穩(wěn)定性，還可以有效地減緩其由于高溫、光照、氧氣等誘發(fā)的氧化進程[9-10]。將多孔淀粉進行OSA酯化，可同時賦予淀粉顆粒吸附性和兩親性，這將會進一步擴展淀粉顆粒的應(yīng)用范圍[11]。

柑橘黃酮是一類具有多生物活性的植物膳食黃酮[12]，其中代表性的柚皮苷(NA)以其出色的抗氧化、抗病毒、抗炎和抗腫瘤等功效，已在食品與醫(yī)藥領(lǐng)域多有研究。然而，柚皮苷的水溶性較差，口服生物利用度較低，極大地限制了其性能發(fā)揮和應(yīng)用[13]。因此，本研究擬借助OSA改性多孔淀粉的吸附性和兩親性，將其與NA的納米效應(yīng)相結(jié)合制備OSAPS-NA復(fù)合物，并對其制備工藝進行優(yōu)化，獲得負(fù)載率較高的復(fù)合物。通過代謝動力學(xué)模型對復(fù)合物的口服生物利用率進行研究，為OSA改性淀粉在載體領(lǐng)域的拓展提供了一定的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗儀器

分析天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；超聲波清洗機，上海美奈特實業(yè)有限公司；離心機，上海安亭科學(xué)儀器廠；高效液相色譜儀(LC-2030C 3D Plus型)，Shimadzu 公司(日本)；C18反相色譜柱(SunFire，5 μm， 250 mm×4.6 mm)，Waters 公司(美國)。

1.2 實驗材料

柚皮苷(純度≥95%)，西安小草生物科技有限公司；蠟質(zhì)玉米淀粉(50 U·g-1)，甘肅昆侖生物有限公司；辛烯基琥珀酸酐(純度≥99.5%)，α-淀粉酶，NA標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%)和新橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%)均購于上海源葉生物科技有限公司；甲酸(色譜純)、乙腈(色譜純)購于上海阿拉丁試劑有限公司；去蒸餾水為實驗室自制。其余所用試劑均為分析級，購于阿拉丁生物科技有限公司。

1.3 OSA改性多孔淀粉的制備

OSA改性多孔淀粉(OSAPS)的制備過程參考李海燕等[14]的制備方法。將蠟質(zhì)玉米淀粉以30 g·mL-1的質(zhì)量濃度懸浮于pH值4.5的磷酸鹽和醋酸鹽混合緩沖液中，于55 ℃水浴鍋中攪拌(100 r·min-1)20 min，然后向懸浮液中加入的復(fù)合酶(α-淀粉酶與糖苷酶的質(zhì)量比為6：1)，復(fù)合酶質(zhì)量濃度為20 mg·g-1(相當(dāng)于2.0%蠟質(zhì)玉米淀粉質(zhì)量)；將樣品在55 ℃水浴中攪拌24 h，然后用1 mol·L-1NaOH將混合液pH值調(diào)節(jié)為10.0，以終止酶解。將懸浮液在4 ℃ 7 000×g離心15 min，用蒸餾水重復(fù)洗滌3次。最后，將收集的沉淀物置于50 ℃恒溫箱中干燥8 h，研磨沉淀物后過90目篩，即得多孔淀粉。

將6.0 g多孔淀粉均勻地分散在30 mL去離子水中，用3% NaOH將pH值調(diào)至8.5，在1 h內(nèi)將600 μL 30 mg·mL-1的辛烯基琥珀酸酐-無水乙醇溶液緩慢滴加至淀粉漿中，在35 ℃反應(yīng)1 h后，再用3% HCl將pH值調(diào)至6.5，離心混合物并用去離子水洗沉淀3次，然后用90%乙醇洗滌3次，置于45 ℃恒溫箱中干燥24 h，將干燥的沉淀物研磨后過90目篩，即得到OSAPS粉末(酯化度約為0.012 6)。

1.4 OSAPS-NA復(fù)合物制備與工藝優(yōu)化

將40 mg NA溶于10.0 mL無水乙醇或丙酮溶液中，記為溶液A；將一定質(zhì)量的OSAPS分散至正己烷中，記為混懸液B。將混懸液B滴入溶液A中，并在超聲機中負(fù)載一段時間，然后將混合液離心，將沉淀在烘箱中干燥24 h，將干燥的沉淀物研磨后過50目篩(孔徑為0.282 mm)，即獲得OSAPS-NA復(fù)合物粉末。

本研究采用反溶劑沉淀法將NA負(fù)載于OSA改性多孔淀粉，在制備OSAPS-NA復(fù)合物時，需要以負(fù)載率為評價標(biāo)準(zhǔn)，對所用溶劑、制備方法、正己烷與丙酮的體積比(V正己烷/V丙酮)、NA與OSA改性多孔淀粉的質(zhì)量比(mOSAPS/mNA)、超聲強度、超聲時間進行單因素優(yōu)化，優(yōu)化指標(biāo)如表1所示。

表1 OSAPS-NA復(fù)合物優(yōu)化指標(biāo)

1.5 負(fù)載率檢測

1.5.1 檢測條件

采用高效液相色譜對NA的濃度進行檢測，檢測條件為：C18反相色譜柱；檢測溫度 (柱溫箱溫度)為30 ℃；流動相為乙腈-去離子水體積比20∶ 80，流速為1.0 mL·min-1；檢測波長為283 nm；進樣體積為10 μL。

1.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定

精確稱取NA標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，用無水乙醇定容至10 mL，充分溶解，然后用無水乙醇將上述溶液稀釋至0.5、0.25、0.125、0.062 5、0.031 25 mg·mL-1，即得NA標(biāo)準(zhǔn)品溶液。采用1.5.1節(jié)所述方法對NA標(biāo)準(zhǔn)溶液進行檢測，以NA的峰面積為縱坐標(biāo)，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5.3 負(fù)載率計算

采用高效液相色譜對OSAPS-NA復(fù)合物制備過程中離心步驟的上清液中NA的質(zhì)量濃度進行加測。復(fù)合物中NA的負(fù)載率計算公式[15]如下：

(1)

式(1)中：R為負(fù)載率，ce為每個實驗上清液中NA的質(zhì)量濃度，Ve為相應(yīng)的上清液體積，m0為NA的初始質(zhì)量。

1.6 表面張力與膠束濃度檢測

分別制備30.77、15.39、7.70、3.85、1.92、0.96、0.48 mg·mL-1的OSA改性多孔淀粉懸浮液，將其分別置于80 ℃水浴鍋中攪拌，并使其糊化。常溫冷卻后，將內(nèi)徑為0.5 mm的毛細(xì)管分別插入OSA改性多孔淀粉糊化溶液中，使毛細(xì)管下緣剛好與液面連接。用Image J軟件記錄并計算每個質(zhì)量濃度的OSA改性多孔淀粉糊化溶液在毛細(xì)管中上升的高度h與接觸角θ，并用公式(2)計算各濃度的OSA改性多孔淀粉糊化溶液的表面張力[16]。

γ=ρghr/2cosθ。

(2)

式(2)中，γ代表表面張力，r取值為0.25 mm，g取值為常溫下各濃度的OSA改性多孔淀粉糊化溶液的密度(g·cm-1)，ρ代表不同OSA改性多孔淀粉懸浮液的密度。

以O(shè)SA改性多孔淀粉糊化溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以其相應(yīng)的表面張力為縱坐標(biāo)，繪制曲線，沿曲線轉(zhuǎn)折點的兩邊分別作切線，兩條切線的交叉點所對應(yīng)的濃度即為OSA改性多孔淀粉的臨界膠束濃度。

此外，用該方法對最佳條件下制備的OSAPS-NA復(fù)合物在負(fù)載前后的表面張力進行了檢測。將負(fù)載NA前后的OSAPS顆粒與OSAPS-NA復(fù)合物(具有相同的OSAPS濃度)分別溶解于去離子水中，并分別在80 ℃水浴鍋中攪拌，然后分別檢測冷卻后的糊化溶液的表面張力。

1.7 OSAPS-NA復(fù)合物釋放動力學(xué)研究

1.7.1 溶液配制

模擬胃液的配制：向1 000 mL去離子水中加入濃鹽酸，使鹽酸水溶液的pH值為1.5±0.2，向該鹽酸水溶液中加入10.0 g胃蛋白酶，混合均勻后即獲得模擬胃液。

模擬腸液的配制：用1 000 mL去離子水溶解6.8 g磷酸二氫鉀，然后用0.1 mol·L-1NaOH將溶液的pH值調(diào)至6.8。向上述溶液中加入10.0 g胰蛋白酶和10.0 g膽汁酸鈉水合物，混合均勻后即獲得模擬腸液。

1.7.2 釋放動力學(xué)研究

將NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物(含有相同質(zhì)量的NA)分別加入200 mL模擬胃液和200 mL模擬腸液中，在5、10、15、30、60、90、120、240和480 min分別取樣200 μL，并同時向體系中加入等體積的模擬消化液。用4倍體積的無水乙醇稀釋樣品，充分混合后，用高效液相色譜檢測每個時間點的樣品中NA的濃度。用上述檢測結(jié)果計算每個時間點NA的累積釋放量。以不同時間點的累積釋放率為數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，進行Korsmeyer-Peppas模型[公式(4)]的擬合，計算該淀粉基載體的釋放速率。累積釋放量的計算公式和Korsmeyer-Peppas模型如下：

(3)

Cr=k×tn。

(4)

式(3)和(4)中，Cr為t時間內(nèi)NA在釋放體系中的累積釋放率(%)；Ve為每次的取樣量；V0為釋放溶液的體積；ci和cn分別為i和n個樣品中的NA的濃度；mt為復(fù)合物中NA的總質(zhì)量；k為基于構(gòu)成大分子網(wǎng)絡(luò)或顆粒系統(tǒng)的特性所獲得的釋放常數(shù)；n為擴散指數(shù)，表示運輸機制。

1.8 OSAPS-NA復(fù)合物口服生物利用度研究

1.8.1 動物飼養(yǎng)

選取12只體重為(250±20)g的Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)用于生物利用度研究。將用于研究的SD大鼠隨機分為兩組(NA原材料組和OSAPS-NA復(fù)合物組)，在相同的外部環(huán)境(包括溫度、濕度、光線、食物和水)下飼養(yǎng)3 d，并在給予口服樣品前禁食24 h。3組大鼠(n=6)分別口服去離子水、NA原材料-去離子水混懸液、OSAPS-NA混懸液(口服劑量根據(jù)NA計算，用相當(dāng)于大鼠體重50 mg·kg-1的柚皮苷質(zhì)量對大鼠進行灌胃)。口服后，在0、5、15、30、60、90、120、240、360、720、1 440和2 880 min，通過眼眶靜脈竇穿刺獲得血樣，將血樣立即3 000 ×g離心10 min，保存在-40 ℃冰箱中。杭州赫貝科技有限公司實驗動物福利和倫理委員會審查并批準(zhǔn)了本研究的動物實驗操作(許可證號：HB2021130009031WL-A)。

1.8.2 血液樣品檢測與藥代動力學(xué)研究

在分析之前，首先在37 ℃水浴中解凍冷凍樣品。血漿樣品的預(yù)處理方法為：精確吸取血清樣品20 μL并用100 μL無水乙醇萃取，將萃取體系放在渦旋攪拌器上搖動1 min，然后離心 (10 000×g，10 min)。最后，將上清液中的10 μL注入HPLC系統(tǒng)。檢測條件同1.5節(jié)。以血清中NA的質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo)，時間為橫坐標(biāo)繪制藥-時曲線。應(yīng)用房室模型和統(tǒng)計矩模型擬合并計算NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物中NA在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)。相對生物利用度(Frb)按以下公式計算[17]。

Frb(%)=(SAUCp/SAUCr)×100。

(5)

式(5)中，SAUCp為OSAPS-NA復(fù)合物給藥組的藥-時曲線下面積；SAUCr為NA原材料給藥組的藥-時曲線下面積。實驗結(jié)果的差異顯著性用One-way ANOVA進行評價，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。所有的數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 OSAPS-NA復(fù)合物的優(yōu)化

采用反溶劑沉淀法制備了OSAPS-NA復(fù)合物，并對其制備過程中影響負(fù)載率的重要指標(biāo)進行單因素優(yōu)化，其優(yōu)化結(jié)果如圖1～圖3所示。首先以負(fù)載率為評價指標(biāo)，對復(fù)合物制備所用溶劑和負(fù)載方式進行篩選，其篩選結(jié)果如下。

*表示差異顯著(P<0.05)。*meant significant difference at the levels of P<0.05.圖1 溶劑種類與負(fù)載方式的篩選結(jié)果Fig.1 Results of filtering for solvent and loading methods

由圖1可知，以反溶劑沉淀法制備的NA納米懸浮液結(jié)合超聲輔助吸附法制備的OSAPS-NA復(fù)合物獲得了最高的負(fù)載率(57.93%±2.1%)。在同樣的負(fù)載條件下，用反溶劑沉淀法獲得的納米顆粒獲得了更好的吸附率，說明反溶劑沉淀法是影響OSAPS負(fù)載NA的關(guān)鍵因素之一。固定反溶劑沉淀法的制備條件，超聲法使負(fù)載率達到最高，并且與其他負(fù)載方法具有顯著性差異，說明超聲法更適宜NA納米顆粒的負(fù)載。由于淀粉酶在淀粉顆粒表面水解出的孔隙是向心的[16]，而攪拌負(fù)載時的納米顆粒隨懸浮液轉(zhuǎn)動的角度與淀粉表面的開孔平行，與負(fù)載所需的方向(向孔隙內(nèi)負(fù)載)垂直，這可能是負(fù)載率低于靜置法的原因。與此同時，納米懸浮液結(jié)合超聲輔助吸附法制備的OSAPS-NA復(fù)合物的負(fù)載率高于靜置法，可能是由于超聲法提供的高動能增加了納米顆粒與改性淀粉表面和空隙的接觸概率，進而增加了負(fù)載率。綜上所述，超聲法和反溶劑沉淀法是制備高負(fù)載率的OSAPS-NA復(fù)合物的關(guān)鍵因素。因此，將就這兩種方法的操作要點進行后續(xù)的單因素優(yōu)化研究。

超聲強度和超聲時間是超聲法負(fù)載過程的重要控制因素。從圖2中可以看出，不同超聲時間和超聲強度下對NA負(fù)載率的變化幅度較大，超聲強度為80 W、超聲時間為10 min時NA負(fù)載率最低，僅為27.56%±3.32%；超聲強度為200 W,超聲時間為20 min時，負(fù)載率最高，為62.89%±2.71%。代表超聲強度為200 W的紅色線一直在所有相應(yīng)數(shù)據(jù)點的最上方，呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢。由于超聲時間繼續(xù)延長，負(fù)載率出現(xiàn)下降，可能是由于淀粉顆粒在超聲時本身的膨脹[18]所致。

圖2 超聲強度和超聲時間對負(fù)載率的影響Fig.2 Effect of ultrasonic intensity and ultrasonic time on loading rate

從反溶劑沉淀的角度，對V正己烷/V丙酮和MOSAPS/MNA進行了優(yōu)化，優(yōu)化結(jié)果如圖3所示。圖3-A是制備NA納米粒子所需的反溶劑(正己烷)和溶劑(丙酮)應(yīng)用比例的優(yōu)化結(jié)果。隨著正己烷體積占比的增加，OSAPS對NA的負(fù)載率也隨之增加。結(jié)合實物圖(圖3-B)，在不超聲的情況下，當(dāng)正己烷與丙酮溶液的體積比為0.8時，混合體系中的NA出現(xiàn)析出，超聲后，這一比例前移至0.6，說明超聲過程能夠促進NA顆粒的析出。從圖3-A可知，當(dāng)正己烷與丙酮溶液的體積比為0.6時，OSA改性淀粉對NA的負(fù)載率最高，達到了78.51%±3.84%，該結(jié)果與實物圖的結(jié)果(圖2-B)相一致。從圖3-C可知，在固定OSAPS質(zhì)量的情況下，隨著NA在丙酮中質(zhì)量濃度的提升，OSAPS對NA的負(fù)載率先增加后減小，當(dāng)mOSAPS/mNA=5時，負(fù)載率最高，達到了71.49%±2.26%。因此，mOSAPS/mNA=5是優(yōu)化的最佳選擇。

A和B為V正己烷/V丙酮優(yōu)化結(jié)果；C為mOSAPS/mNA優(yōu)化結(jié)果。A and B， Optimization results of Vn-hexaneether/Vacetone； C， Optimization results of mOSAPS/mNA.圖3 V正己烷/V丙酮和mOSAPS/mNA對負(fù)載率的影響Fig.3 Effect of Vpetroleumether/Vacetone and mOSAPS/mNA on loading rate

綜上所述，優(yōu)化后的OSAPS-NA復(fù)合物制備方法為：將40 mg NA溶于10.0 mL丙酮溶液中記為溶液A，將200 mg OSAPS分散至6.0 mL正己烷中，記為混懸液B。將混懸液B滴入溶液A中，并在強度為200 W超聲機中放置20 min，然后將混合液離心，將沉淀在烘箱中干燥24 h，將干燥的沉淀物研磨后過50目篩，即獲得OSAPS-NA復(fù)合物粉末。

2.2 臨界膠束濃度檢測結(jié)果

由圖4計算可得，OSAPS的臨界膠束濃度為(5.622±0.451) mg·mL-1，其對應(yīng)的表面張力約為63.12 μm·m-1。經(jīng)計算。在最優(yōu)的制備條件下，OSAPS的質(zhì)量濃度為12.5 mg·mL-1，該數(shù)值高于OSAPS的臨界膠束濃度，說明復(fù)合物形成過程中NA的負(fù)載不僅與OSA改性多孔淀粉的吸附作用有關(guān)，還可能被部分溶解的OSA改性多孔淀粉所形成的膠束所包裹。此外，經(jīng)檢測，在最佳的OSAPS-NA復(fù)合物制備條件下，OSAPS在水中的表面張力為(63.66±5.20)μm·m-1，OSAPS-NA復(fù)合物在水中的表面張力為(65.49±4.10)μm·m-1，其數(shù)值略高于OSAPS糊化液，可能是由于易在熱水中溶解的NA降低了OSAPS-NA復(fù)合物糊化液的密度，進而增加了其表面張力。此外，冷卻后水溶液的NA會被糊化的OSAPS膠束包埋，減緩其結(jié)晶的增長[19]。

圖4 臨界膠束濃度檢測結(jié)果Fig.4 Detection results for critical micelle concentration

2.3 釋放動力學(xué)研究結(jié)果

圖5和表2分別是NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物的釋放曲線和釋放動力學(xué)參數(shù)擬合結(jié)果。從圖5-可知，OSAPS-NA復(fù)合物中的NA在模擬胃液和模擬腸液中的累積釋放率均高于NA原材料，說明負(fù)載后的NA具有更高的溶解性。從實際檢測的結(jié)果來看，6 h時NA和OSAPS-NA復(fù)合物在模擬胃液中的累積釋放率分別是7.412%±0.141%和68.800%±3.234%，同時，它們在模擬腸液中的累積釋放率分別為20.225%±1.978%和69.800%±3.106%。經(jīng)計算可知，OSAPS-NA復(fù)合物中的NA在模擬胃液和模擬腸液中的溶解度分別提升了9.28和3.45倍。盡管，在37 ℃時，NA和OSAPS會在人工胃液(強酸性條件)中部分分解[20]，但OSAPS-NA復(fù)合物中的NA在模擬胃液和模擬腸液中較高的累積釋放率說明復(fù)合物的形成對NA起到了較好的增溶和保護作用。這可能是OSAPS的兩親性及其膠束共同作用的結(jié)果。

圖5 NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物在模擬胃液(A)和模擬腸液(B)中的釋放曲線Fig.5 Release profiles of NA raw material and OSAPS-NA complexes in simulated gastric fluid (A) and simulated intestinal fluid (B)

表2 NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物的釋放動力學(xué)參數(shù)擬合結(jié)果

從模型的角度分析OSAPS-NA復(fù)合物中NA的釋放機制，結(jié)果如表2所示。NA原材料在模擬胃液和模擬腸液中的n值均小于0.43，說明NA在原材料中的釋放符合Fickian 擴散。OSAPS-NA復(fù)合物中NA在模擬胃液和模擬腸液中的n值均處于0.43至0.85之間，說明OSAPS對NA的釋放機制屬于異常擴散(非Fickian 擴散)，即僅由NA的顆粒屬性控制釋放。此外，OSAPS-NA復(fù)合物在兩種媒介中的n值都大于NA原材料，說明OSAPS-NA復(fù)合物中NA釋放速度的主要控制因素已偏向于載體控制[21]。

2.4 口服生物利用度

NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物的藥-時曲線如圖6所示。根據(jù)擬合結(jié)果可知，口服NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物在大鼠體內(nèi)的藥-時曲線符合二室模型，并且藥-時曲線的雙峰預(yù)示著NA在大鼠體內(nèi)的消除過程中存在著肝-腸膽道循環(huán)現(xiàn)象，這個結(jié)果與之前的研究結(jié)果是一致的[22]。綜合以上結(jié)果，本研究將通過二室模型和統(tǒng)計矩對NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物的藥代動力學(xué)參數(shù)分別進行分析，結(jié)果如表3所示。由表3可知，OSAPS-NA復(fù)合物的最高血藥濃度(Cmax)和0～2 880 min內(nèi)的藥-時曲線下面積[AUC(0～2880)]值約為NA原材料的4.57和9.80倍，OSAPS-NA復(fù)合物的相對生物利用度(Frb)值為979.61%±56.79%。上述關(guān)鍵參數(shù)說明，本研究中獲得OSAPS-NA復(fù)合物能夠顯著提高NA在大鼠體內(nèi)的生物利用度。OSAPS-NA復(fù)合物膠束濃度可能是出現(xiàn)這個結(jié)果的主要原因。在合適的流動性、較低的表面張力和膠束形成的共同作用下，NA體內(nèi)生物利用度的提升可能取決于NA在復(fù)合物中的小尺寸、兩親性O(shè)SAPS的增溶作用及其膠束的保護作用。同時，與NA原材料相比，OSAPS-NA復(fù)合物明顯縮短NA的達峰時間(Tmax)，由60 min縮短至15 min，這表明OSAPS-NA復(fù)合物中的NA通過大鼠血管壁進入血液的時間更短。但較長的分布半衰期(t1/2α)表明該復(fù)合物中的NA分布到組織和器官中的速度較慢，這也解釋了OSAPS-NA復(fù)合物較高的平均滯留時間[MRT(0-∞)]和較大的0～∞ min內(nèi)的藥-時曲線下面積[AUC(0-∞)]。

圖6 口服NA原材料和OSAPS-NA復(fù)合物后NA在血漿中的濃度Fig.6 Plasma concentration of NA following oral administration of OSAPS-NA complex and the raw NA

3 結(jié)論

超聲輔助的反溶劑沉淀法可以高效率地將NA負(fù)載于OSAPS中，負(fù)載過程的最佳優(yōu)化條件為：在NA質(zhì)量濃度為4 mg·mL-1的前提下，以丙酮和正己烷(體積比1∶0.6)為作用溶劑，超聲強度為200 W，超聲時間為20 min。在最佳條件下，NA在OSAPS中的負(fù)載率為71.49%±2.26%。藥代動力學(xué)結(jié)果顯示，NA在小鼠體內(nèi)的藥-時曲線出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象，并且符合二室模型。動力學(xué)參數(shù)結(jié)果顯示，OSAPS-NA復(fù)合物的最高血藥濃度和0～2 880 min內(nèi)的藥-時曲線下面積值是NA原材料的4.57和9.80倍，并且達峰時間縮短至15 min。這些現(xiàn)象可能是NA在復(fù)合物中的小尺寸、兩親性的OSAPS的增溶作用及其膠束的保護作用共同作用形成的。該研究為OSA改性淀粉在載體領(lǐng)域的拓展提供了一定的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。