湖羊鏈球菌與球蟲混合感染的診治

黃宇翔

（黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院 黑龍江齊齊哈爾 161005）

近年來，隨著畜牧業(yè)的發(fā)展，在市場經(jīng)濟(jì)的作用下，湖羊的養(yǎng)殖取得了良好的經(jīng)濟(jì)效益，也成為一些地區(qū)農(nóng)民脫貧致富的首選，飼養(yǎng)規(guī)模也在不斷地?cái)U(kuò)大，由于養(yǎng)殖過程中，沒有做到科學(xué)化管理；有的羊群密度大，且沒有良好的環(huán)境條件，會導(dǎo)致很多病原體蔓延，造成羊只病原混合感染現(xiàn)象，給臨床診斷和治療帶來困難，從而降低養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益[1]。球蟲病為養(yǎng)羊生產(chǎn)中常見的原蟲病，羊只一旦感染球蟲，可破壞腸道黏膜的完整性，造成機(jī)體營養(yǎng)吸收障礙，引起貧血、消瘦、發(fā)育不良等癥狀[2]，導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降，會引起患羊感染其他疾病，造成混感，促使癥狀加重。鏈球菌在自然界中廣泛存在，有多種血清型能威脅禽類、豬、牛、羊等多種牲畜。羊鏈球菌病是由致病性鏈球菌感染引起，不同日齡的羊均可感染，典型特征是下頜淋巴結(jié)出現(xiàn)炎性水腫，肺臟出現(xiàn)炎癥病變，全身呈現(xiàn)出血性敗血癥，發(fā)病急，病程短，不同季節(jié)均有發(fā)生，在冬春季節(jié)高發(fā)，主要通過消化道和呼吸道傳播[3]。具有較強(qiáng)的傳染性，在羊群中可快速擴(kuò)散。多呈地方性流行或散發(fā)。羔羊一旦感染多呈急性死亡。對養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展非常利，為了確保養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)不受到損失，需要采取有效的防治方法。

現(xiàn)將臨床羔羊鏈球菌與球蟲混合感染的實(shí)驗(yàn)室診斷和藥敏試驗(yàn)報(bào)告如下，供臨床診斷參考。

1 發(fā)病情況

1.1 臨床癥狀

黑龍江省齊齊哈爾市區(qū)某縣鎮(zhèn)，養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)200 多只種湖羊，2021 年12 月份起，有3 只30 日齡羔羊陸續(xù)發(fā)生死亡。羔羊臨床表現(xiàn)精神萎靡，弓背垂頭，呆立不動；食欲不振或廢絕，反芻停止；羔羊呼吸困難，鼻腔有漿液性分泌物流出；排出混雜黏液或者血液的糞便，因體質(zhì)衰竭倒地不起，抽搐，口吐泡沫，1～2d 死亡。

1.2 剖檢癥狀

喉頭有散在的出血點(diǎn)，內(nèi)有黏液，氣管環(huán)出血，一側(cè)肺葉大面積於血，瘤胃、網(wǎng)胃有少量食物，瓣胃成團(tuán)的毛球，十二指腸有卡他性炎癥，并有點(diǎn)狀或帶狀出血，盲腸腫脹，伴有卡他性炎癥。尸體干癟、消瘦，皮膚無彈性、皮下脂肪消失。

2 材料與方法

2.1 材料

1）病料。無菌采集病死羊肝臟，心臟，肺，喉頭等病變器官和組織作病料。

2）主要試劑。血清營養(yǎng)瓊脂平板（本試驗(yàn)室自制）；革蘭氏染液（本試驗(yàn)室自制）；微量生化反應(yīng)管、藥敏片（購自杭州濱和微生物試劑有限公司）。

2.2 方法

1）病原細(xì)菌的分離培養(yǎng)。用無菌環(huán)挑取肝、心血，肺及喉頭黏液，分別于含7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基劃線培養(yǎng)，置37℃培養(yǎng)18～24h，觀察細(xì)菌生長情況。

2）分離菌的純化。挑取上述血瓊脂上培養(yǎng)出的單個菌落在血瓊脂上劃線接種，37℃培養(yǎng)18～24h。

3）分離菌形態(tài)觀察。挑取血瓊脂上培養(yǎng)出的單個菌落制作抺片、革蘭氏染色油鏡下觀察。

4）生化試驗(yàn)。對分離菌分別進(jìn)行糖類分解試驗(yàn)、MR 試驗(yàn)、VP 試驗(yàn)、山梨醇試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)、甘露醇試驗(yàn)。

5）藥敏試驗(yàn)。刮取適量純化的分離菌，用涂布棒均勻地涂抺在血瓊脂平板上，再貼上藥敏片，倒置于培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)24h。

6）蟲卵檢驗(yàn)。刮取盲腸內(nèi)屑觸片，滴加生理鹽水進(jìn)行稀釋，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡下觀察，依蟲卵的形態(tài)特征，進(jìn)行判斷。

3 結(jié)果

3.1 細(xì)菌培養(yǎng)及鏡檢鑒定結(jié)果

37℃培養(yǎng)20h，在含7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上可見生長出圓形突起米粒大小、灰白色半透明的菌落。將分離菌涂片，染色，鏡檢可見革蘭氏陽性短鏈排列或鏈狀球菌[4]（見圖1）。

圖1 顯微鏡10×100 觀察細(xì)菌形態(tài)

3.2 生化鑒定結(jié)果

在糖發(fā)酵的試驗(yàn)中可見分離的細(xì)菌能夠分解麥芽糖、葡萄糖、乳糖、蔗糖、果糖，在MR 試驗(yàn)、山梨醇試驗(yàn)和硝酸鹽還原試驗(yàn)呈現(xiàn)陽性，VP 試驗(yàn)和甘露醇試驗(yàn)呈現(xiàn)陰性[5]，這些生化鑒定結(jié)果證明該分離菌為鏈球菌。

3.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

用藥敏紙片法對分離的鏈球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，抑菌圈直徑大于15mm 表示高度敏感（++），直徑小于10mm 表示為耐藥不敏感（-），介于兩者之間表示為中度敏感（+）。

結(jié)果顯示，分離菌株對青霉素、頭孢他啶、恩諾沙星、磺胺間甲氧嘧啶高度敏感，對慶大霉素、林可霉素、環(huán)丙沙星、鏈霉素中度敏感，對新生霉素、阿莫西林不敏感。見表1。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3.4 盲腸觸片鏡檢結(jié)果

鏡下可見卵圓形或橢圓形的卵囊，卵囊壁光滑，有極帽，卵囊壁2 層，無外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w（見圖2）。與艾美耳球蟲卵特征相符。

圖2 顯微鏡觀察卵囊形態(tài)

4 討論

通過對病死羊進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查初步診斷為鏈球菌，進(jìn)一步對分離菌株進(jìn)行生化試驗(yàn)鑒定，結(jié)果顯示該病原與鏈球菌的生物學(xué)特性基本相符；通過對盲腸內(nèi)蟲卵形態(tài)特征檢查，結(jié)果與艾美耳球蟲卵特征相符，結(jié)合發(fā)病羊臨床癥狀、病剖檢變化，最終判定為鏈球菌和球蟲混合感染。

通過藥敏試驗(yàn)研究，結(jié)果顯示鏈球菌對青霉素、頭孢他定、恩諾沙星高度敏感，為臨床治療用藥提供了參考依據(jù)。對球蟲的治療使用抗球蟲藥如氨丙啉，磺胺氯吡嗪，磺胺間甲氧嘧啶等?；前奉愃幬锎x產(chǎn)物在尿中的溶解度較低，容易形成結(jié)晶，所以連續(xù)用藥不宜超過1 周，并給予大量飲水或應(yīng)同時(shí)應(yīng)用碳酸氫鈉。忌與酸性藥物如VC、氯化鈣、青霉素等配伍。

該養(yǎng)殖場發(fā)生羊鏈球菌與球蟲混合感染是因地處北方，為了保障圈舍溫度，門窗外又用塑料罩住，造成圈舍潮濕、通風(fēng)不良、糞便清理不及時(shí)、青飼料缺乏，養(yǎng)殖環(huán)境惡劣等因素造成的，尤其是羊只抵抗力下降時(shí)極易誘發(fā)本病，且病死率較高，為此在本病多發(fā)的冬春季節(jié)要改善羊群養(yǎng)殖環(huán)境，圈舍通風(fēng)干燥，供給營養(yǎng)豐富的飼料，定期消毒并做好免疫接種工作，春、秋兩季實(shí)施羊敗血性鏈球菌病滅活疫苗免疫接種。每年要對羊群定期進(jìn)行2～3 次預(yù)防性驅(qū)蟲。此外，合理的養(yǎng)殖密度，保證舍內(nèi)通風(fēng)良好，也可有效防控此病發(fā)生。

臨床診療中常常存在多病原混合感染的現(xiàn)象。因此，在開展藥物治療前，一定要確定致病源，篩選出敏感的藥物，然后采取對癥措施進(jìn)行治療，使病情得到有效控制，從而減少經(jīng)濟(jì)損失。在用藥治療中也需要嚴(yán)格遵守抗菌類藥物的使用量和使用時(shí)間，以減少或延緩耐藥菌株的產(chǎn)生。