閆雪崧
(山東省濱州市沾化區(qū)海洋和漁業(yè)發(fā)展服務(wù)中心,山東濱州 256600)
南美白對(duì)蝦(Penaeus vannamei,也被稱為凡納濱對(duì)蝦)不僅肉質(zhì)鮮美、蛋白含量高,而且富含不飽和脂肪酸和多種維生素和礦物質(zhì),受到廣大消費(fèi)者的喜愛(房媛等,2022)。同時(shí)南美白對(duì)蝦飼養(yǎng)周期短,食性廣,抗病強(qiáng),除了沿海地區(qū)還可以利用純淡水或半咸水等池塘養(yǎng)殖,養(yǎng)殖要求相對(duì)較低,目前已成為我國(guó)養(yǎng)殖產(chǎn)量、養(yǎng)殖面積最大的蝦類品種?!吨袊?guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》統(tǒng)計(jì)表明,南美白對(duì)蝦占我國(guó)海水養(yǎng)殖蝦類的80.52%,是僅次于克氏原螯蝦的第二淡水養(yǎng)殖蝦類品種。我國(guó)南美白對(duì)蝦蝦苗需要量大,2019年達(dá)到15070億尾,較2018年相比增加47.36%(王丹等,2021)。與成蝦相比,蝦苗對(duì)環(huán)境要求高,蝦苗質(zhì)量直接影響?zhàn)B殖產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益。作為變溫動(dòng)物,南美白對(duì)蝦適應(yīng)的溫度范圍較廣,25~30℃生長(zhǎng)性能最佳,溫度過高存活率顯著下降(肖善勢(shì)等,2016)。南美白對(duì)蝦經(jīng)歷無節(jié)幼體(Nauplius stage,N)、溞狀幼體(Zoea stage,Z)、糠蝦幼體(Mysis stage,M)和仔蝦(Post larval stage,P)4個(gè)階段完成變態(tài),各階段的習(xí)性及生長(zhǎng)性能存在差異(楊章武等,2011)。南美白對(duì)蝦適宜高密度養(yǎng)殖,但養(yǎng)殖密度過高時(shí)會(huì)導(dǎo)致群體內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)增加,平均餌料系數(shù)和抗病能力降低(陳亞坤等,2011)。目前養(yǎng)殖密度對(duì)生長(zhǎng)性能的影響主要集中于成蝦,幼蝦階段的密度要求及其對(duì)后續(xù)生長(zhǎng)的影響報(bào)道較少。
南美白對(duì)蝦工業(yè)化養(yǎng)殖不斷普及,蝦苗需求量大,但成活率低、生長(zhǎng)能力差等問題影響了后續(xù)的養(yǎng)殖工作。本研究分析溫度及養(yǎng)殖密度對(duì)南美白對(duì)蝦幼體成活率的影響,并對(duì)蝦苗后續(xù)生長(zhǎng)性能及消化道酶進(jìn)行分析,明確育苗條件對(duì)后續(xù)養(yǎng)殖的影響。
1.1 試驗(yàn)材料 采用同一批南美白對(duì)蝦群體的親蝦的F1代無節(jié)幼體,使用餌料為蝦片、藻粉、豐年蟲、BP粉等。試驗(yàn)用水為經(jīng)沉淀、砂濾、消毒的海水[pH=(8.0±0.2)、鹽度(30±1)%],使用前曝氣、檢測(cè)余氯并涂板檢測(cè)弧菌數(shù)量。所有試驗(yàn)均在0.3 m3的可控溫不透明玻璃鋼桶中進(jìn)行。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)分別設(shè)置3種溫度處理[(27±0.5)℃、(30±0.5)℃、(33±0.5)℃],在每種溫度處理下設(shè)置3種培育密度(15、25、35萬尾/m3),共9組不同處理,每組設(shè)計(jì)3個(gè)平行。幼蝦投餌6次/d,每個(gè)階段的投餌量不同:ZⅠ期投餌(1.5±0.5)g/m3·次,ZⅡ和ZⅢ期投餌(3±0.5)g/m3·次,M期投餌(4±0.5)g/m3·次,P期投餌(5±0.5)g/m3·次,在M和P期適量添加豐年蟲,以保證其營(yíng)養(yǎng)要求,記錄不同處理組幼蝦各階段的存活率。
對(duì)上述各組獲得的蝦苗進(jìn)行蝦苗標(biāo)粗,10 d后在每個(gè)處理組中隨機(jī)選取蝦苗,31℃下300尾/m3繼續(xù)養(yǎng)殖6周,每組處理設(shè)計(jì)3個(gè)平行。養(yǎng)殖階段投餌4次/d,初次投喂量為平均體重的3%,后續(xù)根據(jù)攝食情況適當(dāng)調(diào)整。6周后停止投喂,1 d后各組隨機(jī)選取30只對(duì)蝦,記錄并計(jì)算平均身長(zhǎng)和體重。
為明確造成差異的原因,對(duì)不同溫度、密度培育的各組仔蝦中隨機(jī)取樣10只剝?nèi)「我扰K,利用液氮速凍后于-80℃保存,用于測(cè)定胰蛋白酶(Trypsin)、脂肪酶(Lipase)和淀粉酶(Amylase),每組設(shè)計(jì)3個(gè)平行。
1.2.2 幼蝦各階段存活率的測(cè)定 利用顯微鏡觀察上述組中幼蝦的變態(tài)階段,當(dāng)各組處理90%以上幼蝦處于ZⅠ后開始計(jì)算時(shí)間,當(dāng)其中90%以上幼蝦進(jìn)入下一個(gè)發(fā)育階段后計(jì)算存活率。在不同位置隨機(jī)取樣3次,每次取樣500 mL,利用水體比例法計(jì)數(shù),并計(jì)算對(duì)應(yīng)階段幼體數(shù)量的平均值及存活率。
1.2.3 消化酶活性指標(biāo)分析 準(zhǔn)確稱取等量上述各組仔蝦的肝胰臟樣本,在冰浴下進(jìn)行勻漿及離心,取上清液等比例混合,使用試劑盒測(cè)定消化酶活性(上海通蔚生物,TW30161、TW30674、TW30561),具體方法見相關(guān)說明書。
1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 利用GraphPad Prism 8軟件處理上述各組數(shù)據(jù),結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示;同時(shí)利用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,P<0.05表示組間差異顯著。
2.1 不同溫度、密度對(duì)南美白對(duì)蝦幼蝦各發(fā)育階段存活率的影響 由表1可知,隨著溫度的提高,南美白對(duì)蝦各階段的存活率降低。當(dāng)培育密度較高時(shí)(25和35萬尾/m3),30和33℃的溫度對(duì)仔蝦存活率均顯著低于對(duì)應(yīng)密度下27℃時(shí)的存活率(P<0.05)。尤其是當(dāng)溫度33℃時(shí),當(dāng)培育密度達(dá)到35萬尾/m3時(shí),各階段的存活率均為最低。但MⅢ期以后,30和33℃兩組培育溫度下的幼蝦存活率差異不顯著。大部分發(fā)育階段15和25萬尾/m3培育時(shí)存活率無顯著差異(P>0.05)。
表1 溫度、培育密度對(duì)南美白對(duì)蝦幼蝦不同階段存活率的影響
2.2 蝦苗培育的溫度和密度對(duì)后續(xù)養(yǎng)殖生長(zhǎng)性能的影響 由圖1可知,蝦苗培育密度對(duì)體長(zhǎng)的影響較小,但對(duì)后期飼養(yǎng)過程中成蝦平均體重的影響較為明顯,結(jié)果顯示,當(dāng)蝦苗培育密度達(dá)到35萬尾/m3時(shí),同樣狀態(tài)下飼養(yǎng)的成蝦體重均為同溫度3組中的最低值(P<0.05)。蝦苗培育溫度較高時(shí)(33℃)對(duì)后續(xù)飼養(yǎng)中成蝦的體重影響較大,尤其是當(dāng)33℃時(shí)培育密度達(dá)到35萬尾/m3得到的蝦苗經(jīng)6周養(yǎng)殖平均體重最低,僅為2.67 g;而當(dāng)蝦苗培育溫度為30℃,培育密度為25萬尾/m3時(shí)平均體重最高,達(dá)到3.75 g。
圖1 蝦苗培育溫度和密度對(duì)南美白對(duì)蝦體長(zhǎng)及體重的影響
2.3 蝦苗培育的溫度和密度對(duì)消化酶的影響由圖2可知,仔蝦肝胰臟的3種消化酶酶活在15和25萬尾/m3時(shí)均表現(xiàn)為隨著溫度增加而增加,但溫度對(duì)脂肪酶的影響較小。在27℃時(shí)培育密度對(duì)淀粉酶和脂肪酶的影響較小,當(dāng)溫度處于30℃時(shí),提高密度到25萬尾/m3以上對(duì)胰蛋白酶和脂肪酶的影響無顯著差異,但當(dāng)培育溫度升高到33℃時(shí),高密度(35萬尾/m3)育苗導(dǎo)致仔蝦消化酶活性不同程度地下降,尤其是胰蛋白酶下降顯著(P<0.05)。
圖2 蝦苗培育溫度和密度對(duì)消化酶的影響
南美白對(duì)蝦在我國(guó)養(yǎng)殖規(guī)模大,蝦苗需要量已達(dá)到1.5千億尾以上,因此,蝦苗質(zhì)量直接影響了其產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益(王丹等,2021)。與成蝦相比,蝦苗對(duì)環(huán)境要求更高,工業(yè)化育苗不受天然環(huán)境條件的影響,可以對(duì)溫度、密度、鹽度、溶氧等多條件進(jìn)行精準(zhǔn)控制。溫度通過影響酶活性、機(jī)體代謝等方面可以影響蝦類變溫動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育(馮旭等,2022)。而較高的養(yǎng)殖密度容易造成密度脅迫,影響應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá),導(dǎo)致其抗逆性降低,生長(zhǎng)速率和存活率降低(Yang等,2017)。但也有報(bào)道顯示,不同生長(zhǎng)發(fā)育階段的適應(yīng)性可能存在差異,如南美白對(duì)蝦的最適溫度在成蝦和幼蝦期存在差異(歐黃思,2015);非洲鯰魚(Clarias lazera)成魚高密度養(yǎng)殖導(dǎo)致攻擊性增加,生長(zhǎng)性能降低,但幼魚階段可以適當(dāng)提高密度(劉洪軍等,2010)。本研究結(jié)果顯示,南美白對(duì)蝦育苗過程中溫度及密度存在交互作用。隨著溫度增加,幼蝦各階段的存活率降低,但糠蝦生長(zhǎng)后期對(duì)溫度的適應(yīng)性明顯增強(qiáng),提高溫度后存活率無顯著差異。育苗溫度較低(27℃),培養(yǎng)密度為25萬尾/m3時(shí)部分發(fā)育階段的存活率高于15萬尾/m3(表2),這可能是由于適當(dāng)?shù)姆N間競(jìng)爭(zhēng)對(duì)南美白對(duì)蝦幼蝦的存活具有促進(jìn)作用。
由于溫度增加會(huì)縮短蝦的變態(tài)發(fā)育時(shí)間,因此,工業(yè)化育苗過程中經(jīng)常采用提高水溫的方法來縮短周期,但這是否對(duì)蝦苗后續(xù)養(yǎng)殖造成影響尚不清楚。本文同時(shí)進(jìn)行了蝦苗生長(zhǎng)試驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn),蝦苗培育的溫度和密度對(duì)后續(xù)成蝦的平均體重具有一定影響,發(fā)現(xiàn)蝦苗培育溫度和密度過高(33℃35萬尾/m3)會(huì)影響蝦苗后續(xù)生長(zhǎng),但27和30℃對(duì)蝦苗體重的影響沒有差異。為了分析引起差異的原因,本文對(duì)仔蝦消化酶進(jìn)行了分析。消化酶可以反映蝦類攝食情況和對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用程度,溫度及密度均影響消化酶活性(周元雪,2014)。研究發(fā)現(xiàn),低密度培育時(shí),溫度升高可導(dǎo)致仔蝦肝胰臟淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶酶活增加,但育苗條件為33℃、35萬尾/m3時(shí)會(huì)導(dǎo)致胰蛋白酶酶活顯著下降。這表明高水溫和高密度培育得到的蝦苗其機(jī)體代謝受到影響,導(dǎo)致后續(xù)生長(zhǎng)性能下降。
本文著重探討了溫度和培育密度對(duì)南美白對(duì)蝦幼蝦的影響,進(jìn)一步驗(yàn)證了不同培育條件獲得的蝦苗在后續(xù)養(yǎng)殖過程中生長(zhǎng)特性等方面的差異,結(jié)果顯示,33℃、35萬尾/m3的條件不利于南美白對(duì)蝦蝦苗的培育,而且會(huì)影響蝦苗質(zhì)量。本文結(jié)果為南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖技術(shù)的完善提供了理論參考。