微小RNA調(diào)控母豬胎盤發(fā)育的研究進(jìn)展

?？±?潘旭靜 吳 德 徐盛玉

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所，成都611130)

微小RNA(microRNA，miRNA)是一類非編碼RNA基因，是一種大小約22 nt的功能性RNA分子。自miRNA發(fā)現(xiàn)以來(lái)，科學(xué)家們通過分子克隆和生物信息學(xué)等方法在植物、動(dòng)物和病毒中發(fā)現(xiàn)了數(shù)百個(gè)miRNA，并且在理解其結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)和作用機(jī)制方面取得了許多新進(jìn)展。miRNA已經(jīng)被確定為調(diào)控基因表達(dá)的主要調(diào)控因子，并且其參與動(dòng)物體內(nèi)許多生理過程[1]。據(jù)報(bào)道，人類基因組中已鑒定出約800個(gè)miRNA基因，它們可調(diào)控哺乳動(dòng)物細(xì)胞中多達(dá)50%的蛋白質(zhì)編碼基因[2]。可見，miRNA在哺乳動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的過程中作用是至關(guān)重要的。胎盤是哺乳動(dòng)物胚胎生存和發(fā)育必不可少的一個(gè)暫時(shí)性器官。胎盤是胎兒和母體之間營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣和廢物交換的主要界面[3-4]。此外，胎盤還是妊娠相關(guān)激素和生長(zhǎng)因子的重要來(lái)源，并參與胎兒的免疫保護(hù)，對(duì)胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要[5]。因此，一旦胎盤發(fā)育障礙或出現(xiàn)缺陷，必將影響胚胎的發(fā)育，并會(huì)引發(fā)一些疾病，例如先兆子癇、子宮內(nèi)生長(zhǎng)受限和流產(chǎn)等[6-7]。胎盤是由滋養(yǎng)層干細(xì)胞分化而來(lái)，且胎盤的主要結(jié)構(gòu)成分為滋養(yǎng)層。胎盤的正常發(fā)育需要許多信號(hào)分子，包括miRNA、生長(zhǎng)因子和激素的精確調(diào)節(jié)。越來(lái)越多的證據(jù)表明，miRNA在調(diào)節(jié)胎盤發(fā)育的許多關(guān)鍵過程中起著重要作用，例如miRNA參與調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖、分化和遷移以及胎盤血管生成等過程[8]，進(jìn)而調(diào)控胎盤的發(fā)育。因此，本文綜述了miRNA的合成、作用機(jī)制以及其對(duì)母豬胎盤發(fā)育的調(diào)控作用，以期為提高母豬繁殖力提供新的研究思路。

1 miRNA的合成與作用機(jī)制

1.1 miRNA的合成

對(duì)于動(dòng)物來(lái)說，大多數(shù)miRNA是由獨(dú)立基因的RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ,RNAPⅡ)特異性轉(zhuǎn)錄而來(lái)的[9]。在RNAPⅡ途徑中(圖1)，RNAPⅡ先轉(zhuǎn)錄得到初級(jí)miRNA(primary miRNA,pri-miRNA)，其大小從數(shù)百個(gè)核苷酸到幾千個(gè)堿基不等[10]；然后，pri-miRNA加工分2步進(jìn)行，首先在細(xì)胞核內(nèi)由一種微處理復(fù)合蛋白處理，其核心成分是Drosha和DGCR8，該復(fù)合物將pri-miRNA加工成約70個(gè)核苷酸的前體miRNA(previous miRNA,pre-miRNA)[11-12]；pre-miRNA生成后，會(huì)被通道蛋白5(exportin 5)所識(shí)別，然后通過GTP酶Ran(Ran-GTP)依賴機(jī)制轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中[13-15]。在細(xì)胞質(zhì)中，由TAR RNA結(jié)合蛋白(TRBP)的協(xié)助，Dicer在細(xì)胞質(zhì)中切割pre-miRNA產(chǎn)生約20 bp的雙鏈miRNA，miRNA雙鏈中的一條即引導(dǎo)鏈(guide strand)優(yōu)先并入miRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物(miRNA induced silencing complex，miRISC)中發(fā)揮作用，而另一條鏈即乘客鏈(passenger strand)通常被降解[16]。引導(dǎo)鏈一般是miRNA雙鏈中堿基配對(duì)不太穩(wěn)定的5′端的那條鏈[12]；乘客鏈也并不總是miRNA生成的副產(chǎn)物，也可以被加載到miRISC中，作為miRNA發(fā)揮作用[17-18]。

1.2 miRNA的作用機(jī)制

大多數(shù)關(guān)于miRNA的研究表明，miRNA通過與靶基因的3′非翻譯區(qū)(untranslated region,UTR)處的靶基因結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合以抑制其表達(dá)。研究表明，miRNA一旦整合到miRISC中，miRNA就通過堿基配對(duì)作用將miRISC引導(dǎo)至其靶基因靶點(diǎn)，miRISC通過識(shí)別靶基因上的miRNA反應(yīng)元件(miRNA response element,MRE)的序列并與其結(jié)合，然后miRISC發(fā)揮功能[16]。MRE通常位于動(dòng)物的3′ UTR，位于植物mRNA的編碼區(qū)[19]。miRNA的作用通常是降低靶蛋白的表達(dá)，以及降解mRNA(圖1)。此外，miRNA還具有誘導(dǎo)脫帽、誘導(dǎo)去烯基化、改變Cap蛋白結(jié)合、減少核糖體占有率以及從翻譯機(jī)制分離mRNA等作用[20]。研究表明，這些機(jī)制大多數(shù)是通過miRNA降低靶mRNA的表達(dá)水平來(lái)介導(dǎo)的[21]。

miRNA gene：微小RNA基因 microRNA gene；RNA Pol Ⅱ：RNA聚合酶Ⅱ RNA polymerase Ⅱ；pri-miRNA：初級(jí)miRNA primary miRNA；expotin 5:通道蛋白5；Ran-GTP：GTP酶Ran GTPase Ran；pre-miRNA:前體miRNA previous miRNA；TRBP：TAR RNA結(jié)合蛋白TAR RNA binding protein；guide strand：引導(dǎo)鏈；passenger strand：乘客鏈；miRISC：miRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物 miRNA induced silencing complex；Argonaute：AGO蛋白 AGO protein；degradation of passenger strand：乘客鏈降解；GW182：182 kDa的甘氨酸色氨酸蛋白 182 kDa glycine-tryptophan protein；ribosome：核糖體；mRNA：miRNA靶向的信使RNA miRNA targeted messenger RNA；inhibit translation of target gene：抑制靶基因的翻譯；degradation of target gene：靶基因的降解。

關(guān)于miRISC的組成也有相關(guān)的研究。AGO蛋白(Argonaute)與miRNA直接相關(guān)，是miRISC的核心成分[22]。哺乳動(dòng)物細(xì)胞中含有AGO蛋白的miRISC遇到與miRNA幾乎完全互補(bǔ)的miRNA MRE時(shí)，完全互補(bǔ)的miRNA MRE會(huì)促進(jìn)AGO蛋白2核酸內(nèi)切酶的活性和靶向mRNA分子的切割，從而導(dǎo)致這些mRNA被內(nèi)切并降解[8,23-24]。此外，182 kDa的甘氨酸色氨酸蛋白(GW182)也是miRISC的核心成分，與AGO蛋白相互作用并在其下游發(fā)揮作用[25]。研究表明，同一個(gè)miRNA可以調(diào)控多個(gè)甚至數(shù)百個(gè)靶基因，而多個(gè)miRNA也可以共同調(diào)控同一個(gè)靶基因，從而形成了一個(gè)復(fù)雜的miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[19]。大多數(shù)研究中，miRNA是通過與靶mRNA的3′ UTR處的MRE結(jié)合；但是也有研究表明，miRNA也可以與5′ UTR處的MRE結(jié)合，通過mRNA特異性機(jī)制促進(jìn)或抑制翻譯[26-27]。

2 母豬胎盤的發(fā)育

胎盤是哺乳動(dòng)物胎兒和母體進(jìn)行物質(zhì)交換的特殊結(jié)構(gòu)，由胎盤的母體部分和胎兒部分所組成。按照母體與胎兒的物質(zhì)交換方式，胎盤可分為上皮絨毛膜型、結(jié)締絨毛膜型、內(nèi)皮絨毛膜型、血竇絨毛膜型和血竇內(nèi)皮型[28]。母豬胎盤屬于上皮絨毛膜型胎盤，其有一個(gè)絨毛狀的表面，緊密排列的微絨毛覆蓋整個(gè)絨毛膜表面。研究表明，豬胎盤的結(jié)構(gòu)和功能不僅對(duì)胎兒的生長(zhǎng)和存活產(chǎn)生影響，也可能對(duì)產(chǎn)仔數(shù)產(chǎn)生影響[29]。由此可見，胎盤的發(fā)育對(duì)早期胚胎的發(fā)育及其繁殖性能是至關(guān)重要的。有研究表明，母豬胎盤在妊娠13～14 d的時(shí)候開始形成，此時(shí)胚胎滋養(yǎng)層上皮逐漸與母體的子宮內(nèi)膜上皮相互黏附，形成滋養(yǎng)層-子宮內(nèi)膜雙上皮細(xì)胞層[30]；在妊娠的27～32 d，胎盤已基本形成，并開始出現(xiàn)大量的微血管[31]。在妊娠的30～60 d，發(fā)生絨毛膜和尿囊的融合；在妊娠的60～70 d，胎盤在重量、表面積和胎盤乳暈數(shù)量方面已經(jīng)完全發(fā)育，從而為胎兒妊娠后期的生長(zhǎng)發(fā)育做好準(zhǔn)備[32]。

3 miRNA對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞的調(diào)控

3.1 miRNA對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖和分化的作用

3.1.1 附著過程

在母豬妊娠過程中，胚胎的附植期大約發(fā)生在妊娠12～30 d，胚胎附植的失敗是胎兒早期死亡的原因之一，會(huì)對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)生很大的影響。在附植過程中，需要滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移、增殖等過程，從而才能使得胚胎與子宮建立組織及生理聯(lián)系。研究發(fā)現(xiàn)，miR-26a-5p可通過抑制SMAD家族成員1(SMAD family member 1，SMAD1)信號(hào)分子刺激豬妊娠期間滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖，并減弱其與層黏連蛋白之間的親和力，而miR-125b-5可以通過抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)、白細(xì)胞介素-6受體(interleukin-6 receptor,IL-6R)和白血病抑制因子受體(leukemia inhibitory factor receptor,LIFR)基因表達(dá)降低豬滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移，進(jìn)而調(diào)控胎兒附植過程(表1)[33]。此外，Hu等[34]對(duì)母豬胎兒附植時(shí)期子宮腔液的研究發(fā)現(xiàn)，子宮腔液中富含的外囊泡中miRNA不僅調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移和增殖，而且還參與免疫反應(yīng)相關(guān)的通路。這表明miRNA通過調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞的生理活動(dòng)，以及調(diào)控免疫反應(yīng)以維持正常妊娠。在人上的研究也發(fā)現(xiàn)，miR-149通過靶向調(diào)控人子宮內(nèi)膜和基質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的多腺苷二磷酸核糖聚合酶2[poly (ADP-ribose) polymerase 2，PARP2]，從而調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞對(duì)子宮內(nèi)膜的貼附過程，進(jìn)而影響胎兒的附著[35]。綜上所述，miRNA可以通過調(diào)節(jié)胎兒附植期間滋養(yǎng)層的增殖和遷移以及調(diào)控免疫反應(yīng)，從而促進(jìn)胎兒與母體子宮內(nèi)膜建立生理聯(lián)系，從而有利于胎兒的附植。

表1 miRNA作用靶基因及其作用

續(xù)表1miRNA種類miRNA species靶基因Target genes作用Effects參考文獻(xiàn)ReferencesmiR-21PTEN促進(jìn)人內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和血管的形成[61]miR-221Angpl2抑制豬胎盤血管的生成[62]miR-21PDCD4維持小鼠造血干細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)和功能[65]miR-646VEGF-A抑制人內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖、分化和遷移[66]

3.1.2 胎盤發(fā)育過程

滋養(yǎng)層細(xì)胞不僅參與胎兒附著過程，也參與胎盤的發(fā)育。母豬妊娠過程中，胎兒滋養(yǎng)層細(xì)胞與母體子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞相互黏附，形成的雙上皮細(xì)胞層稱為胎盤褶皺[30]。隨著妊娠的進(jìn)行，褶皺的面積以及深度在不斷加大加深，從而增加子宮內(nèi)膜和胎盤絨毛膜上皮之間的接觸表面積，以擴(kuò)大母體與胎兒營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)交換的面積[29]，更有利于胎兒的發(fā)育。研究發(fā)現(xiàn)，豬胎盤的褶皺在妊娠25～30 d時(shí)開始形成，滋養(yǎng)層細(xì)胞表現(xiàn)出很高的增殖活性；在妊娠50 d左右時(shí)，已基本形成規(guī)則的褶皺，此時(shí)滋養(yǎng)層細(xì)胞處于較低的增殖活性[36-37]。Vallet等[37]提出，胎盤褶皺的發(fā)育是由于滋養(yǎng)層細(xì)胞向基質(zhì)的遷移。由此可見，滋養(yǎng)層細(xì)胞是豬胎盤褶皺發(fā)育的關(guān)鍵。劉睿澤[38]對(duì)比妊娠26和50 d即胎盤褶皺形成階段發(fā)現(xiàn)miR-205、miR-24等13個(gè)差異表達(dá)的miRNA，其中miR-27a、miR-30a等9個(gè)miRNA在妊娠26 d時(shí)的表達(dá)水平顯著低于妊娠50 d時(shí)的表達(dá)水平，而miR-122、miR-17等4個(gè)miRNA在妊娠26 d的表達(dá)水平顯著高于妊娠50 d時(shí)的表達(dá)水平，并且發(fā)現(xiàn)這些差異表達(dá)的miRNA的靶基因主要參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞黏附和組織發(fā)育等與胎盤褶皺形成和發(fā)育相關(guān)的通路中。與此同時(shí)，對(duì)豬妊娠30和90 d胎盤的miRNA研究發(fā)現(xiàn)，差異表達(dá)的miR-125b、miR-106a等7個(gè)miRNA的靶基因主要參與黏附連接、Wnt以及絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)等信號(hào)通路，這些通路已被證明在滋養(yǎng)層細(xì)胞分化和血管發(fā)育中具有重要作用[39]。綜上所述，這說明在豬妊娠時(shí)miRNA的表達(dá)水平隨著母豬胎盤發(fā)育的進(jìn)行而變化，進(jìn)而在不同妊娠階段調(diào)控其相關(guān)通路中相應(yīng)的靶基因蛋白，從而對(duì)胎盤的發(fā)育起到一定的調(diào)控作用。

細(xì)胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,CDC42)是小G蛋白R(shí)ho亞家族的一員，在細(xì)胞間黏附和細(xì)胞遷移過程中起重要作用[40]。Liu等[41]研究發(fā)現(xiàn)，miR-18a通過調(diào)節(jié)CDC42的表達(dá)水平從而調(diào)控豬胎盤褶皺的發(fā)育，并且miR-18a與CDC42的結(jié)合位點(diǎn)與母豬產(chǎn)仔數(shù)有關(guān)。此外，也有研究表明，當(dāng)miR-18a表達(dá)量下降時(shí)，會(huì)導(dǎo)致人類滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲減少，細(xì)胞凋亡增加[42]。由此可以得出miR-18a不僅可以通過調(diào)控CDC42的表達(dá)水平參與胎盤發(fā)育，也可以通過調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞的生理活動(dòng)進(jìn)而對(duì)胎盤發(fā)育產(chǎn)生影響。滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化是胎盤發(fā)育的關(guān)鍵。有研究表明，miR-290簇可以通過抑制細(xì)胞周期抑制因子P21、P27和WEE1促進(jìn)小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞的增殖；而miR-322簇通過抑制細(xì)胞周期蛋白E1(cyclin E1)、細(xì)胞分裂周期蛋白25B(cell division cycle 25B,CDC25B)，從而減少滋養(yǎng)層干細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其分化[43]。胎盤表達(dá)轉(zhuǎn)錄本1(placenta-expressed transcript 1，PLET1)基因是豬胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞獨(dú)特的標(biāo)記物，在豬胎盤中，僅限于在滋養(yǎng)層細(xì)胞中表達(dá)[44]。研究證實(shí)，過度表達(dá)的PLET1還可以促進(jìn)滋養(yǎng)層干細(xì)胞向滋養(yǎng)層巨細(xì)胞的分化，而抑制PLET1可以誘導(dǎo)合胞體滋養(yǎng)層的形成[45]。研究表明，miR-365-3p通過調(diào)節(jié)豬胎盤中PLET1基因的表達(dá)水平，從而調(diào)控豬滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化[44]。綜上所述，miRNA可以通過調(diào)控胎盤發(fā)育中一些關(guān)鍵基因的表達(dá)水平，進(jìn)而調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖分化等生理過程，進(jìn)而調(diào)控胎盤發(fā)育。

3.2 miRNA對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌生長(zhǎng)因子的作用

妊娠早期，胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞可以分泌多種與胎盤發(fā)育相關(guān)的生長(zhǎng)因子，如表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-like growth factor,IGF)和胎盤生長(zhǎng)因子(placental growth factor,PLGF)等[28,46]。滋養(yǎng)層分泌的生長(zhǎng)因子對(duì)維持妊娠、調(diào)控胎兒發(fā)育以及胎盤發(fā)育是極其重要的。研究表明，EGF可以促進(jìn)豬滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞的增殖、遷移，從而促進(jìn)豬胚胎在子宮的附植[47]。Malik等[48]研究證明，過表達(dá)的miR-92a-1-5p會(huì)抑制EGF刺激人滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲作用。IGF-2可以促進(jìn)滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖，促進(jìn)胎盤的發(fā)育和功能[49]。研究表明，miR-141-3p和miR-200a-3p可以下調(diào)小鼠胎盤中IGF-2的表達(dá)和抑制小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞中Wnt的激活，從而抑制胎盤的發(fā)育[50]。此外，子癇前期的患者胎盤中miR-124-3p表達(dá)量顯著高于正常孕婦，且miR-124-3p可以通過靶向調(diào)控PLGF導(dǎo)致滋養(yǎng)層細(xì)胞的焦亡、遷移和侵襲[51]。目前關(guān)于miRNA對(duì)豬滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌因子調(diào)控的研究很少，但是通過小鼠、人上的研究可以看出，miRNA可以通過調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌EGF、IGF和PLGF等生長(zhǎng)因子，從而調(diào)控胎盤的發(fā)育。

4 miRNA對(duì)胎盤血管發(fā)育的調(diào)控

胎盤是一種富含血管的器官，其血管的發(fā)育可以直接影響到子宮和臍帶的血流速度，因此血管的發(fā)育是保證胎盤功能和胎兒發(fā)育的關(guān)鍵[52]。胎盤血管生成異常會(huì)導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩[53]、流產(chǎn)[54]和子癇[55]等疾病。因此胎盤血管的生成會(huì)直接影響到胎兒妊娠期間的發(fā)育以及出生后的生長(zhǎng)。

4.1 miRNA對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的調(diào)控

VEGF是血管發(fā)育中重要的調(diào)節(jié)因子。研究表明，胎盤中VEGFmRNA水平與胎盤子宮內(nèi)膜血管化呈正相關(guān)[56]。Guimar?es等[57]研究證明，豬胎盤血管在妊娠80 d時(shí)發(fā)育完善，之后血管直徑會(huì)有增加，并且VEGF與胎盤效率、血管化和血管通透性相關(guān)，可以刺激養(yǎng)分從母體向胎兒的轉(zhuǎn)移。此外，低出生重仔豬的胎盤中VEGF-A的蛋白水平顯著下降[58]。對(duì)妊娠小鼠研究發(fā)現(xiàn)，miR-16水平會(huì)影響胎盤和胚胎的重量、子代數(shù)量和微血管密度，并導(dǎo)致反復(fù)流產(chǎn)，并且miR-16表達(dá)上調(diào)會(huì)抑制VEGF的表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致胎盤血管發(fā)育受阻[54]。也有研究發(fā)現(xiàn)，子癇患者胎盤中的miR-150-5p表達(dá)水平顯著高于正常孕婦，且抑制miR-150-5p可以上調(diào)VEGF的表達(dá)水平[59]，因此可以推測(cè)子癇患者miR-150-5p可以抑制胎盤血管發(fā)育，從而影響妊娠期胎兒的發(fā)育。STAT3是VEGF-A重要的調(diào)控因子，STAT3可以轉(zhuǎn)錄激活VEGF-A以促進(jìn)血管生成[60]。Chen等[61]研究表明，血管生成素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)可以通過激活STAT3上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞中miR-21的表達(dá)，miR-21可通過直接靶向抑制磷酸酯酶與張力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)表達(dá)，從而增加內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和血管的形成。除了VEGF外，miRNA對(duì)其他血管生成因子也有調(diào)控作用。肥胖母豬脂肪組織分泌的外泌體中的miR-221通過調(diào)控血管生成素樣蛋白2(angiopoietin-like protein 2,Angpl2)來(lái)抑制血管的生成[62]。這說明肥胖母豬可能會(huì)損害胎盤的血管發(fā)育從而導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩和仔豬初生重較低。由此可見，胎盤血管的發(fā)育與胎兒的發(fā)育是息息相關(guān)的，miRNA通過調(diào)控VEGF的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控妊娠期胎盤血管的發(fā)育。

4.2 miRNA對(duì)造血干細(xì)胞的調(diào)控

胎盤血管的生成需要造血干細(xì)胞的參與，造血干細(xì)胞會(huì)分化成血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血管母細(xì)胞，從而參與血管的生成[63]。Crisafulli等[64]研究證實(shí)，miR-127-3p可以限制造血干細(xì)胞的分化，進(jìn)而維持造血干細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)。此外也有研究也表明，miR-21通過調(diào)節(jié)程序性細(xì)胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)介導(dǎo)的核因子-κB(NF-κB)途徑參與維持造血干細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)和功能[65]。妊娠過程中，造血干細(xì)胞穩(wěn)態(tài)一旦被破壞，會(huì)直接影響到胎盤血管的發(fā)育進(jìn)而會(huì)影響到胎兒對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。對(duì)子癇前期患者研究發(fā)現(xiàn)，miR-646通過靶向調(diào)控VEGF-A抑制內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖、分化和遷移，進(jìn)而抑制血管生成[66]，這說明miRNA表達(dá)異常會(huì)直接影響到血管生成，這可能也是子癇患者影響胎兒發(fā)育的重要原因。

5 小結(jié)與展望

綜上所述，miRNA作為一類小分子的核苷酸，通過調(diào)控特定靶基因蛋白的表達(dá)參與母豬妊娠期滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、分化和遷移過程，以及通過調(diào)控滋養(yǎng)層分泌的各種生長(zhǎng)因子和胎盤血管的形成和發(fā)育等生理活動(dòng)，從而調(diào)節(jié)妊娠期母豬胎盤的發(fā)育。母豬胎盤的發(fā)育對(duì)于胎兒發(fā)育和母豬繁殖能力的影響是直接與實(shí)際生產(chǎn)相關(guān)的，miRNA水平可以間接反映母豬的生理狀態(tài)。但是現(xiàn)有研究對(duì)miRNA在母豬妊娠不同階段、不同營(yíng)養(yǎng)水平和不同胎次等方面的研究較少。未來(lái)可以通過研究不同條件下miRNA的水平，進(jìn)而通過營(yíng)養(yǎng)或分子手段改善母豬不同時(shí)期的miRNA水平，使其達(dá)到更好的生理狀態(tài)，從而更好的挖掘母豬的繁殖潛力，提高生產(chǎn)性能，產(chǎn)生更高的經(jīng)濟(jì)效益。