馬圓線蟲病診斷與防治的研究進展

李 燁

（ 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)分院，黑龍江 齊齊哈爾 161000 ）

馬屬動物的消化道線蟲種類繁多，多達83種。馬屬動物主要的消化道線蟲為馬圓線蟲，共64種，分別隸屬于圓線科（Strongylidae）的盅口亞科（Cyathostominae）和圓線亞科（Strongylinae）的29 個屬[1]。馬圓線蟲呈世界范圍內(nèi)分布，早在十八世紀被首次發(fā)現(xiàn)，但是由于其種類繁多，分類方式一直存在爭議。2008 年，Lichtenfels 等[2]針對存在爭議的馬圓線蟲分類進行討論，總結(jié)歸納并提出了較全面的分類系統(tǒng)，結(jié)束了馬圓線蟲分類混亂，此分類系統(tǒng)一直沿用至今。普通圓形線蟲、無齒圓形線蟲、馬圓形線蟲是臨床最常見的大型圓線蟲，成蟲寄生于大腸，宿主通常表現(xiàn)為消瘦貧血、腹痛腹瀉，圓線蟲寄生數(shù)量較大可導致宿主出現(xiàn)水腫、排出帶有蟲體且氣味惡臭的糞便等情況，病情嚴重時可使宿主死亡。此外，馬圓線蟲幼蟲移行還會導致血栓性疝痛，病畜煩躁打滾、腹圍增大、排出血便。常見的小型圓線蟲包括了三齒屬線蟲、噴口屬線蟲和食道齒屬線蟲，此類圓線蟲致病性較低，主要損害宿主腸黏膜，導致病畜消瘦、腹瀉，有時伴有腸絞痛、發(fā)熱，病情嚴重也可導致死亡[3-4]。馬圓線蟲大量寄生可對病畜生命造成威脅，對我國畜牧業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。因此，準確診斷馬圓線蟲病對于此病的治療和防控十分重要。本文綜述了馬圓線蟲的國內(nèi)外流行情況及近年來診斷、防治的研究進展，以期為相關(guān)疾病的臨床防治提供參考。

1 馬圓線蟲病國內(nèi)外流行情況

馬圓線蟲在我國各地均有流行，多發(fā)生于新疆地區(qū)，其他地區(qū)有少數(shù)報道。張鵬舉等[5]對吉林省2個馬場的寄生蟲感染情況進行了調(diào)查，結(jié)果顯示馬圓線蟲在各個年齡段均有分布，尤其是3歲以內(nèi)的幼齡馬感染率最高，可高達98.6%，且感染率和年齡呈反比。梁素聯(lián)等[6]對廣西壯族自治區(qū)田東縣的散養(yǎng)馬匹進行了剖檢，發(fā)現(xiàn)了大量的馬圓線蟲，確診馬匹死亡原因為圓線蟲感染。吳樹清[7]對內(nèi)蒙古地區(qū)馬術(shù)隊馬匹的寄生蟲感染情況進行了調(diào)查，其中馬圓線蟲的感染率為86.18%。賽迪拉木等[8]對新疆地區(qū)的65匹普氏野馬進行了消化道寄生蟲的檢查，發(fā)現(xiàn)馬圓線蟲的總感染率為34%，幼齡馬匹感染率為38%，成年馬匹感染率為32%，發(fā)現(xiàn)成年馬匹比幼齡馬匹感染率低，可能與幼齡馬匹的免疫功能較弱有關(guān)系。沈青義等[9]對新疆某馬場的馬體內(nèi)寄生蟲感染情況進行了調(diào)查，結(jié)果表明馬圓線蟲的感染率為80%，雖感染率較高，但感染強度并不強。陳暉等[10]對新疆地區(qū)伊犁馬的寄生蟲感染情況進行調(diào)查，1 周齡馬匹的圓線蟲感染率為98.11%，2 周齡馬匹感染率為90.52%，3 周齡馬匹感染率為88.18%，其感染率和年齡的關(guān)系亦成反比。

馬圓線蟲病在世界范圍內(nèi)也均有流行。Sazmand等[1]對伊朗地區(qū)馬圓線蟲病情況進行了概括，馬、驢、騾的圓線蟲病感染率分別為4.4%～69.2%、65.4%～96.4%、80.0%。Alemayehu等[11]對埃塞俄比亞地區(qū)的384匹馬的圓線蟲病進行了調(diào)查，圓線蟲病的總感染率為67.19%。Matthee等[12]對南非地區(qū)驢的寄生蟲感染情況進行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)普通圓形線蟲、無齒圓形線蟲和馬圓形線蟲，其中普通圓形線蟲的數(shù)量最多。Studzińska等[13]對波蘭地區(qū)某屠宰場的725 匹馬的圓線蟲感染情況進行了調(diào)查，其中普通圓形線蟲感染率為22.8%，無齒圓形線蟲感染率為18.3%，馬圓形線蟲感染率為1.7%。

2 馬圓線蟲病的診斷

目前臨床診斷和感染情況調(diào)查多采用飽和鹽水漂浮法對病畜糞便進行檢查，顯微鏡下圓線蟲卵呈淺灰褐色的橢圓形，卵殼比較薄，表面光滑，其內(nèi)包含數(shù)量不等的卵細胞；糞檢發(fā)現(xiàn)圓線蟲的蟲卵即可確認病畜患有圓線蟲病。賽迪拉木·托合提[14]采用飽和鹽水法和蟲卵計數(shù)法對新疆65 匹普氏野馬的糞樣進行了鏡檢，馬圓線蟲感染率可達86.6%。蘇娃等[15]采用飽和鹽水漂浮法和蟲卵計數(shù)法對伊犁馬的消化道線蟲進行了調(diào)查，馬圓線蟲感染率為80%。Harvey 等[16]采用飽和鹽水漂浮法和蟲卵計數(shù)法對澳大利亞的6個野馬種群的糞樣進行了分析，結(jié)果顯示圓線蟲感染率為96.7%。

此外，病畜死亡后也可以采取剖檢法進行檢測，在病畜的腸腔中有大量蟲體或者腸道壁上有大量幼蟲結(jié)節(jié)可確診為圓線蟲感染。張偉等[17]對山東聊城市某屠宰場80 頭驢的腸道進行剖檢，發(fā)現(xiàn)馬圓線蟲的感染率為21.3%。張偉信等[18]采用系統(tǒng)剖檢法對新疆塔里木盆地驢進行檢查，發(fā)現(xiàn)9種圓線亞科蟲體，數(shù)量最多的是普通圓形線蟲，感染率為86.5%。Gonzales-Viera 等[19]對7月齡自然死亡的小母馬進行了剖檢，腹腔大面積出血，腸道漿膜表面可見大量線蟲幼蟲，經(jīng)鑒定為無齒圓形線蟲感染造成的死亡。目前常用的圓線蟲鑒定方法為形態(tài)學鑒定，馬圓線蟲長度約1～8 mm，蟲體呈較對稱的紡錘形，其口囊、食道、交合傘等特征均可作為鑒定圓線蟲的依據(jù)。高遠[3]對5種盅口亞科的圓線蟲進行了形態(tài)學鑒定，對蟲體的長度、口囊形態(tài)、內(nèi)葉冠和外葉冠的數(shù)量、雄蟲尾部交合傘等特征進行了描述，為鑒定不同種圓線蟲提供了參考資料。

然而，傳統(tǒng)的形態(tài)學方法存在一定弊端，對鑒定者的專業(yè)知識要求較高，且鑒定形態(tài)相似的蟲種容易造成誤判。而分子生物學鑒定可解決其弊端，具有耗時短、準確率高等優(yōu)勢，廣泛地應用于寄生蟲的蟲種鑒定。常見的分子生物學方法鑒定寄生蟲有很多，如:PCR技術(shù)、多重PCR技術(shù)、熒光定量PCR 技術(shù)、同工酶技術(shù)、隨機擴增多態(tài)性DNA（RAPD）等。張淑熠[20]通過PCR 方法對35 種圓線蟲的Cox1和Nad1序列進行擴增，鑒定蟲種并探究其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。El-Gameel等[21]使用掃描電鏡觀察了普通圓形線蟲，并對其ITS2 序列進行擴增和鑒定蟲種。Jürgenschellert等[22]對484匹馬糞便樣本進行ELISA檢查，樣本陽性率為66.7%，從陽性馬匹獲得成蟲后進行PCR，發(fā)現(xiàn)有普通圓形線蟲、無齒圓形線蟲、馬圓形線蟲和Strongylus asini。Halvarsson 等[23]對普通圓形線蟲和無齒圓線蟲進行形態(tài)學鑒定，后采用PCR 方法對其ITS2 序列進行擴增，進行了一代測序和高通量測序，發(fā)現(xiàn)使用高通量測序可以更好地分析ITS2 的變化。在分子生物學鑒定方法中，PCR檢測方法具有高特異性、高敏感性，可準確地鑒定蟲種甚至隱蔽種、亞種等，是使用最廣泛的一種鑒定方法。ELISA 檢測法操作相對比較簡單，但是費用較高，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，不適合生產(chǎn)中使用。

3 馬圓線蟲病的防治

馬匹要定期進行驅(qū)蟲，一般6～8周進行一次治療為宜。有文獻表示可以通過使用驅(qū)蟲藥驅(qū)除蟲卵和L3期幼蟲[24]。治療馬圓線蟲的藥物包括四氫嘧啶噻啶類、苯并咪唑類、大環(huán)內(nèi)酯類。雙羥萘酸噻嘧啶片為四氫嘧啶噻啶類抗線蟲藥，其作用機制是對敏感蟲體產(chǎn)生的神經(jīng)肌肉阻斷作用，使蟲體麻痹。此藥物對馬圓形線蟲、普通圓形線蟲等具有高效作用，對無齒圓形線蟲、小型圓形線蟲等效果較差。阿苯達唑片為苯并咪唑類抗線蟲藥，具有廣譜驅(qū)蟲作用，線蟲對其敏感，作用機制是與線蟲的微管蛋白結(jié)合發(fā)揮作用。本品不但對成蟲作用強，對未成熟蟲體和幼蟲也有較強作用，還具有殺蟲卵作用。奧芬達唑片為苯并咪唑類抗線蟲藥，作用機制與阿苯達唑相似，抗蟲譜不如阿苯達唑廣，但是作用效果略強。伊維菌素為大環(huán)內(nèi)酯類藥物，主要對體內(nèi)線蟲和體表節(jié)肢動物具有作用，作用機制是干擾神經(jīng)肌肉間的信號傳遞，使蟲體松弛麻痹，導致蟲體死亡或被排出體外。

使用藥物需根據(jù)馬圓線蟲的流行病學以及當?shù)匕l(fā)病情況、耐藥性進行選擇。四氫嘧啶噻啶類對包囊中幼蟲作用不大，對成蟲的效果較好，苯并咪唑類對成蟲或者幼蟲階段均有作用。有研究表明，伊維菌素不能驅(qū)除L3 期和L4期幼蟲，但對圓線蟲成蟲的驅(qū)蟲效果較好[25]。盅口線蟲對四氫嘧啶噻啶類和苯并咪唑類藥物會呈現(xiàn)不同程度的抗藥性，可采用大環(huán)內(nèi)酯類藥物進行治療，此類藥物對盅口線蟲的二次感染依然有效。Tavassoli 等[26]研究了分布于伊朗的兩種本地植物阿魏和大蒜提取物對圓線蟲幼蟲的體外抗寄生蟲作用，結(jié)果表明兩種植物提取物均對其具有殺蟲作用。Apolinário 等[27]研究了芬苯達唑、伊維菌素和阿維菌素三種藥物對巴西東南部24個馬場的驅(qū)蟲效果，結(jié)果顯示伊維菌素和阿維菌素對17個馬場有效，芬苯達唑?qū)?1個馬場有效果。Vera等[28]評價了芬苯達唑、伊維菌素和莫西菌素對巴西馬群的療效，結(jié)果顯示馬群對芬苯達唑有耐藥性，伊維菌素和莫西菌素具有較好的療效。Butler等[29]研究了雙羥萘酸噻嘧啶和伊維菌素對加拿大的馬場圓線蟲的治療效果，通過糞卵計數(shù)法分析顯示治療后蟲卵數(shù)可降低10%。D?r?bu?等[30]研究了羅馬尼亞馬場的18匹馬對苯并咪唑的耐藥性，結(jié)果顯示有一匹馬對苯并咪唑具有耐藥性。此外，制定科學的管理制度，加強養(yǎng)飼養(yǎng)管理，注意養(yǎng)殖場衛(wèi)生，按時清掃糞便、定期消毒、科學放牧等也有助于預防馬圓線蟲感染。

4 結(jié)論

馬圓線蟲病是一種常見的馬屬動物寄生蟲病。馬圓線蟲種類繁多，數(shù)量龐大，感染強度最高可達上萬條，大量寄生可導致腸絞痛和腸梗阻，嚴重危害了馬屬動物的健康，對畜牧業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。由于不同種類的圓線蟲抗藥性不一樣，所以不可濫用驅(qū)蟲藥物進行預防和治療，需要根據(jù)當?shù)伛R圓線蟲的流行病學情況，制定科學合理的綜合防控方案。