藤茶的藥理作用和安全性研究新進(jìn)展 Δ

趙春草，曾佳 （上海市生物醫(yī)藥技術(shù)研究院/國家衛(wèi)生健康委員會計劃生育藥具重點(diǎn)實驗室/上海生殖健康藥具工程技術(shù)研究中心，上海 200032）

藤茶是葡萄科蛇葡萄屬植物顯齒蛇葡萄Ampelop‐sis grossedentata（Hand.-Mazz.）W.T.Wang 的干燥嫩枝葉，也稱為托茶、甜茶藤、毛燕梅等，在我國作為一種傳統(tǒng)的茶飲品已應(yīng)用了幾個世紀(jì)[1]。其主要分布在湖北、湖南、廣西、貴州、重慶、江西等地，其中湖北、湖南兩省是其主要產(chǎn)地[2]。藤茶的活性成分包括黃酮、多酚、多糖和微量元素等，其中黃酮類化合物是其最主要的活性成分，尤以二氫楊梅素（dihydromyricetin，DMY）的藥理作用最為明確。因此，近年來，學(xué)者們不斷開展對藤茶藥理作用的研究。

為了總結(jié)藤茶的藥理作用研究新進(jìn)展，筆者以“藤茶”“vine tea”為關(guān)鍵詞，在中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)、PubMed、Web of Science、大為專利網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫檢索2016－2022年發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn)，按人體系統(tǒng)（主要包括消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等）分類進(jìn)行綜述，并首次對該藥的安全性進(jìn)行概括，以期為今后藤茶的深入研發(fā)和臨床應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 藤茶治療不同系統(tǒng)疾病的藥理作用

1.1 治療消化系統(tǒng)疾病

藤茶對消化系統(tǒng)疾病的作用主要是對肝臟的保護(hù)作用，包括對小鼠肝纖維化、四氯化碳（carbon tetrachlo‐ride，CCl4）致急性肝損傷、酒精性肝損傷及免疫性肝損傷均呈現(xiàn)改善作用，其機(jī)制可能與增加肝組織抗氧化酶活性、降低血清轉(zhuǎn)氨酶和脂質(zhì)過氧化水平等有關(guān)。此外，藤茶還能改善腸道菌群的豐度和多樣性，從而改善腸道菌群失調(diào)。

1.1.1 治療肝損傷 張文濤等[3]探討了藤茶總黃酮（to‐tal flavonoid from A. grossedentata，AGTF）抗小鼠肝纖維化的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)AGTF能通過抑制肝纖維化小鼠肝組織中轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）的過表達(dá)，從而抑制肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cells，HSCs）的激活，進(jìn)而阻斷肝纖維化的發(fā)展，使肝組織炎癥、膠原纖維增生情況明顯減輕。同時，該團(tuán)隊也研究了AGTF對CCl4致急性肝損傷的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)AGTF能降低CCl4致急性肝損傷食蟹猴血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的含量，提示其具有一定的保肝降酶作用[4]。Xie等[5]發(fā)現(xiàn)藤茶多酚可降低血清中膽固醇和三酰甘油水平，減少肝臟中的脂滴積累，同時提高固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1（sterol regulatory element-binding pro‐tein-1，SREBP-1）和脂肪酸合酶（fatty acid synthase，F(xiàn)AS）的水平，從而抑制肝臟脂肪生成，達(dá)到預(yù)防非酒精性脂肪肝的目的，而藤茶多酚對腺苷酸活化蛋白激酶-肝X受體α信號的激活可能是其潛在機(jī)制。另有研究表明，藤茶對免疫性肝損傷的保護(hù)功能，可能是由于其所含的DMY減少了自由基引起的氧化作用[6―7]。

1.1.2 改善腸道菌群失調(diào) 腸道微生物具有多種代謝體系，能夠調(diào)節(jié)藥物的最終代謝途徑。近年來，腸道菌群的調(diào)控引起了研究人員的關(guān)注。有學(xué)者研究了藤茶中DMY和腸道微生物群的相互作用，通過16S rRNA焦磷酸測序的方法考察了DMY對腸道菌群組成的長期影響，發(fā)現(xiàn)DMY能顯著改善腸道菌群的豐度和多樣性，進(jìn)而調(diào)節(jié)腸道菌群組成[8]。

1.2 治療內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病

藤茶在高血糖、高血脂、高尿酸血癥等內(nèi)分泌系統(tǒng)慢性疾病的治療上具有較大優(yōu)勢，其機(jī)制可能與藤茶的活性成分能調(diào)節(jié)肝臟中相關(guān)蛋白的活性有關(guān)。

1.2.1 治療高血糖和高血脂 天然產(chǎn)物和功能性食品具有補(bǔ)充治療2型糖尿?。╠iabetes mellitus type 2，T2DM）的巨大潛力。研究顯示，藤茶可作為膳食補(bǔ)充劑，改善T2DM大鼠相關(guān)癥狀，在預(yù)防和治療T2DM的過程中起輔助作用[9]。榮曉哲等[10]探索了AGTF在干預(yù)T2DM大鼠糖脂代謝、氧化應(yīng)激損傷過程中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt）信號通路所起的作用，發(fā)現(xiàn)其機(jī)制可能是通過減少T2DM糖脂代謝異常及氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生，發(fā)揮對T2DM的干預(yù)作用。有學(xué)者研究了藤茶提取物對糖尿病模型大鼠血糖的調(diào)控作用，發(fā)現(xiàn)藤茶及其黃酮類成分可調(diào)節(jié)與糖脂代謝密切相關(guān)的代謝產(chǎn)物水平，促進(jìn)糖原合成，從而顯著預(yù)防胰島素抵抗[11]。另有研究表明，藤茶提取物可顯著影響Akt信號通路中關(guān)鍵基因的表達(dá)，通過Akt/叉頭框蛋白O1/磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶2（Akt/forkhead box protein O1/phosphoenol‐pyruvate carboxykinase 2，Akt/Foxo 1/Pck2）信號通路抑制糖異生，并通過固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白/脂肪酸合成酶（sterol regulatory element binding protein-1c/fatty acid synthase，SREBP-1c/FASN）信號通路減少脂肪酸合成；在高脂飲食動物模型中，藤茶提取物對胰島素抵抗和代謝異常具有顯著的預(yù)防作用；對于T2DM和高脂血癥動物，藤茶提取物通過廣泛調(diào)節(jié)肝臟代謝紊亂、促進(jìn)糖原合成和糖酵解來改善癥狀[9，12]。還有報道稱，DMY可通過調(diào)節(jié)腸道微生物群來減少患者體質(zhì)量增加、脂肪積累及肝臟脂肪變性，從而改善葡萄糖和胰島素穩(wěn)態(tài)[13]。

1.2.2 治療高尿酸血癥 Shimizu等[14]對36例符合受試標(biāo)準(zhǔn)的健康日本男性餐后血清尿酸進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)給予藤茶提取物的18例男性的血清尿酸水平低于安慰劑組；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，藤茶提取物是通過抑制黃嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，XO）的體外活性并促進(jìn)尿酸排泄，從而抑制餐后血清尿酸的升高。

近年來，為了更深入研究藤茶降尿酸的作用機(jī)制，學(xué)者們建立了多種動物模型，并檢測了給藥后動物血清中多個相關(guān)指標(biāo)。李佳川等[15]采用腺嘌呤和乙胺丁醇建立大鼠高尿酸血癥腎功能損傷模型，檢測大鼠血清中XO、腺苷脫氨酶活性和尿酸、肌酐、尿素氮水平，發(fā)現(xiàn)AGTF能顯著降低上述指標(biāo)（P＜0.05或P＜0.01）。吳淑慧等[16]通過腹腔注射氧嗪酸鉀誘導(dǎo)建立高尿酸血癥小鼠模型，發(fā)現(xiàn)藤茶提取物對模型小鼠肝組織和腎組織有明顯的改善作用。馬二秀等[17]分別采用酵母、次黃嘌呤和氧嗪酸鉀鹽誘導(dǎo)建立3種高尿酸血癥動物模型，進(jìn)一步驗證了藤茶的降尿酸作用。

1.3 治療心血管系統(tǒng)疾病

近幾年的藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，藤茶的主要活性成分DMY具有清除體內(nèi)氧自由基、緩解血管緊張、抑制血管平滑肌細(xì)胞和心臟成纖維細(xì)胞增殖、保護(hù)心肌缺血再灌注損傷、抗心肌肥大等心血管保護(hù)作用，在心血管系統(tǒng)疾病治療方面具有潛在的應(yīng)用前景。

1.3.1 治療高血壓 有學(xué)者觀察了藤茶提取物對氯化鉀誘導(dǎo)的大鼠胸腔離體血管環(huán)的影響，發(fā)現(xiàn)藤茶提取物能緩解由氯化鉀刺激的血管緊張，顯現(xiàn)出良好的降壓效果[18]。趙喜蘭[19]測定并分析了原發(fā)性高血壓大鼠和正常大鼠灌胃AGTF后的血壓相關(guān)生化指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)AGTF對原發(fā)性高血壓大鼠的降血壓效果顯著而對正常大鼠的血壓沒有影響，其作用機(jī)制可能與腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的調(diào)節(jié)有關(guān)，提示藤茶可作為預(yù)防高血壓的天然藥物。

1.3.2 治療血管損傷 近年來的研究表明，頸動脈孤核受體（trios3，TR3）的表達(dá)對血管功能的調(diào)節(jié)具有較為重要的作用[20]，這將為心血管疾病的治療提供新策略。Huang等[21]研究了藤茶中DMY對結(jié)扎頸動脈血管內(nèi)膜形成的影響，發(fā)現(xiàn)DMY能夠顯著誘導(dǎo)TR3，恢復(fù)血管正常功能；此外，DMY在體外能顯著抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，在體內(nèi)能通過TR3誘導(dǎo)頸動脈結(jié)扎并形成新生內(nèi)膜，證實其是一種有效的TR3天然激活劑，可用于血管疾病的治療。另有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，DMY可減少血管緊張素誘導(dǎo)的大鼠心臟成纖維細(xì)胞的增殖，提示其可用于治療心血管疾病，但作用機(jī)制尚不清楚[22]。Luo等[23]認(rèn)為DMY對血管內(nèi)皮的保護(hù)機(jī)制主要是通過激活核因子E2相關(guān)因子2/血紅素加氧酶1（nuclear factor E2-related fac‐tor 2/heme oxygenase-1，Nrf2/HO-1）通路，改善人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷來實現(xiàn)的。

1.3.3 治療心肌缺血再灌注損傷 再灌注療法通常用于治療急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI），但臨床中經(jīng)常會出現(xiàn)快速啟動再灌注對心臟造成進(jìn)一步損傷的情況。有研究評估了藤茶中的DMY對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)其可通過PI3K/Akt和低氧誘導(dǎo)因子 1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）信號通路在體內(nèi)外防止缺血再灌注誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，該結(jié)果對拓寬臨床AMI的治療思路十分重要[24]。

1.3.4 治療心肌肥厚 持續(xù)的病理性心肌肥厚可導(dǎo)致充血性心力衰竭、心律失常和猝死，是許多心血管疾病的重要病因之一。藤茶中的DMY能夠調(diào)節(jié)去乙?；?（sirtuins 3，SIRT3）信號通路，從而發(fā)揮潛在的心肌保護(hù)作用[7]。Chen等[25]測定了SIRT3基因及其編碼蛋白在心肌中的表達(dá)，通過雙向方差分析表明，DMY對SIRT3基因及其編碼蛋白的表達(dá)及SIRT3的活性有顯著影響，從而證明了其對心肌肥厚的改善作用。

1.4 治療免疫系統(tǒng)疾病

免疫系統(tǒng)疾病是由身體抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而引起的自身組織損害，但目前其發(fā)病機(jī)制尚未明確。近幾年，已有較多藥理活性研究表明，AGTF和藤茶中的DMY具有抗炎、抗腫瘤等免疫作用。

1.4.1 抗炎 劉雯等[26]研究了藤茶不同極性部位與其體內(nèi)抗炎作用的譜效關(guān)系，并考察了藤茶不同極性部位對二甲苯誘導(dǎo)的耳腫脹炎癥模型小鼠的抗炎活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，藤茶70%乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、水提取物的抗炎活性均明顯（耳腫脹抑制率分別為54%、30%和30%）；進(jìn)一步的譜效關(guān)系分析顯示，藤茶對二甲苯致小鼠耳腫脹的抗炎作用是多組分協(xié)同作用的結(jié)果，且DMY可能是其抗炎作用的主要活性成分。另一項研究建立了脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7巨噬細(xì)胞體外炎癥模型和葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸體內(nèi)炎癥模型，探討藤茶水提物與DMY的抗炎功效和機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，藤茶水提物通過調(diào)控細(xì)胞絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號通路來抑制通路下游核轉(zhuǎn)錄因子活性，減少炎癥因子表達(dá)，而DMY通過Toll樣受體4-MAPK/H19信號通路來抑制轉(zhuǎn)錄因子活性，減少炎癥因子表達(dá)[27]。

1.4.2 抗腫瘤 目前已有較多學(xué)者研究了藤茶及其主要活性成分（如DMY）預(yù)防和抵抗腫瘤的作用，發(fā)現(xiàn)其對肝癌[28]、絨毛膜癌[29]、直腸癌[30]、肺癌[31]等體外腫瘤細(xì)胞的抑制效果顯著。其作用機(jī)制主要是抑制致癌物形成、促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡和抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移，作用的分子靶點(diǎn)主要是p53、Caspase-3、Bax、PI3K、Akt-1、Bcl-2、MRP-2以及活性氧（reactive oxygen species，ROS）等。

1.5 治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病

藤茶可以通過抑制兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶（catechol-O-methyltransferase，COMT）和保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元2種機(jī)制對帕金森病（Parkinson’s disease，PD）、阿爾茨海默病（Alzheimer disease，AD）等神經(jīng)系統(tǒng)疾病起輔助治療作用[32]。COMT是兒茶酚神經(jīng)遞質(zhì)和藥物代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，參與介導(dǎo)以兒茶酚為底物的藥物甲基化過程，抑制COMT活性可以有效緩解兒茶酚類藥物的首過效應(yīng)，進(jìn)而改善其藥代動力學(xué)行為[32]。有學(xué)者研究了藤茶對COMT的強(qiáng)抑制作用和對鄰苯二酚類藥物暴露的抑制潛能，發(fā)現(xiàn)藤茶中5種黃酮類化合物均對COMT表現(xiàn)出中等至強(qiáng)的抑制作用，半數(shù)抑制濃度（median inhibitory concentration，IC50）在 0.96～42.47 μmol/L 之間，其中楊梅素是抑制COMT的強(qiáng)效成分，IC50為2.33 μg/mL[33]。該發(fā)現(xiàn)對鄰苯二酚類藥物的暴露行為和半衰期具有指導(dǎo)意義，為藤茶對PD、AD等慢性退行性疾病的輔助治療作用提供了證據(jù)。

很多學(xué)者認(rèn)為PD是一種多巴胺能神經(jīng)元損傷性疾病[34―35]，而藤茶中的有效成分DMY能保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元，有望在PD治療中起重要作用。Ren等[36]探索了DMY在PD小鼠模型中的潛在治療價值，發(fā)現(xiàn)DMY能顯著減輕1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP）誘導(dǎo)的小鼠行為障礙和多巴胺能神經(jīng)元缺失；此外，DMY以劑量和時間依賴性方式增加了糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）的磷酸化，提示其可能與DMY誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元保護(hù)作用有關(guān)。

另有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，DMY還可以抑制D-半乳糖誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)海馬組織中自噬受損神經(jīng)元的修復(fù)，在AD的治療中起到保護(hù)神經(jīng)元的作用[37]。

2 藤茶的安全性

藤茶應(yīng)用歷史悠久，多年的臨床應(yīng)用經(jīng)驗已初步證實其具有較好的安全性，而現(xiàn)代毒性研究進(jìn)一步科學(xué)地闡明了其安全性。阮祥春等[38]將藤茶黃酮制成混懸液對小鼠進(jìn)行急性毒性實驗，當(dāng)灌胃劑量最高達(dá)到5 g/kg時，小鼠仍未產(chǎn)生明顯中毒反應(yīng)，證明藤茶黃酮安全性良好。鐘正賢等[39]研究了廣西產(chǎn)藤茶對大鼠的長期毒性，以高劑量1.5 g/kg灌胃給藥12周，結(jié)果表明，大鼠的主要臟器均未見與藥物毒性相關(guān)的明顯病變，證明廣西產(chǎn)藤茶毒性較小，臨床應(yīng)用安全。鐘禮云等[40]按照最高劑量22 g/kg對大鼠灌胃藤茶水提物90 d后，與正常對照組（以蒸餾水灌胃）相比，用藥組大鼠肝、腎、脾、胃腸等器官組織均未見實質(zhì)性病變，表明藤茶水提物較為安全。周防震等[41]研究了藤茶活性成分DMY和臨床常用化療藥物順鉑對人正常肝、腎細(xì)胞增殖的影響，發(fā)現(xiàn)順鉑對人胚腎細(xì)胞HEK-293和肝細(xì)胞L-02的IC50分別為7.4、7.7 μg/mL，而DMY對上述2種細(xì)胞的IC50分別為475.3、324.8 μg/mL，證明DMY對人正常肝、腎細(xì)胞的安全性較好。

3 總結(jié)與展望

藤茶對消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)等方面的疾病具有不同程度的預(yù)防與治療作用。其對非酒精性肝損傷的保護(hù)作用主要是通過抑制肝組織中TGF-β的過表達(dá)和激活腺苷酸活化蛋白激酶-肝X受體α信號等實現(xiàn)的；降血糖的作用主要是通過減少T2DM糖脂代謝異常及氧化應(yīng)激反應(yīng)和調(diào)節(jié)Akt信號通路中關(guān)鍵基因的表達(dá)等實現(xiàn)的；降血脂作用主要是通過改善能量相關(guān)代謝實現(xiàn)的；降尿酸的作用主要是通過抑制XO的體外活性實現(xiàn)的；對心血管疾病的治療主要是通過調(diào)節(jié)TR3表達(dá)、抑制SMC增殖和遷移、調(diào)節(jié)線粒體途徑從而保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞和改善內(nèi)皮功能障礙、抑制巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞形成等機(jī)制實現(xiàn)的[42]；抗炎作用主要是通過抑制MAPK通路下游核轉(zhuǎn)錄因子活性等實現(xiàn)的；抗腫瘤作用主要是通過抑制癌細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡實現(xiàn)的。

但筆者認(rèn)為，目前對藤茶的研究仍存在以下幾點(diǎn)問題：（1）迄今為止，對藤茶藥理作用研究較多的是其黃酮類化合物對心血管疾病和糖尿病等疾病的治療作用，但具體的作用機(jī)制尚不明確和完善。因此，亟待完善藤茶的藥理學(xué)活性研究和物質(zhì)基礎(chǔ)研究，對其作用機(jī)制進(jìn)行深入的探索。（2）藤茶在抗腫瘤方面顯示出較好的應(yīng)用前景，但相關(guān)藥理作用研究多處于細(xì)胞層面，臨床方面的試驗研究較少。因此，需進(jìn)一步開展臨床試驗研究，確定其是否以相同的分子機(jī)制抑制腫瘤。（3）DMY是一種黃酮類化合物，作為藤茶的主要活性成分，已被證實是一種潛在的天然抗氧化劑和抑菌劑，但其水溶性差、口服生物利用度較低，影響了其功效的發(fā)揮。筆者認(rèn)為，可采用微粉化、固體分散體、脂質(zhì)體和納米乳等制劑手段來解決此問題。（4）隨著藤茶應(yīng)用價值的發(fā)現(xiàn)和經(jīng)濟(jì)價值的提高，市場對其需求量也將不斷增加，隨之而來的將是對藤茶生藥資源的過度采摘，導(dǎo)致其野生資源供應(yīng)量受到影響。因此，需對其人工栽培技術(shù)進(jìn)行深入研究以保證市場供應(yīng)。