左乙拉西坦片聯(lián)合奧卡西平片治療癲癇患者的療效及對(duì)血清miR-222、BAFF水平的影響

席光明，陳召東

商洛市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科二病區(qū)1、一病區(qū)2，陜西 商洛 726000

癲癇屬于神經(jīng)系統(tǒng)疾病，是由腦神經(jīng)元異常放電引起的腦功能障礙綜合征，反復(fù)發(fā)作是其主要特征，該病的病因與腦損傷、遺傳、代謝紊亂等因素有關(guān)，主要臨床癥狀是口吐白沫、意識(shí)喪失和肌肉強(qiáng)迫收縮[1]。癲癇是一種慢性疾病，可嚴(yán)重影響患者的健康、精神、社會(huì)地位等，危及患者的生命，需及時(shí)進(jìn)行治療。癲癇患者需長(zhǎng)期接受抗癲癇藥物治療，選擇合理的藥物能夠保護(hù)患者認(rèn)知功能、改善生活質(zhì)量。奧卡西平是臨床常用的藥物。該藥主要在體內(nèi)代謝成羥基衍生物，阻斷其腦細(xì)胞電壓的通道，從而使神經(jīng)細(xì)胞膜穩(wěn)定，影響神經(jīng)元的放電異常，達(dá)到抗癲癇的目的[2]。左乙拉西坦屬于一種抗癲癇藥物，可通過(guò)海馬CAI區(qū)椎體神經(jīng)元的高電壓抑制N型鈣通道的激活，從而防止神經(jīng)元異常放電[3]。本研究主要觀察左乙拉西坦片聯(lián)合奧卡西平片治療癲癇患者的療效，并探討其對(duì)患者血清微小核糖核酸-222(microRNA-222，miR-222)、B細(xì)胞活化因子(B cell activating factor，BAFF)水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年11月至2021年11月商洛市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的80例癲癇患者進(jìn)行研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)確診為癲癇[4]；(2)臨床表現(xiàn)為意識(shí)喪失、口吐白沫等；(3)患者均知情并簽訂同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)由腦梗死、顱腦損傷、腦出血等導(dǎo)致的癲癇；(2)有感染性疾病；(3)依從性差。按照隨機(jī)數(shù)表法將患者分為觀察組和對(duì)照組，每組40例。觀察組患者中男性22例，女性18例；年齡34～65歲，平均(50.02±6.14)歲；病程1～5年，平均(3.14±0.72)年；癲癇類型：特發(fā)性16例，隱源性24例。對(duì)照組患者中男性25例，女性15例；年齡33～64 歲，平均(49.94±6.27)歲；病程2～5 年，平均(3.19±0.71)年；癲癇類型：特發(fā)性15例，隱源性25例。兩組患者的基線資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 治療方法 對(duì)照組患者口服奧卡西平片(Novartis Farma S.p.A，國(guó)藥準(zhǔn)字J20171082，規(guī)格：0.15 g)治療，初始劑量：300 mg/次，2次/d，若患者類型不佳，可逐漸增加劑量，最大劑量不超過(guò)1 800 mg/d。觀察組患者在對(duì)照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合口服左乙拉西坦片(浙江普洛康裕制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20193256，規(guī)格：0.25 g)治療，初始劑量：3 mg/kg，2 次/d，然后每周增加5 mg/kg，控制最大劑量不超過(guò)60 mg/kg。兩組患者均持續(xù)治療3個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)與評(píng)價(jià)(檢測(cè))方法 (1)療效：治療3個(gè)月后評(píng)價(jià)兩組患者的治療效果。療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[5]：顯效，患者癲癇發(fā)作減少＞75%；有效，患者癲癇發(fā)作減少＞50%，癥狀顯著改善；無(wú)效，未達(dá)以上標(biāo)準(zhǔn)?？傆行?(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。(2)miR-222和BAFF：于治療前及治療3個(gè)月后分別抽取兩組患者的靜脈血5 mL，10 000 r/min離心，每1 mL TRIZOL裂解液中加0.2 mL氯仿，用無(wú)RNA酶水洗滌，再10 000 r/min離心5 min，得到RNA。把混合液放在70℃環(huán)境中3 min(干浴)，加M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶(冰水浴)。當(dāng)試管內(nèi)外的溫度均衡時(shí)，加0.5 μL 的逆轉(zhuǎn)錄酶，放在37℃環(huán)境中60 min(水浴)，常溫靜置5 min。當(dāng)其完全溶解、逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA 后，參照β-actin，在反應(yīng)體系中加入dNTP、SYBR Green 1 染料、上游和下游引物，使總體積達(dá)到20 μL，待檢。在55℃下2 min、93℃下1 min、93℃下2 min，循環(huán)40 次，記錄miR-222的數(shù)據(jù)。在治療前和治療3 個(gè)月后，分別于患者癲癇發(fā)作后的12 h內(nèi)抽取5 mL 空腹靜脈血，靜置30 min，3 000 r/min 離心10 min，取上清，放在-20℃冰箱待測(cè)，選擇酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)BAFF。(3)神經(jīng)功能：分別于治療前及治療3 個(gè)月后，抽取兩組患者的空腹靜脈血3 mL，離心15 min，取上層血清，選擇酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)S-100β蛋白(S-100β)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NES)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)。(4)不良反應(yīng)：比較兩組患者治療期間的惡心嘔吐、便秘、腹痛腹瀉、肝腎損害等不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的治療效果比較 觀察組患者的治療總有效率為95.00%，明顯高于對(duì)照組的77.50%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.165，P=0.023＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者的治療效果比較(例)Table 1 Comparison of treatment effects between the two groups(n)

2.2 兩組患者治療前后的miR-222、BAFF 水平比較 治療前，兩組患者的miR-222、BAFF 水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療3 個(gè)月后，兩組患者的miR-222、BAFF 水平較治療前均顯著降低，且觀察組明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組患者治療前后的miR-222、BAFF水平比較()Table 2 Comparison of miR-222 and BAFF levels between the two groups before and after treatment()

表2 兩組患者治療前后的miR-222、BAFF水平比較()Table 2 Comparison of miR-222 and BAFF levels between the two groups before and after treatment()

注：與本組治療前比較，aP＜0.05。Note:Compared with the value in the same group before treatment,aP＜0.05.

2.3 兩組患者治療前后的神經(jīng)功能指標(biāo)比較 治療前，兩組患者S-100β、NES、GFAP 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療3 個(gè)月后，兩組患者S-100β、NES、GFAP 水平較治療前均明顯降低，且觀察組明顯低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表3。

表3 兩組患者治療前后的神經(jīng)功能指標(biāo)比較()Table 3 Comparison of neurological function indexes between the two groups before and after treatment()

表3 兩組患者治療前后的神經(jīng)功能指標(biāo)比較()Table 3 Comparison of neurological function indexes between the two groups before and after treatment()

注：與本組治療前比較，aP＜0.05。Note:Compared with the value in the same group before treatment,aP＜0.05.

2.4 兩組患者的不良反應(yīng)比較 觀察組患者的不良反應(yīng)總發(fā)生率為7.50%，略高于對(duì)照組的5.00%，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.501，P=0.034＞0.05)，見(jiàn)表4。

表4 兩組患者的不良反應(yīng)比較(例)Table 4 Comparison of adverse reactions between the two groups(n)

3 討論

癲癇是一過(guò)性的腦功能障礙，由腦神經(jīng)元的異常放電導(dǎo)致，患者通常表現(xiàn)為肢體抽搐、突然頭暈、口吐白沫和意識(shí)不清[6]。目前，癲癇患者多給予抗癲癇藥物治療，以控制癲癇發(fā)作、改善癥狀[7]。

奧卡西平屬于新型抗癲癇藥物，對(duì)各類癲癇均有一定的控制作用，其具有高度選擇性的抑制大腦皮層運(yùn)動(dòng)，從而抵抗外部神經(jīng)元異常放電，抑制癲癇[8]。同時(shí)，奧卡西平能作用于K+、Ca+通道，抑制突觸傳遞的興奮，減少突觸前釋放谷氨酸，從而緩解病情。但對(duì)于一些病情較為復(fù)雜的患者，采取該藥治療的效果并不好，少數(shù)患者也有認(rèn)知功能明顯下降的表現(xiàn)，因此，需要選擇高效、低毒的藥物治療該疾病。

左乙拉西坦是抗癲癇藥物，藥效機(jī)制是結(jié)合突觸小泡蛋白，有效調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，從而達(dá)到治療效果[9-10]。左乙拉西坦具有生物利用度高、起效快、療效持久、安全性高等優(yōu)點(diǎn)，可靜脈給藥，無(wú)明顯不良反應(yīng)，且基本不影響認(rèn)知，在抗癲癇方面效果理想，在臨床上逐漸受到青睞和推廣[11]。

BAFF 是腫瘤壞死因子超家族，其與免疫系統(tǒng)功能息息相關(guān)，在自身免疫中的作用十分關(guān)鍵，能參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)，癲癇的發(fā)生與免疫功能障礙有關(guān)[12]。作為調(diào)節(jié)劑，miR-222由促炎因子的誘導(dǎo)分泌產(chǎn)生，對(duì)炎癥因子、黏附因子進(jìn)行刺激，加重炎癥，損害神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)元鞘，導(dǎo)致異常放電，miRNA 參與癲癇的發(fā)生和發(fā)展，可調(diào)節(jié)下游基因的翻譯和轉(zhuǎn)錄，改變相關(guān)蛋白的含量，激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)，引發(fā)癲癇[13]。本研究結(jié)果顯示，治療3個(gè)月后，聯(lián)合治療患者的總有效率明顯高于單純奧卡西平片治療患者，所有患者的miR-222、BAFF 水平均明顯降低，且聯(lián)合治療患者miR-222、BAFF 水平均明顯低于單純奧卡西平片治療患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。究其原因，可能是左乙拉西坦片聯(lián)合奧卡西平片對(duì)癲癇的發(fā)作進(jìn)行控制，同時(shí)機(jī)體的免疫神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控，可明顯提高神經(jīng)元抑制異常放電的作用，改善了患者免疫功能和炎癥，從而提高療效。

S-100β存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中，當(dāng)神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞受損時(shí)，它可以穿透血腦脊液屏障，進(jìn)入人體血液，與患者腦損傷程度成正比。NSE是一種特殊酶，存在于內(nèi)分泌細(xì)胞和大腦神經(jīng)元中，該表達(dá)可作為局部腦損傷標(biāo)志物，輔助疾病評(píng)估和預(yù)后判斷；GFAP 涉及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的生理和病理活動(dòng)，當(dāng)患者GFAP水平異常升高時(shí)，會(huì)引起其調(diào)節(jié)的K+穩(wěn)態(tài)紊亂，導(dǎo)致神經(jīng)元異常和癲癇發(fā)作[14-15]。本研究結(jié)果顯示，治療3個(gè)月后，所有患者的S-100β、NES、GFAP水平均明顯降低，且聯(lián)合治療患者S-100β、NES、GFAP 水平均明顯低于單純奧卡西平片治療患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。經(jīng)分析原因，左乙拉西坦為吡咯烷酮衍生物，不影響正常神經(jīng)元興奮性、鈉離子通道、神經(jīng)元電壓門(mén)控T 型鈣電流，對(duì)患者的神經(jīng)功能損害較小，聯(lián)合奧卡西平使用，能夠改善神經(jīng)功能，雙向調(diào)節(jié)神經(jīng)及免疫，從而增強(qiáng)患者免疫功能。同時(shí)，本研究中，聯(lián)合用藥患者的不良反應(yīng)與單純奧卡西平片治療患者相當(dāng)，表明左乙拉西坦片聯(lián)合奧卡西平片治療癲癇不會(huì)增加患者的不良反應(yīng)，安全性較高。

綜上所述，左乙拉西坦片聯(lián)合奧卡西平片治療癲癇可明顯改善患者的血清miR-222、BAFF 水平，臨床應(yīng)用效果顯著，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。