過表達(dá)LrAN2基因?qū)︸R鈴薯中花青素和糖苷生物堿含量的影響

李紅艷 李潔雅 李 響 葉廣繼,2,3,4,5,6 周 云,2,3,4,5,6 王 艦,2,3,4,5,6,*

過表達(dá)基因?qū)︸R鈴薯中花青素和糖苷生物堿含量的影響

李紅艷1李潔雅1李 響1葉廣繼1,2,3,4,5,6周 云1,2,3,4,5,6王 艦1,2,3,4,5,6,*

1青海大學(xué), 青海西寧 810016;2青海省農(nóng)林科學(xué)院, 青海西寧 810016;3青海大學(xué)青藏高原生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 青海西寧 810016;4青海省馬鈴薯育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 青海西寧 810016;5省部共建三江源生態(tài)與高原農(nóng)牧業(yè)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 青海西寧 810016;6青藏高原種質(zhì)資源研究與利用實(shí)驗(yàn)室, 青海西寧 810016

目前對馬鈴薯(L)中MYB基因參與的花青素研究較為深入, 但對影響馬鈴薯品質(zhì)和安全的糖苷生物堿(steroidal glycoalkaloids, SGAs)在不同組織中的變化規(guī)律及調(diào)控機(jī)制尚不完全清楚。是黑果枸杞()中的MYB基因, 與黑果枸杞果實(shí)中花青素的積累有關(guān)。本研究以野生型大西洋、2種轉(zhuǎn)大西洋株系(LrAN2oe#66和LrAN2oe#200)為試驗(yàn)材料, 檢測不同組織中的花青素和SGAs含量, 并對SGAs生物合成相關(guān)基因的表達(dá)量分析。pH示差法檢測花青素發(fā)現(xiàn), 僅在轉(zhuǎn)基因植株(LrAN2oe#200)葉片中檢測到一定量的花青素(12 mg 100 g–1FW)。高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測SGAs發(fā)現(xiàn), 3個(gè)材料不同組織SGAs含量變化為葉片>薯皮>薯肉。薯皮中的SGAs含量無顯著性差異; 薯肉中LrAN2oe#66的SGAs含量較對照降低、LrAN2oe#200對照顯著增加1.3倍, 但未超出安全標(biāo)準(zhǔn)(0.2 mg g–1FW); 葉片中LrAN2oe#66的SGAs含量較對照增加1倍、LrAN2oe#200較對照顯著增加3.8倍。qRT-PCR分析基因表達(dá)量發(fā)現(xiàn),和基因受到基因的調(diào)控在轉(zhuǎn)基因植株中顯著上調(diào)。本研究結(jié)果對馬鈴薯植株中花青素含量的積累具有指導(dǎo)意義, 為進(jìn)一步解析馬鈴薯資源中花青素及SGAs的調(diào)控機(jī)制提供理論依據(jù)。

基因; 馬鈴薯; 花青素; 糖苷生物堿

糖苷生物堿(steroidal glycoalkaloids, SGAs)是茄科和百合科植物生長過程中產(chǎn)生的一類次生代謝有毒物[1-2], 是茄科植物的天然防御物質(zhì), 對植物真菌、細(xì)菌和病毒引起的病害具有抗性[3-4], 也可作為新藥品開發(fā)的原料, 同時(shí)能夠抵御取食昆蟲的危害[5]。馬鈴薯塊莖中低濃度的SGAs能夠改善馬鈴薯的口感, 而濃度過高則產(chǎn)生苦澀的口味, 當(dāng)濃度高于0.2 mg g–1鮮重(fresh weight, FW)時(shí), 對動物和人類具有毒性[6-7]。SGAs的合成與促進(jìn)呼吸作用的因素呈正相關(guān), 凡是呼吸作用旺盛的植物組織, SGAs也更易于合成[8]。SGAs是通過甲羥戊酸途徑合成的, 合成途徑如圖1, 3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGR)催化乙酰輔酶A形成甲羥戊酸、再經(jīng)鯊烯合酶(SQS1)和鯊烯環(huán)氧酶(SQE1)催化合成法尼基焦磷酸, 產(chǎn)物被環(huán)丙烯醇合成酶(CAS)和羊毛甾醇合成酶(LAS)催化[9-11]。擬南芥基因()在馬鈴薯中的異位表達(dá)導(dǎo)致葉中SGAs含量增加, 塊莖中SGAs含量降低[12]。環(huán)丙烯醇合成酶被甾醇側(cè)鏈還原酶2 (SSR2)脫氧形成膽固醇和其他植物甾醇[13], 后者被甾醇C-24-甲基轉(zhuǎn)移酶1 (SMT1)催化合成植物甾醇類物質(zhì)[14]。膽固醇通過羥基化、氧化和糖基化修飾生成SGAs[15-16]。目前對轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)SGAs合成的調(diào)控機(jī)制研究較少, 僅有過表達(dá)GAME9轉(zhuǎn)錄因子, 激活植物中、等基因的轉(zhuǎn)錄水平, 從而積累SGAs[17]。

MYB轉(zhuǎn)錄因子主要調(diào)控植物中苯丙烷代謝途徑中黃酮、花青素及木質(zhì)素等合成代謝過程, 是植物中最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一[18-19]?；驈暮阼坭街锌寺〉玫? 該基因的高表達(dá)水平可能是黑枸杞中花青素積累的主要原因。MYB轉(zhuǎn)錄因子StMtf1在馬鈴薯塊莖中特異性表達(dá)能夠激活苯丙烷生物合成途徑, 同時(shí)促進(jìn)各種黃酮醇和花青素的累積, 降低塊莖中總SGAs含量[20]。前人研究表明, MYB轉(zhuǎn)錄因子可能同時(shí)參與植物中甲羥戊酸途徑和苯丙烷途徑的調(diào)控, 但詳盡的報(bào)道較少。基因在馬鈴薯中是否同時(shí)調(diào)控花青素和SGAs的合成值得進(jìn)一步研究。

目前, 對馬鈴薯中SGAs的研究多集中在塊莖中, SGAs在抗性方面的研究卻鮮有報(bào)導(dǎo)。馬鈴薯作為重要糧菜兼用的作物, 植株葉片及表皮中含有一定量的SGAs能減輕植物病害而提高抗性。此外, 將馬鈴薯中的SGAs提取后可用于藥理活性研究以利于馬鈴薯的綜合開發(fā)應(yīng)用。因此, 本試驗(yàn)以大西洋為材料, 通過在大西洋中過表達(dá)基因, 研究基因?qū)︸R鈴薯不同組織中SGAs的影響, 為創(chuàng)制葉片中SGAs含量高、抗性強(qiáng)的馬鈴薯資源提供理論參考。

圖1 馬鈴薯SGAs生物合成途徑

1 材料與方法

1.1 轉(zhuǎn)基因材料的獲得及采集

用于轉(zhuǎn)化的載體PJAM1502:LrAN2由中國科學(xué)院西北高原生物研究所劉寶龍博士贈與。載體通過凍融法轉(zhuǎn)化至農(nóng)桿菌菌株GV3101。

選用野生型大西洋、2個(gè)轉(zhuǎn)大西洋株系(LrAN2oe#66和LrAN2oe#200)為試驗(yàn)材料, 于2020年12月10日在青海省農(nóng)林科學(xué)院生物技術(shù)研究所溫室盆栽中種植, 每盆1株, 每個(gè)材料種10株。溫室光照16 h/黑暗8 h。在塊莖成熟期(2021年5月6日)取樣, 選擇長勢一致的葉片和薯塊作為試驗(yàn)樣品用于后續(xù)試驗(yàn), 3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。

1.2 SGAs檢測方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 用40%的甲醇水溶液將α-茄堿(Solanine) (Sigma, 美國)和α-卡茄堿(Chaconine)標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma, 美國)配制成400 ng mL–1的標(biāo)準(zhǔn)中間液, 再將標(biāo)準(zhǔn)中間液混合, 逐級稀釋成25、50、100、200、300、400、500和600 ng mL–1的混合液, 過0.22 μm濾膜后, 4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品處理方法 取大西洋、轉(zhuǎn)基因(LrAN2oe#66和LrAN2oe#200)的薯皮(約2 mm)、薯肉和葉片進(jìn)行冷凍干燥后研磨。分別稱取薯皮、薯肉和葉片樣品粉末0.2 g, 加入5%的乙酸5 mL并混勻, 超聲處理30 min, 7104′離心5 min, 收集上清液(稀釋500倍或1000倍), 0.22 μm濾膜過濾, 待測。

使用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(Agilent 1260 Inifity II-Agilent 6470, 美國)檢測α-茄堿和α-卡茄堿含量, 若樣品濃度高于線性范圍, 上清液繼續(xù)稀釋。

1.3 馬鈴薯薯皮和葉片花青素的提取及其含量測定

1.3.1 花青素提取 分別準(zhǔn)確稱取5 g馬鈴薯薯皮和葉片于50 mL棕色容量瓶中, 加入50 mL提取液(80%濃鹽酸∶甲醇=4∶96, v/v)超聲300 W、40℃條件下提取30 min后, 混勻取上清。

1.3.2 花青素含量用pH示差法檢測 取1 mL上清液于10 mL離心管, 分別加入5 mL HCl-KCl (pH 1.0)和HAc-NaAc緩沖液(pH 4.5)稀釋, 將2份樣品液混勻放置20 min, 用分光光度計(jì)檢測樣品材料在530 nm和700 nm處的吸光度值。

花青素提取率(mg g–1)=(DA×MV×DF×V)/(m×ε×L)

式中,DA為吸光度,DA = (A530nm– A700nm) pH值1.0 – (A530nm– A700nm) pH值4.5; M為矢車菊素-3-0-葡萄糖苷的相對分子質(zhì)量, 449.2 g mol–1; V為花青素提取液體積(mL); F為待測液稀釋倍數(shù); m為樣品質(zhì)量(g); ε為矢車菊素-3-0-葡萄糖苷的摩爾消光系數(shù), 26,900 L (mol cm)–1; L為光徑, 1 cm。

1.4 SGAs生物合成相關(guān)基因表達(dá)分析

1.4.1 引物設(shè)計(jì)及合成 糖苷生物堿生物合成所需的引物、、、、、、、、和, 由青海省農(nóng)林科學(xué)院生物技術(shù)研究所提供, 由生物工程(上海)股份有限公司合成(表1)。

表1 試驗(yàn)所需引物序列

1.4.2 總RNA的提取及cDNA的合成 采用天根生化科技(北京)有限公司的TaKaRa提取試劑盒提取大西洋和LrAN2oe#200葉片、RNA prep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒提取薯皮、薯肉中的總RNA。

參照PrimeScript RT MasterMix (Perfect Real Time) (TaKaRa)說明書合成cDNA, 加樣均在冰上進(jìn)行。反應(yīng)體系20 μL: 5× Prime Script RT Master Mix (Perfect Real Time) 4 μL, RNA體積等于1000除以RNA濃度, 用RNase Free ddH2O補(bǔ)充至20 μL。反應(yīng)條件: 37℃ 15 min, 85℃ 3 s, 4℃無限循環(huán)。得到的cDNA溶液稀釋至200 ng μL–1后, –20℃保存。

1.4.3 qRT-PCR檢測 以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板,為內(nèi)參基因。反應(yīng)體系20 μL: 2 μL cDNA模板、0.4 μL引物-F (10 μmol L–1)、0.4 μL引物-R (10 μmol L–1)、10 μL TB Green premix ExII、7.2 μL ddH2O。Real Time PCR反應(yīng)程序?yàn)? 95℃ 30 s; 95℃ 10 s, 61℃ 32 s, 40個(gè)循環(huán); 95℃ 60 s, 60℃ 60 s, 55℃ 10 s。

2 結(jié)果與分析

2.1 過表達(dá)LrAN2基因?qū)︸R鈴薯中花青素的影響

使用引物L(fēng)rAN2-F和LrAN2-R檢測陽性植株, 共獲得了15株陽性轉(zhuǎn)基因株系(圖2)。過表達(dá)基因使不同馬鈴薯植塊莖、葉片、薯皮均發(fā)生了表型變化, 薯皮和葉片變化較大, 薯皮由白色變?yōu)闇\粉色, 葉片由綠色變?yōu)樽仙?。用pH示差法檢測大西洋和轉(zhuǎn)基因LrAN2oe#200薯皮和葉片中的花青素含量, 僅檢測到轉(zhuǎn)基因LrAN2oe#200葉片中積累了花青素, 為鮮重下12 mg 100 g-1(圖3), 符合表型變化特征。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)過表達(dá)基因增加了轉(zhuǎn)基因葉片中的花青素含量, 薯皮僅有表型變化, 但難以檢測到花青素, 表明基因誘導(dǎo)馬鈴薯中花青素的積累具有組織特異性。

2.2 過表達(dá)LrAN2基因?qū)︸R鈴薯不同組織中SGAs的影響

利用HPLC-MS/MS法檢測了大西洋(Atlantic) 和轉(zhuǎn)基因(LrAN2oe#66、LrAN2oe#200)薯皮、薯肉和葉片中的SGAs含量。平均值用LSD法多重比較發(fā)現(xiàn), 3種試驗(yàn)材料葉片中的SGAs含量均高于薯皮和薯肉, 其中薯肉中的SGAs含量最少。薯皮中, 轉(zhuǎn)基因植株和對照之間SGAs含量無顯著性差異(圖4-A)。薯肉中, LrAN2oe#66較對照的SGAs含量降低但無顯著差異, 轉(zhuǎn)基因LrAN2oe#200中SGAs含量較對照顯著增加1.3倍(圖4-B)。葉片中, 轉(zhuǎn)基因植株中SGAs含量有所增加, 其中LrAN2oe#66 較對照增加1倍, LrAN2oe#200中SGAs積累最高, 較對照顯著增加3.8倍(圖4-C)。鑒于轉(zhuǎn)基因LrAN2oe#66的SGAs含量與對照無顯著性差異, 而轉(zhuǎn)基因LrAN2oe#200的SGAs含量與對照有顯著性差異。因此, 選用大西洋和轉(zhuǎn)基因LrAN2oe#200為試驗(yàn)材料進(jìn)行SGAs生物合成相關(guān)基因表達(dá)性分析。

圖2 部分過表達(dá)LrAN2基因馬鈴薯

M: DL 2000 marker; Plasmid: LrAN2質(zhì)粒; WT: 野生型。

M: DL 2000 marker; Plasmid: LrAN2 plasmid; WT: wild-type.

圖3 大西洋(Atlantic)和轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的表型特征(A)、大西洋和LrAN2oe#200的花青素含量(B)

n.d.表示花青素含量為0 mg 100 g–1, 生物學(xué)重復(fù)= 3。

n.d. means the anthocyanin content is 0 mg 100 g–1, biological replicates= 3.

2.3 過表達(dá)LrAN2轉(zhuǎn)基因?qū)GAs生物合成途徑中相關(guān)基因的表達(dá)量影響

將提取的大西洋和轉(zhuǎn)基因馬鈴薯LrAN2oe#200薯皮、薯肉和葉片中的RNA反轉(zhuǎn)為cDNA, 利用qRT-PCR對SGAs生物合成途徑中、、、、、、、、和10個(gè)基因的相對表達(dá)量進(jìn)行分析。

相較于對照, 薯皮中,、、、和基因在LrAN2oe#200中的表達(dá)量顯著上調(diào), 其他基因的表達(dá)無規(guī)律性變化(圖5); 薯肉中,基因在大西洋中顯著上調(diào), 其他基因均在LrAN2oe#200中顯著上調(diào)(圖6); 葉片中,、、、、、、和基因顯著上調(diào),和基因的相對表達(dá)量略有上調(diào)(圖7)。就馬鈴薯而言, SGAs生物合成途徑中和基因的表達(dá)量在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯不同組織中表達(dá)受到基因調(diào)控均上調(diào), 與SGAs含量變化相關(guān)性高; 其他基因在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯不同組織中變化不一致, 說明基因的過表達(dá)可以組織特異性調(diào)節(jié)馬鈴薯中SGAs的生物合成途徑中結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。

圖4 Atlantic、LrAN2oe#66、LrAN2oe#200薯皮(A)、薯肉(B)和葉片(C)中的SGAs含量

不同小寫字母表示不同品種間SGAs的差異顯著性(< 0.05)。

Different lowercase letters indicate significant difference in the contents of SGAs at< 0.05.

圖5 SGAs生物合成相關(guān)基因在Atlantic和LrAN2oe#200薯皮中的表達(dá)量變化

不同小寫字母表示不同品種間基因表達(dá)量的差異顯著性(< 0.05)。

Different lowercase letters indicate significant differences in the relative expression levels among different varieties at< 0.05.

圖6 SGAs生物合成相關(guān)基因在Atlantic和LrAN2oe#200薯肉中的表達(dá)量變化

不同小寫字母表示不同品種間基因表達(dá)量的差異顯著性(< 0.05)。

Different lowercase letters indicate significant differences in gene expression among different varieties at< 0.05.

圖7 SGAs生物合成相關(guān)基因在Atlantic和LrAN2oe#200葉片中的表達(dá)量變化

不同小寫字母表示不同品種間基因表達(dá)量的差異顯著性(< 0.05)。

Different lowercase letters indicate significant differences in gene expression among different varieties at< 0.05.

3 討論

本研究證實(shí)了過表達(dá)基因?qū)︸R鈴薯中花青素和SGAs積累模式的組織特異性。羅香怡等[21]以番茄為試驗(yàn)材料, 檢測到花青素含量和基因在葉片中的表達(dá)量最高。番茄與馬鈴薯同屬茄科作物, 番茄中的花青素及SGAs含量與馬鈴薯中的花青素及SGAs含量變化有一定的相關(guān)性, 但本研究未做番茄相關(guān)的研究, 無法證實(shí)。研究發(fā)現(xiàn), 在煙草中過表達(dá)基因誘導(dǎo)煙草所有組織中的花青素生物合成, 并且轉(zhuǎn)基因煙草葉片中生物堿類物質(zhì)含量降低[22]。超表達(dá)糖基轉(zhuǎn)移酶TOGT (salicylate-and pathogen-inducible glucosyltransferase), 可促使煙草中苯基丙烷類物質(zhì)的合成, 進(jìn)而提高煙草的抗病性[23-24]。在本研究中, 過表達(dá)基因使轉(zhuǎn)基因馬鈴薯葉片中的花青素含量增加, 與前人研究結(jié)果有一定差異, 推測煙草和馬鈴薯雖同屬茄科, 但生長模式存在差異。過表達(dá)基因是否能積累馬鈴薯植株中的花青素含量, 具體原因本試驗(yàn)數(shù)據(jù)難以揭示。早期Rommens等[20]發(fā)現(xiàn)由pUbi7啟動子驅(qū)動MYB轉(zhuǎn)錄因子StMtf1的表達(dá)積累了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯塊莖中的花青素含量。轉(zhuǎn)錄因子StMtf1和LrAN2位于同一MYB家族, 其表達(dá)模式接近。

qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn), 過表達(dá)基因使馬鈴薯薯肉和葉片中大部分SGAs合成結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)量上調(diào)。和基因作為SGAs生物合成的限速酶, 分別調(diào)控α-茄堿和α-卡茄堿的合成過程, 本研究測得α-卡茄堿含量比α-茄堿含量高, 符合前人研究結(jié)果[25-26]。但表達(dá)量分析發(fā)現(xiàn), 薯肉中,基因的表達(dá)量高于基因, 與SGAs含量變化不一致, 推測馬鈴薯材料的不同處理造成了試驗(yàn)結(jié)果的差異。此外, 部分基因的表達(dá)模式具有組織特異性。在植物組織中超表達(dá)糖基轉(zhuǎn)移酶家族基因, 可提高作物的抗逆性[8]。和基因調(diào)控的SGAs合成途徑中, 轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株葉片中SGAs含量高, 具體表現(xiàn)哪一方面的抗性, 其原因有待解析。

CaMV 35S (花椰菜花葉病毒35S)是一種組成型啟動子, 有助于推動轉(zhuǎn)基因植物的組成型表達(dá)、闡明許多植物基因的功能并增進(jìn)對植物過程的了解, 它廣泛用于植物基因功能的研究[27]。然而35S promoter在植物各種組織細(xì)胞類型中具有一定的組織特異性, 偶爾呈現(xiàn)“補(bǔ)丁”表達(dá)模式[28]。本研究利用double 35S啟動子驅(qū)動基因在馬鈴薯中過表達(dá), 發(fā)現(xiàn)馬鈴薯中花青素和SGAs的積累均具有組織特異性, 未來需要進(jìn)一步研究是過表達(dá)基因調(diào)控或是糖基轉(zhuǎn)移酶家族基因調(diào)控花青素或SGAs的合成。

4 結(jié)論

本研究通過在不同馬鈴薯材料薯皮、薯肉和葉片中過表達(dá)基因, 花青素檢測發(fā)現(xiàn), 在馬鈴薯中過表達(dá)基因僅能提高轉(zhuǎn)基因植株葉片中的花青素含量, 花青素的積累具有組織特異性; SGAs檢測發(fā)現(xiàn), 過表達(dá)基因提高了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯地上部葉片中的SGAs含量, 而3個(gè)材料薯肉中的SGAs含量未超出安全標(biāo)準(zhǔn)(0.2 mg g-1FW); qRT-PCR檢測發(fā)現(xiàn), 轉(zhuǎn)基因馬鈴薯中,和基因均受基因的調(diào)控上調(diào)表達(dá), 其他部分上調(diào)基因的表達(dá)模式具有組織特異性。

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Effects of overexpression ofgene on contents of anthocyanins and glycoalkaloids in potato

LI Hong-Yan1, LI Jie-Ya1, LI Xiang1, YE Guang-Ji1,2,3,4,5,6, ZHOU Yun1,2,3,4,5,6, and WANG Jian1,2,3,4,5,6,*

1Qinghai University, Xining 810016, Qinghai, China;2Qinghai Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Xining 810016, Qinghai, China;3Qinghai University Key Laboratory of Qinghai-Tibet Plateau Biotechnology of the Ministry of Education, Xining 810016, Qinghai, China;4Qinghai Provincial Key Laboratory of Potato Breeding, Xining 810016, Qinghai, China;5Provincial and Ministry Co-construction of the State Key Laboratory of Sanjiangyuan Ecology and Plateau Agriculture and Animal Husbandry, Xining 810016, Qinghai, China;6Laboratory for Research and Utilization of Qinghai Tibet Plateau Germplasm Resources, Xining 810016, Qinghai, China

At present, the research on the anthocyanins involved in the MYB gene inpotato (L.) is relatively in-depth, but the change rule and regulatory mechanism of the glycoalkaloids (steroidal glycoalkaloids, SGAs) in different tissues, which affect the quality and safety of potato, are still unclear., the MYB gene in, is associated with the accumulation of anthocyanins infruit. In this study, to detect the contents of anthocyanins and SGAs in different tissues, and to analyze the expression of genes related to SGA biosynthesis, wild-type Atlantic and two trans-Atlantic lines (LrAN2oe#66 and LrAN2oe#200) were used as the test materials. The detection of anthocyanins by pH differential method showed that only a certain number of anthocyanins (12 mg 100 g–1FW) were detected in the leaves of transgenic plants (LrAN2oe#200). The contents of SGAs by HPLC-TMS in different tissues of the three materials were as follows: leaves>potato skin>potato flesh. There was no significant difference in the contents of SGAs in potato peels. Compared with the control, the SGAs content of LrAN2oe#66 in potato flesh was lower than the control, and the SGAs content of LrAN2oe#200 was significantly increased by 1.3 times, but did not exceed the safety standard (0.2 mg g–1FW). The contents of SGAs in LrAN2oe#66 of leaves were increased by 1 times and LrAN2oe#200 was significantly increased by 3.8 times compared with the control.andgenes were significantly up-regulated in transgenic plants under the regulation ofgene by qRT-PCR. These results give a guiding significance for the accumulation of anthocyanins in potato plants and provide a theoretical basis for further analysis of the regulation mechanism of anthocyanins and SGAs in potato resources.

gene; potato; anthocyanin; glycoalkaloid

10.3724/SP.J.1006.2023.24082

本研究由財(cái)政部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-9), 青海省科學(xué)自然基金項(xiàng)目-創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(2022-ZJ-902)和青海省創(chuàng)新平臺建設(shè)專項(xiàng)(2022-ZJ-Y01)資助。

This study was supported by the China Agriculture Research System of MOF and MARA (CARS-9), the Qinghai Natural Science Foundation Program-Innovation Team (2022-ZJ-902), and the Qinghai Innovation Platform Construction Project (2022-ZJ-Y01).

王艦, E-mail: jianwang2197@163.com

E-mail: 1286068155@qq.com

2022-04-03;

2022-07-21;

2022-08-17.

URL: https://kns.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20220816.1615.006.html

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