淺析《中國(guó)藥典》（2020版）中阿奇霉素顆粒標(biāo)準(zhǔn)的變化

崔玉玲，張紅梅

濟(jì)南市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心， 濟(jì)南 250014

阿奇霉素是大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物，可通過(guò)抑制細(xì)菌的蛋白質(zhì)合成而達(dá)到抗菌作用，其抗菌譜較廣，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌、支原體等都有抗菌活性，適用于敏感菌引起的急性支氣管炎、急性細(xì)菌性肺炎、支原體肺炎、急性扁桃體炎等［1-2］。阿奇霉素的顆粒制劑因便于分劑量、易服用的優(yōu)點(diǎn)而廣泛用于兒童?！吨袊?guó)藥典》（2005版）開(kāi)始收錄阿奇霉素顆粒，經(jīng)過(guò)15年的發(fā)展，到《中國(guó)藥典》（2020版），阿奇霉素顆粒的標(biāo)準(zhǔn)制定得更加規(guī)范合理，更加科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，充分保證了其臨床使用的安全性和有效性。

本文以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)，結(jié)合《中國(guó)藥典》（2020版）與《中國(guó)藥典》（2015版）中有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)因標(biāo)準(zhǔn)不同出現(xiàn)的結(jié)果判定變化，并對(duì)新增項(xiàng)目溶出度進(jìn)行測(cè)定，比較不同版本《中國(guó)藥典》中阿奇霉素顆粒的標(biāo)準(zhǔn)變化。

1 阿奇霉素顆粒標(biāo)準(zhǔn)在歷版《中國(guó)藥典》中的演變［3 -6 ］

阿奇霉素顆粒標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目主要有性狀、鑒別、檢查及含量測(cè)定。其中，反映藥品安全性的檢查項(xiàng)目包括堿度、水分及顆粒劑項(xiàng)下的粒度、裝量差異等，具體變化見(jiàn)表1。

表1 阿奇霉素顆粒在不同版本《中國(guó)藥典》中的方法和判定標(biāo)準(zhǔn)比較a

2 阿奇霉素顆粒有關(guān)物質(zhì)在不同標(biāo)準(zhǔn)下的結(jié)果判定差異［5 -6 ］

2.1 儀器與試劑

LC-20A高效液相色譜儀（日本島津公司）；MS105DU型電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；PB-10酸度計(jì)（德國(guó)賽多利斯公司）。

阿奇霉素對(duì)照品（批號(hào)：130593-202004，純度94.3%）、阿奇霉素系統(tǒng)適用性對(duì)照品（批號(hào)：130609-202008，系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用）、阿奇霉素雜質(zhì)A（批號(hào)：130651-202003，鑒別/檢查用）、阿奇霉素雜質(zhì)S（批號(hào)：130655-202004，鑒別/檢查用）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純）、磷酸氫二鉀（分析純）、磷酸二氫銨（分析純）、磷酸（分析純）等均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；純化水（山東普利思飲用水股份有限公司）。

5批阿奇霉素顆粒樣品分別來(lái)自A、B、C、D、E共5家生產(chǎn)企業(yè)，批號(hào)分別為8D0251F04、1912022、19061301、190604、200102，依次編號(hào)為 S1、S2、S3、S4、S5。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1 色譜條件

按照《中國(guó)藥典》（2015版、2020版）有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法，采用CAPCELL PAK C18MGⅡ色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；以磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%磷酸溶液調(diào)節(jié)pH至8.2）-乙腈（45∶55）為流動(dòng)相A，以甲醇為流動(dòng)相B；線性梯度洗脫（0～35min，75%→95%A；35～64min，95%→95%A；64～65min，95%→75%A；65～71min，75%→75%A）；柱溫為30℃；流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm；進(jìn)樣體積為50 μ l。

2.2.2 溶液的制備

稀釋液：稱取磷酸二氫銨1.73g，加水溶解并稀釋至1000ml，用氨試液調(diào)節(jié)pH至（10.0±0.05），得到磷酸二氫銨溶液。按磷酸二氫銨溶液-甲醇-乙腈（7∶7∶6）為比例配制稀釋液。

供試品溶液：取阿奇霉素顆粒適量，加稀釋液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含阿奇霉素10mg的溶液，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液。

對(duì)照溶液：精密量取供試品溶液1ml，置200ml量瓶中，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻。

雜質(zhì)S對(duì)照品與雜質(zhì)A對(duì)照品溶液：取雜質(zhì)S對(duì)照品與雜質(zhì)A對(duì)照品各適量，加稀釋液溶解并稀釋制成每1ml中各約含0.05mg的溶液。

系統(tǒng)適用性溶液：取阿奇霉素系統(tǒng)適用性對(duì)照品適量，加雜質(zhì)S對(duì)照品與雜質(zhì)A對(duì)照品溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液。

靈敏度溶液：精密量取對(duì)照溶液10ml，置50ml量瓶中，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻。

2.2.3 限度規(guī)定

《中國(guó)藥典》（2015版）規(guī)定限度為：雜質(zhì)B峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的4倍（2.0%）；雜質(zhì)H與雜質(zhì)Q按校正后的峰面積計(jì)算（分別乘以校正因子0.1、0.4）不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）；各雜質(zhì)峰面積之和按校正后的峰面積計(jì)算不得大于對(duì)照溶液主峰面積的8倍（4.0%）。

《中國(guó)藥典》（2020版）規(guī)定限度為：雜質(zhì)B峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的4倍（2.0%）；雜質(zhì)R、雜質(zhì)Q、雜質(zhì)J、雜質(zhì)I、雜質(zhì)S、雜質(zhì)A和雜質(zhì)H按校正后的峰面積計(jì)算（分別乘以校正因子0.5、0.4、0.7、1.6、0.4、1.4、0.1）均不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）；各雜質(zhì)峰面積的和按校正后的峰面積計(jì)算不得大于對(duì)照溶液主峰面積的8倍（4.0%）；小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計(jì)。

2.3 結(jié)果

對(duì)5批樣品同時(shí)進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)檢查，通過(guò)《中國(guó)藥典》（2015版、2020版）不同的判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果變化見(jiàn)表2。

表2 應(yīng)用不同版本《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)比較5批阿奇霉素顆粒有關(guān)物質(zhì)的結(jié)果 %

3 溶出度測(cè)定［6］

3.1 儀器與試劑

UDT-812溶出度試驗(yàn)儀（美國(guó)LOGAN公司）；ZKT-18F真空脫氣儀（天大天發(fā)科技有限公司）；高效液相色譜儀、酸度計(jì)、電子天平同“2.1”項(xiàng)下。

磷酸氫二鈉（分析純）、鹽酸（分析純）均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；其他同“2.1”項(xiàng)下。

樣品同“2.1”項(xiàng)下。

3.2 實(shí)驗(yàn)方法

按照《中國(guó)藥典》（2020版）溶出度與釋放度測(cè)定法（通則0931 第二法）測(cè)定5批阿奇霉素顆粒的溶出度。以磷酸鹽緩沖液（pH6.0）500ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50r/min，分別于15、30、45、60min取樣進(jìn)行測(cè)定，其中30min時(shí)取樣用以計(jì)算溶出度。每批樣品取6袋進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定方法除進(jìn)樣體積為100μl外，其余條件同“2.2.1”項(xiàng)下。

3.3 結(jié)果

3.3.1 溶出度

5批阿奇霉素顆粒的溶出度結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 5批阿奇霉素顆粒的溶出度結(jié)果

3.3.2 溶出曲線

5批阿奇霉素顆粒的溶出曲線見(jiàn)圖1。

圖1 5批阿奇霉素顆粒的溶出曲線

4 討論

經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展、改進(jìn)和提升，《中國(guó)藥典》中阿奇霉素顆粒的鑒別項(xiàng)在單一的薄層色譜法基礎(chǔ)上增加了HPLC，且薄層色譜法的點(diǎn)樣濃度由30mg/ml降至5mg/ml、點(diǎn)樣量由10μl降至2μl，提示方法靈敏度有了較大幅度的提升；有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)由薄層色譜法改為HPLC，色譜條件由等度洗脫改為梯度洗脫，系統(tǒng)適用性增加分離度、信噪比的要求以及判定標(biāo)準(zhǔn)中增加各雜質(zhì)限量要求，不僅提高了方法靈敏度、系統(tǒng)適用性要求，還更加嚴(yán)格控制了各雜質(zhì)的限量，進(jìn)一步保證了藥品的安全性；溶出度是控制藥品質(zhì)量、評(píng)價(jià)藥物生物利用度和療效的重要指標(biāo)，阿奇霉素為水難溶性藥物，口服吸收性較差，生物利用度不高，而溶出是限速步驟，應(yīng)對(duì)溶出度進(jìn)行考察［7-11］，《中國(guó)藥典》（2020 版）增加了溶出度測(cè)定項(xiàng)，進(jìn)一步合理完善了阿奇霉素顆粒的標(biāo)準(zhǔn)；含量測(cè)定方法由抗生素微生物檢定法改為HPLC，提高了方法的靈敏度和準(zhǔn)確度，減少人為操作影響，提高檢驗(yàn)效率和結(jié)果的可靠性，進(jìn)一步保證了藥品的有效性。

本研究中，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)的不同，同一批樣品測(cè)得的數(shù)據(jù)結(jié)果判定會(huì)有差異，但由于雜質(zhì)的量都很小，影響不是很明顯。按《中國(guó)藥典》（2015版）中阿奇霉素顆粒標(biāo)準(zhǔn)判定，對(duì)于雜質(zhì)R、雜質(zhì)J和雜質(zhì)S只能按其他雜質(zhì)（限度1.0%）計(jì)算。如果雜質(zhì)含量處于限度邊緣，樣品結(jié)果判定可能為不合格；但當(dāng)按《中國(guó)藥典》（2020版）中阿奇霉素顆粒標(biāo)準(zhǔn)判定，分別乘以相應(yīng)的校正因子，雜質(zhì)含量可能低于相應(yīng)限度，這樣計(jì)算出來(lái)的雜質(zhì)含量更準(zhǔn)確，樣品結(jié)果判定更為合理。因?yàn)榘⑵婷顾仡w粒有關(guān)物質(zhì)測(cè)定采用的是主成份自身對(duì)照法，各雜質(zhì)與主成份（阿奇霉素）在HPLC上的響應(yīng)因子不同，所以各雜質(zhì)以相應(yīng)的校正因子進(jìn)行計(jì)算更為合適?！吨袊?guó)藥典》（2020版）對(duì)阿奇霉素顆粒有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)的判定更加細(xì)化、更加嚴(yán)格，也同阿奇霉素原料標(biāo)準(zhǔn)保持一致，而《中國(guó)藥典》（2015版）中阿奇霉素顆粒有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)的判定與阿奇霉素原料藥標(biāo)準(zhǔn)判定要求不一致，表現(xiàn)為比阿奇霉素原料藥要求更寬松。

阿奇霉素在水中幾乎不溶，作為口服藥物應(yīng)該測(cè)定其溶出度。本研究中，不同廠家的樣品溶出度結(jié)果雖然不同，但都達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)中的限度要求，即標(biāo)示量的75%，表明樣品均符合規(guī)定；各樣品溶出量基本在30min左右達(dá)到峰值，表明《中國(guó)藥典》（2020版）標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置的取樣時(shí)間合理。

綜上所述，歷版《中國(guó)藥典》對(duì)于阿奇霉素顆粒的標(biāo)準(zhǔn)在不斷修訂和完善，且《中國(guó)藥典》（2020版）的檢驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置更合理，判定標(biāo)準(zhǔn)更加嚴(yán)謹(jǐn)，整體標(biāo)準(zhǔn)日趨完善，進(jìn)一步確保了藥品的安全性和有效性。