冷凝集素在交叉配血過程中的影響

張薇薇

（沈陽市骨科醫(yī)院承基醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000）

在對患者實施輸血前合理展開交叉配血試驗的意義顯著，其對于輸血安全性可做出充分保證。但是對于此類患者而言，如果血清中表現(xiàn)出較高冷凝集素抗體滴度，則會使得交叉配血困難度顯著增加[1-2]。對于冷凝集而言，其主要因為自身抗體導致，于低溫條件下紅細胞會呈現(xiàn)出凝集成團的情況。通常在＜ 31 ℃的條件下表現(xiàn)出冷凝集反應現(xiàn)象，其最強溫度條件主要集中于0～4 ℃，并呈現(xiàn)出最顯著的紅細胞凝集現(xiàn)象。在溫度呈現(xiàn)出一定程度升高后，會逐漸表現(xiàn)出凝塊消失以及抗原抗體復合物解離的現(xiàn)象，對此就冷凝集素的影響因素展開針對性分析的意義顯 著[3-4]。本次研究將我院2017年3月至2020年2月收治的50例疑難交叉配血凝集患者（因為冷凝集素導致）作為試驗對象，合理采用改良凝聚胺法、鹽水法、經(jīng)典抗人球蛋白試驗以及微柱凝膠免疫法對特異性抗體實施鑒定，合理展開血清學分析操作，主要探析在實施交叉配血試驗期間冷凝集素產生的影響，以對患者輸血的安全性做出保證。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將我院2017年3月至2020年2月收治的50例疑難交叉配血凝集患者（因為冷凝集素導致）作為試驗對象。其中女29例，男21例；年齡區(qū)間為46～71歲，平均為（59.25±2.59）歲。納入標準：①患者疾病類型主要集中于腫瘤、血透以及發(fā)熱等方面。②對于臨床輸血指征均滿足。排除標準：①非冷凝集素原因導致呈現(xiàn)出交叉配血凝集現(xiàn)象。②不具備輸血指征。

1.2 方法

1.2.1 合理對患者展開交叉配血試驗操作 選擇2支干燥潔凈試管分別完成次管以及主管的標注，準備獻血者1滴紅細胞懸液（3%～5%）以及受血者2滴血漿于主管中加入；準備受血者1滴紅細胞（3%～5%）以及獻血者2滴血漿于次管中加入，此外各準備0.6 mL低離子介質溶液于每管中分別加入，將其混勻后，保持1 min室溫孵育，且各準備凝聚氨溶液（1滴）于每管中加入，混勻后保持15 s靜置。于3 500 r/min轉速下離心15 s，去除上清液，靜置待表現(xiàn)出瀝干現(xiàn)象后，將試管輕輕搖動。觀察紅細胞是否表現(xiàn)出凝集現(xiàn)象，如呈現(xiàn)出凝集現(xiàn)象，準備1滴重懸液于各管中加入，確保輕輕混合后，對凝集有無散開進行觀察，通過顯微鏡對結果進行判定。

1.2.2 合理對患者展開冷凝集素試驗操作 對患者2 mL 靜脈血進行采集，于37 ℃條件下進行放置，觀察凝固后將血清實施分離。針對患者1 mL抗凝血進行采集，針對紅細胞利用溫生理鹽水實施3次洗滌，最后確保紅細胞懸液（2%）成功完成配置。之后選擇小試管10支，分別準備0.2 mL生理鹽水于各管中加入，準備0.2 mL血清中于第一管中加入，之后保持逐管稀釋。在確保混勻后，將0.2 mL去除，對于對照主要采用第10管展開。此外，準備紅細胞懸液（0.2 mL，2%）于各管中加入，保持搖勻后，于冰箱（4 ℃）中進行2～4 h放置，之后就具體結果進行觀察，針對表現(xiàn)出顯著凝集現(xiàn)象的滴度進行認真記錄。

2 結果

針對所有患者于臨床合理采用凝聚胺法完成交叉配血試驗操作，就主管以及次管反應進行觀察發(fā)現(xiàn)，均表現(xiàn)出程度不同的凝集顆?，F(xiàn)象，呈現(xiàn)出部分顯著特點。于37 ℃條件下保持5～10 min水浴，通過輕緩搖動確保顆粒能夠緩慢散開，之后于玻片中導入，通過顯微鏡實施觀察發(fā)現(xiàn)，紅細胞表現(xiàn)出彌漫以及散在排列的現(xiàn)象，針對其他亞型抗體造成免疫反應影響結果可以順利排除，成功完成交叉配血。準備O型正常人紅細胞于患者血清中加入，最終發(fā)現(xiàn)在＜32 ℃表現(xiàn)出凝集現(xiàn)象；在4 ℃時表現(xiàn)出的凝集現(xiàn)象明顯，之后逐漸升高溫度，直至37 ℃進行觀察，發(fā)現(xiàn)凝集均全部消失。對凝集素抗體滴度實施認真測定，就最終結果進行分析，范圍為1/64～1/512。

3 討論

對于交叉配血試驗而言，主要包括副試驗以及主試驗兩種。對于主試驗而言，主要利用受血者血清以及供血者紅細胞血液完成試驗，對二者之間是否表現(xiàn)出反應抗體進行檢測；對于副試驗，主要利用供血者血清以及受血者紅細胞懸液完成臨床試驗，對二者之間是否表現(xiàn)出不合抗體加以檢測。臨床開展交叉配血試驗目的在于對供血者以及受血者之間ABO血型匹配正確與否加以鑒定，對于受血者溶血性輸血反應的出現(xiàn)給予充分避免。

冷凝集素作為自身IgM完全抗體之一，于低溫條件下，受此種抗體的影響，會使得同型紅細胞或者自身表現(xiàn)出可逆性凝集的現(xiàn)象。通常于0～4 ℃會表現(xiàn)出凝集反應高峰的現(xiàn)象，當溫度逐漸上升，保持37 ℃后對凝集現(xiàn)象進行觀察，最終發(fā)現(xiàn)全部消失[5]。對于一定濃度冷凝集素抗體而言，于部分人群中均會發(fā)現(xiàn)。在通常情況下，對血清中冷凝集素效價進行分析，正常人均＜1/16，從而不會導致表現(xiàn)出系列癥狀現(xiàn)象。但是因為系列病理因素的影響，會使得冷凝集素效價呈現(xiàn)出一定程度增高現(xiàn)象，從而對應表現(xiàn)出冷凝集素綜合征現(xiàn)象[6-12]。因為冷凝集素的影響，會使得系列檢驗項目呈現(xiàn)出失真現(xiàn)象，尤其以血常規(guī)受到的影響較為顯著，對于血型結果的測定均會產生對應影響，尤其針對交叉配血試驗會產生顯著 影響[13-20]。

本次研究發(fā)現(xiàn)，針對所有患者于臨床合理采用凝聚胺法完成交叉配血試驗操作，就主管以及次管反應進行觀察發(fā)現(xiàn)，均表現(xiàn)出程度不同凝集顆粒現(xiàn)象，呈現(xiàn)出部分顯著特點，之后于37 ℃條件下保持 5～10 min水浴，通過輕緩搖動確保顆粒能夠緩慢散開，之后于玻片中導入，通過顯微鏡實施觀察發(fā)現(xiàn)，紅細胞表現(xiàn)出彌漫以及散在排列的現(xiàn)象，針對其他亞型抗體造成免疫反應影響結果可以順利排除，成功完成交叉配血。準備O型正常人紅細胞于患者血清中加入，最終發(fā)現(xiàn)在＜32 ℃表現(xiàn)出凝集現(xiàn)象。在4 ℃時表現(xiàn)出的凝集現(xiàn)象明顯，之后逐漸升高溫度，直至37 ℃進行觀察，發(fā)現(xiàn)凝集均全部消失。對凝集素抗體滴度實施認真測定，就最終結果進行分析，范圍為1/64～1/512，對此未避免呈現(xiàn)出血液凝集情況，要求在開展輸血工作前積極做好37 ℃水浴工作，以充分實現(xiàn)用血安全性。

綜上所述，對于輸血科工作人員在日常配血期間，較易因為冷凝集而表現(xiàn)出交叉配血不合的情況，此時需要針對血清合理完成系列冷凝集素檢測工作。針對冷凝集素具體檢測期間，需要同其他抗體以及RBC自身凝聚進行有效鑒別。如患者表現(xiàn)出冷凝集現(xiàn)象，則針對其在給予交叉配血期間，對于加溫輸注工作需要認真完成，以將血清中表現(xiàn)出的冷凝集素影響充分消除，且在輸血期間需要對緩慢滴入做出充分保證，以對患者用血的安全性做出保證，促進患者病情康復。