APOE、SLCO1B1多態(tài)性與老年 2型糖尿病合并輕度認知功能障礙的相關(guān)性

郭曉玲，張 毅，陳 蕓，張 瑤，胡瑋璟(山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院內(nèi)科教研室，太原 00000；山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院老年病科；山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院外科教研室；通訊作者,E-mail:yizhang95@6.com)

2型糖尿病是一種慢性疾病，老年人需要良好的認知功能來進行自我護理和血糖控制，從而避免急性或長期的糖尿病相關(guān)并發(fā)癥。2型糖尿病也是老年人中普遍存在的與認知能力下降和癡呆相關(guān)的疾病[1]。研究表明，載脂蛋白E4(apolipoprotein E4，APOE-4)等位基因是發(fā)展為阿爾茲海默病(Alzheimer’s disease，AD)的一個強遺傳風(fēng)險因素[2]。APOE-4可能是2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)、T2DM合并冠心病和腦梗死的危險因素[3]。也有研究表明，SLCO1B1作為一種可能在細胞內(nèi)β淀粉樣蛋白-42(Aβ-42)的攝取中發(fā)揮重要作用的攝取轉(zhuǎn)運體，將成為認知障礙治療的新靶點[4]。本研究擬分析老年2型糖尿病合并輕度認知功能障礙(mild cognitive impairment，MCI)與APOE、SLCO1B1多態(tài)性的相關(guān)性，以期從基因?qū)用鏋樘骄垦泳徖夏闠2DM認知功能下降提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2020年5月至2022年5月在山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院老年病科門診及住院的79例老年T2DM患者為研究對象。所有入選者均知情同意并自愿參與。根據(jù)是否合并MCI，分為老年T2DM合并MCI組(病例組)和老年T2DM認知正常組(對照組)。其中，病例組男33例，女12例，年齡(71.76±9.09)年；正常對照組男21例，女13例，年齡(68.95±7.21)年；兩組間年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入標準及排除標準

納入標準：年齡>60歲；糖尿病診斷符合WHO1999年制定的標準,分型明確為2型；MCI診斷標準參照《2018中國癡呆與認知障礙診治指南》[5]。排除標準：有任何引起認知功能改變的疾病史，如帕金森病、精神疾患等；有糖尿病急性并發(fā)癥者及嚴重肝腎疾病、慢性消耗性疾病、甲減或甲亢者、服用他汀類藥物者；其他原因不能配合量表檢查者。

1.3 研究方法

收集研究對象的一般臨床資料包括姓名、性別、年齡，通過高通量測序法檢測APOE基因多態(tài)性、SLCO1B1基因多態(tài)性，并進行蒙特利爾認知評估量表(Montreal cognitive assessment，MoCA)、簡易精神狀態(tài)量表(mini-mental state examination，MMSE)得分評估，評價個體認知功能水平及其影響因素。

1.4 評估指標

對APOE、SLCO1B1多態(tài)性進行統(tǒng)計，其中APOE由E2，E3和E4三個等位基因構(gòu)成，組成6種基因型：E2/E2，E2/E3，E3/E3，E2/E4，E3/E4，E4/E4[6]。SLCO1B1有388A>G和521T>C兩個突變位點，其中388A>G位點有A和G兩個等位基因，組成3種基因型：AA、AG、GG。521T>C位點有T和C兩個等位基因，組成3種基因型：TT、TC、CC[6]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS26.0統(tǒng)計軟件，基因型頻率用Hardy-Weinberg平衡檢驗。采用χ2檢驗分析基因型、等位基因在病例組與對照組的分布情況，采用Logistic回歸分析老年2型糖尿病患者合并輕度認知功能障礙的影響因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組和對照組APOE等位基因比較

經(jīng)χ2檢驗，病例組和對照組APOE等位基因分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

表1 兩組間APOE等位基因比較 例(%)Table 1 Comparison of APOE allele distribution between the two groups cases(%)

2.2 病例組和對照組APOE基因型比較

經(jīng)χ2檢驗分析，兩組間APOE基因型分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

表2 兩組間APOE基因型比較 例(%)Table 2 Comparison of APOE genotype between the two groups cases(%)

2.3 病例組和對照組SLCO1B1等位基因比較

兩組間患者SLCO1B1等位基因頻率分布經(jīng)卡方檢驗，388A>G和521T>C等位基因頻率分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表3)。

表3 兩組間SLCO1B1等位基因頻率比較 頻次(%)Table 3 Comparison of SLCO1B1 allele frequency between the two groups frequencies(%)

2.4 病例組和對照組SLCO1B1基因型比較

SLCO1B1基因388A>G位點的基因型分布在兩組的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)χ2檢驗，521T>C位點基因型分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表4)。

表4 兩組間SLCO1B1基因型比較 頻次(%)Table 4 Comparison of SLCO1B1 genotype distribution between the two groups frequencies(%)

2.5 老年T2DM患者合并MCI的Logistic分析

以老年T2DM患者是否合并MCI作為因變量，以APOE等位基因、APOE基因型、SLCO1B1基因型作為自變量，采用Logistic回歸分析APOE、SLCO1B1基因多態(tài)性對老年T2DM合并MCI的影響。結(jié)果顯示，SLCO1B1基因型與老年T2DM合并MCI無明顯相關(guān)性(P>0.05)，APOE等位基因、APOE基因型對老年T2DM合并MCI的發(fā)病有影響，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表5)。

表5 老年T2DM患者合并MCI的Logistic分析Table 5 Logistic analysis of influencing factors of MCI in elderly T2DM patients

3 討論

人類壽命的延長和人口老齡化是增加T2DM認知功能障礙的一個關(guān)鍵因素[7]。在老年T2DM中，認知功能障礙根據(jù)嚴重程度大致可以分為3個階段：糖尿病相關(guān)的認知衰退、MCI和癡呆[7]。MCI是介于正常衰老和癡呆間的中間狀態(tài)。與年齡和教育程度相稱的正常老人對比，患者存在輕度認知功能下降，但日常功能未受到顯著影響[7]。研究表明，認知功能障礙在某些認知領(lǐng)域中與2型糖尿病存在基因重疊，尤其在老年人群中，2型糖尿病與注意力、工作記憶和面孔記憶之間存在顯著的遺傳相關(guān)性[8]。

APOE是第19號染色體上的一個基因，編碼由299個氨基酸殘基組成的多功能蛋白，廣泛參與機體代謝，具有參與血脂代謝、細胞生長、免疫控制、神經(jīng)細胞的損傷和修復(fù)等功能[9]。Bradley等[3]研究表明，APOE-4攜帶者患阿爾茲海默病的風(fēng)險增加，一個APOE-4等位基因的雜合子攜帶者發(fā)生這種神經(jīng)退行性疾病的可能性是非攜帶者的3～4倍，純合子攜帶者的風(fēng)險甚至更高[3]。而本研究中，病例組和對照組均以APOE-3等位基因為主，分別為70.0%和69.1%。病例組中APOE-4等位基因占比22.2%，APOE-2等位基因占比7.8%，在對照組中，APOE-4等位基因占比10.3%，APOE-2等位基因占比20.6%。病例組中基因型分布以E3/E3最多，占比46.7%，E3/E4次之，占比37.8%。對照組中E3/E3分布最多，占比50.0%，E2/E3次之，占比29.4%。經(jīng)χ2檢驗，APOE等位基因和基因型分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。經(jīng)Logistic回歸分析示，APOE等位基因和APOE基因型可能是老年2型糖尿病合并輕度認知功能障礙的獨立危險因素。這與Rodriguez等[10]研究結(jié)果一致。

SLCO1B1基因，全稱溶質(zhì)載體有機負離子轉(zhuǎn)運蛋白家族成員1B1，位于第12號染色體上，編碼膜結(jié)合的鈉非依賴性有機陰離子轉(zhuǎn)運蛋白(organic anion transport protein 1B1，OATP1B1)[11]，具有高度遺傳多態(tài)性，在中國人群中388A>G和521T>C的突變率分別為73.4%和14%[14]，該蛋白介導(dǎo)許多內(nèi)源性和外源性化合物的細胞內(nèi)流，包括單酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，如他汀類藥物。通過搜索數(shù)據(jù)庫、評估使用他汀類藥物患者認知功能的隨機對照試驗、隊列研究及橫斷面研究的最新綜述未顯示他汀類藥物對認知有不良影響[12]。相反，他汀類藥物可能通過多種機制對認知產(chǎn)生有益影響，包括改善內(nèi)皮功能、減少自由基形成和減少炎癥反應(yīng)等[12]。陳小容等[13]的研究也表明，在進行個性化他汀類藥物治療后，認知障礙患者的認知評分有明顯改善。其次，在認知正常的老年人中，腦脊液Aβ-42減少與情景記憶不良和海馬體積減少有關(guān)[14]，SLCO1B1作為一種可能在細胞對Aβ-42的攝取中發(fā)揮重要作用的攝取轉(zhuǎn)運體，將成為認知障礙治療的新靶點[4]，具體機制有待進一步探索。而目前SLCO1B1基因多態(tài)性與疾病相關(guān)性的研究甚少。本研究中，兩組間SLCO1B1等位基因頻率分布無統(tǒng)計學(xué)差異，兩組間SLCO1B1388A>G位點基因型分布無統(tǒng)計學(xué)差異；521T>C位點的基因型分布中，病例組TC占比55.6%，TT占比37.8%，CC占比6.7%，對照組中TC占比26.5%，TT占比64.7%，CC占比8.8%，經(jīng)χ2檢驗521T>C位點基因型分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。Logistic回歸分析顯示，SLCO1B1基因型與老年T2DM合并MCI無明顯相關(guān)性。之所以出現(xiàn)不同結(jié)論考慮可能原因有，研究樣本量少，不具有代表性，或者在患者的篩選和統(tǒng)計分析處理過程中存在偏倚或混雜偏倚等。

綜上所述，APOE基因多態(tài)性與老年2型糖尿病合并輕度認知功能障礙有相關(guān)性，APOE等位基因和基因型是老年2型糖尿病合并輕度認知功能障礙的獨立危險因素，SLCO1B1基因多態(tài)性與老年2型糖尿病合并輕度認知功能障礙無相關(guān)性。本實驗中可能存在樣本選取不全面、數(shù)量不足及個人評估差異等因素影響，有待進一步擴大樣本量及個體化研究。由于老年T2DM患者本身合并較多并發(fā)癥、認知障礙發(fā)生的復(fù)雜性，對于老年T2DM合并MCI的研究不僅僅是基于基因組學(xué)的方法，同樣需要臨床方法與基礎(chǔ)研究的聯(lián)合，以期實現(xiàn)老年T2DM合并MCI的精準化防控和治療。