塔里木盆地驢感染圓形亞科線蟲(chóng)種類(lèi)及種群組成調(diào)查

張偉信，王時(shí)偉，何良軍，楊連升，雷曼紅，汪 明

(1.塔里木大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆 阿拉爾 843300；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193)

線蟲(chóng)病是危害馬屬動(dòng)物養(yǎng)殖最大的寄生蟲(chóng)病，通常為多種線蟲(chóng)混合感染，大圓線蟲(chóng)(圓形亞科)和小圓線蟲(chóng)(盅口亞科)是常見(jiàn)和重要的寄生蟲(chóng)。患病動(dòng)物表現(xiàn)為被毛粗亂，貧血，疝痛和腹瀉等癥狀，幼齡馬駒可以感染幾千條線蟲(chóng)，表現(xiàn)出嚴(yán)重的臨床癥狀和死亡率[1]。研究表明，不同地區(qū)、不同管理方法線蟲(chóng)的流行率不同[2-3]，馬屬動(dòng)物內(nèi)在因素(例如年齡和性別)也會(huì)影響線蟲(chóng)感染和蟲(chóng)卵排出[4-5]。在一定的管理?xiàng)l件下和特定的氣候環(huán)境，徹底調(diào)查馬屬動(dòng)物線蟲(chóng)流行率有助于設(shè)計(jì)經(jīng)濟(jì)有效的寄生蟲(chóng)防控措施。

塔里木盆地地理及氣候特殊，為了解該生態(tài)環(huán)境下驢感染圓形亞科線蟲(chóng)(Strongylinae)情況，2012年7 月至2013 年5 月，本實(shí)驗(yàn)室調(diào)查了該盆地綠洲252 頭役用驢。依據(jù)蟲(chóng)體形態(tài)學(xué)進(jìn)行種類(lèi)鑒定，針對(duì)Strongylinae 的種類(lèi)及流行率做了調(diào)查，并首次依據(jù)宿主年齡對(duì)這些寄生蟲(chóng)的種群組做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，調(diào)查結(jié)果為塔里木盆地驢的高效養(yǎng)殖和寄生蟲(chóng)防控提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 蟲(chóng)體采集 隨機(jī)采集新疆喀什地區(qū)、和田地區(qū)盆地周邊綠洲的252 頭役用驢，年齡在5 個(gè)月～15歲，其中1 歲以下29 頭，1 歲以上208 頭。包括新疆驢、烏頭驢、疆岳驢。采用系統(tǒng)剖檢法將小腸、結(jié)腸、盲腸和直腸分段結(jié)扎，分別取出10 %內(nèi)容物，檢查分離蟲(chóng)體；沖洗腸道后分離粘膜上蟲(chóng)體。

1.2 蟲(chóng)體清洗、固定及保存 采用生理鹽水清洗分離蟲(chóng)體，用70 ℃70 %酒精固定，待酒精冷卻后將蟲(chóng)體移入75 %酒精中加標(biāo)簽保存。編號(hào)，記錄宿主來(lái)源、年齡、采集時(shí)間等信息。

1.3 蟲(chóng)體觀察與鑒定 用乳酸苯酚溶液透明化處理蟲(chóng)體，在光學(xué)顯微鏡下觀察。參照文獻(xiàn)[6]的方法鑒定到種。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用生物統(tǒng)計(jì)方法處理觀察數(shù)據(jù)，分別統(tǒng)計(jì)調(diào)查動(dòng)物年齡，采集線蟲(chóng)的種類(lèi)和感染率。根據(jù)文獻(xiàn)[7]依據(jù)寄生蟲(chóng)感染率將其劃分為優(yōu)勢(shì)種、次要種和衛(wèi)星種(感染率>2/3 為優(yōu)勢(shì)種，2/3>感染率>1/3 為次要種，感染率<1/3 為衛(wèi)星種)。

2 結(jié)果

2.1 圓形亞科線蟲(chóng)感染情況 本實(shí)驗(yàn)調(diào)查發(fā)現(xiàn)9 種圓形亞科線蟲(chóng)，以普通圓線蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種(86.5 %)，其余8 種均為衛(wèi)星種(表1)。

2.2 不同年齡階段感染圓形亞科線蟲(chóng)種類(lèi)情況 通過(guò)年齡對(duì)實(shí)驗(yàn)驢分組，采用卡方檢驗(yàn)分析不同年齡階段驢圓形亞科蟲(chóng)體感染情況，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

在不同年齡組中普通圓線蟲(chóng)的感染率均最高，其中≤1 歲組普通圓線蟲(chóng)感染率54.76 %，無(wú)齒圓線蟲(chóng)、短尾三齒線蟲(chóng)、馬圓線蟲(chóng)、伊氏雙齒線蟲(chóng)未見(jiàn)感染；2 歲～3 歲組普通圓線蟲(chóng)感染率90 %，馬圓線蟲(chóng)、細(xì)頸三齒線蟲(chóng)、伊氏雙齒線蟲(chóng)感染率最低(2.5 %)；4 歲～9 歲組普通圓線蟲(chóng)感染率93.19 %，細(xì)頸三齒線蟲(chóng)感染率最低(0.68 %)；≥10 歲組普通圓線蟲(chóng)感染率95.65 %，無(wú)齒圓線蟲(chóng)、短尾三齒線蟲(chóng)、細(xì)頸三齒線蟲(chóng)未見(jiàn)感染率。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1 歲以內(nèi)的驢普通圓線蟲(chóng)感染率最低(54.76 %)，其他年齡組感染率均在90 %以上，但經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異不顯著。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，無(wú)齒圓線蟲(chóng)僅在2 歲～9 歲的驢中分離到，表明該線蟲(chóng)的流行率比較低，較容易感染青年驢和中年驢，10 歲以上和1 歲以下的驢不易感染，組間差異極顯著(p<0.01)。

表2 4 個(gè)年齡組驢圓形亞科蟲(chóng)體感染情況Table 2 Strongyliae species distribution between four age groups

2.3 圓形亞科線蟲(chóng)種群組成情況 252 頭驢均為線蟲(chóng)混合感染，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1 頭驢最多可以感染6種，最少感染1 種(圖1，表3)。

有4 種圓形亞科線蟲(chóng)(普通圓線蟲(chóng)、鋸齒狀三齒線蟲(chóng)、小三齒線蟲(chóng)和日本三齒線蟲(chóng))可以感染各種年齡階段的驢；感染1 歲以下和2 歲～9 歲的驢有5種圓形亞科線蟲(chóng)(普通圓線蟲(chóng)、鋸齒狀三齒線蟲(chóng)、小三齒線蟲(chóng)、日本三齒線蟲(chóng)和細(xì)頸三齒線蟲(chóng))；感染2歲～9 歲和10 歲以上的驢圓形亞科線蟲(chóng)有6 種(普通圓線蟲(chóng)、鋸齒狀三齒線蟲(chóng)、小三齒線蟲(chóng)、伊氏雙齒線蟲(chóng)、日本三齒線蟲(chóng)、馬圓線蟲(chóng))；感染1 歲以下和10 歲以上的驢圓形亞科線蟲(chóng)有4 種(普通圓線蟲(chóng)、鋸齒狀三齒線蟲(chóng)、小三齒線蟲(chóng)和日本三齒線蟲(chóng))。

圖1 3 個(gè)年齡組圓形亞科線蟲(chóng)蟲(chóng)種分布Fig.1 Strongylinae species distribution among the three age groups

表3 4 個(gè)年齡階段驢感染圓形亞科線蟲(chóng)組成情況Table 3 Strongylinae species distribution between four age groups

統(tǒng)計(jì)結(jié)果為：df=18，χ2=48.83,χ2(18)>χ20.01(18)，p<0.01，表明4 個(gè)年齡組間，感染圓形亞科線蟲(chóng)的種類(lèi)數(shù)量差異極顯著。小于1 歲的年齡組中，23.8 %和54.76 %的驢駒分別感染0 種和1 種線蟲(chóng)，在2 歲～3 歲組中，25 %、35 %和30 %的未成年驢分別感染1 種、2 種和3 種線蟲(chóng)；在4 歲～9 歲組中，52.38 %和27.21 %個(gè)體分別感染1 種和2 種線蟲(chóng)；在≥10 歲組，43.47 %和26.08 %個(gè)體分別感染1 種和2 種線蟲(chóng)。同時(shí)感染4 種以上圓形亞科線蟲(chóng)的驢數(shù)量較少。

數(shù)據(jù)顯示：小于1 歲的驢感染線蟲(chóng)的種類(lèi)最少，感染1 種的驢數(shù)量最多，其次為未感染的，在調(diào)查時(shí)觀察到該年齡段驢的腸壁內(nèi)有許多幼蟲(chóng)在腸壁內(nèi)形成的結(jié)節(jié)，證明驢駒已被線蟲(chóng)感染，但蟲(chóng)體處于幼蟲(chóng)階段，還未到達(dá)腸腔內(nèi)寄生；2 歲～3 歲感染線蟲(chóng)的種類(lèi)迅速升高，在4 個(gè)年齡組中，感染2 種(35 %)、3 種(30 %)和4 種(5 %)圓形亞科線蟲(chóng)的比例均是最高的，表明2 歲～3 歲驢體內(nèi)的圓形亞科線蟲(chóng)的生物多樣性是最高的；4 歲～9 歲組和10 歲以上組感染圓形亞科線蟲(chóng)的種類(lèi)差異不顯著，主要為1 種和2 種線蟲(chóng)的感染。

3 討論

與塔里木盆地生態(tài)環(huán)境較接近的埃塞俄比亞研究顯示線蟲(chóng)感染驢較普遍，調(diào)查數(shù)據(jù)顯示其中Strongylinae 有2 屬4 種，普通圓線蟲(chóng)(51.8 %)、無(wú)齒圓線蟲(chóng)(30.8 %)、馬圓線蟲(chóng)(12.3 %)和細(xì)頸三齒線蟲(chóng)(29.7 %)[8]。與地理氣候情況相似的埃塞俄比亞相比，塔里木盆地驢感染Strongylinae 種類(lèi)較多(3 屬9種)，普通圓線蟲(chóng)的流行率高(86.5 %)，而無(wú)齒圓線蟲(chóng)(5.95%)，馬圓線蟲(chóng)(1.98%)，細(xì)頸三齒線蟲(chóng)(1.19%)流行率較低。國(guó)內(nèi)卜艷珍調(diào)查了2006 年～2007 年河南省34 頭驢體內(nèi)寄生圓線蟲(chóng)的感染情況，共鑒定出22 種圓線蟲(chóng)，隸屬于2 亞科7 屬，其中圓形亞科有4 種：普通圓線蟲(chóng)(88.2 %)、無(wú)齒圓線蟲(chóng)(8.8 %)、鋸齒狀三齒線蟲(chóng)(8.8 %)和日本三齒線蟲(chóng)(8.8 %)，以普通圓線蟲(chóng)的感染率和平均感染強(qiáng)度都很高[9-11]。本次調(diào)查結(jié)果也顯示普通圓線蟲(chóng)是感染塔里木盆地驢的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種。

該調(diào)查首次在塔里木盆地根據(jù)宿主年齡研究驢感染Strongylinae 的種群組成，其中普通圓線蟲(chóng)、鋸齒狀三齒線蟲(chóng)、小三齒線蟲(chóng)和日本三齒線蟲(chóng)可感染各種年齡階段的驢，2 歲～3 歲的驢感染Strongylinae的種類(lèi)的生物多樣性最高。調(diào)查結(jié)果顯示2 歲～3歲是驢容易感染大圓線蟲(chóng)的年齡，應(yīng)該重視該年齡段驢的驅(qū)蟲(chóng)工作。被調(diào)查的252 頭驢均來(lái)自塔里木盆地的周邊綠洲農(nóng)民家庭，幾乎未接觸過(guò)驅(qū)蟲(chóng)藥，屠宰后通過(guò)腸道剖檢獲得蟲(chóng)體，使本研究獲得數(shù)據(jù)更具有代表性。

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