家禽衰老進程中加速卵泡閉鎖的微環(huán)境因素

崔希羽 陳 偉 郭 浩 鄭春田,*

(1.天津農(nóng)學院動物科學與動物醫(yī)學學院，天津市農(nóng)業(yè)動物繁殖與健康養(yǎng)殖重點實驗室，天津300392；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學院動物科學研究所，畜禽育種國家重點實驗室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室,廣東省動物育種與營養(yǎng)公共實驗室,廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點實驗室,廣州510640；3.內(nèi)蒙古通遼市動物疫病預防控制中心，通遼028000)

蛋禽達到產(chǎn)蛋高峰期后隨日齡增長產(chǎn)蛋率快速下降。以集約化養(yǎng)殖的蛋雞為例，在74～94周齡產(chǎn)蛋率驟降，進入產(chǎn)蛋末期[1]。卵巢衰老所誘導的卵泡成熟過程減緩和卵泡閉鎖增加是造成蛋禽后期產(chǎn)蛋率下降的主要原因，也是影響蛋禽使用年限的關(guān)鍵因素。卵泡中顆粒細胞凋亡是造成卵泡閉鎖的重要細胞學機制。本文圍繞家禽衰老進程中卵泡閉鎖加快現(xiàn)象，重點闡述了家禽衰老進程中顆粒細胞微環(huán)境變化及卵泡閉鎖信號，為家禽產(chǎn)蛋后期卵泡發(fā)育調(diào)控提供參考。

1 衰老家禽卵泡閉鎖

卵泡閉鎖是指卵泡在發(fā)育過程中停止生長，出現(xiàn)松散萎縮，逐漸退化并與基底脫離的現(xiàn)象。正常生理條件下，卵泡閉鎖是一種由激素調(diào)控卵泡數(shù)量的生理機制，并在卵泡發(fā)育整個階段都會發(fā)生，這種機制使得卵巢內(nèi)各個階段的卵泡數(shù)量維持在一個相對穩(wěn)定范圍內(nèi)。然而，早在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)，隨年齡增長，在各種外界因素的影響下，卵泡閉鎖與卵泡丟失加快[2]。有關(guān)家禽的研究發(fā)現(xiàn)，580日齡母雞等級前卵泡數(shù)量相比280日齡母雞顯著下降，且更多的等級前卵泡發(fā)生了閉鎖[3]，相關(guān)試驗也證明，衰老會導致蛋雞卵泡生存條件惡化，卵泡結(jié)構(gòu)受損[4]。以上種種證據(jù)表明卵巢中卵泡閉鎖加速是產(chǎn)蛋后期家禽產(chǎn)蛋性能下降的主要原因。

2 顆粒細胞與卵泡閉鎖

卵泡閉鎖的發(fā)生與顆粒細胞的凋亡密切相關(guān)。顆粒細胞是卵泡內(nèi)數(shù)量最多的細胞，同時也是卵泡內(nèi)功能最多的細胞，參與雌激素與孕激素的合成與分泌[5]，在卵泡的發(fā)育成熟和閉鎖過程中起主要調(diào)控作用[6]。家禽卵泡中，顆粒細胞緊密分布在卵母細胞外側(cè)，呈單層排列，并隨卵泡生長而增殖。當卵母細胞開始成熟并逐漸積累卵黃時，單層顆粒細胞發(fā)生增殖，此時卵泡體積增大，卵泡膜形成，初級卵泡轉(zhuǎn)變?yōu)榇渭壜雅?，進一步發(fā)育成等級卵泡后，顆粒細胞層隨卵泡體積繼續(xù)增加而變薄[7]。早期研究在閉鎖卵泡中觀察到顆粒細胞是卵泡中最早發(fā)生凋亡的細胞群，當卵泡閉鎖發(fā)生時，顆粒層逐漸脫落，最后消失，而卵母細胞、膜細胞等其他細胞仍存在。這表明卵泡閉鎖極有可能由顆粒細胞的凋亡而誘導。卵泡閉鎖是一個復雜的生物學過程，受細胞凋亡、激素和旁分泌等因素調(diào)控，但都涉及顆粒細胞凋亡事件的發(fā)生[8]。因此，凋亡顆粒細胞數(shù)量增加是誘導衰老進程中閉鎖卵泡增加的重要原因。

3 顆粒細胞的凋亡

3.1 旁分泌、自分泌激素與顆粒細胞凋亡

卵泡發(fā)育是由卵巢局部旁分泌、自分泌等機制共同調(diào)控的復雜生物學過程，多種激素和卵巢分泌因子參與卵泡發(fā)育調(diào)控，其中部分因子可通過抑制顆粒細胞凋亡和卵泡閉鎖影響家禽卵泡早期發(fā)育、優(yōu)勢卵泡選擇與排卵。

(4)選煤廠入洗能力整體下降。由于煤泥水系統(tǒng)處理能力不足，致使選煤廠不得不降低入洗量，以保證系統(tǒng)正常工作。

激素與分泌因子變化是衰老進程中影響卵泡閉鎖和顆粒細胞凋亡的重要外環(huán)境因素。產(chǎn)蛋后期蛋禽性激素分泌能力衰退，卵泡閉鎖加快。Ciccone等[35]通過比較30周齡(產(chǎn)蛋高峰期)蛋雞、60周齡停產(chǎn)與60周齡在產(chǎn)蛋雞發(fā)現(xiàn)，相比30周齡蛋雞，60周齡停產(chǎn)與60周齡在產(chǎn)蛋雞的血漿中LH含量均顯著降低，而停產(chǎn)60周齡的蛋雞中FSH含量反而更高，由此認為蛋禽衰老后產(chǎn)蛋率下降現(xiàn)象主要與LH有關(guān)而非FSH。除了LH外，其他有利于顆粒細胞生長的信號因子也會隨著家禽年齡增長而降低。在紹興鴨中發(fā)現(xiàn)，血漿IGF-1含量在200日齡時達到最高值，在470日齡時下降，顯著低于200日齡時[36]。而在海蘭褐雞中的研究發(fā)現(xiàn)，隨母雞開始產(chǎn)蛋，血清E2含量從90日齡開始逐步上升，在280日齡即產(chǎn)蛋高峰期達到最高值，但在580日齡產(chǎn)蛋后期顯著下降[37]。除激素分泌水平變化外，卵泡對激素的敏感性以及卵泡受體表達量也會隨年齡增長而改變，例如，卵泡對LH的敏感性隨母雞年齡增長而下降[38]。卵巢FSHR蛋白表達量隨年齡增長而顯著降低[39]，導致老齡雌性動物中出現(xiàn)FSH應(yīng)答敏感性降低的現(xiàn)象。因此，在一些老齡雌性動物中FSH含量不變而成熟卵泡數(shù)量卻不增加的現(xiàn)象很可能與FSHR減少有關(guān)。

新的研究揭示，顆粒細胞中線粒體損傷及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是衰老過程中誘導細胞凋亡的重要事件[17]。線粒體作為細胞代謝的調(diào)節(jié)中樞，是顆粒細胞中最多的細胞器，研究表明，線粒體功能障礙是卵巢衰老過程中導致卵泡數(shù)量和質(zhì)量下降的重要原因[18-19]。在超高齡小鼠卵巢顆粒細胞中觀測到線粒體形態(tài)改變，線粒體膜電位下降，且線粒體自噬分子磷酸酶及張力蛋白同源物誘導的蛋白激酶(PTEN induced putative kinase，PINK)和Parkin的mRNA表達水平增加[20]。付志紅等[21]研究發(fā)現(xiàn)，在女性機體衰老進程中，卵泡液中活性氧(reactive oxygen species，ROS)含量顯著增多，顆粒細胞線粒體活力降低。此外，隨著女性年齡的增加，細胞呼吸鏈電子傳遞能力降低，電子泄漏增加，氧化產(chǎn)物堆積，顆粒細胞線粒體損傷，并最終引發(fā)顆粒細胞凋亡[22]。由此可見，當顆粒細胞線粒體結(jié)構(gòu)損傷后造成ROS積累，最終引發(fā)細胞凋亡和卵泡閉鎖。

研究表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)亦是誘導顆粒細胞凋亡和卵泡閉鎖的重要因素，且在卵巢纖維化等卵巢病理過程中發(fā)揮著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是細胞為應(yīng)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)錯誤折疊與未折疊蛋白堆積及鈣離子紊亂做出的一種保護性應(yīng)激反應(yīng)，持久或者強烈的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激會導致細胞凋亡和自噬[23-24]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)可被ROS或者鈣離子紊亂進一步加劇[25-26]，嚴重的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可誘導顆粒細胞凋亡，促進卵泡閉鎖發(fā)生[27]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生早期，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)和葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94(glucose regulated protein 94，GRP94)等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶蛋白的基因轉(zhuǎn)錄增加，幫助內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中蛋白折疊，減少非折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)堆積，GRP78和GRP94表達的上調(diào)常作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)早期應(yīng)激發(fā)生的標志；當內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激嚴重時，位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的凋亡響應(yīng)蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶12(cysteme aspartate specific protease 12，Caspase12)和凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK1)及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)被激活，誘導下游凋亡信號級聯(lián)反應(yīng)[28]。研究發(fā)現(xiàn)，山羊早期閉鎖卵泡顆粒細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志物GRP78、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡響應(yīng)蛋白轉(zhuǎn)錄因子C/EBP的同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein，CHOP)的表達相比正常卵泡顯著上調(diào)，而在晚期閉鎖卵泡的顆粒細胞中，GRP78的mRNA和蛋白表達量下調(diào)，CHOP的mRNA表達量卻有進一步升高的趨勢[29]，這暗示當細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激加劇時，可通過促凋亡蛋白誘導細胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)，雞卵泡顆粒細胞中發(fā)生的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與小白卵泡的閉鎖有關(guān)[30]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激隨動物衰老進程的推進而更加嚴重。Kim等[31]研究發(fā)現(xiàn)，小鼠衰老模型中卵母細胞GRP78蛋白及細胞凋亡因子表達增加。Yao等[32]在580日齡產(chǎn)蛋后期的老齡母雞等級前顆粒細胞中也發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)受損現(xiàn)象，相比280日齡蛋雞的正常卵泡，580日齡蛋雞正常和閉鎖卵泡中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志基因半胱天冬氨酸蛋白酶9(cysteme aspartate specific protease 9，Caspase9)、GRP78和CHOP的表達均顯著上調(diào)，且細胞凋亡基因Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 associated X protein，BAX)的表達也上調(diào)。而改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可一定程度減緩在體外培養(yǎng)的牛卵母細胞衰老，并提高卵母細胞質(zhì)量[33]。這表明，持續(xù)性的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能是家禽衰老進程中誘導卵泡閉鎖的重要因素。此外，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與線粒體功能障礙聯(lián)系緊密[34]，該生物學機制很有可能在卵巢退化、生殖力下降以及卵巢疾病方面作為一個新的治療靶點。

動物衰老進程中氧化應(yīng)激誘導的顆粒細胞氧化損傷是造成卵巢功能衰退的重要原因，氧化應(yīng)激指機體內(nèi)自由基生成與清除系統(tǒng)失衡而引起的一系列生物學反應(yīng)。老齡動物機體自由基清除能力減弱，卵巢組織中自由基堆積過多，造成顆粒細胞和卵母細胞氧化損傷，從而誘導卵泡閉鎖，卵巢功能衰退[40]。目前研究已充分證明發(fā)生在家禽卵巢的氧化應(yīng)激是卵泡閉鎖和卵巢衰老的重要誘因[41]。

3.2 細胞器功能障礙誘導的顆粒細胞凋亡

顆粒細胞的生存同時受其自分泌功能的影響，雌激素和孕激素都是由顆粒細胞分泌的激素，并對顆粒細胞自身生長起到積極作用。雌激素對抑制顆粒細胞的凋亡以及卵巢功能的正常尤為關(guān)鍵，它能通過抑制早期腔前卵泡和腔體泡中的顆粒細胞凋亡，從而防止卵泡早期閉鎖[11]。雌激素合成與分泌受FSH與LH的共同調(diào)控[12]，F(xiàn)SH可通過細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2，ERK1/2)激活的方式作用于雌激素的合成[13]。在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)，在早期和晚期卵泡閉鎖階段的卵泡液中雌二醇(estradiol，E2)含量顯著低于正常卵泡[14]。

圖3展示了L=100個地面移動IoT設(shè)備的初始分布以及應(yīng)用本文方法所確定的最優(yōu)UAV布署效果.此次實驗采用8個UAV，如圖3(a)所示，100個IoT設(shè)備初始分布位置隨機，基于通信節(jié)能策略，首先形成了8個最優(yōu)分簇，其次在各簇聚類中心的影響下，UAV的布署位置實現(xiàn)最優(yōu)，如圖3(b)所示.

4 衰老過程中影響顆粒細胞微環(huán)境的因素

采用正交試驗L9(34)[15-16]設(shè)計，采用種實采后處理(A)、播種時間(B)、播種方式(C)3個因素，每個因素設(shè)置3個水平(表1)，試驗共設(shè)置9個處理，以各處理播種小區(qū)(2 m2)為1次重復，重復10次，不考慮互作。

4.1 激素紊亂

旁分泌機制通過促黃體素(luteinizing hormone，LH)和促卵泡激素(follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)參與顆粒細胞生存調(diào)節(jié)。LH具有雙重作用，在一定范圍內(nèi)其含量升高能抑制顆粒細胞的凋亡，超過該范圍則引起卵泡閉鎖和退化。在牦牛顆粒細胞中發(fā)現(xiàn)，較低含量(0.05～0.50 IU/mL)的LH可抑制顆粒細胞凋亡，促進雌激素和孕激素分泌；而高含量(5.0 IU/mL)的LH則誘導顆粒細胞凋亡[9]。研究發(fā)現(xiàn)，大卵泡相比小卵泡能接受更高的LH含量，當提高LH含量且超過小卵泡承受上限時，大卵泡能繼續(xù)發(fā)育，而小卵泡的生長則受到抑制或發(fā)生閉鎖[10]。與LH相似，F(xiàn)SH通過促卵泡生成素受體(follicle-stimulating hormone receptor，F(xiàn)SHR)調(diào)節(jié)顆粒細胞，并激活下游信號，進而促進顆粒細胞快速增殖。

衰老造成激素分泌發(fā)生變化，并進而影響卵巢微環(huán)境和卵泡生長。機體衰老進程中，細胞微環(huán)境發(fā)生改變，如自由基含量升高和鈣離子紊亂，這些環(huán)境因子的改變可直接導致細胞器如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體損傷，最終引起顆粒細胞凋亡和卵泡閉鎖。

在三維豎井模型中，使用MIDAS/GTS NX提供的實體單元來模擬地質(zhì)圍巖，使用板單元來模擬混凝土襯砌，使用植入式桁架來模擬錨桿。巖體本構(gòu)模型為彈塑性模型，采用莫爾-庫侖理論[2-4]。巖體及材料的物理力學參數(shù)如表1所示。

4.2 抗氧化能力下降及ROS生成增加

除卵巢自分泌與旁分泌激素外，顆粒細胞還受到卵巢局部調(diào)節(jié)因子調(diào)控。胰島素樣生長因子(insulin like growth factor，IGF)是卵泡發(fā)育必需的促生長因子，IGF-1可通過促進FSHR表達來增強顆粒細胞的FSH反應(yīng)[15]。成纖維生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)是成纖維細胞生長因子家族的一員，它可通過激活蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)信號,上調(diào)細胞周期蛋白依賴性激酶6(cyclin-dependent kinase 6，CDK6)和細胞周期蛋白依賴性激酶2(cyclin-dependent kinase 2，CDK2)的基因表達，進而促進小黃卵泡中顆粒細胞增殖[7]。表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)的作用與IGF相似，可通過增強FSHR蛋白表達，提高顆粒細胞FSH反應(yīng)來促進細胞增殖；此外，骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)也參與顆粒細胞的生存調(diào)節(jié)[16]。

高產(chǎn)蛋禽中，頻繁的排卵過程加劇了卵巢組織ROS的積累。與其他階段相比，老年蛋雞卵巢組織中抗氧化蛋白核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)、血紅素氧合酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)、醌氧化還原酶1[NAD(P)H: quinone oxidoreductase 1，NQO1]蛋白的表達量顯著下調(diào)，且卵巢組織谷胱甘肽(glutathione，GSH)含量、總抗氧化能力和總超氧化物歧化酶活性下降[42-43]。其中Nrf2是調(diào)控細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要蛋白因子，其介導的Nrf2-抗氧化反應(yīng)原件(antioxidant response element，ARE)信號通路被認為是家禽體內(nèi)最重要的抗氧化通路之一。在氧化應(yīng)激狀態(tài)下，Nrf2被激活并進入細胞核內(nèi)，與Maf蛋白結(jié)合形成異二聚體，進而與ARE結(jié)合，激活下游基因如HO-1、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl cysteine synthetase，γ-GCS)、NQO1等的表達，發(fā)揮抗氧化作用，降低ROS含量；Nrf2還能介導線粒體自噬來降解受損老化的線粒體，將ROS維持在低水平，保護細胞避免凋亡[44]。研究發(fā)現(xiàn)卵巢內(nèi)Nrf2的表達與年齡有關(guān)，小鼠性成熟前到老年期的生理過程中，隨著成熟卵泡數(shù)量先上升后下降，卵巢組織中Nrf2含量也表現(xiàn)出先增多后降低的趨勢[45]，這表明老齡雌性動物生殖能力下降很有可能與Nrf2表達降低有關(guān)。在小鼠模型上的研究發(fā)現(xiàn)，Nrf2蛋白的表達隨年齡增長而下調(diào)了5.3倍，Nrf2與ARE4的結(jié)合率降低40%，且Nrf2蛋白表達的減少主要源于其蛋白質(zhì)翻譯能力的下降，而非Nrf2的降解[46]。對卵巢組織中Nrf2蛋白及Nrf2-ARE信號通路的干預可能成為延長家禽生殖年限的重要手段。

4.3 鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)

鈣離子(Ca2+)在禽類卵泡發(fā)育過程中發(fā)揮著重要生理作用[47]，是細胞內(nèi)重要的第二信使，參與顆粒細胞代謝調(diào)控、增殖、分化與凋亡等重要生理過程[48]，并在激素合成等方面發(fā)揮著重要作用[49]。近年來諸多研究發(fā)現(xiàn)由Ca2+介導的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體交流信號改變是誘導細胞凋亡的一條重要途徑，而這種伴隨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體損傷出現(xiàn)的異常鈣交流現(xiàn)象導致的細胞凋亡在年齡相關(guān)的諸多疾病中出現(xiàn)，主要表現(xiàn)為從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)流向線粒體和胞漿的Ca2+增多[50]。早期研究已發(fā)現(xiàn)ROS會對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+釋放關(guān)鍵通道蛋白肌醇1，4，5三磷酸受體(inositol 1，4，5-trisphosphate receptors，IP3R)和蘭尼堿受體(ryanodine，RYR)造成氧化修飾，如谷胱甘肽化以及亞磺酸化等多種氧化修飾[51-52]，從而導致其對Ca2+敏感性降低,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中鈣泄漏，過量的Ca2+在線粒體附近堆積導致線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔道不可逆開放，引起ROS含量增加和線粒體受損，最終誘導細胞凋亡發(fā)生，且這種現(xiàn)象隨著年齡增長而加劇[53]。Ziegler等[54]通過對小鼠進行IP3R2基因敲除改善線粒體損傷研究，認為IP3R2型鈣釋放通道表達增加以及從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到線粒體的Ca2+通量增加是人體細胞衰老的誘導因素。與衰老哺乳動物上的發(fā)現(xiàn)相似，Yao等[3]發(fā)現(xiàn)已進入產(chǎn)蛋末期的蛋雞卵巢組織中IP3R蛋白表達量顯著高于產(chǎn)蛋高峰期蛋雞，這極有可能是顆粒細胞中鈣過載導致線粒體損傷的原因。因此，伴隨衰老發(fā)生在顆粒細胞中的Ca2+紊亂很可能是卵泡閉鎖的誘因。對顆粒細胞Ca2+轉(zhuǎn)運進行調(diào)控能改善卵泡閉鎖[3,55]和延緩卵巢早衰[56]，盡管其機制仍有待被進一步深入揭示，但該途徑有望成為調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和細胞衰老的重要手段。

遲恒的謀畫十分周密，魏昌龍眼光不住地閃爍，他還是有些顧慮：“嚇不住怎么辦？吳縣長老實人，詐他有點于心不忍?！?/p>

5 小 結(jié)

家禽卵泡閉鎖是細胞信號和激素等內(nèi)外環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，并最終影響繁殖功能和產(chǎn)蛋性能。顆粒細胞的凋亡是卵泡閉鎖的啟動機制。隨動物年齡的增長，激素分泌紊亂，有利于顆粒細胞生存的激素如E2、LH等含量降低，顆粒細胞可能更易發(fā)生凋亡；此外，顆粒細胞內(nèi)的ROS含量升高，同時抗氧化能力下降，引起的氧化應(yīng)激導致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體受損，由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑和線粒體途徑引起細胞凋亡；同時，還伴隨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的Ca2+外排增加，這會加劇線粒體功能障礙，誘導ROS含量升高，最后導致線粒體損傷，顆粒細胞凋亡，卵巢閉鎖(圖1)。

針對以上影響因素，目前生產(chǎn)中采用多種手段來提高蛋雞產(chǎn)蛋后期的產(chǎn)蛋性能，如添加雌激素類似物異黃酮或植物源抗氧化劑如白藜蘆醇、槲皮素、番茄紅素等[57-58]。最新一項研究發(fā)現(xiàn)柚皮苷既能作為一種植物性雌激素，又能起到抗氧化作用，可預防產(chǎn)蛋后期卵泡閉鎖，提高蛋禽產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋性能[41]。

FSH：促卵泡激素 follicle stimulating hormone；FSHR：促卵泡生成素受體 follicle-stimulating hormone receptor；E2：雌二醇 estradiol；LH：促黃體素 luteinizing hormone；LHR：促黃體素受體 luteinizing hormone receptor；ERK1/2：細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2 extracellular signal-regulated kinase 1/2；ROS：活性氧 reactive oxygen species；CHOP：轉(zhuǎn)錄因子C/EBP的同源蛋白 CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein；JNK：c-Jun氨基末端激酶 c-Jun N-terminal kinase；Caspase12：半胱天冬氨酸蛋白酶12 cysteme aspartate specific protease 12。