雞巴氏桿菌病的診斷與防治對(duì)策

孫孟瑤，方 宇，楊 丁，楊雅琪，侯 杰，梁晚?xiàng)鳌铮ㄑ舆吺醒舆叴髮W(xué)農(nóng)學(xué)院 136200）

1 雞巴氏桿菌病的診斷

1.1 病原體

多殺性巴氏桿菌是引起該病的病原菌，菌體整體呈現(xiàn)為橢圓型或短桿型，長(zhǎng)度約在1～1.5μm之間[1]，是一種無鞭毛不運(yùn)動(dòng)、不形成芽孢的革蘭陰性桿菌,根據(jù)外部莢膜的不同，不同的分離株具有的毒力有所不同；該病菌在自然界中分布廣泛，屬于條件型致病菌，病菌對(duì)常見消毒藥抵抗力較弱，易被普通消毒藥、陽光、干燥或加熱破壞，但可常溫存在于腐敗尸體或超市的土壤中中3～5個(gè)月。該菌在人類和其他動(dòng)物之間均具有極強(qiáng)的感染力，在人體中易引發(fā)肺部的感染，在動(dòng)物中，引起牛羊這類牲畜敗血癥，禽類引起霍亂。

1.2 巴氏桿菌的危害

盡管巴氏桿菌的感染性是不分物種的，但實(shí)際上禽類的感染性是最高的，在禽類中又屬雞的感染性最強(qiáng)。病菌通過侵襲雞的眼部、鼻腔和口腔分泌物感染雞群，同時(shí)污染周邊環(huán)境、工具等。有研究發(fā)現(xiàn)，在空氣潮濕悶熱、氣候巨變的環(huán)境中，該病的發(fā)病率較高[2]，同時(shí)飼養(yǎng)管理不良也是誘因之一。通常而言，一月齡以下的幼雞最易感。該病會(huì)廣泛的傳播的原因是其潛伏期較長(zhǎng)且潛伏期內(nèi)具有很強(qiáng)的傳染性。處于潛伏期的雞無明顯臨床表現(xiàn)，很難進(jìn)行鑒別和早期預(yù)防，導(dǎo)致病雞長(zhǎng)期混在雞群中，引起其他雞感染，同時(shí)，潛伏在病雞體內(nèi)的多殺性巴氏桿菌很容易發(fā)生變異，毒力急劇升高。一旦病情暴發(fā)，會(huì)導(dǎo)致雞群滅亡、蛋雞的產(chǎn)蛋質(zhì)量變差、產(chǎn)蛋率降低，損害養(yǎng)殖場(chǎng)等地的經(jīng)濟(jì)。

1.3 臨床癥狀

雞巴氏桿菌病依據(jù)疾病不同的類型和嚴(yán)重程度具有較大差異。按病程可劃分為急性、慢性。但多數(shù)情況下很難據(jù)此分類，臨床癥狀也可介于急性型和慢性型之中。每個(gè)時(shí)期的發(fā)病特點(diǎn)各不相同。

1.3.1 最急性型

常見于產(chǎn)蛋量非常高、體型相對(duì)肥碩的雞。發(fā)病雞通常在1～2d內(nèi)死亡，在潛伏期內(nèi)一直均處于正常狀態(tài)，不易被察覺，發(fā)病時(shí)突發(fā)性地急速拍打翅膀，進(jìn)而癥狀變?yōu)槊土页榇?，最終角弓反張死亡，病雞死前精神無異常，食欲旺盛。

1.3.2 急性型

是臨床上發(fā)病最多的一種。潛伏期以后，病雞體溫開始急速升高，高達(dá)44℃～45℃、對(duì)外界刺激反應(yīng)微弱離群呆立、被毛凌亂、雙翅下垂，頻繁且大量地飲水，食欲不振或完全廢絕，口鼻流出斑駁混有泡沫粘液、腹瀉、排黃綠色或白色稀便，甚至呈血色[3]，情況嚴(yán)重者，出現(xiàn)脫水、抽搐。呼吸變急促的同時(shí)伴隨有“咯咯”聲，一般在72 h內(nèi)急速死亡。病雞的雞冠、肉髯腫大、呈現(xiàn)暗紅色。該時(shí)期病情兇險(xiǎn)，死亡率極高。

1.3.3 慢性型

慢性型病雞身體的各個(gè)部位開始出現(xiàn)不同程度的炎癥和腫脹，并且隨著時(shí)間的推移會(huì)逐漸加劇，存在自行康復(fù)的可能，然而藥物治療效果并不理想。除此之外，病雞表現(xiàn)出日漸消瘦、貧血相關(guān)癥狀病程持續(xù)時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月，周身伴有多種慢性疾病如慢性肺炎、慢性呼吸道炎、慢性胃腸炎等，病情反復(fù)頑固，若為產(chǎn)蛋雞群，產(chǎn)蛋量同時(shí)減少，畸形蛋、血斑蛋等比例急劇增高，病情嚴(yán)重時(shí)完全停止產(chǎn)蛋。不同于急性型病雞、慢性型病雞雞冠和肉髯為蒼白色。

1.4 病理解剖變化

主要病變是與血管障礙有關(guān)的變化，通常為敗血癥。最急性病例通常無特征性病變，剖檢偶爾可見輕微出血點(diǎn)。急性型病例的剖解變化較為經(jīng)典，可觀察到病雞的十二指腸腸系膜上小血管、心外膜、冠狀脂肪和肌胃等部位明顯出血，其中十二指腸出血尤其嚴(yán)重，呈現(xiàn)卡他性腸炎，腸內(nèi)容物時(shí)?；祀s血液、黏膜紅腫潰瘍、肺部充血，有出血點(diǎn)，嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致為肺炎；鼻腔和呼吸道內(nèi)充斥大量黏液；心包內(nèi)積有不透明淡黃液體；肝臟呈病態(tài)棕灰色、土黃色，質(zhì)脆，表面有針尖大小、灰白色的多個(gè)病灶型凝固壞死區(qū)[4]；脾略腫大，存在散在的壞死灶，胰腺腫大甚至出血，少數(shù)病雞氣管環(huán)狀出血。慢性病由于病菌的侵入部位不同，故臨床癥狀也有所不同[5]，但大多為呼吸道、關(guān)節(jié)部位炎癥反應(yīng)，呼吸道有卡他性滲出、黏液堆集于鼻腔和上呼吸道，切開腫大關(guān)節(jié)腔有淡黃色干酪樣壞死物。若病程持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，可能表現(xiàn)為卵黃性腹膜炎。

1.5 實(shí)驗(yàn)室診斷方法

1.5.1 染色鏡檢

在無菌條件下，取病雞的心、肝、脾、淋巴結(jié)等部位進(jìn)行組織涂片，革蘭氏染色，油鏡觀察[6]。呈革蘭氏陰性菌特征、兩級(jí)明顯著色;通過瑞氏染色觀察，可以觀察到一定數(shù)量的球桿菌，菌體的兩端著色淺、中間著色深。

1.5.2 分離培養(yǎng)

在無菌條件下，將肝臟和脾臟組織分別接種在肉湯培養(yǎng)基、新鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂平板中，并在37℃下培養(yǎng)24～48 h。肉湯培養(yǎng)基管底有沉積物，表面形成一圈灰白色的細(xì)菌；新鮮血瓊脂培養(yǎng)基可見灰白色露珠狀小菌落生長(zhǎng)，表面半透明，光滑，無溶血；麥康基中心無細(xì)菌[7]。選取典型菌落進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢，可見呈橢圓形禿頭微球菌，兩極均呈強(qiáng)色。

1.5.3 生化試驗(yàn)

該菌不能分解乳糖、木糖、鼠李糖、山梨糖醇；VP試驗(yàn)、MR試驗(yàn)均為陰性，靛藍(lán)基質(zhì)試驗(yàn)為陽性。

1.5.4 動(dòng)物試驗(yàn)

取該病菌相關(guān)的病料，以1∶5比例向其中加入滅菌生理鹽水，與研缽中充分研磨后制成懸液備用[8]。取小鼠、家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，經(jīng)皮注射含有病菌的懸液，等待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病發(fā)。一般情況下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)在24h左右出現(xiàn)明顯病理變化，取其心臟、肝臟、血液等制成病理涂片進(jìn)行顯微鏡的觀察、對(duì)比。通常需要注意的是，健康動(dòng)物的體內(nèi)也含有一定量的菌群，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)鑒定時(shí)，應(yīng)與禽生前的剖檢變化、臨床癥狀進(jìn)行比較，得出合理的推論[9]。

2 雞巴氏桿菌的防治

2.1 疾病的治療

2.1.1 西醫(yī)方法

禽巴氏桿菌的治療，應(yīng)盡早采取措施，采取措施越早，治療效果越好。經(jīng)過藥敏試驗(yàn)篩選后，可選定有效的治療藥物。對(duì)巴氏桿菌敏感的抗生素類藥物應(yīng)用最廣，病雞癥狀輕微時(shí)，可將金霉素、土霉素等隨飼料拌入喂食持續(xù)3～5日；患病雞群癥狀嚴(yán)重時(shí)，可使用鏈霉素進(jìn)行肌肉注射等?；前奉愃幬锸褂眠^程中要注意用量，避免大劑量，大劑量的該類藥物可產(chǎn)生腎毒性，影響采食，導(dǎo)致雞的中毒死亡；磺胺喹惡啉在該類藥物中具有優(yōu)秀的效果，故而應(yīng)用甚廣，使用時(shí)需注意不能用于產(chǎn)蛋雞的雞群，該藥物會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)蛋量降低甚至完全停止產(chǎn)蛋[10]?？Z酮類藥物可以配合其他藥物交替使用，避免一類藥物長(zhǎng)期使用而產(chǎn)生的抗藥性。

2.1.2 中獸醫(yī)方法

中藥是我國(guó)獨(dú)特的醫(yī)療體系，可將其運(yùn)用到動(dòng)物疾病的治療當(dāng)中。相較于西藥，中藥用藥更加安全、符合綠色的食品要求，能更好的克服耐藥菌增多、藥物殘留等現(xiàn)象。中醫(yī)認(rèn)為，禽霍亂是外邪侵入機(jī)體，然后入營(yíng)血，導(dǎo)致血熱妄行。治療本病中醫(yī)用藥以清熱解毒、涼血保肝、清泄里熱、透邪外出為主。當(dāng)疾病在某地區(qū)蔓延時(shí)，養(yǎng)殖場(chǎng)可考慮中藥方劑防治：以金銀花、黃聯(lián)為主柴胡、雄黃為輔。[11]有研究發(fā)現(xiàn)白頭翁、黃柏、秦皮等組成的方劑對(duì)抑制巴氏桿菌對(duì)動(dòng)物體的侵染有顯著效果，經(jīng)該方劑治療的存活率和體重增加指數(shù)均比較明顯變化。另有研究指出，復(fù)方黃芪多糖散(含黃芪多糖、人身皂苷、青蒿素、魚腥草、板藍(lán)根、大青葉等)對(duì)該病的治療明確的效果。當(dāng)今市面上，復(fù)方雙黃清熱解毒液是最常見的治療禽霍亂的中藥，應(yīng)用范圍廣、治療效果良好。面對(duì)數(shù)量較多的雞群，可采用如下方劑：加水煎煮板藍(lán)根、穿心蓮、黃蓮、葛根、貫眾、紫草、甲紫適量熬制成2000mL的藥液，再加入適量紅糖和大蒜汁,晾至室溫給病雞飲用。

2.2 疾病的預(yù)防

2.2.1 疫苗免疫

預(yù)防禽霍亂的主要措施是疫苗免疫。禽霍亂疫苗分滅活疫苗、弱毒苗和亞單位疫苗三種。滅活苗常用于易感雞群的首次免疫或后期免疫的加強(qiáng)。一般情況下，8～10周齡雞群注射滅活疫苗完成首免，一個(gè)月后再次注射進(jìn)行加強(qiáng)。弱毒疫苗由于存在反毒風(fēng)險(xiǎn)，故不適用于易感雞群的前期預(yù)防，適合雞群二次免疫。亞單位疫苗是目前的研究熱點(diǎn)，對(duì)雞安全無毒、保護(hù)力良好。使用時(shí)應(yīng)注意，未使用的疫苗應(yīng)在2℃～8℃保存，開放疫苗應(yīng)在8h內(nèi)使用完畢。免疫期間避免使用鎮(zhèn)痛消炎類藥物、糖皮質(zhì)激素類藥物。

當(dāng)今社會(huì)分子生物學(xué)的蓬勃發(fā)展揭露了多殺性巴氏桿菌更多的發(fā)病機(jī)制，這顯著推動(dòng)了新型疫苗的研發(fā)[12]，如新型減毒疫苗、重組亞單位疫苗和DNA疫苗等正是當(dāng)今科學(xué)研究的熱點(diǎn)。相較之前的疫苗，新型減毒疫苗可同時(shí)激發(fā)細(xì)胞免疫和體液免疫交叉保護(hù)力強(qiáng)，具有很高的安全性；亞單位疫苗和DNA疫苗制備方便、基因靶向明確、安全穩(wěn)定。然而，上述三種疫苗的研發(fā)還存在著有待解決的科學(xué)問題，目前未應(yīng)用于市場(chǎng)。

2.2.2 環(huán)境預(yù)防措施

要確保養(yǎng)殖和管理安全，必須重在預(yù)防。加強(qiáng)家禽抵抗力，增加營(yíng)養(yǎng)，保持雞舍干燥，避免家禽過度擁擠。平時(shí)要加強(qiáng)雞群管理，嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫措施，合理調(diào)控飼養(yǎng)密度。在疫病高發(fā)地區(qū)，應(yīng)加強(qiáng)環(huán)境衛(wèi)生，正常時(shí)間保持禽舍通風(fēng)干燥。盡量減少引進(jìn)外來雞種，做到自繁自養(yǎng)。當(dāng)引進(jìn)新的雞群時(shí)，應(yīng)該對(duì)老雞實(shí)行單獨(dú)的飼養(yǎng)制度，并對(duì)引進(jìn)雞群進(jìn)行嚴(yán)格檢疫，確保疾病不被引入雞舍。病群被徹底消滅后，籠子要徹底消毒，新雞群才能進(jìn)入。水和食物是感染的主要來源，養(yǎng)殖過程中，用水要保持清潔，食物要保持衛(wèi)生且營(yíng)養(yǎng)均衡，不定時(shí)補(bǔ)充維生素，有助于提高雞群免疫力[13]。發(fā)病時(shí)應(yīng)盡快隔離治療，徹底消毒，對(duì)群內(nèi)所有雞群給予預(yù)防性用藥。當(dāng)發(fā)現(xiàn)病雞或死雞時(shí)，應(yīng)隔離其他雞群，及時(shí)處理病死雞，防止感染擴(kuò)散。病雞和死雞主要通過焚燒和掩埋來治療。有病死雞的場(chǎng)所要及時(shí)消毒，其他畜群要及時(shí)轉(zhuǎn)移，防止疾病傳播。飼養(yǎng)過程中，相關(guān)工作人員進(jìn)入雞舍需嚴(yán)格消毒；一般情況下，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)謝絕外來人員參觀，嚴(yán)禁外來動(dòng)物闖入。

3 討論與小結(jié)

雞巴氏桿菌病的感染病雞主要以出血性敗血癥為主要表現(xiàn)，不同時(shí)期的臨床癥狀有所不同。該病的病原主要通過呼吸道、消化道傳播；慢性感染病雞是最主要的傳染源。禽霍亂不僅可以感染正常家禽，還可以感染人類和其他動(dòng)物。因此，加強(qiáng)對(duì)多殺巴氏桿菌的研究，控制禽霍亂的發(fā)病幾率，促進(jìn)養(yǎng)雞場(chǎng)的自我繁殖和自給自足，盡量減少外地雞的引進(jìn)，如需要引進(jìn)，將禁止從疫點(diǎn)采購(gòu)雞只[14]。養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)當(dāng)制定相應(yīng)管理制度和衛(wèi)生制度，合理預(yù)防流行病，加強(qiáng)消毒，減少疾病發(fā)生。這些對(duì)于保護(hù)和促進(jìn)家禽產(chǎn)業(yè)和生態(tài)鏈的健康發(fā)展具有重要意義。若周邊出現(xiàn)疾病流行狀況，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)有防患意識(shí)，早日接種疫苗，積極用藥；抗生素對(duì)巴氏桿菌敏感是治療本病的最佳藥物，中藥則采用以清熱解毒為主的多種方劑。早預(yù)防，早治療是戰(zhàn)勝本病的重要指南。