金釵石斛花多酚的PEG 200提取工藝優(yōu)化及體外抗氧化活性

趙洋洋，邢 杰，李 麗，詹茂玲，李 飛，林李芳洲，王 嵐，楊文宇,

（1.西華大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，四川成都 610039；2.貴州仙草生物科技有限公司，貴州赤水 564700）

金釵石斛花是一種藥食兩用的中藥材[1]，為蘭科植物Dendrobium nobileLindl.新鮮或干燥的花，其功效與金釵石斛莖相似[2]，具有強(qiáng)陰益氣、厚腸胃、輕身延年、延緩衰老等作用，在其主產(chǎn)地貴州赤水常被用作保健食材，因產(chǎn)量遠(yuǎn)低于莖[3]，故十分名貴。目前有關(guān)金釵石斛的研究主要集中在莖[4]，對花的研究相對較少。食用花卉是生物活性多酚類物質(zhì)的重要來源[5-6]，多酚類化合物在抗氧化[7]、抗菌[8]、抗癌[9]等方面有多種藥用價值，對人體健康有積極作用。多酚的提取通常采用煎煮、回流、索氏提取等提取方法，所用溶劑除水外，普遍使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有機(jī)溶劑[10]，故往往存在能耗高、影響環(huán)境、不便循環(huán)利用等問題，因此，開發(fā)綠色提取工藝至關(guān)重要。近年來，PEG作為新型綠色提取溶劑逐漸被重視，已在多酚類成分的提取方面得到一些應(yīng)用[11-13]。PEG具有無毒、可食用、成本低、對環(huán)境友好等特點，且可循環(huán)利用，因此，以其作溶劑建立金釵石斛花多酚的綠色提取工藝，在經(jīng)濟(jì)性、安全性、環(huán)保性等方面具有優(yōu)勢，其酚類成分可以更好地用于食品及健康相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)。為實現(xiàn)金釵石斛花資源的進(jìn)一步開發(fā)和利用，本研究以PEG 200為溶劑，通過響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化金釵石斛花多酚的提取方法，實現(xiàn)高效提取；利用大孔樹脂吸附法回收多酚和PEG，重復(fù)利用提取介質(zhì)以實現(xiàn)該方法的綠色可持續(xù)性，并對金釵石斛花總多酚的體外抗氧化性進(jìn)行考察，為開發(fā)利用金釵石斛花資源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

金釵石斛花 貴州省赤水市復(fù)興鎮(zhèn)轉(zhuǎn)石奇觀景區(qū)，采收時間為2021年5月，經(jīng)西華大學(xué)食品與生物工程學(xué)院楊文宇副教授鑒定為蘭科植物金釵石斛（Dendrobium nobileLindl.）的花；2,2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基 上海麥克林生化科技有限公司；2,2'-聯(lián)氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽 生工生物工程上海股份有限公司；抗壞血酸 分析純，成都金山化學(xué)試劑有限公司；沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品 色譜純，成都埃法生物科技有限公司；PEG 200、PEG 400、PEG 600、無水乙醇、Folin-酚試劑（2 mmol·L-1）、碳酸鈉

分析純，成都市科隆化學(xué)品有限公司；AB-8型大孔樹脂、D101大孔樹脂、陽離子交換樹脂 成都市科隆化學(xué)品有限公司。

UV-2600型紫外可見分光光度計 尤尼柯上海儀器有限公司；HYN-2120C恒溫?fù)u床 天津歐諾儀器儀表有限公司；BT25S型1/10萬電子天平 德國賽多利斯公司；SB-5200DTN型超聲波清洗機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司； SpectraMax i3x型多功能酶標(biāo)儀 美谷分子儀器上海有限公司；Concentrator plus型低溫真空離心濃縮儀 艾本德中國有限公司；LC-16高效液相色譜儀 日本島津公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 金釵石斛花多酚的綠色提取工藝 選用不同分子量的PEG為提取溶劑，干燥的金釵石斛花打碎成粗粉過80目篩備用。精確稱取石斛花粉末1 g，按實驗設(shè)計提取條件，以超聲波輔助提取法提取金釵石斛花多酚。根據(jù)唐靜月等[14]的方法研究并做適當(dāng)調(diào)整，采用10000 r·min-1、4 ℃離心30 min后取上清液得到金釵石斛花多酚粗提取液。

1.2.2 樣品中金釵石斛花多酚得率的測定 提取液總酚含量利用Folin-酚比色法測定，根據(jù)李娟等[15]的方法并進(jìn)行改進(jìn)，取1 mL提取液于25 mL比色管中，加3 mL Folin-酚試劑，6.0 mL 12%碳酸鈉溶液，振蕩混勻，最后定容至25 mL，25 ℃下黑暗避光反應(yīng)2 h，測定其在760 nm處的吸光值。沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：制備0.1 mg·mL-1的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，取標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 mL于25 mL比色管中，按上述步驟顯色后依次測定各濃度的吸光值，繪得橫坐標(biāo)為沒食子酸濃度、縱坐標(biāo)為吸光度的沒食子酸濃度與吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為y=1.7687x-0.01349，R2=0.9992，擬合程度較好。按下列公式計算金釵石斛花多酚得率：

式中：Y表示金釵石斛花總多酚得率（mg·g-1）；C表示根據(jù)吸光度值計算出的溶液質(zhì)量濃度（mg·mL-1）；D表示溶液稀釋倍數(shù)；V表示供試品溶液體積（mL）；m表示取樣量（g）。

1.2.3 提取工藝優(yōu)化實驗

1.2.3.1 單因素實驗 超聲波輔助提取金釵石斛花多酚，經(jīng)查閱文獻(xiàn)[16-17]和預(yù)實驗后，確定對溶劑類型、液料比、超聲時間、超聲溫度、溶劑體積分?jǐn)?shù)5個因素進(jìn)行單因素實驗，以篩選出對總多酚的提取有顯著影響的因素，首先考察PEG溶劑分子量對于金釵石斛花多酚提取效率的影響，配制不同分子量的PEG（200、400、600）溶液作為溶劑，按照液料比30:1、超聲時間80 min、額定功率為300 W、超聲溫度50 ℃、溶劑體積分?jǐn)?shù)60%為固定條件提取金釵石斛花多酚，篩選出實驗范圍內(nèi)提取效率最高的PEG型號作為提取溶劑，研究某一因素時其余因素保持不變，分別考察液料比（10:1、20:1、30:1、40:1、50:1 mL·g-1），超聲時間（40、60、80、100、120 min），超聲溫度（30、40、50、60、70、80 ℃），溶劑體積分?jǐn)?shù)（20%、40%、60%、80%、100%）對金釵石斛花多酚得率的影響。

1.2.3.2 響應(yīng)面試驗設(shè)計 在單因素實驗基礎(chǔ)上選取對金釵石斛花多酚提取效率影響較大的液料比、超聲時間、超聲溫度、溶劑體積分?jǐn)?shù)四個因素的三水平為自變量進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗，金釵石斛花多酚的得率（mg·g-1）為因變量，選取的四個因素編碼分別為溶劑體積分?jǐn)?shù)（A）、液料比（B）、超聲時間（C）、超聲溫度（D），編碼因素及水平見表1。

表 1 Box-Behnken設(shè)計因素水平Table 1 Levels of Box-Behnken design factor

1.2.4 金釵石斛花多酚的回收以及提取溶劑的重復(fù)利用 采用AB-8、陽離子交換樹脂、D101三種大孔樹脂進(jìn)行金釵石斛花多酚的回收實驗。取最優(yōu)條件下的花多酚提取液5 mL三份，依次加入三種大孔樹脂5 g，25 ℃下于搖床上振蕩8 h（120 r·min-1），取其上清液測定多酚吸附率。選取吸附率最高的樹脂進(jìn)行進(jìn)一步實驗。濾液PEG 200再次用于金釵石斛花樣品提取，測量并計算重復(fù)利用率。過濾得到大孔樹脂置于過量甲醇中解吸4 h（25 ℃，120 r·min-1），取解吸液測定解吸率。

式中：m0表示吸附前樣品中金釵石斛花多酚的含量（mg）；m1表示吸附后上清液金釵石斛花多酚的含量（mg）；m2表示解析后上清液金釵石斛花多酚的含量（mg）；m3表示再吸附后上清液中金釵石斛花多酚的含量（mg）。

1.2.5 體外抗氧化活性 金釵石斛花多酚清除DPPH及ABTS自由基的能力測定，以抗壞血酸為陽性對照，研究金釵石斛花多酚提取液對于DPPH以及ABTS自由基的清除能力。按照宋小蒙[4]的方法并進(jìn)行改進(jìn)，配制1 mmol·L-1DPPH儲備液，100 μL DPPH儲備液與100 μL樣品混合，避光30 min后，檢測517 nm處吸光度值，計算樣品對于DPPH的清除率；按2:1的體積比將3.5 mmol·L-1ABTS與2.45 mmol·L-1的過硫酸鉀混合，室溫下避光15 h制備ABTS自由基儲備液，取150 μL ABTS儲備液和50 μL樣液于96孔板中避光10 min，在734 nm處測量吸光值，計算樣品清除ABTS自由基的能力。金釵石斛花多酚樣品為PEG 200提取液，減壓濃縮除去溶劑中的水分，將PEG樣品與水按照一定的比例進(jìn)行稀釋，ABTS樣品比例為0～1:9，DPPH樣品比例為1:2～1:36（比值均為PEG 200粗提取液:水）。

式中：A0表示DPPH在517 nm處的吸光度；A1表示樣品與ABTS自由基反應(yīng)后在517 nm處的吸光度；A2表示樣品空白在517 nm處的吸光度。

式中：A3表示ABTS自由基儲備液在734 nm處的吸光度；A4表示樣品與ABTS自由基反應(yīng)后在734 nm處的吸光度；A5表示樣品空白在734 nm處的吸光度。

1.3 數(shù)據(jù)處理

實驗均平行重復(fù)三次，并使用Excel 2010軟件收集和整理實驗數(shù)據(jù)，使用Design-expert 8.0軟件對實驗數(shù)據(jù)采用方差分析進(jìn)行比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實驗

2.1.1 PEG分子量對金釵石斛花多酚得率的影響通過使用不同分子量的PEG作為溶劑來提取金釵石斛花多酚，由圖1可以看出PEG的分子量對金釵石斛花多酚的得率存在一定的影響，PEG 200提取液中多酚的含量最高，且顯著高于PEG 400和PEG 600（P＜0.05），其原因是聚乙二醇的相對分子質(zhì)量越小，溶液的黏度越小，增加了熱交換，有利于傳質(zhì)，在提取過程中，隨著聚乙二醇相對分子質(zhì)量的降低，溶液的極性增大[18]。因此選擇黏度相對較小的PEG 200作為進(jìn)一步試驗的提取溶劑來進(jìn)行考察。

圖 1 PEG分子量對金釵石斛花總多酚得率的影響Fig.1 Effect of PEG molecular weight on the yield of DNF polyphenols

2.1.2 溶劑體積分?jǐn)?shù)對金釵石斛花多酚得率的影響考察不同體積分?jǐn)?shù)（20%、40%、60%、80%、100%）的PEG 200作為提取溶劑時對金釵石斛花多酚提取效率的影響，由圖2可以看出當(dāng)溶劑體積分?jǐn)?shù)為60%時，多酚得率達(dá)到最高，提取效率較高。首先，隨著體積分?jǐn)?shù)的增加，PEG 200的溶解能力提高，金釵石斛花多酚的溶解度變大。后期，隨著PEG 200濃度的增加，溶液黏度增大，溶劑的流動性可能會影響金釵石斛花多酚與植物中的多糖和蛋白質(zhì)等物質(zhì)的結(jié)合程度，影響提取液中多酚的含量，從而減緩了提取過程中的傳質(zhì)過程[19]。為進(jìn)一步優(yōu)化金釵石斛花多酚的提取方法，選擇溶劑體積分?jǐn)?shù)分別為40%～80%作為響應(yīng)面優(yōu)化試驗的水平條件。

圖 2 不同體積分?jǐn)?shù)PEG 200對金釵石斛花總多酚得率的影響Fig.2 Effect of different concentrations of PEG 200 on the yield of DNF polyphenols

2.1.3 超聲時間對金釵石斛花多酚得率的影響 考察不同超聲時間（40、60、80、100、120 min）對金釵石斛花多酚提取效率的影響，由圖3可以看出，隨著超聲時間的增加，提取液中金釵石斛花多酚含量隨之增大，最后達(dá)到平衡，在實驗范圍內(nèi)，當(dāng)超聲80 min時，提取液中金釵石斛花多酚含量達(dá)到最大，適宜的超聲時間可以有效地溶出金釵石斛花中的多酚，提高金釵石斛花多酚得率，因此選擇超聲時間60～100 min作為響應(yīng)面優(yōu)化試驗的水平條件。

圖 3 不同超聲時間對金釵石斛花總多酚得率的影響Fig.3 Effect of different ultrasound time on the yield of DNF polyphenols

2.1.4 超聲溫度對金釵石斛花多酚得率的影響 考察不同超聲溫度（30、40、50、60、70、80 ℃）對金釵石斛花多酚提取效率的影響，根據(jù)圖4可以看出，溫度的控制對于金釵石斛花多酚提取效率的影響較為復(fù)雜，可能是由于超聲波清洗儀的水浴溫度控制較為困難的原因，導(dǎo)致溫度對于金釵石斛花多酚提取效率的影響線性關(guān)系復(fù)雜[20]，但是根據(jù)圖4還是可以看出，當(dāng)溫度為70 ℃時，提取液中金釵石斛花多酚的含量最高，50與60 ℃的提取效率接近，因此為了進(jìn)一步優(yōu)化實驗條件，選擇60～80 ℃作為響應(yīng)面優(yōu)化試驗的溫度水平條件。

2.1.5 液料比對金釵石斛花多酚得率的影響 考察不同液料比（10:1、20:1、30:1、40:1、50:1 mL·g-1）對金釵石斛花多酚提取效率的影響，根據(jù)圖5可以看出，在實驗范圍內(nèi)增大液料比的比值，提取液中多酚含量逐漸增大，在一定范圍內(nèi)增加溶劑的比例，更有利于金釵石斛花多酚的溶出，當(dāng)比值為30:1 mL·g-1時，金釵石斛花多酚得率達(dá)到最大，因此為進(jìn)一步優(yōu)化實驗條件，選擇液料比20:1～40:1 mL·g-1作為響應(yīng)面優(yōu)化試驗的液料比水平條件。

圖 4 不同超聲溫度對金釵石斛花總多酚得率的影響Fig.4 Effect of different ultrasound temperature on the yield of DNF polyphenols

圖 5 不同液料比對金釵石斛花總多酚得率的影響Fig.5 Effect of different liquid-solid ratio on the yield of DNF polyphenols

2.2 響應(yīng)面試驗

2.2.1 多元二次回歸模型的建立及方差分析 根據(jù)單因素實驗得到的水平條件，設(shè)計四因素三水平的Box-Behnken響應(yīng)面試驗，以提取液中金釵石斛花多酚含量作為響應(yīng)值，記錄試驗結(jié)果，進(jìn)行響應(yīng)面分析，試驗設(shè)計及結(jié)果見表2。

對響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果進(jìn)行回歸分析得到擬合方程Y=297.50-5.37A+10.12B+7.74C+13.16D+8.76AB-13.80AD+13.93CD-17.78A2。

根據(jù)表3回歸模型的方差分析表可以看出模型的P＜0.05，具有顯著性，模型失擬項的結(jié)果并不顯著（P＞0.05），R2=0.9745，Radj2=0.9530，該結(jié)果表明了試驗設(shè)計結(jié)果具有可靠性，可以用來預(yù)測金釵石斛花多酚的含量。試驗結(jié)果中D和A2都具有顯著性（P＜0.05），表明各因素對于金釵石斛花多酚的提取效率并非簡單的線性關(guān)系。幾種因素對于金釵石斛花多酚提取效率的影響作用依次為：超聲溫度＞液料比＞超聲時間＞溶劑體積分?jǐn)?shù)。

表 2 Box-Behnken響應(yīng)面試驗設(shè)計結(jié)果分析Table 2 Analysis of design results about Box-Behnken response surface

表 3 方差分析Table 3 Analysis of variance

2.2.2 響應(yīng)面分析 根據(jù)各因素交互作用的響應(yīng)面圖6可以看出，開始時，金釵石斛花多酚的含量隨溶劑濃度以及液料比的增大而增大，達(dá)到中心值后，多酚含量有所減小。溶劑體積分?jǐn)?shù)（A）和液料比（B）、超聲溫度（D）和溶劑體積分?jǐn)?shù)（A）、超聲時間（C）和超聲溫度（D）之間均存在一定的交互作用，根據(jù)等高線的疏密程度可以看出超聲時間和超聲溫度（CD）、溶劑體積分?jǐn)?shù)和超聲溫度（AD）之間的交互作用更為明顯。圖6中A為溶劑體積分?jǐn)?shù)（%），B為液料比（mL·g-1），C為超聲時間（min），D為超聲溫度（℃），Y為金釵石斛花總多酚得率（mg·g-1）。

圖 6 各因素相互作用響應(yīng)面圖Fig.6 Response surface plot of the interaction between various factors

2.2.3 優(yōu)化結(jié)果與實驗驗證 根據(jù)Design-expert 8.0軟件設(shè)計的響應(yīng)面優(yōu)化試驗結(jié)果中得到PEG 200提取金釵石斛花多酚的工藝條件為溶劑體積分?jǐn)?shù)55%，液料比38:1 mL·g-1，超聲時間99 min，超聲溫度80 ℃，超聲功率為300 W，預(yù)測總多酚含量應(yīng)達(dá)到341.12 mg·g-1。根據(jù)以上得到的實驗條件進(jìn)行了三組實驗，通過驗證實驗測定得到多酚含量為338.88 mg·g-1，與預(yù)測多酚含量接近，相對誤差在0.7%內(nèi)，實驗結(jié)果可靠。

2.3 不同提取方法的比較

近年來文獻(xiàn)報道的石斛花化學(xué)成分提取主要使用甲醇和乙醇[21-22]作為溶劑。在相同的最佳提取條件下，對70%甲醇、70%乙醇和55% PEG 200進(jìn)行了對比實驗，以證明PEG 200作為有效提取溶劑的可行性。采用傳統(tǒng)方法（70%乙醇）的提取效果（128.63±0.63 mg·g-1）低 于 本 文 中 該 提 取 工 藝（338.88±0.25 mg·g-1），使用70%甲醇的提取效果（344.76±0.44 mg·g-1）略高于本文提取工藝，原因是PEG 200是一種比乙醇略強(qiáng)的極性溶劑，能更有效地提取更多的極性多酚類化合物。有研究表明，其在PEG中的化學(xué)選擇性顯著高于乙醇，是由于PEG的結(jié)構(gòu)與多酚類化合物可能形成一種分子絡(luò)合物[23]；由于甲醇的黏度遠(yuǎn)低于55%的PEG 200水溶液，有利于提取過程中的擴(kuò)散和傳質(zhì)。但由于甲醇具有揮發(fā)性和易燃性，對環(huán)境有害。因此本文提取工藝高效且綠色，可用于提取金釵石斛花多酚。

2.4 總酚的回收和PEG 200循環(huán)利用

PEG 200的一個重要優(yōu)點就是綠色環(huán)保，可重復(fù)利用。目前主要使用超臨界CO2萃取[24]、固相萃取[25]、色譜[26]等方法回收提取物來再次利用溶劑，此類方法成本較高且操作復(fù)雜。利用大孔樹脂吸附法[27]回收溶劑被認(rèn)為是一種簡便而高效的方法，可普遍用于回收PEG 200。本研究采用AB-8、陽離子交換樹脂、D101三種不同類型大孔樹脂來吸附PEG 200中的多酚，來研究多酚類物質(zhì)的回收和PEG 200的重復(fù)利用性能，結(jié)果如圖7所示。結(jié)果表明，三個不同類型的樹脂吸附率都較好。在相同吸附劑用量和液料比的條件下，吸收效果從高到低依次為AB-8＞D101＞陽離子交換樹脂，其中AB-8在液料比為5:5 mL·g-1時吸附率達(dá)到68.85%。再采用甲醇對已經(jīng)吸附飽和的樹脂進(jìn)行解吸，在同等條件下，AB-8解析率最高，為81.82%。因此PEG 200經(jīng)過大孔樹脂吸附金釵石斛花多酚后，利用PEG 200與水沸點差異大通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去水分，實現(xiàn)循環(huán)利用。在最優(yōu)實驗條件下AB-8吸附后的PEG 200再次用于提取金釵石斛花多酚時，其得率為（420.59±2.80） mg·g-1，扣除吸附不完全帶來的背景影響，其回收利用率達(dá)到79.06%。因此，PEG 200使用大孔吸附樹脂回收后，性質(zhì)穩(wěn)定溶解性保持較好，可重復(fù)利用，是一種綠色優(yōu)良的提取溶劑。

圖 7 不同種類樹脂的多酚吸附效率Fig.7 Polyphenol adsorption efficiency of different kinds of resins

圖 8 金釵石斛花提取液和抗壞血酸的ABTS自由基清除能力Fig.8 ABTS free radical scavenging ability of DNF extract and VC

2.5 體外抗氧化活性

根據(jù)圖8和圖9可以看出，隨著稀釋倍數(shù)減小，金釵石斛花提取液中多酚的質(zhì)量濃度提高，對DPPH自由基和ABTS自由基清除能力也逐漸提升，因此表明其體外抗氧化活性較強(qiáng)。經(jīng)測得該工藝下金釵石斛花粗提取液中多酚的質(zhì)量濃度為16.974 mg·mL-1。根據(jù)圖8可以看出金釵石斛花多酚提取液在實驗比例范圍內(nèi)與濃度在0.1～0.5 mg·mL-1抗壞血酸的ABTS自由基清除能力逼近，當(dāng)ABTS自由基的清除率為99%以上時，金釵石斛花多酚提取液的濃度為16.974 mg·mL-1。石斛花多酚濃度在1.886～5.657 mg·mL-1（1:8～1:2）內(nèi)，清除率呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，擬合方程為y=0.1395x-0.1258，R2=0.9615，IC50=4.486 mg·mL-1。根據(jù)圖9可以看出金釵石斛花多酚提取液在實驗比例范圍內(nèi)的DPPH自由基清除能力逼近于濃度在0.03～0.30 mg·mL-1抗壞血酸，當(dāng)達(dá)到90%以上的DPPH自由基清除率時，金釵石斛花多酚提取液濃度為1.886 mg·mL-1。金釵石斛花多酚濃度在0.339～1.886 mg·mL-1（1:40～1:8） 內(nèi)，與DPPH的清除率具有良好的線性關(guān)系，擬合方程為y=0.0710x+0.3018，R2=0.9894，IC50=2.792 mg·mL-1。說明金釵石斛花多酚的DPPH及ABTS自由基清除能力較為明顯。

3 討論與結(jié)論

本文研究了一種金釵石斛花多酚的綠色提取工藝，PEG 200水溶液作為一種綠色溶劑可用于藥用植物中活性成分的提取分離，利用超聲波輔助提取效率提高，能快速破壞植物組織，加快有效成分的溶出，并利用大孔樹脂AB-8吸附多酚回收溶劑。處理后的PEG 200對總酚仍具有較高的得率，回收利用率達(dá)79.06%。與傳統(tǒng)的提取方法相比，該方法可以提供更高的提取產(chǎn)率，同時大大減少了提取時間和溶劑消耗，同時實現(xiàn)溶劑重復(fù)利用，可成為具有工業(yè)應(yīng)用前景的提取工藝。且PEG是一種可食用食品添加劑，不僅價格低廉而且作為低共熔溶劑的材料被廣泛使用[28]，以PEG作為溶劑不僅安全、環(huán)保而且極其穩(wěn)定[29-30]，許多天然產(chǎn)物的活性成分成功地被PEG溶出，而且得率高于其他種類的溶劑，例如，對黃酮類化合物的提取效率高于乙醇和甲醇[31-32]，對多糖類物質(zhì)的提取效率也高于水[29]，因此，PEG 200水溶液作為一種綠色溶劑在天然來源的多種活性物質(zhì)的超聲波輔助提取中顯示出巨大的應(yīng)用前景。

本研究可以為金釵石斛花多酚的綠色提取工藝提供可靠的數(shù)據(jù)，并為金釵石斛花多酚研發(fā)成為天然抗氧化劑提供了依據(jù)。目前就金釵石斛花的研究還比較少，金釵石斛花其他種類的活性成分和多酚的其他藥理功能以及毒理等還有待進(jìn)一步考察；PEG作為提取天然產(chǎn)物活性物質(zhì)的環(huán)保溶劑選擇性較差，對于極性較大的物質(zhì)均具有良好的提取效率，因此PEG提取液中多酚類、黃酮類和多糖類物質(zhì)的分離有待進(jìn)一步研究。