血細胞分析儀的臨床研究進展

王洪 天津市職工醫(yī)院檢驗科 （天津 300050）

內(nèi)容提要： 血細胞分析是臨床上常用的技術(shù)和手段，隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，血細胞分析技術(shù)也取得了巨大的進步。隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，臨床儀器也在不斷的研發(fā)當(dāng)中，并且取得了巨大成績，血細胞分析是臨床上最為基礎(chǔ)的檢測手段，也是檢測患者血項的重要過程，能夠為臨床上很多疾病提供科學(xué)的參考依據(jù)和基礎(chǔ)，為后續(xù)治療方案的制定和實施提供依據(jù)，而血細胞分析儀的便利性與準確性與否，直接關(guān)系到臨床患者指標檢測的準確性，檢測項目越多的儀器，往往能夠在一次檢測當(dāng)中獲取到患者的血項數(shù)據(jù)，不但節(jié)約了檢測的時間，還簡化了檢測的流程。為了分析其在臨床診斷當(dāng)中的價值和意義，本次綜述將對血細胞分析儀的臨床研究進展進行深入的分析。

血細胞分析儀是醫(yī)學(xué)檢驗中最常用的分析儀器之一，其主要功能為對血液中不同類型的細胞進行計數(shù)、白細胞分類計數(shù)、血紅蛋白等含量測定等，并根據(jù)檢測數(shù)據(jù)得出相應(yīng)的細胞形態(tài)參數(shù)，一般主要由機械系統(tǒng)、電子系統(tǒng)、細胞檢測系統(tǒng)、血紅蛋白測定系統(tǒng)及計算機控制系統(tǒng)等以不同形式組合構(gòu)成。血液細胞檢查一直是臨床上比較常用的檢測手段，而傳統(tǒng)的檢測方式是手工檢測，操作較為復(fù)雜，并且準確率低，會受到較多因素的影響，而隨著科技的發(fā)展，血細胞分析的儀器也逐漸問世[1]，血細胞分析儀的檢測結(jié)果更為準確。本次綜述將對血細胞分析儀的臨床研究進展進行分析[2]。

1.檢測方法不斷完善，儀器測試原理的改進

1.1 檢測方法完善

電阻抗法細胞計數(shù)是臨床上較為原始的檢測方式，它是建立在血細胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì)的基礎(chǔ)上，通過其在電解質(zhì)當(dāng)中的漂浮狀態(tài)進行計數(shù)[3]，血細胞在電解質(zhì)當(dāng)中，會直接呈現(xiàn)出懸浮狀態(tài)，這是因為臨床認為其算為不良導(dǎo)體。當(dāng)其通過檢測器微孔時，電壓會發(fā)生瞬間的變化，也正是因此，一個電壓脈沖信號就因此而形成[4]，因此，可以通過對脈沖的數(shù)量的統(tǒng)計，來判斷血細胞的數(shù)量。在早期，只能夠檢測紅細胞的數(shù)量，逐漸擴展到對白細胞、血紅蛋白等臨床指標的檢測，這也就形成了能夠檢測八項指標的血細胞分析儀[5]。隨后，臨床推出了檢測白細胞二分群小細胞群和大細胞群的儀器，之后又推出了細胞三分群小細胞群大細胞群、中間細胞群的分析儀器，將檢測的指標提升至18項[6]。

1.2 儀器測試原理的改進

這些血細胞分析儀的改進方式主要體現(xiàn)在白細胞分類部分的改進，即電阻抗法的二分群發(fā)展為多項技術(shù)聯(lián)合同時檢測一個細胞，綜合分格實驗數(shù)據(jù)，得岀的較為準確的白細胞分群結(jié)果。（1）光散射技術(shù)可使血細胞分析儀里的血細胞在未經(jīng)任何處理，與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測結(jié)果。首先在標本內(nèi)中只作用于紅細胞的溶血劑使紅細胞溶解，然后加入抗溶血劑起中和溶血劑的作用，使白細胞表面、胞質(zhì)及細胞大小等特征仍然保持與體內(nèi)時間相同的狀態(tài)。光散射能提供細胞類型的鑒別方式，對細胞顆粒的構(gòu)型和顆粒質(zhì)量有區(qū)別能力。（2）阻抗與射頻技術(shù)聯(lián)合白細胞分類，通過嗜酸性粒細胞檢測系統(tǒng)、嗜堿性粒細胞檢測系統(tǒng)、淋巴、單核、粒細胞檢測系統(tǒng)、幼稚細胞檢測系統(tǒng)，采用電阻與射頻聯(lián)合檢測的方式對白細胞進行分類。（3）光散射與細胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細胞分類計數(shù)，將血細胞經(jīng)過氧化物染色后，胞質(zhì)內(nèi)即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng)，血液分析儀的分析基礎(chǔ)形成，分血器將血加入到高滲液體內(nèi)并孵育20秒鐘，細胞被破壞，白細胞質(zhì)內(nèi)酶被固定，發(fā)生第二步反應(yīng)，由于酶反應(yīng)強度不同和細胞體大小不同，激光束射到細胞上的前向角和散射角有所不同，以X軸為吸光率標記酶反應(yīng)強度，Y軸為光散射標記細胞大小。每個細胞產(chǎn)生的兩個信號結(jié)合定位在細胞圖上。每秒鐘儀器可測上千個細胞。計算機系統(tǒng)對存儲的資料進行分析處理并結(jié)合嗜好堿性粒細胞或分葉核粒細胞通道結(jié)果計算出白細胞總參數(shù)和分類參數(shù)。（4）多角度偏振光散射白細胞分類技術(shù)：其原理是一定體積的全血標本用鞘流液按適當(dāng)比例稀釋。其白細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，因嗜堿性粒細胞具有吸濕的特性，所以嗜堿性粒細胞的結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細胞內(nèi)部的滲透壓高于鞘興高釆烈的滲透壓而發(fā)生改變，紅細胞內(nèi)的血紅蛋白從細胞內(nèi)游離出來，而鞘液內(nèi)的水分進入紅細胞中白細胞檢測。然后從前角光、狹角光、消偏振光、垂直光散射四個角度測定散射光的密度，從這四個角度同時對個白細胞進行測量，同一種特定的程序自動儲存和分析數(shù)據(jù)，將白細胞分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。

2.設(shè)置的功能不斷增多，拓展了儀器的使用范圍

隨著臨床檢驗學(xué)的不斷發(fā)展，生產(chǎn)儀器的廠家為了能夠生產(chǎn)出符合臨床的檢驗設(shè)備，也在不斷的發(fā)展當(dāng)中。血細胞分析儀隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，也取得了巨大的進步，將很多軟件系統(tǒng)等運用到了其中，也就是說，血常規(guī)的檢測已經(jīng)是臨床最基礎(chǔ)的檢測了，還增加了許多擴展功能[7]，能夠為臨床幫助較多。常見的型號有SYSMEX SE-9500、XE-2100 COULTER STKS等儀器。含有網(wǎng)織紅細胞的測定儀器，可選的染料有傳統(tǒng)的化學(xué)染料、熒光染料等，儀器有全自動的，也有半自動的，不同的儀器對于網(wǎng)織紅細胞的計數(shù)也存在一定的誤差，對于有條件的實驗室，可以采用較為高端的手段進行校準，調(diào)節(jié)儀器的參數(shù)，但是要按照原廠配套的質(zhì)量控制標準進行把控和調(diào)整。此外，還有的儀器增加了幼稚細胞分析和有核紅細胞分析功能[8]，比如BAYER ADVIA-120、SYSMEX SE-9500/XE-2100、COULTER LH750、ABBOTT CD3 500/4000等，具有顯著的效果和意義，而對于試劑方面，有的儀器需要，而有的儀器是不需要，在寄生蟲檢測方面，有的儀器是能夠直接檢測出的[9,10]，比如對瘧原蟲有良好的敏感度的儀器是ABBOTT CD3200。臨床上還有的儀器，會在血細胞分析儀上綁定流式細胞分析儀的某些功能，也就是說，臨床可以將其進行常規(guī)血常規(guī)檢查時，也能夠?qū)⒛承┝馨图毎麃喨韩@得，比如將抗CD4和CD8單克隆抗體的聚苯乙烯微球與血液混合的儀器是Coulter GENS，它能夠?qū)⑵浣Y(jié)合含有相應(yīng)表面抗原標志的淋巴細胞，從而改變細胞的VCS性質(zhì)，從而得出CD4和CD8淋巴細胞的計數(shù)，并且計算比率。在Abbott CELL-DYN 4000的儀器上[11]，可以對CD3、CD4、CD8和CD6進行測定，實現(xiàn)一機兼有兩類儀器的功能。此外，CD-3700和ADVIA-2120具有特殊的分析模式，從而分析血細胞的數(shù)據(jù)，而ADVIA-2120可以與特殊的試劑結(jié)合[12]。

3.計算機技術(shù)的應(yīng)用，提高了自動化程度

血細胞分析儀的自化程度不斷提高，要得益于計算機技術(shù)的不斷應(yīng)用和發(fā)展。此外，也使得檢測的速度和效率大大提升，不僅體現(xiàn)在檢測手段的多樣化，還表現(xiàn)在將自動稀釋技術(shù)運用到儀器當(dāng)中，還有的會直接連接到全自動流水線的自動進樣系統(tǒng)，這就大大節(jié)約了檢測的時間[13]，還提升了取樣和稀釋的精度，并且操作簡便靈活，將檢測的速度和效率大大提升。目前，Bayer ADVIA可以檢測120個標本/每小時[14]，而Sysmex XE-2100可以檢測150個標本/每小時，在操作靈活的基礎(chǔ)上，能夠成批的進行檢測，并且在檢測的中間，可以隨時插入其他的標本[15,16]，檢驗的方式也多種多樣，比如CBC方、CBC+DIFF方式和RET方式，也可以將其任意的組合，來對標本進行辨別和檢測，能夠直接將患者的信息進行區(qū)分，再根據(jù)不同的條碼返回到患者的手中，記錄在檔案中，從而提供了電子的檢查數(shù)據(jù)結(jié)果，大大避免了編號帶來的差錯[17]。

4.檢測參數(shù)的臨床應(yīng)用

血細胞分析儀可以檢測白細胞等常規(guī)的臨床指標，在疾病的診斷和評估當(dāng)中，起到參考的作用和價值，對于疾病的鑒別也能夠起到輔助和參考作用[18]。

4.1 過氧化物酶散點圖

BAYER ADVIA 120儀器能夠分析和辨別各類白血病及亞型，根據(jù)各種白細胞的MPO活性不同，從而對外周血或骨髓標本進行分析，結(jié)果表明，兩組人群的符合率均為100%，但是在急非淋M 1、M 2、M4的鑒別診斷具有顯著差異[19]，因此，過氧化物酶散點圖異常和MPO活性減低相結(jié)合的方式，是臨床評估和診斷白細胞MPO缺陷癥的依據(jù)和參考[20]。

4.2 紅細胞血紅蛋白含量

紅細胞血紅蛋白含量是BAYER ADVIA 120的類似儀器采用光散射測量的紅細胞參數(shù)的一種[21]，在貧血的診斷當(dāng)中具有顯著價值，在相關(guān)疾病的診斷當(dāng)中具有顯著的意義[22]，尤其是兒童、孕婦人群，除此之外，還在血液透析患者鐵缺乏、慢性病貧血時功能性鐵缺乏的診斷和評估當(dāng)中具有顯著效果和價值[23]。

4.3 造血干細胞

造血干細胞是體內(nèi)常見的細胞，可進行二次可移植性[24]。造血干細胞的移植目前在臨床上的運用十分廣泛，并且效果顯著，很多疾病在臨床上的救治均需要造血干細胞的移植，再加上其具有可塑性[25]，能夠代替患病的組織、細胞或者器官，大大提升心臟功能。

5.總結(jié)

隨著科技的發(fā)展，血細胞分析的儀器的不斷更新，檢測方法不斷完善，陸續(xù)出現(xiàn)了檢測白細胞二分群小細胞群、大細胞群、三分群小細胞群、大細胞群、中間細胞群的分析儀器，測量參數(shù)逐漸增加至18項；檢測功能不斷完善，出現(xiàn)了網(wǎng)織紅細胞、幼稚細胞、有核紅細胞、淋巴細胞亞群的血細胞分析功能。計算機技術(shù)的應(yīng)用，自動稀釋、批量檢測、條碼返還技術(shù)的運用，簡化了操作，檢測的速度、效率、準確度大大提升，還能為患者提供手機端的檢查數(shù)據(jù)結(jié)果。血細胞分析檢測參數(shù)可以應(yīng)用到過氧化物酶散點圖、紅細胞血紅蛋白含量、造血干細胞對疾病的鑒別起到輔助和參考作用。血細胞分析儀還在不斷的研發(fā)和推新當(dāng)中，相信其會在臨床上具有更多顯著的價值和意義。