牦牛巴氏桿菌病診斷與治療

摘要：在我國高原地區(qū)牦牛是關(guān)鍵的養(yǎng)殖畜牧種類，在青海省果洛州經(jīng)濟(jì)發(fā)展過程中發(fā)揮了重要作用。牦牛養(yǎng)殖過程產(chǎn)生大量問題，其中巴氏桿菌問題是其中之一，對(duì)牦牛健康造成巨大威脅，使該地區(qū)的養(yǎng)殖業(yè)蒙受巨大的經(jīng)濟(jì)損失。針對(duì)牦牛巴氏桿菌開展系統(tǒng)研究，能為高原地區(qū)的牦牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展提供一定幫助。

關(guān)鍵詞：牦牛；巴氏桿菌；診治

中圖分類號(hào)：S858.23 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2022.22.036

Diagnosis and Treatment of Pasteurellosis in Yaks

QIAO Cunmei

（Animal Husbandry and Veterinary Work Station，Waeryi Township，Jiuzhi County，Guoluo Tibetan Autonomous Prefecture，Guoluo Qinghai 814499，China）

Abstract：Yak is the key animal breed in the plateau area of our country．It plays an important role in the economic development of Golog Tibetan Autonomous Prefecture．Today's Yak farming process has produced a lot of problems，one of which is pasteurellosis，which poses a great threat to the health of the Yak，causing huge economic losses in the region's farming industry．Therefore，the systematic research on pasteurellosis of Yak can provide some help for the development of Yak breeding industry in Plateau area．

Keywords：yak，pasteurella，diagnosis and treatment

0" 引言

牦牛巴氏桿菌又稱為出血性敗血癥，表現(xiàn)出零星發(fā)病的特征，牦牛發(fā)病后易出現(xiàn)死亡。巴氏桿菌導(dǎo)致很多牦牛死亡，一定程度破壞果洛州的生態(tài)環(huán)境。畜牧工作人員要深入研究巴氏桿菌，科學(xué)宣傳疫情知識(shí)，徹底控制發(fā)病率。

1" 基本情況

果洛州把牦牛作為主要地方畜種資源，農(nóng)牧民生產(chǎn)資料與生活資源都無法缺少牦牛，其在農(nóng)村經(jīng)濟(jì)和增加農(nóng)民收入中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。巴氏桿菌還稱為多殺性巴氏桿菌，它是敗血癥和出血性器官組織炎癥的誘因，這種急性傳染病十分危重。牦牛巴氏桿菌有不同的表現(xiàn)癥狀，以及廣泛出血如發(fā)熱、肺炎和急性腸胃炎等現(xiàn)象，也是高原地區(qū)耗牛非常普遍的一種病菌，全年均可發(fā)病，一旦無法采取行之有效的手段，威脅我國畜牧業(yè)的發(fā)展，帶來無法估計(jì)的經(jīng)濟(jì)損失。

多殺性巴氏桿菌不存在明顯的季節(jié)特點(diǎn)，其中天氣突變、冷熱交互、潮濕、天熱等都是其誘發(fā)因素，表現(xiàn)出較強(qiáng)散發(fā)性，同時(shí)在牦牛全身體液、分泌物與排泄物中存在病毒，其關(guān)鍵感染途徑為消化道與呼吸道。若幾頭牛產(chǎn)生癥狀，其快速擴(kuò)散和傳播至整個(gè)牛群，故要及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染源，為牦牛打造適合的生存環(huán)境。對(duì)牦牛的健康和免疫力造成巨大威脅的是寄生蟲，其在傳染病原中借病菌出現(xiàn)在排泄物和分泌物中，嚴(yán)重污染水源與飼料。高原多變的氣候與牧區(qū)天然飼草枯黃等因素導(dǎo)致牦牛受寒，加之無法為其提供充足營養(yǎng)而使機(jī)體降低抵抗力，產(chǎn)生巴氏桿菌病[1]。

2" 流行病學(xué)調(diào)查

2.1" 流行病史

牦牛多殺性巴氏桿菌偏細(xì)小，兩側(cè)分布短桿菌，無法產(chǎn)生芽胞，因厭惡運(yùn)動(dòng)而表現(xiàn)出散發(fā)特點(diǎn)，即陰性的革蘭氏染色體。實(shí)驗(yàn)選取堿性染色染血片或肝臟涂片，其有兩極濃染特點(diǎn)，故稱為兩極桿菌。多殺性巴氏桿菌弱化抵抗力，僅在空氣環(huán)境內(nèi)生存較短時(shí)間，并與血液融合生存，可依賴腐爛尸體生存1～6個(gè)月，由此發(fā)現(xiàn)，快速消滅巴氏桿菌的方法是陽光直射或高溫。相關(guān)資料記載，該病在本州發(fā)生時(shí)間很早，在瑪沁、瑪多、甘德、達(dá)日、班瑪、久治等縣的多個(gè)鄉(xiāng)村廣泛流行。本病致牛死亡現(xiàn)象在果洛州6縣都曾出現(xiàn)過，1958—1980年全州發(fā)病平均致死率67%。從1958年開始，每年注射1～2次牛出敗氫氧化鋁菌苗，直到1989年后徹底得到控制。但疫苗縮短了免疫期，加大劑量，以及注射過程的漏針、漏群和不及時(shí)等問題，極少數(shù)地區(qū)未徹底掐斷該病的流行途徑，都直接阻礙本州畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[2]。

2.2" 流行特點(diǎn)

本病分布范圍廣泛，全部養(yǎng)殖國家和地區(qū)均不能避免。牦牛巴氏桿菌病一般由多種血清型的多殺性巴氏桿菌誘發(fā)。牦牛出現(xiàn)該病時(shí)，往往伴隨高溫、肺炎、急性胃腸炎和內(nèi)臟器官大規(guī)模出血等，這也是該病發(fā)病率與死亡率居高不下的直接原因。

牛舍內(nèi)部和附近環(huán)境的巴氏桿菌易對(duì)飼料、飲水和器具造成污染，牛舍內(nèi)出現(xiàn)帶菌牛與病牛，它們作為巴氏桿菌的污染源都可通過呼吸道與糞便排毒。加之周圍環(huán)境長期存在著大量多巴氏桿菌，較大程度增加感染風(fēng)險(xiǎn)，提高感染頻率。病原體感染健康牛的媒介包括病牛的分泌物、排泄物、污染的飼料、飲水和用具等。另外，病菌通過咳嗽與噴嚏等渠道外排，借呼吸道引發(fā)大規(guī)模的傳染。同時(shí)皮膚黏膜傷口也是傳染不可缺少的條件。

該病無顯著的季節(jié)特點(diǎn)，但也有好發(fā)期，如冷熱交替、氣候突變、悶熱、潮濕等時(shí)節(jié)。一般表現(xiàn)出散發(fā)特點(diǎn)和地方流行性。當(dāng)環(huán)境衛(wèi)生惡劣，遇嚴(yán)寒、潮濕、空氣流通不暢、陰雨不斷、營養(yǎng)不足等一系列誘發(fā)因素時(shí)，將直接降低牦牛機(jī)體的抵抗力，帶來內(nèi)源性感染，引發(fā)大規(guī)模傳播。

3" 臨床癥狀

3.1" 敗血型

患畜體溫明顯升高至41～42 ℃，精神萎靡，進(jìn)食次數(shù)減少甚至終止反芻，回頭顧腹，引起腹瀉，體溫快速下降。糞便早期為粥樣，之后變成與黏液、血液混合的帶有惡臭味的液體。少數(shù)患畜出現(xiàn)尿液癥狀，病程在12～36 h，往往在未得到確切病因的情況下病畜已死亡。

3.2" 浮腫型

患畜初期表現(xiàn)為精神萎靡，減少進(jìn)食次數(shù)或反芻終止，皮膚與粘膜發(fā)紺，頸部、胸前附近產(chǎn)生嚴(yán)重水腫，但其很少甚至不會(huì)在病畜的四肢與肛門附近出現(xiàn)，并伴有熱、痛、硬的癥狀，在不斷發(fā)展過程中水腫位置發(fā)生變化，癥狀變得更加涼、痛與軟，以指壓立顯出痕跡，對(duì)應(yīng)咽喉越發(fā)腫脹，舌向外延伸時(shí)成暗紅色，此時(shí)吞咽與呼吸均受阻，提高了發(fā)生窒息死亡的概率。

3.3" 肺炎型

患畜表現(xiàn)出纖維素性肺炎癥狀，呼吸和心率持續(xù)加快，精神狀態(tài)不佳，呆立或久坐不起，食欲減弱，可視黏膜發(fā)紺，雙眼淚流不止，打噴嚏癥狀加重，部分牦牛流出的鼻液呈漿液性且包含血絲，呼吸通道不順暢，氣喘表現(xiàn)出間歇性，扣診胸部時(shí)現(xiàn)濁音，伴有疼痛感，由肺部聽診發(fā)現(xiàn)支氣管內(nèi)產(chǎn)生呼吸音與水泡性雜音[3]。

4" 剖檢變化

4.1" 敗血型

內(nèi)臟器官出血，在胃粘膜、漿膜及肺、舌、皮下組織與肌肉附近清晰可見大量出血點(diǎn)，腎臟實(shí)質(zhì)發(fā)生嚴(yán)重改變，淋巴結(jié)周圍隱約可見水腫與出血癥狀，切面變成暗紅色，而在大網(wǎng)膜與腸系膜周圍散布一些出血斑點(diǎn)。這時(shí)脾臟也產(chǎn)生不規(guī)則狀的出血點(diǎn)。

4.2" 浮腫型

咽喉或皮下漿液快速向肢體下組織延伸并完全浸潤，水腫部位切開后外溢大量深黃色透明液體或分布很多血絲，黃色膠樣液體同時(shí)浸潤咽組織周圍，咽、淋巴結(jié)的腫脹顯著，上呼吸道粘膜變得潮紅。

4.3" 肺炎型

肺臟表現(xiàn)出纖維素性肺炎特點(diǎn)，無形中增加充血、出血和瘀血的面積，紅色肝變區(qū)產(chǎn)生大理石狀的切面差異，牦牛患病一段時(shí)間后肺部產(chǎn)生壞死灶，光澤度下降并轉(zhuǎn)換成暗褐色。胸膜也粘有大量纖維素性物質(zhì)，絕大多數(shù)情況下與心包和心壁連接，積液也持續(xù)累積。

5" 診斷

5.1" 樣本采集

選取牦牛生前血液、水腫液等。牦牛死亡后取得心血、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓和病灶等。

5.2" 樣本處理

把臟器與淋巴結(jié)表面的雜物去除，將組織塊浸入95%酒精并快速拿出，后點(diǎn)火令其自燃，如此反復(fù)試驗(yàn)2～3次；或浸入沸水進(jìn)行數(shù)秒浸燙，采用滅菌刀進(jìn)行剖切，反復(fù)涂抹血瓊脂平板一端新鮮的剖面，相當(dāng)于1/5面積，并在鉑金耳涂層上完成分離作業(yè)。分離時(shí)完全涂抹整體平板，以提高檢出效率。

5.3" 直接鏡檢

科學(xué)制作血液推片，利用新鮮剖面制作相關(guān)臟器的涂片，選擇甲醛對(duì)革蘭氏染色實(shí)現(xiàn)固定，還可以實(shí)現(xiàn)瑞氏染色或堿性美蘭染色，若形成大量革蘭氏陰性、雙側(cè)鈍圓、中心部位梢凸的短小型桿菌，則瑞氏或美藍(lán)染色體得到并列形式的卵圓形雙球菌，滿足了初期診斷的標(biāo)準(zhǔn)。

5.4" 分離培養(yǎng)

綜合利用麥康凱瓊脂和血液瓊脂平板進(jìn)行分離培養(yǎng)操作，本菌難以基于麥康凱瓊脂順利生長，卻能借血液瓊脂平板提升生長速率，培養(yǎng)24 h后，最終獲得濕潤、圓形、灰白色的露珠狀小菌落。利用涂片染色鏡檢獲得革蘭氏陰性小桿菌，在生化試驗(yàn)過程中對(duì)其進(jìn)行鑒定。

科學(xué)利用指示培養(yǎng)基提高鑒別多殺巴氏桿菌的速率。該培養(yǎng)基成分包括胰蛋白腸、胰蛋白陳、蔗糖等。完成接種后，設(shè)定環(huán)境溫度為37 ℃并保持24～48 h，該菌是紅色露珠狀的小菌落，其邊緣呈藍(lán)綠熒光色。非多殺性巴氏桿菌經(jīng)科學(xué)培養(yǎng)后得到深紫紅色與淡藍(lán)綠色的菌落，在觀察過程中充分發(fā)揮透視光線的作用，二者邊緣均無熒光色。一旦本菌分離時(shí)，基于這一培養(yǎng)基形成多個(gè)代表性的菌落，此時(shí)產(chǎn)生100%的鑒別率。

一種多殺巴氏桿菌的選擇性分離培養(yǎng)基：提前備好馬丁培養(yǎng)基，將牛全血、抑菌劑硫酸新霉素和鹽酸潔霉素完全融合，進(jìn)一步獲得分離多殺巴氏桿菌培養(yǎng)基。而培養(yǎng)基內(nèi)硫酸新霉素低于2.5 vg/mL的濃度時(shí)，能最大程度保證多殺巴氏桿菌的正常生長；當(dāng)這一濃度為2.5 vg/mL時(shí)，會(huì)影響少數(shù)菌株的生長過程；不斷提升濃度至5 pg/mL時(shí)，限制了A型菌株的生長狀況，B型菌株部分被影響，而D型菌株無任何變化；當(dāng)繼續(xù)提高濃度至10 pg/mL時(shí)，這一環(huán)境不適合菌株的生長。若培養(yǎng)基成分是2.5 pg/mL的硫酸新霉素和1.0 pg/mL的鹽酸潔霉素時(shí)，這一環(huán)境僅適合少部分菌株生長，大部分菌株能正常生長。

5.5" 形態(tài)特征

多殺性巴氏桿菌由自然病例新分離形成，大部分屬小型短桿菌，兩頭鈍圓，中部稍凸，接近于卵圓型。菌體長與寬分別是0.7～2.5、0.3～0.6μm。病畜體液內(nèi)的肥大菌體以獨(dú)立形式存在。經(jīng)長期人工培育，菌體發(fā)生變化呈桿狀，極少數(shù)表現(xiàn)出長鏈狀特點(diǎn)，形成長短區(qū)別。自然病科新分離菌體的英膜相當(dāng)于1/3菌體，不帶芽孢和鞭毛；革蘭氏染色為陰性。本菌結(jié)合菌落形態(tài)、生化反應(yīng)、血清反應(yīng)等情況包括若干型，且菌型直接聯(lián)系著巴氏桿菌的病型、畜主特異性、致病性等。加之本菌表現(xiàn)出極大變異特點(diǎn)，原菌型經(jīng)長期穩(wěn)定培養(yǎng)有可能產(chǎn)生變異株。

6" 影響因素

6.1" 健康牛帶菌因素

巴氏桿菌病在全年都會(huì)出現(xiàn)，特別是在冬春季節(jié)突變的氣候環(huán)境，本病的發(fā)病率更高。健康家畜上呼吸道扁桃體基本都存在本菌，一旦機(jī)體被不同因素影響而降低自身抵抗力時(shí)，本菌有較強(qiáng)的致病力，令其產(chǎn)生內(nèi)源性感染。因本病多發(fā)于氣候干冷、牧草干枯的環(huán)境，加之牦牛體質(zhì)過瘦弱，這是該病發(fā)病率高的直接原因。

6.2" 免疫效果因素

久治縣牦牛巴氏桿菌氧化鋁甲醛菌苗在3—4月發(fā)揮免疫作用，牦牛此刻體質(zhì)不佳，抵抗力嚴(yán)重不足，免疫后應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)烈或帶來死亡。一些牧戶或防疫工作者自行減少注射巴氏桿菌氫氧化鋁甲醛菌苗滅活疫苗的量或取消對(duì)瘦弱牦牛的注射，加上補(bǔ)免工作拖延滯后，降低免疫密度，導(dǎo)致質(zhì)量不合格，無法得到良好的免疫效果。

6.3" 環(huán)境污染因素

據(jù)有關(guān)調(diào)查可知，草場(chǎng)上牦牛感染巴氏桿菌后死亡，其急性發(fā)病的臨床反應(yīng)不顯著，處理分泌物、排泄物和尸體時(shí)不符合消毒要求，進(jìn)一步對(duì)草場(chǎng)和水源造成污染，最大程度保護(hù)附近耗牛群。

7nbsp; 防治措施

7.1" 疫苗免疫

每年春秋兩季開展免疫工作，為體重不足100 kg牦牛注射4 mL菌苗，體重超過100 kg的注射6 mL，能獲得理想的預(yù)防效果。

7.2" 藥物治療

一旦出現(xiàn)該病立即進(jìn)行消毒、隔離和治療操作。緊急情況下使用高免血清或疫苗預(yù)防性注射，如抗生素與高免血清混用提高了治療水平。我國對(duì)巴氏桿菌的治療采用青霉素、氨節(jié)青霉素、先鋒霉素、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、大觀霉素、環(huán)丙沙星等藥物。這些藥物的藥效卻各不相同。對(duì)牦牛巴氏桿菌采取藥物治療可最大程度降低發(fā)病率。而從前主要用青、鏈霉素等藥物的防治效果不佳，但慶大霉素、卡那霉素、新霉素、大觀霉素等肌肉注射，需保證穿梭用藥，進(jìn)一步獲得較好的治療效果。

用10%磺胺嘧啶鈉150～200 mL靜脈注射，2次/d，持續(xù)用3 d，同時(shí)，注射維生素C 40～60 mL實(shí)行治療。當(dāng)牦牛病癥較重時(shí)不只用磺胺嘧啶鈉，還要搭配肌肉注射青霉素800萬IU，2次/d，持續(xù)用3d。用20%復(fù)方磺胺嘧啶鈉以每千克體重0.05 g注射防治，持續(xù)用2～3 d。

對(duì)巴氏桿菌病治療的中草藥包括復(fù)方中藥制劑，即為黃連30 g、黃芩60 g、金銀花60 g、連翹60 g、射干30 g、當(dāng)歸30 g、生地30 g、白術(shù)30 g、山楂30 g、神曲30 g、厚樸25 g、木香25 g、積實(shí)25 g、桔梗20 g、大黃60 g、芒硝30 g、干草15 g，水煎1次灌服，1劑/d，持續(xù)服用2劑。該中藥療效極佳，明顯抑殺巴氏桿菌并，提高肝、胃活動(dòng)水平和物質(zhì)代謝速率。藥沫灌服或與飼料混合喂服，有效率達(dá)到90%。

7.3" 手術(shù)治療

牦牛巴氏桿菌并水腫型晚期一般都有窒息造成病牛死亡的特點(diǎn)，建議用氣管切開術(shù)，插入氣導(dǎo)管，能減輕病牛呼吸受阻的痛苦。同時(shí)，與以上藥物搭配治療可得到較好的效果。

8" 結(jié)束語

果洛州地區(qū)在養(yǎng)殖牦牛時(shí)，巴氏桿菌會(huì)嚴(yán)重危害牦牛，在牦牛日常養(yǎng)殖過程該菌也是非常普遍的流行傳染病，一定程度威脅牦牛的健康。平時(shí)要深入研究巴氏桿菌，結(jié)合病原與流行特征研究怎樣減少巴氏桿菌帶來的經(jīng)濟(jì)損失。當(dāng)出現(xiàn)病牛時(shí)，養(yǎng)殖戶注意培養(yǎng)防范巴氏桿菌的意識(shí)，做好該病的預(yù)防與治療措施，降低該病的發(fā)病率，提高經(jīng)濟(jì)效益。

參考文獻(xiàn)

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