維生素D受體在消化系統(tǒng)腫瘤中研究進(jìn)展

史鐵偉 武迎澳 崔今玲 金磊 杜智瑋 白春英

(赤峰學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院內(nèi)蒙古人類遺傳病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 赤峰 024000)

維生素D屬于固醇類衍生物，是人體內(nèi)不可或缺的脂溶性維生素。與人類健康關(guān)系最密切的是其代謝產(chǎn)物活性維生素D即1，25-二羥基維生素D3〔1，25-(OH)2VD3〕，進(jìn)一步由人體內(nèi)的維生素D受體(VDR)介導(dǎo)發(fā)揮其廣泛生物學(xué)作用。VDR及其配體活性維生素D結(jié)合發(fā)揮的生物學(xué)作用除了大家熟知的經(jīng)典調(diào)節(jié)鈣和磷的代謝功能以外，還與糖尿病〔1，2〕、兒童自閉癥〔3，4〕、哮喘〔5〕、骨質(zhì)疏松〔6，7〕、口腔扁平苔蘚〔8，9〕、認(rèn)知功能障礙〔10，11〕等疾病關(guān)系密切，尤其是在癌癥〔12～15〕等非經(jīng)典作用方面的研究，越發(fā)受到研究人員的關(guān)注和重視。

人類VDR由427個氨基酸殘基組成，位于12號染色體長臂1區(qū)3帶(12q13.11)，基因組總長度63 495 bp，11個外顯子〔16〕。VDR與1，25-(OH)2VD3結(jié)合后，發(fā)生構(gòu)象改變，從而激活靶基因轉(zhuǎn)錄。VDR分為細(xì)胞核受體(nVDR)和細(xì)胞膜受體(mVDR)兩大類：維生素D作為核受體超家族重要成員的nVDR，與視黃醇X受體(RXR)結(jié)合形成VDR-RXR，該二聚體是發(fā)揮活性維生素D作用的分子開關(guān)，激活維生素D靶基因以調(diào)控相應(yīng)蛋白；細(xì)胞膜受體介導(dǎo)的快速非基因效應(yīng)，主要調(diào)控人體內(nèi)鈣和磷的代謝穩(wěn)定，該效應(yīng)從產(chǎn)生到完成持續(xù)時間為數(shù)秒到數(shù)分鐘不等〔17〕。采用限制性片段長度多態(tài)性-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR-RFLP)技術(shù)分析VDR基因，提示其具有明顯的基因多態(tài)性。根據(jù)限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)的存在與否，人們通常將VDR基因多態(tài)性位點(diǎn)分成4種類型進(jìn)行研究：含有BsmI、ApaI、TaqI、FokI酶切位點(diǎn)者分別為b、a、t、f型；不含相應(yīng)酶切位點(diǎn)的分別為B、A、T、F型。值得關(guān)注的是當(dāng)前基因多態(tài)性在腫瘤的易感性、藥物代謝反應(yīng)和預(yù)后表現(xiàn)方面已成為研究熱點(diǎn)〔18〕。

當(dāng)前我國消化系統(tǒng)腫瘤在惡性腫瘤的發(fā)病率和死亡率方面均居高不下，由于早期發(fā)病癥狀不明顯、缺乏簡單易行且專一性強(qiáng)的篩查方法，許多患者確診時往往錯過了手術(shù)治療的最佳時機(jī)，極大影響患者預(yù)后生存〔19〕。根據(jù)國家癌癥中心發(fā)布的最新一期全國癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)(2019年發(fā)布)，發(fā)病率前10位的腫瘤，消化系統(tǒng)腫瘤占大多數(shù)，包括排名第2位的胃癌，第3位的結(jié)直腸癌，第4位的肝癌，第6位的食管癌和第10位的胰腺癌〔20〕。消化系統(tǒng)腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制較復(fù)雜、信號通路更是錯綜雜亂，這也是臨床基礎(chǔ)研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)，因此探討VDR在消化系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制有助于進(jìn)一步分析和深入了解消化系統(tǒng)抗腫瘤方面的研究，為臨床提供更多抗腫瘤治療思路和靶點(diǎn)選擇。

1 VDR與食管癌

中國是食管癌高發(fā)國家，發(fā)病率與死亡率均占世界一半以上，每年新發(fā)病例25.9萬例，死亡21.1萬例〔20〕。中國食管癌以食管鱗癌為主，嚴(yán)重威脅我國國民的健康和生命。Yang等〔21〕對我國北方人群血漿維生素D水平、維生素D代謝相關(guān)基因變異與食管鱗癌易感性關(guān)系進(jìn)行分析，將582例食管鱗癌患者和569例健康對照組進(jìn)行分析，檢測維生素D代謝相關(guān)基因的多態(tài)性，結(jié)果顯示血漿中的25-羥基維生素D〔25(OH)D〕的含量與食管鱗癌發(fā)病風(fēng)險負(fù)相關(guān)，并發(fā)現(xiàn)VDR的CDX2(rs11568820)變異體與食管鱗癌易感性顯著相關(guān)，研究表明攝入維生素D可能作為降低中國人群食管鱗癌患病風(fēng)險的化學(xué)預(yù)防措施之一。Bao等〔22〕分析應(yīng)激活化蛋白激酶(JNK)1與VDR的表達(dá)對于食管鱗癌預(yù)后的關(guān)系將362個食管鱗癌組織芯片與正常食管組織芯片相比，結(jié)果顯示食管鱗癌上皮細(xì)胞中VDR表達(dá)水平更低，基質(zhì)組織非上皮細(xì)胞中VDR的表達(dá)與食管鱗癌患者的生存時間密切相關(guān)，研究表明VDR是食管鱗癌的抑制因子，而且其間質(zhì)表達(dá)水平與食管鱗癌的預(yù)后相關(guān)。Zgaga等〔23〕通過Meta分析，將人體內(nèi)25(OH)D水平、維生素D攝入、紫外線B暴露情況和遺傳因素進(jìn)行篩選得到15篇有關(guān)文獻(xiàn)，研究表明VDR T〔rs2107301 VDR單體型rs2238135(G)/rs1989969(T)〕攜帶者的食管腺癌患病風(fēng)險更低。McCain等〔24〕進(jìn)行食管腺癌預(yù)后和VDR表達(dá)研究，將2004～2012年間130例北愛爾蘭人群的食管腺癌標(biāo)本和臨床資料建立比例風(fēng)險回歸模型(Cox回歸模型)，結(jié)果顯示校正干擾因素后，較高的VDR表達(dá)水平與總生存率(HR=0.49，95%CI0.25～0.96)和疾病特異性生存率(HR=0.50，95%CI0.26～0.99)的改善相關(guān)，研究首次在愛爾蘭人群中證明高表達(dá)水平VDR的食管腺癌患者預(yù)后較好，提示可以將VDR作為食管腺癌的預(yù)后標(biāo)志物。

2 VDR與胃癌

胃癌是一種源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，和胃癌發(fā)生密切相關(guān)的因素包括現(xiàn)代人工作煩躁導(dǎo)致壓力增大、多脂多糖的不合理飲食結(jié)構(gòu)及幽門螺桿菌感染等，使其發(fā)生呈年輕化傾向〔25〕。據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的《全球癌癥報告2014》顯示，東南亞地區(qū)是胃癌高發(fā)區(qū)，中國、日本、韓國3個國家的胃癌總?cè)藬?shù)約占全球胃癌患病總?cè)藬?shù)的70%，而其他地區(qū)加起來占30%左右。我國胃癌發(fā)生率僅次于肺癌，排第二位，也是癌癥導(dǎo)致死亡的第三大原因。Yin等〔26〕進(jìn)行VDR基因的VDRrs2107301T>C，rs2228570C>T，rs1989969C>T和rs11568820G>A的4個單核苷酸多態(tài)性(SNP)和中國人群胃賁門腺癌的相關(guān)性研究，結(jié)果顯示該4個SNP等位基因的變異與胃賁門腺癌易感性無關(guān)，進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析提出飲酒或60歲以下患者中具有rs1989969多態(tài)性位點(diǎn)與發(fā)病風(fēng)險有關(guān)，VDR Trs2107301、Trs2228570、Crs1989969、Grs11568820的單倍型降低了發(fā)病風(fēng)險。研究表明VDR-rs1989969多態(tài)性與胃癌的發(fā)生有關(guān)，尤其在中國年輕人群和飲酒人群中，VDR-rs1989969多態(tài)性明顯提升了胃癌的發(fā)病風(fēng)險。胡倩等〔27〕進(jìn)行維生素D和VDR對胃癌細(xì)胞增殖作用的分子機(jī)制研究，結(jié)果顯示兩種胃癌細(xì)胞株SGC-7901和MKN-45都表達(dá)VDR，培養(yǎng)細(xì)胞過程中添加1，25-羥基維生素D3〔1，25-(OH)VD3〕與VDR結(jié)合后可以明顯抑制胃癌細(xì)胞增殖和集落形成，同時還發(fā)現(xiàn)二者結(jié)合可以抑制β-catenin的磷酸化水平，當(dāng)下調(diào)VDR的表達(dá)后，維生素D對β-catenin的磷酸化水平無明顯影響。研究表明VDR與維生素D作用后，通過下調(diào)β-catenin磷酸化水平從而抑制胃癌細(xì)胞的增殖和集落形成以達(dá)到抑制腫瘤的目的。方法等〔28〕對新疆維吾爾族胃癌患者和VDR的FokI基因多態(tài)性進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示含f等位基因(Ff+ff)的人群患胃癌的風(fēng)險高于不含f等位基因(FF)的人群。研究表明VDR的f位多態(tài)性基因可能是維吾爾族胃癌發(fā)生的危險因素之一，而VDR的F位多態(tài)性基因可能是維吾爾族胃癌發(fā)生的保護(hù)因素(F位點(diǎn)有可能是通過調(diào)節(jié)D-二聚體而發(fā)揮抗腫瘤作用)。Li等〔29〕利用胃癌細(xì)胞株(TMK1)和永生化正常胃細(xì)胞(HFE145)兩種細(xì)胞進(jìn)行VDR和突變型p53(mutp53)在介導(dǎo)1，25-(OH)2VD3抗腫瘤作用中的機(jī)制研究，結(jié)果顯示1，25-(OH)2VD3對TMK1細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用。此外，1，25-(OH)2VD3作為配體結(jié)合VDR可以刺激TMK1中p21的表達(dá)，同時抑制細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)2的表達(dá)。在人胃癌組織和癌細(xì)胞系中VDR具有高表達(dá)水平，突變p53可以通過與VDR的相互作用穩(wěn)定核VDR水平。研究表明1，25-(OH)2VD3通過VDR和突變p53相互作用，通過對p21/CDK2的調(diào)節(jié)達(dá)到抑制胃癌細(xì)胞生長的效果。Durak等〔30〕進(jìn)行VDR多態(tài)性和胃癌易感性分析，結(jié)果顯示VDR rs731236和rs2228570多態(tài)性在患者和對照組之間分布無顯著差異，研究表明VDR兩個多態(tài)性位點(diǎn)并不是胃癌發(fā)展的危險因素。Eom等〔31〕進(jìn)行韓國人群飲食維生素D的攝入和維生素D相關(guān)基因多態(tài)性和胃癌易感性研究，研究表明維生素D相關(guān)基因包括VDR多態(tài)性與胃癌的發(fā)生沒有關(guān)系。馬曉莉等〔32〕進(jìn)行VDR基因多態(tài)性和胃腸道腫瘤化療敏感性的研究，結(jié)果表明31例胃癌患者中VDR的BsmI位點(diǎn)基因型分布頻率與對照組并無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，化療效果也無明顯差異。

3 VDR與結(jié)直腸癌

世界各地不同區(qū)域，結(jié)直腸癌發(fā)病率差異可達(dá)20倍以上。北歐、西歐、北美及新西蘭等發(fā)達(dá)國家(日本和芬蘭除外)結(jié)直腸癌發(fā)病率最高，新西蘭死亡率最高。而我國結(jié)直腸癌發(fā)生率排在惡性腫瘤發(fā)病率前三，我國大陸地區(qū)每年新發(fā)結(jié)直腸癌病例42.92萬人，死亡28.14萬例，防控形勢不容樂觀〔33〕。結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程從腺瘤到惡性病灶有一個較長過程，利用臨床生物標(biāo)志物篩查可以做到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)、早治療，但是大多數(shù)結(jié)直腸癌患者確診時已是中晚期，體內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)移，其臨床療效欠佳，預(yù)后較差，所以早期診斷及預(yù)防對于結(jié)直腸癌研究顯得尤為重要。近年來化學(xué)預(yù)防逐漸成為癌癥研究熱點(diǎn)之一，特別是在預(yù)防結(jié)直腸癌方面的潛力，阿司匹林、葉酸、維生素D和鈣劑、膳食纖維和腸道菌群等對結(jié)直腸癌預(yù)防作用都是熱點(diǎn)〔34〕。

華宏軍等〔35〕進(jìn)行VDR基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險的相關(guān)性研究，選擇29個VDR SNPs進(jìn)行基因分型，并測量血漿維生素D濃度，結(jié)果表明rs2254210、rs1540339、rs2107301、rs11168267、rs11574113、rs731236、rs3847987和rs11574143等8個VDR的SNP與結(jié)直腸癌的風(fēng)險相關(guān)(P<0.05)。在血漿維生素D濃度較高的人中rs11574113、rs3847987和rs11574143這3個SNP位點(diǎn)與結(jié)直腸癌的風(fēng)險相關(guān)性更顯著，研究表明VDR基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險具有一定相關(guān)性。Castellano-Castillo等〔36〕進(jìn)行結(jié)直腸癌組織的炎癥和VDR表達(dá)及甲基化相關(guān)研究，檢測結(jié)直腸癌患者和健康對照組血液和內(nèi)臟脂肪組織的血清25-羥基維生素D、VDR的表達(dá)和促炎癥標(biāo)志物等指標(biāo)，結(jié)果顯示結(jié)直腸癌患者組織表達(dá)和VDR基因正相關(guān)，DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)3A mRNA表達(dá)和VDR的DNA甲基化正相關(guān)。研究表明結(jié)直腸癌發(fā)生的關(guān)鍵因素是脂肪組織的功能和炎癥反應(yīng)，而患者脂肪組織的VDR高水平表達(dá)可能是通過甲基化促進(jìn)炎癥引發(fā)腫瘤。Moossavi等〔37〕進(jìn)行伊朗結(jié)直腸癌VDR基因多態(tài)性和易感性研究，結(jié)果顯示南霍拉桑族人群FokI SNP的ff基因型和f等位基因與大腸癌易感性呈正相關(guān)。研究表明，F(xiàn)okI多態(tài)性結(jié)直腸癌的易感性有關(guān)，F(xiàn)okI多態(tài)性的ff基因型與結(jié)直腸癌發(fā)生風(fēng)險正相關(guān)。Zhang等〔38〕進(jìn)行結(jié)直腸癌中p62和VDR之間的調(diào)控研究，結(jié)果顯示p62在結(jié)直腸癌細(xì)胞表達(dá)中顯著上調(diào)，而高p62水平是結(jié)直腸癌患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險因素。研究表明p62通過與VDR互相作用可以抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞增殖來促進(jìn)結(jié)直腸癌遷移和侵襲。Pan等〔39〕進(jìn)行VDR基因多態(tài)性和結(jié)直腸癌相關(guān)Meta分析，結(jié)果表明VDR的BsmI多態(tài)性位點(diǎn)與腫瘤發(fā)生有關(guān)，同時FokI多態(tài)性位點(diǎn)可能是結(jié)直腸癌發(fā)生的危險因素之一。崔君鵬等〔40〕對亞洲人群與高加索人群的VDR基因中FokI位點(diǎn)不論F或f等位基因均與結(jié)直腸癌之間進(jìn)行Meta分析，分析結(jié)果均表明無明顯的直接關(guān)聯(lián)。左忠朝等〔41〕進(jìn)行VDR基因ApaI多態(tài)性與結(jié)直腸癌相關(guān)性Meta分析，結(jié)果表明VDR基因ApaI多態(tài)性與結(jié)直腸癌沒有顯著相關(guān)性。

4 VDR與胰腺癌

胰腺癌作為消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，全球的發(fā)病率和死亡率呈逐年上升現(xiàn)象。胰腺癌具有發(fā)病隱匿、進(jìn)展迅猛、惡性程度高，療效欠佳，生存期短、預(yù)后極差等特點(diǎn)，患者5年生存率約8%，幾乎沒有有效治療方案〔42〕。

Li等〔43〕對中國胰腺癌患者VDR基因的rs2228570和rs1544410兩個多態(tài)性位點(diǎn)的變化與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險關(guān)聯(lián)進(jìn)行研究。根據(jù)列聯(lián)表分析結(jié)果顯示，在rs2228570中，T等位基因的T基因座和基因型會增加胰腺癌的風(fēng)險；在rs1544410中，G基因座和基因型AG+GG可以顯著降低胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險，rs2228570多態(tài)性與胰腺癌的病理分化密切相關(guān)，而rs1544410多態(tài)性與胰腺癌的TNM分期密切相關(guān)。研究顯示中國人群VDR多態(tài)性對于胰腺癌的發(fā)生率和生存率有重要意義。Li等〔44〕進(jìn)行維生素D處理細(xì)胞后VDR和細(xì)胞周期蛋白(CDKN1A，p21和CDK1)表達(dá)水平研究，將胰腺細(xì)胞和低分化轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞進(jìn)行維生素D藥物處理，結(jié)果顯示正常胰腺細(xì)胞中隨著1，25-(OH)2VD3的濃度增加，細(xì)胞中的VDR、p21和CDK1表達(dá)也上調(diào)，而低分化轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞panc-1也發(fā)生表達(dá)上調(diào)的變化。當(dāng)1，25-(OH)2VD3濃度進(jìn)一步升高到超過生理范圍時，VDR的表達(dá)會顯著下調(diào)。研究表明當(dāng)維生素D濃度急劇變化，VDR可以通過調(diào)節(jié)自己的表達(dá)水平來維持細(xì)胞的正常功能，同時也提示添加維生素D結(jié)合VDR后通過提高細(xì)胞周期抑制蛋白p21和CDK1的水平，進(jìn)一步說明維生素D在理論上對胰腺細(xì)胞分裂增殖有一定作用。Innocenti等〔45〕進(jìn)行化療藥物吉西他濱對治療晚期胰腺癌患者的研究，將患者分成兩組獨(dú)立樣本，一組是癌癥和白血病B組(CALGB80303)，一組是梅奧醫(yī)學(xué)中心患者，結(jié)果顯示VDR的rs2853564多態(tài)性變異與兩組胰腺癌患者的總生存期有關(guān)。研究表明VDRrs2853564多態(tài)性的改變，影響內(nèi)源性25-羥基維生素D的改變及和吉西他濱互相作用，減少IRF4轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合，從而提高患者總生存期。Mohamed等〔46〕首次對埃及胰腺癌患者進(jìn)行VDR-FokI多態(tài)性統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示胰腺癌組的VDR-FokI多態(tài)性分布和對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，研究表明埃及患者胰腺癌發(fā)生和VDR-FokI不存在直接關(guān)系。

5 VDR與肝癌

肝癌是發(fā)生率和死亡率較高的惡性腫瘤之一，其導(dǎo)致的死亡率排在惡性腫瘤引起死亡率的第3名，我國每年新發(fā)肝癌病例約占世界新發(fā)人群的一半。肝癌的發(fā)生是一個復(fù)雜的生物學(xué)過程，具體機(jī)制尚未完全闡明，其病因主要包括乙型/丙型肝炎病毒的感染和黃曲霉毒素、藍(lán)藻毒素和多種可干預(yù)的個體行為方式〔47〕。

Xu等〔48〕進(jìn)行阿司咪唑和維生素D在肝癌細(xì)胞中抗腫瘤協(xié)同作用研究。結(jié)果表明不論體外實(shí)驗(yàn)還是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)阿司咪唑能夠增強(qiáng)維生素D的抗肝癌作用，阿司咪唑的處理上調(diào)了VDR的表達(dá)，而VDR下調(diào)明顯抑制維生素D和阿司咪唑?qū)Ω伟┘?xì)胞在活力、增殖、凋亡、遷移和侵襲方面的協(xié)同作用?；驒z測報告證實(shí)VDR受miR-125a-5p調(diào)控，而miR-125a-5p抑制劑可增加VDR表達(dá)，并降低肝細(xì)胞癌(HCC)細(xì)胞中細(xì)胞存活率和增殖能力。此外，肝癌患者腫瘤組織中的VDR和miR-125a-5p表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。研究表明抑制miR-125a-5p和隨后上調(diào)的VDR與阿司咪唑誘導(dǎo)增強(qiáng)維生素D的抗腫瘤作用有關(guān)。Barooah等〔49〕進(jìn)行具有丙型肝炎病毒感染的HCC發(fā)展的基因多態(tài)性關(guān)聯(lián)研究，將印度東北部的60例攜帶乙型肝炎病毒的肝癌患者進(jìn)行VDR(BsmI，ApaI和TaqI)多態(tài)性分析，結(jié)果顯示患者的VDR基因ApaI CC基因型、ApaI C等位基因型和bAt單倍型的頻率顯著高于對照組，經(jīng)邏輯回歸分析提示ApaI CC基因型和bAt單倍型是肝癌發(fā)展的獨(dú)立預(yù)測因子。研究表明VDR多態(tài)性和丙型肝炎肝細(xì)胞癌的發(fā)生有重要聯(lián)系。Raafat等〔50〕進(jìn)行丙型肝炎病毒性肝硬化中肝癌發(fā)生與VDR多態(tài)性位點(diǎn)ApaI rs7975232相關(guān)性研究，結(jié)果顯示與肝硬化組和對照組相比，肝癌組中ApaI CC基因型的頻率更高(75%，P<0.000 1)。研究表明ApaI CC基因型與慢性丙型肝炎病毒攜帶肝硬化患者引發(fā)HCC相關(guān)，因此有可能成為慢性丙型肝炎病毒肝硬化患者進(jìn)一步發(fā)展到HCC獨(dú)立生物標(biāo)志物。Quan等〔51〕選擇十二種常見基因多態(tài)性〔VDR/血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)/白介素18(IL-18)/甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)〕與肝細(xì)胞癌易感性之間的關(guān)聯(lián)進(jìn)行Meta分析，結(jié)果表明VDR rs7975232、VDR rs2228570多態(tài)性均與HCC顯著相關(guān)。Yu等〔52〕進(jìn)行載脂蛋白(Apo)M在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的機(jī)制研究，將肝癌細(xì)胞SMMC7721的ApoM基因進(jìn)行敲除，基因芯片分析敲除前后的基因差異表達(dá)，鑒定了1 868個差異基因，包括VDR基因。結(jié)果顯示敲除ApoM后的肝癌細(xì)胞株VDR表達(dá)顯著下降，功能恢復(fù)實(shí)驗(yàn)顯示，VDR高表達(dá)可以抵消ApoM敲除引起的細(xì)胞凋亡，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。研究表明通過VDR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，ApoM可以抑制肝癌細(xì)胞SMMC7721的生長和轉(zhuǎn)移。Laura等〔53〕進(jìn)行一項(xiàng)關(guān)于維生素D代謝和VDR-TGFβ-1-SMAD3互作于丙型肝炎長期抗病毒治療抗肝硬化的試驗(yàn)(HALT-C)中dbGaP數(shù)據(jù)的研究，對692例慢性丙型肝炎患者進(jìn)行4年的隨訪，評估臨床結(jié)果，包括肝癌的發(fā)生。研究表明VDR中有2個與胃/食管出血和HCC有關(guān)的多態(tài)性位點(diǎn)分別是rs4516035和rs2239186，但統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著差異。

6 VDR與膽囊癌

膽囊癌屬于高度惡性膽囊系統(tǒng)腫瘤，發(fā)病率具有明顯的區(qū)域差異性〔54〕。世界上膽囊癌發(fā)病率較高的地區(qū)是南亞、中亞和南美洲，目前膽囊癌發(fā)病率最高的國家是玻利維亞，日本的發(fā)病率也很高。在我國臨床中比較少見，發(fā)病率為(1.00～1.30)/10萬，膽囊癌不是消化系統(tǒng)和膽道系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率近年來也無明顯升高，但5年相對生存率自2003年以來平均每個時間段降低0.9%〔55～57〕。

Sachit等〔58〕在印度北部進(jìn)行了一項(xiàng)前瞻性研究，分析膽囊癌患者病理切片(n=32)和良性膽囊組織切片(n=11)VDR表達(dá)情況，同時對19例膽囊癌患者補(bǔ)充維生素D，11例膽囊癌患者未攝入維生素D，評價姑息治療中維生素D對患者生活質(zhì)量和治療效果的影響。結(jié)果顯示VDR表達(dá)下調(diào)與腫瘤惡性過程進(jìn)展有關(guān)，姑息治療攝入維生素D確實(shí)可顯著改善患者的生活質(zhì)量。研究表明維生素D受體的表達(dá)在膽囊癌的發(fā)生發(fā)展中有抑制作用。也有研究不認(rèn)同VDR多態(tài)性和膽囊癌有關(guān)。Li等〔60〕進(jìn)行VDR基因多態(tài)性和中國人群膽囊癌易感性分析研究，將291例膽囊癌患者和396例正常對照人群進(jìn)行分析，分別檢測了ApaI，BsmI和TaqI多態(tài)性的基因型和等位基因頻率。結(jié)果顯示膽囊癌患者的FokI TT型頻率差異顯著，多元logistic回歸分析顯示CC基因型攜帶者發(fā)生膽囊癌的風(fēng)險較高。但是多元logistic回歸分析表明VDR的ApaI，BsmI和TaqI多態(tài)性與膽囊癌風(fēng)險之間無任何關(guān)聯(lián)，兩組無顯著差異(P>0.05)。

7 總結(jié)與展望

前文提及的大量研究表明維生素D代謝通路里VDR和腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，盡管有一定爭議性。VDR及其配體活性維生素D之所以抑制腫瘤，作用機(jī)制調(diào)控有以下幾方面〔60〕：①抗生長信號的不敏感和細(xì)胞凋亡逃逸：Chiang等〔61〕研究提出膽管癌細(xì)胞生長可以被1α，25-二羥維生素D3〔1α，25(OH)2D3〕及其類似物MART-10抑制生長。兩種藥物均可以通過上調(diào)p27和下調(diào)CDK4、CDK6和cyclinD3而誘導(dǎo)細(xì)胞G0/G1細(xì)胞周期阻滯，而VDR敲除后的膽管癌細(xì)胞再進(jìn)行藥物處理，檢測到對細(xì)胞生長抑制作用也減弱。Chiang等〔62〕在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細(xì)胞也有類似的發(fā)現(xiàn)。Zheng等〔63〕在乳腺癌細(xì)胞和前列腺癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)敲除VDR會干擾癌細(xì)胞內(nèi)的Wnt/β-catenin信號通路，尤其提出未結(jié)合配體的VDR可能成為乳腺癌和前列腺癌新的診斷和治療的標(biāo)志物。江流芳等〔64〕研究提出高糖作用后足細(xì)胞中誘導(dǎo)VDR水平升高，同時VDR可以拮抗高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡，降低高糖環(huán)境中細(xì)胞中半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3活性，分子作用機(jī)制可能與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)3、p38有關(guān)。②組織浸潤和轉(zhuǎn)移：Chen等〔65〕研究提出在腎癌細(xì)胞中VDR過表達(dá)明顯抑制癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并且有促細(xì)胞凋亡作用，作用機(jī)制可能是VDR通過細(xì)胞的瞬時受體電位香草酸亞型(TRPV)5調(diào)節(jié)了細(xì)胞內(nèi)Ga2+通道。Huang等〔67〕研究發(fā)現(xiàn)未敲除VDR，維生素D結(jié)合蛋白通過激活胰島素樣生長因子-1/胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2/Akt軸來促進(jìn)細(xì)胞侵襲，并誘導(dǎo)抑制維生素D反應(yīng)性基因。VDR啟動子中的NF-κBp65結(jié)合位點(diǎn)是依賴DBP啟動子激活的主要決定因素。③潛力無限的復(fù)制能力：Graziano等〔67〕研究發(fā)現(xiàn)癌基因Ras表達(dá)與DNA損傷反應(yīng)途徑激活有關(guān)，而癌基因誘導(dǎo)的衰老(OIS)過程中VDR表達(dá)顯著下調(diào)，并且與DNA修復(fù)因子表達(dá)有關(guān)。Chagani等〔68〕研究也認(rèn)為VDR在小鼠黑色素細(xì)胞內(nèi)對戶外紫外線(UVB)誘導(dǎo)的DNA損傷有光保護(hù)作用，并且抑制黑色素細(xì)胞的增殖和分化。維生素D可以從飲食攝入，但是人體主要通過太陽光中的UVB(290～320 nm)照射獲得。不論哪種方式，人體內(nèi)的維生素D經(jīng)過肝臟和腎臟代謝，合成有生物活性的1，25-(OH)2VD3，結(jié)合VDR，才發(fā)揮多種生理功能。又由于VDR具有明顯SNP，增加了人們對維生素D代謝途徑在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制興趣，包括VDR多態(tài)性預(yù)測多種癌癥發(fā)生、易感性及預(yù)后情況，盡管很多腫瘤研究顯示結(jié)果不一致甚至自相矛盾，提示VDR的這方面研究應(yīng)該結(jié)合分布區(qū)域特點(diǎn)、民族特點(diǎn)、飲食習(xí)慣和增加樣本數(shù)據(jù)量等因素充分綜合性分析。進(jìn)行VDR在消化系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)機(jī)制研究，有利于人們對消化系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)行有效干預(yù)同時對于開發(fā)有效藥物治療及生物標(biāo)志物的策略有一定促進(jìn)意義。