獸用清肺顆粒處方藥材研究進(jìn)展

張 艷，劉雪松，郝敬友，薛沾枚，蘇 景，唐 偉，孫洪杰，史同瑞

(1.黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院，齊齊哈爾 161005；2.哈爾濱綠達(dá)生動(dòng)物藥業(yè)有限公司，哈爾濱 150039；3.黑龍江省動(dòng)物疫病控制中心，哈爾濱 150069)

畜禽呼吸道疾病在獸醫(yī)臨床最為常見，可由細(xì)菌、病毒、寄生蟲等病原微生物感染引起，也可因粉塵、氣體和飼料變質(zhì)誘發(fā)，造成畜禽的生產(chǎn)性能降低，經(jīng)濟(jì)效益減少，甚至動(dòng)物死亡。清肺顆粒組方來源于《中國獸藥典》，由板藍(lán)根、葶藶子、浙貝母、甘草和桔梗5味中藥材組成，具有良好的清肺平喘、化痰止咳、抗炎功效，主治清熱咳嗽、咽喉腫痛[1]。

《中國獸藥典》中記錄的清肺顆粒提取工藝為傳統(tǒng)的水煎煮法，存在中藥提取時(shí)間長、溶劑消耗大、提取效率低、工藝流程繁雜、提取成本高等缺點(diǎn)。李玉平改良制備的清肺平喘顆粒，利用黃酮和多種生物堿的醇溶屬性，將桔梗、浙貝母和葶藶子3種藥材進(jìn)行乙醇回流提取，提取后的藥渣再同板藍(lán)根和甘草進(jìn)行水煎煮，進(jìn)一步提取藥材中的水溶性成分，結(jié)果顯示其制備的清肺平喘顆粒有效成分含量更高。為此，本文對清肺顆粒處方中藥材的主要成分、藥理作用和提取工藝等情況進(jìn)行綜述，為清肺顆粒的制備工藝改良提供新思路。

1 清肺顆粒方劑

1.1 功效主治 清肺平喘，化痰止咳。肺熱咳喘，咽喉腫痛。證見氣促喘粗，咳嗽，口干，舌紅等。

1.2 辯證論治 本方證為肺熱壅滯，氣失宣降所致的肺熱氣喘。方中以貝母、葶藶子清熱定喘，桔梗開宣肺氣而祛痰，使升降調(diào)和而喘咳自消；板藍(lán)根、甘草清熱解毒。諸藥合用，共奏清肺平喘之效。

1.3 應(yīng)用 方劑適用于肺熱咳喘。支氣管炎和肺炎均可加減使用。若熱盛痰多，可添加知母、瓜蔞、桑白皮、黃白藥子等；若喘癥明顯，可添加蘇子、杏仁、紫菀等；若肺燥干咳，可添加沙參、麥冬、天花粉等。

2 板藍(lán)根

2.1 主要成分 板藍(lán)根是多種植物的別稱，如馬藍(lán)屬爵床科植物板藍(lán)、菘藍(lán)屬十字花科植物菘藍(lán)、倒吊筆屬夾竹桃科植物藍(lán)樹、木藍(lán)屬豆科植物野青樹等。其主要成分有：靛苷、靛紅、靛藍(lán)、靛玉紅等吲哚類化合物，色氨酮等喹唑類生物堿；黑芥子苷、1-硫代-3-吲哚甲基芥子油苷、葡萄糖蕓薹素、新葡萄糖蕓薹素等芥子苷類化合物，告依春、表告依春等含硫類化合物，棕櫚酸、苯甲酸、水楊酸、2-氨基苯甲酸、丁香酸等有機(jī)酸類物質(zhì)[2]。

2.2 藥理作用

2.2.1 抗病原微生物作用 王亞芳等發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根對于多種細(xì)菌和病毒具有抑制作用。

2.2.2 抗內(nèi)毒素作用 阮德清的研究結(jié)果顯示板藍(lán)根提取物可對脂多糖誘導(dǎo)內(nèi)毒素小鼠產(chǎn)生很好的保護(hù)作用。

2.2.3 解熱作用 倪力軍發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根可有效緩解多因素誘發(fā)的小鼠直腸升溫。

2.2.4 抗炎作用 李雅莉的研究表明板藍(lán)根可在流感病毒感染后降低TNF-α、IL-6、IL-10和IFN-γ在血中含量。

2.3 提取工藝 江曉倩等[7]發(fā)現(xiàn)超聲法提取的板藍(lán)根水提液中(R,S)-告依春的含量明顯高于水煎法和沸水浴法，最佳提取工藝為50倍量水，超聲30 min。張前珍等[8]發(fā)現(xiàn)乙醇回流法提取的板藍(lán)根中靛玉紅含量是水提醇沉法的97倍，最佳提取工藝為7倍量80%乙醇回流提取2次，80 min/次。溫馨等[9]發(fā)現(xiàn)料液比1∶20(g/mL)，90 ℃，超聲30 min時(shí)板藍(lán)根多糖提取效果最佳。

3 葶藶子

3.1 主要成分 葶藶子是十字花科芝麻菜屬植物芝麻菜的種子。主要成分有：毒毛旋花子甙配基、葶藶苷、伊夫雙苷和糖芥苷等強(qiáng)心苷，葡萄糖異硫氰酸酯的降解產(chǎn)物，異硫氰酸烯丙酯、異硫氰酸丁烯酯、4-甲硫丁基異硫氰酸酯等異硫氰酸類物，肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、十六碳烯酸、亞麻油酸等脂肪油類，環(huán)硫丁烷衍生物，槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷[10]。

3.2 藥理作用

3.2.1 止咳平喘作用 楊云等[11]采用傳統(tǒng)的氨水引咳法和組胺乙酰膽堿引咳法考察葶藶子的止咳、平喘作用，結(jié)果顯示葶藶子提取物的止咳平喘作用良好。

3.2.2 利尿作用 曾夢楠等[12]研究發(fā)現(xiàn)葶藶子各個(gè)化學(xué)拆分組分均有較好的利尿效果。

3.2.3 強(qiáng)心作用 基杰等[13]發(fā)現(xiàn)黃芪、葶藶子配伍對慢性心率衰竭的療效顯著。

3.2.4 抗菌作用 葶藶子中的芐基芥子油可以抗20余種真菌和數(shù)十種其他細(xì)菌[14]。

3.2.5 抗癌作用 桂家輝[15]發(fā)現(xiàn)南葶藶子的有效部位乙酸乙酯浸膏在裸鼠體內(nèi)的抗腫瘤效果明顯；馬梅芳等[16]研究發(fā)現(xiàn)南北葶藶子對S180荷瘤小鼠均有一定抗癌作用。

3.2.6 調(diào)血脂作用 劉忠良[17]研究發(fā)現(xiàn)南葶藶子醇提物和南葶藶子油可有效調(diào)節(jié)飲食性高血脂癥大鼠的血脂。

3.3 提取工藝 顏?zhàn)娴躘18]研究發(fā)現(xiàn)纖維素酶提取法可提高葶藶子中多糖提取量，最佳工藝為pH為5，加酶量4 mL，50 ℃，提取1 h。李紅偉[19]研究結(jié)果顯示蒸制、酒炙、鹽炙均能提高葶藶子脂肪油的提取率。李雪峰[20]研究結(jié)果顯示1/4裝量，提取2次，時(shí)長2 h，8倍溶劑量時(shí)葶藶子中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷效果最佳。

4 浙貝母

4.1 主要成分 浙貝母百合科貝母屬植物，又稱為大貝、象貝、元寶貝、珠貝。主要成分有：貝母甲素、貝母乙素、浙貝寧、浙貝酮、貝母新堿、貝母芬堿、膽堿、貝母醇、植物甾醇、去氫鄂貝啶堿、西貝素、伊貝辛、浙貝丙素、浙貝母堿、異貝母素甲等生物堿，括貝母堿苷、西貝素苷、貝母素甲苷、伊貝堿苷A、平貝堿苷等皂苷，多糖等[21]。

4.2 藥理作用

4.2.1 止咳化痰 王翰華等[22]發(fā)現(xiàn)浙貝母葉提取物具有止咳、平喘、化痰的功效。錢伯初等[23]研究發(fā)現(xiàn)浙貝母中的浙貝母堿和去氫浙貝母堿均具有明顯的鎮(zhèn)咳作用。

4.2.2 鎮(zhèn)痛抗菌 曹躍芬等[24]研究發(fā)現(xiàn)浙貝母精油可以抑制白色念珠菌。張明發(fā)[25]的研究表明浙貝母提取物可以明顯緩解醋酸引起的小鼠扭動(dòng)和甩尾現(xiàn)象的產(chǎn)生。

4.2.3 抗?jié)儭⒖寡字篂a 張明發(fā)[25]的研究還發(fā)現(xiàn)浙貝母提取物還可以抑制鹽酸引起的小鼠胃潰瘍，同時(shí)浙貝母對蓖麻油和番瀉葉引起的腹瀉抑制效果顯著[26]。

4.2.4 抗腫瘤 祁愛風(fēng)[27]研究表明貝母素甲可誘發(fā)細(xì)胞凋亡，同時(shí)貝母甲素和生物堿成分還可以調(diào)控各種細(xì)胞因子來改變白血病多種治療藥物的抗性。鄧雯琦等[28]發(fā)現(xiàn)在放化療期間長期輔以貝母等化痰散結(jié)和抗癌中藥進(jìn)行治療，可起到滿意的療效。

4.3 提取工藝 侯敏娜等[29]發(fā)現(xiàn)料液比1∶13 g/mL，54 ℃，超聲25 min時(shí)浙貝母中揮發(fā)油提取效果理想。魏金瑩[30]研究發(fā)現(xiàn)60 ℃，pH為4.5，纖維素酶量2.5 g/L，提取3.5 h時(shí)浙貝母中生物堿提取效果最佳[30]。郭曉雨等[31]研究發(fā)現(xiàn)醋炙、酒炙對浙貝母的提取效果最好。

5 桔 梗

5.1 主要成分 桔梗是桔?？平酃僦参?，主要成分包括遠(yuǎn)志酸類、桔梗酸類及桔梗二酸型等桔梗皂苷，黃酮、二氫黃酮、黃酮苷類等黃酮類物質(zhì)，酚酸類、聚炔類、脂肪酸(亞油酸、棕櫚酸等)、多糖類、甾醇類和微量元素等成分[32]。

5.2 藥理作用

5.2.1 抗腫瘤 曾川川[33]發(fā)現(xiàn)桔梗苷D和金屬Ru、Ir配合可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。王歡等[34]發(fā)現(xiàn)熟化的桔梗可抑制H22荷瘤增殖。田雨弘[35]發(fā)現(xiàn)桔梗莖葉中皂苷可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

5.2.2 抗氧化作用 許瑞如研究發(fā)現(xiàn)正丁醇提取的桔梗根抗氧化效果最好[36]。于婷[37]研究發(fā)現(xiàn)發(fā)酵后的桔梗對DPPH和OH自由基的清除能力顯著增強(qiáng)。Chenyang Shi等[38]的研究結(jié)果表明桔梗苷可以通過調(diào)控線粒體的代謝功能阻止體外早衰。

5.2.3 抗菌作用 劉一寧[39]制備的桔梗湯可以顯著降低金黃色葡萄球菌感染引起的小鼠肺組織損傷。周蘭華[40]醇提桔梗中的皂苷和黃酮類物質(zhì)對革蘭氏陰性菌的抑制率最高。

5.2.4 免疫調(diào)節(jié) 王萌等[41]研究顯示，桔梗皂苷D可顯著提高小鼠脾淋巴細(xì)胞的刺激指數(shù)、和IL-2、IL-4分泌。鄭丕苗[42]研究發(fā)現(xiàn)桔梗多糖可激活雞腹腔巨噬細(xì)胞，提高各細(xì)胞因子的含量。賈林發(fā)[43]現(xiàn)桔梗多糖可以顯著增強(qiáng)環(huán)磷酸酰胺誘導(dǎo)的免疫缺陷小鼠的免疫功能。

5.2.5 抗糖尿病和抗肥胖作用 鄭杰等[44]發(fā)現(xiàn)桔梗提取物可以增強(qiáng)外源胰島素的降糖效果。鄭毅男等[45]研究結(jié)果顯示，桔梗皂苷可以抑制脂肪酶的活性。

5.2.6 抗心肌損傷作用 史有陽等[46]研究發(fā)現(xiàn)桔梗提取物可以保護(hù)斑馬魚心臟損傷。

5.3 提取工藝 朱學(xué)軍[47]研究表明，35 ℃，2 h，料液比1∶25，鹽濃度為0.20 mol/L時(shí)β-D-葡萄糖苷酶活力最佳。許一平等[48]研究發(fā)現(xiàn)纖維素酶用量0.6%，酶解溫度55 ℃，料液比l∶20，超聲酶解時(shí)間1.5 h黃酮得率最佳[48]。陳俊波[49]考察水提醇沉法提取桔梗的最佳條件，最佳工藝為提取溫80 ℃，3 h，料液比1∶30。

6 甘 草

6.1 主要成分 甘草是雙子葉植物綱豆目蝶形花科甘草屬植物，又名國老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子。主要成分包括甘草酸和甘草次酸等三萜類化合物，甘草素﹑異甘草素﹑甘草苷等黃酮類化合物，葡糖糖﹑鼠李糖﹑阿拉伯糖、半乳糖等多糖類化合物[50]。

6.2 藥理作用

6.2.1 抗病毒作用 張明發(fā)等[51]發(fā)現(xiàn)甘草酸類物質(zhì)具有抗多種呼吸道病毒的作用。

6.2.2 抗癌作用 張麗娟等[52]制備的甘草次酸納米粒對人肝癌細(xì)胞體外抑制效果良好。

6.2.3 抗炎抑菌作用 阮仁余等[53]研制的甘草次酸洗手液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌有很好的抑制作用。包芳等[54]發(fā)現(xiàn)甘草中的半甘草異黃酮B和粗毛甘草素C可有效抑制多種植物病原菌。

6.2.4 抗氧化作用 化敏等[55]研究表明甘草飲片用量與DPPH自由基的清除率呈正相關(guān)。

6.2.5 免疫調(diào)節(jié)作用 陳璟怡[56]發(fā)現(xiàn)飼喂甘草提取物可促進(jìn)禽流感H9N2和新城疫抗體效價(jià)的升高。

6.3 提取工藝 張光輝[57]以95%乙醇為溶劑，86.7 ℃、提取4.0 h、液料比80∶1(mL/g)時(shí)提甘草中黃酮提取效果最佳。姜文倩[58]發(fā)現(xiàn)30%乙醇、液固比35 mL/g、提取70 s、吐溫-60濃度0.01 g/mL和微波功率390 W時(shí)提甘草中黃酮提取效果最佳。王振強(qiáng)[59]發(fā)現(xiàn)以回流法90 ℃、料液比1∶30(g/mL)、提取時(shí)間0.5 h、提取5次時(shí)甘草中甘草酸提取效果最佳。

7 展 望

中藥的成分復(fù)雜，含多種有效成分，找到一種行之有效的提取方法是中藥研究領(lǐng)域中一項(xiàng)重要內(nèi)容。傳統(tǒng)清肺顆粒采用水煎煮提取法，缺點(diǎn)是降低了藥材中的非水溶性有效成分且能耗較高。未來研究中可依據(jù)上述單味中藥提取方法，將微波提取、生物酶提取和醇提取等多種新技術(shù)合理整合，制定一套效率更高、更節(jié)能的提取方法，避免寶貴中藥資源的浪費(fèi)。